李樹鋒
(長春市農(nóng)安縣前崗鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)站 130209)
瓜類霜霉病的致病菌是古巴假霜霉菌,屬于鞭毛菌亞門、霜霉菌目、假霜霉屬,是一種轉(zhuǎn)性寄生菌。該菌侵染對葫蘆科的甜瓜、西瓜、南瓜、絲瓜、葫蘆及蛇瓜等12種瓜類造成病害,其中受害最嚴重的是黃瓜、甜瓜。最早發(fā)現(xiàn)瓜類作物霜霉病是1868年,首先在古巴報道的。目前瓜類霜霉病已成為世界各國瓜類作物的主要病害。近年來隨著我國甜瓜生產(chǎn)規(guī)模的逐漸擴大,霜霉病也隨之產(chǎn)生擴大和蔓延的趨勢,導致較重的經(jīng)濟損失。
目前國內(nèi)外對甜瓜霜霉病的研究,主要集中在甜瓜霜霉病的發(fā)生危害、發(fā)生規(guī)律和綜合防治等方面,對甜瓜霜霉病的病源生物學特性、系統(tǒng)流行學方面的研究較少。鑒于此,我們開展了對這方面的分析研究工作,通過對甜瓜霜霉病菌游動孢子囊產(chǎn)生、萌發(fā)、病斑擴展、病菌的近程傳播等方面進行研究。以掌握甜瓜霜霉病的發(fā)病規(guī)律,為甜瓜霜霉病的系統(tǒng)分析研究、病害預(yù)測和管理提供基礎(chǔ)資料。
實驗中的甜瓜品種為純甜時代,萬里飄香,金甜佳美,嘎嘎甜。接下來將通過病害流行學的常規(guī)方法對品種抗病性等方面進行初步的研究。
1.1 病孢子日齡與病斑產(chǎn)游動孢子囊潛能的關(guān)系。對尚未發(fā)病的甜瓜葉片的最下位葉進行標記,發(fā)現(xiàn)已標葉片上產(chǎn)生霜霉病斑后做病斑標記,以后分別采集 1-2、3-4、5-6、7-8、9-10、13-14、17-18、21-22日齡病斑,洗去表面游動孢子囊,每個培養(yǎng)皿中放入10個同質(zhì)病斑,放入20℃溫箱中保濕培養(yǎng)24小時。培養(yǎng)后檢查每個培養(yǎng)皿中產(chǎn)生的游動孢子囊數(shù),在相同大小培養(yǎng)皿中用同樣放大倍數(shù)的鏡頭觀察50個視野,查出游動孢子囊總數(shù)并計算單斑產(chǎn)游動孢子囊量。經(jīng)計算1~4日齡病斑僅少量產(chǎn)孢,5~10日齡病斑可大量產(chǎn)孢,7~8日齡病斑產(chǎn)孢量最大,13~14日齡病斑還有一定產(chǎn)孢能力,個別17~18日齡病斑還可以產(chǎn)少量孢。20日齡后病斑完全不能產(chǎn)孢。
1.2 保濕時間與病斑產(chǎn)游動孢子囊關(guān)系。采集同質(zhì)病斑,洗去病斑上游動孢子囊,在培養(yǎng)皿中保濕并置于25℃溫箱中讓其產(chǎn)游動孢子囊,分別設(shè) 6、8、10、12、14、16、18、20、22、24 小時,10 個保溫時間,觀察50個顯微鏡視野,記錄游動孢子囊總數(shù),并計算出各處理組游動孢子囊總數(shù)占24小時生成游動孢子囊總數(shù)的百分率(%)。經(jīng)觀察,保濕時間少于10小時條件下游動孢子囊基本不產(chǎn)生,保濕時間10~24小時條件下游動孢子囊產(chǎn)生量隨保濕時間增加而增加。
1.3 光照對病斑產(chǎn)游動孢子囊的影響。將新采集的病葉在兩個培養(yǎng)皿中保濕,分別置于光暗交替(光暗各12小時)和黑暗條件(用報紙將培養(yǎng)皿包好)下。24小時后鏡檢產(chǎn)游動孢子囊情況:用等量水洗下病斑上的游動孢子囊,每皿洗液在鏡下觀察50個視野算出每個視野內(nèi)的平均游動孢子囊數(shù)。對比光暗交替(光暗各12小時)和黑暗條件下游動孢子囊產(chǎn)生數(shù)量的多少。在顯微鏡下可見,在光暗交替(光暗各12小時)和黑暗條件下游動孢子囊產(chǎn)生有較大的差異。全黑暗條件下病斑上產(chǎn)孢面積明顯大于光暗交替(光暗各12小時)條件下的產(chǎn)孢面積。
1.4 溫度與病斑產(chǎn)游動孢子囊的關(guān)系
1.4.1 病斑產(chǎn)游動孢子囊的最低、最高溫度測定。采集同質(zhì)病斑,洗去病斑表面游動孢子囊,每個培養(yǎng)皿中放入5個同質(zhì)病斑,放5、6、7、7.5、8、28、28.5、30、35℃溫箱中保溫培養(yǎng) 24 小時。之后在顯微鏡下觀察每個病斑產(chǎn)生游動孢子囊情況。
觀察得當溫度在5~7℃時不產(chǎn)孢;在7.5℃時可見產(chǎn)孢但孢囊梗很稀疏;8℃時可見一定數(shù)量產(chǎn)孢;28℃時可見一定數(shù)量產(chǎn)孢;28.5~35℃時未見產(chǎn)孢。其中,病斑產(chǎn)游動孢子囊的最低、最適合溫度、最高溫度分別為:7.5、20、28℃。
1.4.2 溫度與病斑產(chǎn)游動孢子囊的定量關(guān)系測定。洗下病斑上的游動孢子囊,觀察30個顯微鏡視野,記錄游動孢子囊總數(shù),并計算出各處理組游動孢子囊總數(shù)占24小時生成游動孢子囊總數(shù)的百分率(%)。對所得數(shù)據(jù)進行回歸分析,得溫度與病斑產(chǎn)游動孢子囊關(guān)系的回歸方程為:Y=Sin(Z700000.1X-11667X2+43.21275X3)
采甜瓜霜霉病斑,洗下表面游動孢子囊放入不同培養(yǎng)皿中,分別置顯微鏡(10×10)下,固定視野,在記錄本上畫出視野內(nèi)各個游動孢子囊的位置,隨時觀察并記錄各個游動孢子囊的萌發(fā)情況,最后計算出不同浸水時間的游動孢子囊萌發(fā)率。
經(jīng)觀察,不同批次的游動孢子囊萌發(fā)情況不同,最快在30分鐘即可萌發(fā),1小時內(nèi)萌發(fā)率可達60%左右,較慢的1小時10分鐘才開始萌發(fā)。
在甜瓜霜霉病試驗田發(fā)病后,在發(fā)病瓜秧上標記新產(chǎn)生的20個病斑,標記后每2日測量記錄病斑長度,直至這些病斑不再擴展為止。分析這些病斑的發(fā)展規(guī)律,在前4天里病斑增長較慢,每天增長量僅0.5毫米;在5-8天里病斑增長較快,每天增長量接近1毫米;在9~10天時病斑增長又變慢,增長量不足0.5毫米;在10天后病斑基本不再擴展。
在甜瓜霜霉病試驗田發(fā)病1個月后,在試驗田南側(cè)種植2壟(壟向南北)甜瓜,則甜瓜霜霉病試驗田成為菌源中心,可向后出苗的甜瓜傳播霜霉病菌。待后出苗的甜瓜發(fā)病后,對甜瓜霜霉病的傳播做調(diào)查。記錄每個調(diào)查樣點距菌源中心的距離及每個植株上的甜瓜霜霉病斑數(shù),最后用回歸分析法對調(diào)查數(shù)據(jù)進行分析。
回歸分析法處理結(jié)果顯示由于田間存在大量外來菌源,普遍傳播于所有植株上,且數(shù)量遠遠大于我們所設(shè)的菌源中心產(chǎn)生的游動孢子囊的數(shù)量,因此甜瓜霜霉病菌不再表現(xiàn)出明顯的梯度。
同時對純甜時代,萬里飄香,金甜佳美,嘎嘎甜四個品種的病斑數(shù)、病斑面積以及每個顯微鏡視野內(nèi)孢子囊數(shù)進行測試,以每個品種感染病性指數(shù)=單葉病斑數(shù)X病斑面積X孢子囊數(shù)來進行各品種抗病性總體評價。其中,純甜時代的單葉病斑數(shù)(個)、病斑面積(mm2)、每個視野孢子囊數(shù)(個)、各種感染病性指數(shù)分別是5.9、17.1、9.7、978;萬里飄香的單葉病斑數(shù)(個)、病斑面積(mm2)、每個視野孢子囊數(shù)(個)、各種感染病性指數(shù)分別是23.2、19.1、6.0、2658.7;金甜佳美的單葉病斑數(shù)(個)、病斑面積(mm2)、每個視野孢子囊數(shù)(個)、各種感染病性指數(shù)分別是17.7、20.1、10.2、3628.7;嘎嘎甜的單葉病斑數(shù)(個)、病斑面積(mm2)、每個視野孢子囊數(shù)(個)、各種感染病性指數(shù)分別是 13.1、18.5、11.8、2862.6。因此從上述數(shù)值分析中可見,甜瓜品種純甜時代與其他三個品種相比較抗病性最好,其次分別為萬里飄香、嘎嘎甜、金甜佳美。
本文通過對病害流行學的常規(guī)研究方法,對對甜瓜霜霉病菌游動孢子囊產(chǎn)生、萌發(fā)、病斑擴展、病菌的近程傳播及不同甜瓜品種的抗性組分等方面進行研究,多數(shù)研究結(jié)果在國內(nèi)尚未報道。這些研究結(jié)果可為甜瓜霜霉病的預(yù)測和防止方案的制訂提供基礎(chǔ)性資料。