楊學(xué)軍 海龍 于圣平

惡性膠質(zhì)瘤是最常見的原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，是難治性和預(yù)后極差的腫瘤之一。以惡性程度最高、侵襲性最強(qiáng)的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤為例，若患者僅接受支持治療，中位生存期不足3個(gè)月，1年內(nèi)病死率達(dá)97%［1］。近10余年來，在微創(chuàng)理念和影像導(dǎo)引外科新技術(shù)的支持下，惡性膠質(zhì)瘤影像學(xué)全切除率提高，術(shù)后病殘率和病死率下降；各種改良的綜合治療措施和新的治療方法為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的治療帶來曙光，但仍僅有限延長患者中位生存期［2?4］。腫瘤復(fù)發(fā)并向多個(gè)腦葉侵襲播散將最終導(dǎo)致病情持續(xù)惡化。惡性膠質(zhì)瘤雖然具有高侵襲性，但極罕見血行轉(zhuǎn)移至中樞神經(jīng)系統(tǒng)外，侵襲和播散主要發(fā)生于腦和脊髓，因此，惡性膠質(zhì)瘤是僅累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的腫瘤。如果能夠有效抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲和遷移，則可能轉(zhuǎn)變其為局部發(fā)生、局部復(fù)發(fā)、局部控制的慢性病變。我國國民經(jīng)濟(jì)和社會(huì)發(fā)展第十二個(gè)五年規(guī)劃（以下簡(jiǎn)稱“十二五”）時(shí)期，天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院楊學(xué)軍教授研究團(tuán)體在國家自然科學(xué)基金、教育部高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金和天津市應(yīng)用基礎(chǔ)及前沿技術(shù)研究計(jì)劃資助下，聚焦惡性膠質(zhì)瘤侵襲播散的生物學(xué)行為，本文擬就上述研究成果進(jìn)行簡(jiǎn)要綜述。

一、惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞的侵襲遷移形式

侵襲和遷移是惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞最基本的生物學(xué)行為之一。盡管體外實(shí)驗(yàn)可以觀察和研究膠質(zhì)瘤細(xì)胞的侵襲和遷移能力，但在體內(nèi)和組織標(biāo)本上進(jìn)行研究仍較為困難，難以在體內(nèi)動(dòng)態(tài)追蹤腫瘤細(xì)胞的遷移過程，也無法從常規(guī)染色的靜態(tài)組織切片中回答腫瘤內(nèi)具有運(yùn)動(dòng)能力的細(xì)胞為何、如何分布、何種細(xì)胞遷移、遷移方向?yàn)楹蔚葐栴}，鑒于此，我們?cè)诩?xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞成球?qū)嶒?yàn)、Transwell小室模型基礎(chǔ)上，建立水凝膠三維細(xì)胞培養(yǎng)［5?6］、腦片培養(yǎng)［7?8］等體外補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，以及以研究侵襲遷移為目的的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，并完善一系列免疫組織化學(xué)染色和熒光染色方法。

從病理學(xué)角度已知惡性膠質(zhì)瘤的組織學(xué)形態(tài)為，腫瘤細(xì)胞高度間變，有絲分裂活躍，呈假“柵欄”樣圍繞壞死區(qū)并簇集在腫瘤微血管周圍，向周圍白質(zhì)浸潤，血管增殖和（或）壞死。我們課題組對(duì)人膠質(zhì)瘤和大鼠原位種植膠質(zhì)瘤進(jìn)行腫瘤中心組織、邊緣組織和周圍浸潤組織系列取材，并通過CD133或巢蛋白（Nes）標(biāo)記膠質(zhì)瘤干細(xì)胞（GSCs）、CD34標(biāo)記腫瘤內(nèi)和腫瘤周圍血管內(nèi)皮細(xì)胞，結(jié)果顯示，CD133和巢蛋白陽性細(xì)胞在腫瘤內(nèi)的表達(dá)并非彌漫性均勻分布，而呈簇狀分布；腫瘤壞死區(qū)周圍的假“柵欄”樣結(jié)構(gòu)主要由膠質(zhì)瘤干細(xì)胞組成，圍繞腫瘤微血管的假“菊形團(tuán)”樣結(jié)構(gòu)亦主要由膠質(zhì)瘤干細(xì)胞組成，惡性膠質(zhì)瘤向周圍白質(zhì)浸潤區(qū)也可見較密集的膠質(zhì)瘤干細(xì)胞［9?11］；膠質(zhì)瘤干細(xì)胞集中分布于腫瘤壞死區(qū)周圍、微血管周圍和腫瘤邊緣浸潤部位，分別稱為缺氧區(qū)小生境（niche）、微血管旁小生境和侵襲性小生境［12］。膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的上述分布特點(diǎn)提示其與惡性膠質(zhì)瘤的組織病理學(xué)特征和侵襲遷移的生物學(xué)行為密切相關(guān)。我們課題組進(jìn)一步探討，在腫瘤中心和邊緣組織向周圍白質(zhì)遷移的路徑中，何種細(xì)胞具有較強(qiáng)的運(yùn)動(dòng)能力或正在遷移？結(jié)果顯示，hMena蛋白和Ras相關(guān)C3肉毒素底物1（Rac1）是肌動(dòng)蛋白聚合和片狀偽足形成過程中的必需蛋白質(zhì)，僅表達(dá)于細(xì)胞運(yùn)動(dòng)時(shí)，是遷移中腫瘤細(xì)胞的可靠標(biāo)志物［13?16］；缺氧區(qū)小生境、微血管旁小生境和侵襲性小生境等膠質(zhì)瘤干細(xì)胞聚集區(qū)域，也是遷移的腫瘤細(xì)胞的聚集區(qū)域，CD133與Rac1雙重?zé)晒馊旧@示，約83%的CD133陽性細(xì)胞表達(dá)Rac1蛋白，提示膠質(zhì)瘤干細(xì)胞具有較強(qiáng)的遷移能力［16?17］。

在腦組織切片中判斷腫瘤細(xì)胞運(yùn)動(dòng)方向是一項(xiàng)難題。體外實(shí)驗(yàn)中，片狀偽足的伸出方向可以指示腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)方向，而在腦組織切片中，腫瘤細(xì)胞密度高且相互擠壓，無法分辨出片狀偽足的伸出方向。高爾基體作為微管形成中心在細(xì)胞極性維持和細(xì)胞遷移過程中發(fā)揮重要作用。研究顯示，高爾基體位于胞核前120°扇形范圍內(nèi)，可以參考指示細(xì)胞運(yùn)動(dòng)方向［18］。我們課題組發(fā)現(xiàn)，腫瘤壞死區(qū)周圍聚集的腫瘤細(xì)胞內(nèi)，高爾基體多位于胞核背向壞死區(qū)一側(cè)，提示多數(shù)細(xì)胞在“逃離”壞死小生境；而白質(zhì)纖維束中遷移的腫瘤細(xì)胞內(nèi)，高爾基體和胞核連線與白質(zhì)纖維束走行方向基本平行［19］。

二、惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)與趨化

我們課題組采用鏡像切片技術(shù)和神經(jīng)纖維染色方法，在大鼠原位膠質(zhì)母細(xì)胞瘤模型中發(fā)現(xiàn)，膠質(zhì)瘤干細(xì)胞沿白質(zhì)纖維束縱行方向遷移并聚集于微血管旁，提示腫瘤細(xì)胞在白質(zhì)內(nèi)的播散很可能以自一個(gè)微血管旁小生境至另一個(gè)微血管旁小生境的接力方式，自腫瘤周圍向遠(yuǎn)隔白質(zhì)播散［11］。膠質(zhì)瘤干細(xì)胞是如何聚集到微血管旁小生境，又如何在白質(zhì)纖維束中遷移至下一個(gè)微血管旁小生境？與膠質(zhì)瘤侵襲表型相關(guān)的因素中，趨化因子系統(tǒng)引起越來越廣泛的關(guān)注，尤其是CXCL12/CXCR4軸。我們課題組發(fā)現(xiàn)，腫瘤血管周圍聚集CXCR4陽性細(xì)胞，而血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)CXCL12；CXCR4可能是膠質(zhì)瘤干細(xì)胞標(biāo)志物，相對(duì)于CD133陰性細(xì)胞，CXCR4在CD133陽性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞中呈高表達(dá)（未發(fā)表），提示腫瘤微血管可能通過CXCL12/CXCR4軸介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的趨化分布，膠質(zhì)瘤干細(xì)胞主要參與其中。CXCL12/CXCR4軸與膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲遷移的關(guān)聯(lián)性還表現(xiàn)在，CXCL12/CXCR4軸具有激活基質(zhì)金屬蛋白酶?9（MMP?9）、Rac1蛋白、Arg蛋白的作用［16，20?21］，并通過磷脂酰肌醇 3?激酶（PI3K）/絲氨酸/蘇氨酸激酶（AKT）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的相互作用進(jìn)一步影響膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的侵襲能力［22］。

三、惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)與增殖

我們課題組在惡性膠質(zhì)瘤侵襲遷移的研究中發(fā)現(xiàn)，腫瘤邊緣血管旁大量腫瘤細(xì)胞聚集并具有較高的增殖指數(shù)，腫瘤細(xì)胞在向周圍正常腦組織浸潤擴(kuò)散過程中在微血管旁聚集并增殖，表明腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)態(tài)與增殖態(tài)之間存在相互轉(zhuǎn)換（未發(fā)表）。早在 1996年 Giese等［23］即提出腫瘤細(xì)胞“go or grow”假說，如果腫瘤細(xì)胞所處局部微環(huán)境（酸性環(huán)境、可利用的營養(yǎng)物質(zhì)減少、缺氧等）不利于腫瘤細(xì)胞增殖，則腫瘤細(xì)胞遷移至適宜生存和增殖的環(huán)境。微小 RNA?451（miRNA?451）是一種內(nèi)源性非編碼RNA，通過激活腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）以調(diào)控Rac1蛋白和哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白C1（mTORC1）活性，進(jìn)而影響膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移和增殖能力。我們課題組的體外實(shí)驗(yàn)顯示，miRNA?451作為表觀遺傳學(xué)調(diào)控機(jī)制，在腫瘤細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)表型與增殖表型轉(zhuǎn)換中起到“開關(guān)”作用［24］。進(jìn)一步研究顯示，若微環(huán)境適宜因素或其他誘導(dǎo)因子使miRNA?451表達(dá)上調(diào)，惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞則通過減少腺苷酸活化蛋白激酶激活以解除或減弱其對(duì)哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白C1活性的抑制作用，進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞增殖；相反，若在缺氧、低能量或有其他生長抑制因子的微環(huán)境中，惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞miRNA?451呈低表達(dá)，則促進(jìn)腺苷酸活化蛋白激酶磷酸化，激活細(xì)胞運(yùn)動(dòng)相關(guān)蛋白R(shí)ac1，進(jìn)而使膠質(zhì)瘤細(xì)胞具有更強(qiáng)的遷移能力，“逃離”小生境，發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移［25］。

四、惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞的侵襲遷移與Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞干性表型的維持起關(guān)鍵作用。Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路配體和受體均為細(xì)胞表面跨膜蛋白，細(xì)胞表面Notch配體結(jié)合鄰近細(xì)胞表面Notch受體并活化受體細(xì)胞Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，稱為反式活化（trans?interaction）；同一細(xì)胞表面的Notch配體與受體胞外域也可以發(fā)生相互作用，阻止受體接受來自其他細(xì)胞的配體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而產(chǎn)生對(duì)受體的抑制作用，稱為順式抑制（cis?inhibition）。膠質(zhì)瘤干細(xì)胞干性表型的維持需Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的高度活化，而該通路特點(diǎn)決定膠質(zhì)瘤干細(xì)胞高表達(dá)Notch受體、低表達(dá)Notch配體。膠質(zhì)瘤干細(xì)胞如何維持這種Notch受體表達(dá)優(yōu)勢(shì)的狀態(tài)？解整合素?金屬蛋白酶12（ADAM12）是解整合素?金屬蛋白酶家族成員，具有金屬蛋白酶和解整合素等多種功能，我們課題組通過促進(jìn)Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路配體DLL1胞外域脫落以解除自身受體順式抑制對(duì)Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的競(jìng)爭(zhēng)性拮抗作用，進(jìn)而促進(jìn)Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路激活［26］。Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路維持膠質(zhì)瘤干細(xì)胞干性表型需配體DLL1的激活，更重要的是，肌動(dòng)蛋白骨架參與配體依賴性Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活，后者的傳統(tǒng)激活形式需配體細(xì)胞與受體細(xì)胞相互接觸。我們課題組發(fā)現(xiàn)，Notch配體細(xì)胞與受體細(xì)胞在CXCL12/CXCR4軸的作用下侵襲遷移相互靠近時(shí)，膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲和遷移調(diào)節(jié)信號(hào)因子ArpC亦參與DLL1自胞質(zhì) 至 胞 膜 的 囊 泡 運(yùn) 輸［27?28］，從 而 確 保 DLL1 激 活Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的功能［29］。惡性膠質(zhì)瘤是一類異質(zhì)性很強(qiáng)的腫瘤，許多抑制Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的靶向藥物失敗的最大原因是未選擇適宜的患者，我們課題組采用腫瘤基因組學(xué)圖譜計(jì)劃（TCGA）和中國腦膠質(zhì)瘤基因組學(xué)圖譜計(jì)劃（CGGA）進(jìn)行大樣本研究，結(jié)果顯示，Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在前神經(jīng)元亞型和經(jīng)典亞型中呈高表達(dá)，而這兩種亞型呈現(xiàn)祖細(xì)胞狀態(tài)；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與核因子?κB（NF?κB）高度相關(guān)，體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)亦證實(shí)Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路直接調(diào)節(jié)核因子?κB表達(dá)變化，影響膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的侵襲遷移，從而為Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路靶向治療從基礎(chǔ)向臨床轉(zhuǎn)化提供方向（未發(fā)表）。

五、惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞的侵襲遷移與離子通道

腫瘤進(jìn)展過程中，膠質(zhì)瘤干細(xì)胞與微環(huán)境相互作用，形成缺氧區(qū)小生境、微血管旁小生境和侵襲性小生境，無論何種類型腫瘤微環(huán)境均存在不同程度的缺氧和營養(yǎng)匱乏，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞糖酵解增加，產(chǎn)生大量H+和乳酸，使細(xì)胞排出的H+和乳酸代償性增加，從而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)堿化，加之腫瘤微環(huán)境的低灌注使細(xì)胞外微環(huán)境H+和乳酸無法有效清除，造成酸性細(xì)胞外微環(huán)境和堿性細(xì)胞內(nèi)微環(huán)境。酸性細(xì)胞外微環(huán)境有利于腫瘤侵襲遷移，鈉氫交換蛋白1（NHE1）是腫瘤細(xì)胞外微環(huán)境酸化的主要調(diào)節(jié)因子。鈉氫交換蛋白1激活使胞質(zhì)體積縮小，允許細(xì)胞擠過狹窄的細(xì)胞外間隙，同時(shí)，鈉氫交換蛋白1激活為腫瘤細(xì)胞提供酸性微環(huán)境，有利于基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）及其他蛋白水解酶降解細(xì)胞外基質(zhì)（ECM），從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲遷移［30］。

腫瘤細(xì)胞在細(xì)胞外基質(zhì)中的侵襲遷移是多種細(xì)胞內(nèi)外信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與細(xì)胞內(nèi)骨架蛋白在時(shí)間和空間上精確整合的結(jié)果，可以分解為4個(gè)獨(dú)立步驟：（1）細(xì)胞前緣片狀偽足形成和延伸，涉及肌動(dòng)蛋白的聚合。（2）新的局部黏附復(fù)合物形成。（3）肌動(dòng)蛋白?肌球蛋白復(fù)合物介導(dǎo)的細(xì)胞體收縮。（4）細(xì)胞尾部黏著斑解離［31］。其中，第（2）和（4）步中的細(xì)胞前緣黏著斑形成與尾部黏著斑解離過程，稱為黏著斑周轉(zhuǎn)（focal adhesion turnover），而鈣離子作為細(xì)胞內(nèi)第二信使，介導(dǎo)多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，參與細(xì)胞的黏著斑周轉(zhuǎn)。鈣池調(diào)控性鈣內(nèi)流（SOCE）由基質(zhì)相互作用因子1（STIM1）與鈣釋放激活鈣通道蛋白1（Orai1）介導(dǎo)，是細(xì)胞內(nèi)鈣離子的重要來源途徑之一。遷移細(xì)胞中鈣離子的分布具有顯著特征：鈣離子在細(xì)胞內(nèi)不同部位呈現(xiàn)穩(wěn)定而瞬時(shí)的濃度梯度變化：從遷移頭部至尾部逐漸升高，而在細(xì)胞遷移頭部又存在散在的鈣離子內(nèi)流引起的局部濃度升高，稱為“鈣火花”。我們課題組的研究顯示，SOCE通過調(diào)節(jié)細(xì)胞黏著斑周轉(zhuǎn)的速度和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）樣改變，參與惡性膠質(zhì)瘤的侵襲遷移［32?34］。

惡性膠質(zhì)瘤靶向治療領(lǐng)域，貝伐單抗是唯一通過Ⅲ期臨床試驗(yàn)的藥物，但在臨床實(shí)踐中，貝伐單抗通過耗竭血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）而抑制腫瘤血管形成的同時(shí)，卻促進(jìn)腫瘤細(xì)胞向周圍白質(zhì)浸潤播散。唯一靶向于惡性膠質(zhì)瘤侵襲的整合素抑制劑——西侖吉肽，臨床試驗(yàn)以失敗而遺憾告終［35］，提示在腫瘤精準(zhǔn)治療理念盛行的今天，針對(duì)腫瘤細(xì)胞微環(huán)境和細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路設(shè)計(jì)的靶向治療，不應(yīng)以增加惡性膠質(zhì)瘤的侵襲遷移能力為代價(jià)；惡性膠質(zhì)瘤侵襲遷移的關(guān)鍵信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路和治療靶點(diǎn)仍需優(yōu)化設(shè)計(jì)。惡性膠質(zhì)瘤侵襲遷移研究仍是我們課題組目前和未來的研究重點(diǎn)。

［1］Kumar HR,Zhong X,Sandoval JA,Hickey RJ,Malkas LH.Applications of emerging molecular technologies in glioblastoma multiforme［J］.Expert Rev Neurother,2008,8:1497?1506.

［2］Yang XJ,Jiang T,Chen ZP.The cure of maglinant glioma from ideality to reality:what should the clinicians do［J］.Zhongguo Xian Dai Shen Jing Ji Bing Za Zhi,2008,8:373?375［.楊學(xué)軍,江濤,陳忠平.治愈惡性膠質(zhì)瘤從理想到現(xiàn)實(shí)：臨床醫(yī)生還應(yīng)做些什么［J］.中國現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志,2008,8:373?375.］

［3］Yang XJ,Jiang T,Chen ZP,Qi ST.The standardized and individualized treatment and clinical practice of glioma［J］.Zhongguo Shen Jing Jing Shen Ji Bing Za Zhi,2009,35:321?322［.楊學(xué)軍,江濤,陳忠平,漆松濤.腦膠質(zhì)瘤的規(guī)范化和個(gè)體化治療與臨床實(shí)踐［J］.中國神經(jīng)精神疾病雜志,2009,35:321?322.］

［4］Yang XJ.Ten?year advance of contemporary neuro?oncology study in the new century［J］.Zhongguo Xian Dai Shen Jing Ji Bing Za Zhi,2010,10:103?110［.楊學(xué)軍.現(xiàn)代神經(jīng)腫瘤學(xué)研究新世紀(jì)十年進(jìn)展［J］.中國現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志,2010,10:103?110.］

［5］Huang Y,Tong L,Yi L,Zhang C,Hai L,Li T,Yu S,Wang W,Tao Z,Ma H,Liu P,Xie Y,Yang X.Three?dimensional hydrogel is suitable for targeted investigation of amoeboid migration of glioma cells［J］.Mol Med Rep,2018,17:250?256.

［6］Huang YB,Tong LQ,Zhang C,Hai L,Li T,Wang W,Yu SP,Xie M,Yang XJ.Effect of NSC23766 and Y?27632 on invasion and migration of malignant glioma cells and integrin expression basedon 3D hydrogel models［J］.Zhonghua Shen Jing Yi Xue Za Zhi,2017,16:665?670［.黃玉寶,童鹿青,張辰,海龍,李濤,王偉,于圣平,謝棉,楊學(xué)軍.NSC23766、Y?27632對(duì)3D水凝膠中膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲遷移及整合素表達(dá)的影響［J］.中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志,2017,16:665?670.］

［7］Ren BC,Liu B,Chen C,Liu ZF,Wu QL,Yu SP,Zhang B,Wang LL,Zhao K,Ming HL,Yang XJ.Improved models of organotypic brain slice in investigating the migration and invasion of glioma cells［J］.Zhonghua Shen Jing Yi Xue Za Zhi,2013,12:217?220［.任炳成,劉彬,陳聰,劉志峰,武俏麗,于圣平,張斌,王壘壘,趙凱,明浩朗,楊學(xué)軍.改良的三維腦片培養(yǎng)模型研究腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的遷移及侵襲［J］.中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志,2013,12:217?220.］

［8］Ren B,Yu S,Chen C,Wang L,Liu Z,Wu Q,Wang L,Zhao K,Yang X.Invasion and anti?invasion research of glioma cells in an improved model of organotypic brain slice culture［J］.Tumori,2015,101:390?397.

［9］Yu SP,Yang XJ,Zhang B,Ming HL,Chen C,Ren BC,Liu ZF,Liu B.Enhanced invasion in vitro and the distribution patterns in vivo of CD133+glioma stem cells［J］.Chin Med J(Engl),2011,124:2599?2604.

［10］Yu SP,Yang XJ,Zhang B,Ming HL,Liu B,Liu ZF,Ren BC,Chen C,Gao W.Glioma stem cells enhanced angiogenesis and its relationship with microvesse［lJ］.Zhonghua Wai Ke Za Zhi,2012,50:452?456［.于圣平,楊學(xué)軍,張斌,明浩朗,劉彬,劉志峰,任炳成,陳聰,高偉.膠質(zhì)瘤干細(xì)胞增強(qiáng)血管形成及與微血管的關(guān)系［J］.中華外科雜志,2012,50:452?456.］

［11］Wang HM,Yang XJ,Dong XT,Li Y,Wang W,Ming HL,Zhang B,Yu SP.Correlation between the distribution of CD133?positive cells and the proliferation of microvessels in glioblastoma multiforme［J］.Zhonghua Yi Xue Za Zhi,2011,91:781?785［.王華民,楊學(xué)軍,董雪濤,李瑜,王維,明浩朗,張斌,于圣平.膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中CD133陽性細(xì)胞的分布與組織微血管增殖的相關(guān)性［J］.中華醫(yī)學(xué)雜志,2011,91:781?785.］

［12］Dong XT.Brain tumor stem cells and small habitats［J］.Guoji Shen Jing Bing Xue Shen Jing Wai Ke Xue Za Zhi,2010,37:565?569［.董雪濤.腦腫瘤干細(xì)胞與小生境［J］.國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志,2010,37:565?569.］

［13］Dong XT,Yang XJ,Wang HM,Wang W,Yu L,Zhang B,Yu SP,Ming HL.Expression and distribution characteristics of human ortholog of mammalian enabled(hMena)in glioma［J］.Chin J Cancer Res,2011,23:312?316.

［14］Dong XT,Yang XJ.Wang HM,Wang W,Li Y,Zhang B,Yu SP,Ming HL.Expression and distribution characteristics of human orthology of mammalian enabled in glioma［J］.Zhonghua Shen Jing Yi Xue Za Zhi,2011,10:132?136［.董雪濤,楊學(xué)軍,王華民,王維,李瑜,張斌,于圣平,明浩朗.hMena在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及分布特征［J］.中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志,2011,10:132?136.］

［15］Dong XT,Yang XJ,Li Y,Yu SP,Zhang B,Wang W,Wang HM.Enhancement of glioma cell migration in vitro by EGF?induced up?regulation of hMena［J］.Zhongguo Shen Jing Zhong Liu Za Zhi,2011,9:77?81［.董雪濤,楊學(xué)軍,李瑜,于圣平,張斌,王維,王華民.EGF上調(diào)hMena的表達(dá)促進(jìn)人膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移能力的體外研究［J］.中國神經(jīng)腫瘤雜志,2011,9:77?81.］

［16］Zhang B,Yang XJ,Yu SP,Ming HL,Chen C,Ren BC,Liu ZF,Liu B.Role of Rac1 in the SDF?1?induced migration and invasion of human glioma cell line U251［J］.Zhonghua Yi Xue Za Zhi,2012,92:727?730［.張斌,楊學(xué)軍,于圣平,明浩朗,陳聰,任炳成,劉志峰,劉彬.Rac1在基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1誘導(dǎo)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U251遷移和侵襲中的作用［J］.中華醫(yī)學(xué)雜志,2012,92:727?730.］

［17］Zhang B,Sun J,Yu SP,Chen C,Liu B,Liu ZF,Ren BC,Ming HL,Yang XJ.Rac1+cells distributed in accordance with CD133+cells in glioblastomas and the elevated invasiveness of CD133+glioma cells with higher Rac1 activity［J］.Chin Med J(Engl),2012,125:4344?4348.

［18］Ríos RM,Sanchís A,Tassin AM,Fedriani C,Bornens M.GMAP?210 recruits gamma?tubulin complexes to cis?Golgi membranes and is required for Golgi ribbon formation［J］.Cell,2004,118:323?335.

［19］Liu B,Liu ZF,Ren BC,Chen C,Yu SP,Zhang B,Ming HL,Wang LL,Zhao K,Yang XJ.Relationship between Golgi apparatus and cell migration direction in vivo and in vitro［J］.Zhonghua Yi Xue Za Zhi,2013,93:2001?2003［.劉彬,劉志峰,任炳成,陳聰,于圣平,張斌,明浩朗,王壘壘,趙愷,楊學(xué)軍.高爾基體與細(xì)胞運(yùn)動(dòng)方向關(guān)系的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究［J］.中華醫(yī)學(xué)雜志,2013,93:2001?2003.］

［20］Chen C,Liu ZF,Ren BC,Liu B,Yu SP,Yang XJ.Distribution of CXCL12 and CXC chemokine receptor?4 in glioblastoma microenviroment and the role of them in invasion and migration［J］.Zhonghua Shi Yan Wai Ke Za Zhi,2013,30:1271?1274.［陳聰,劉志峰,任炳成,劉彬,于圣平,楊學(xué)軍.膠質(zhì)母細(xì)胞瘤微環(huán)境中CXCL12/CXC趨化因子受體?4的表達(dá)分布及其在腫瘤侵襲遷移中的作用［J］.中華實(shí)驗(yàn)外科雜志,2013,30:1271?1274.］

［21］Chen L,Zhu M,Yu SP,Zhang C,Zhao PF,Zhou H,Hai L,Liu B，Li S,Zhou XC,Lin Y,Yang XJ.Effect of silencing abelson nonreceptor tyrosine kinases 2 expression on invasion and migration of glioma cells［J］.Zhonghua Shen Jing Yi Xue Za Zhi,2015,14:221?226［.陳磊,朱蒙,于圣平,張辰,趙鵬飛,周華,海龍,劉波,李帥,周星辰,林雨,楊學(xué)軍.ABL2基因表達(dá)沉默對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移和侵襲的影響［J］.中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志,2015,14:221?226.］

［22］Zhou XC,Hai L,Zhang C,Liu B,Li S,Lin Y,Wang W,Li T,Yang YH,Cheng C,Yu SP,Yang XJ.Effect of Notch1 pathway activation on migration and invasion of glioma stem cells［J］.Zhonghua Shen Jing Yi Xue Za Zhi,2016,15:41?46［.周星辰,海龍,張辰,劉波,李帥,林雨,王偉,李濤,楊亦寒,程鋮,于圣平,楊學(xué)軍.Notch1通路活化對(duì)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響［J］.中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志,2016,15:41?46.］

［23］Giese A,Loo MA,Tran N,Haskett D,Coons SW,Berens ME.Dichotomy of astrocytoma migration and proliferation［J］.Int J Cancer,1996,67:275?282.

［24］Zhao K,Wang LL,Zhu M,Yu SP,Zhao PF,Zhou H,Zhang C,Chen L,Ming HL,Yang XJ.The effect and mechanism of miR?451 on migration of glioma cell line U251［J］.Zhonghua Shen Jing Wai Ke Za Zhi,2014,30:468?472［.趙愷,王壘壘,朱蒙,于圣平,趙鵬飛,周華,張辰,陳磊,明浩朗,楊學(xué)軍.miR?451對(duì)U251細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)能力的影響及其潛在機(jī)制［J］.中華神經(jīng)外科雜志,2014,30:468?472.］

［25］Zhao K,Wang L,Li T,Zhu M,Zhang C,Chen L,Zhao P,Zhou H,Yu S,Yang X.The role of miR?451 in the switching between proliferation and migration in malignant glioma cells:AMPK signaling,mTOR modulation and Rac1 activation required［J］.Int J Oncol,2017,50:1989?1999.

［26］Liu B,Yang XJ,Zhang C,Yu SP,Lin Y,Hai L,Zhou XC,Li S,Li T,Wang W,Cheng C,Yang YH.Effect of silencing a disintegrin and metalloprotease 12 expression on self?renewal capacity of CD133?positive giloma cells［J］.Zhongguo Shen Jing Jing Shen Ji Bing Za Zhi,2016,42:45?49［.劉波,楊學(xué)軍,張辰,于圣平,林雨,海龍,周星辰,李帥,李濤,王偉,程鋮,楊亦寒.ADAM12基因表達(dá)沉默對(duì)CD133陽性膠質(zhì)瘤細(xì)胞自我更新能力的影響［J］.中國神經(jīng)精神疾病雜志,2016,42:45?49.］

［27］Liu Z,Yang X,Chen C,Liu B,Ren B,Wang L,Zhao K,Yu S,Ming H.Expression of the Arp2/3 complex in human gliomas and its role in the migration and invasion of glioma cells［J］.Oncol Rep,2013,30:2127?2136.

［28］Liu ZF,Yang XJ,Liu B,Chen C,Ren BC,Wang LL,Zhao K,Yu SP,Ming HL,Zhu M.Effect of silencing Arp2/3 complex expression on invasion and migration of glioma cells［J］.Zhongguo Shen Jing Jing Shen Ji Bing Za Zhi,2013,39:129?134［.劉志峰,楊學(xué)軍,劉彬,陳聰,任炳成,王壘壘,趙愷,于圣平,明浩朗,朱蒙.Arp2/3復(fù)合物表達(dá)沉默對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲和遷移的影響［J］.中國神經(jīng)精神疾病雜志,2013,39:129?134.］

［29］Zhang C,Hai L,Zhu M,Yu S,Li T,Lin Y,Liu B,Zhou X,Chen L,Zhao P,Zhou H,Huang Y,Zhang K,Ren B,Yang X.Actin cytoskeleton regulator Arp2/3 complex is required for DLL1 activating Notch1 signaling to maintain the stem cell phenotype of glioma initiating cells［J］.Oncotarget,2017,8:33353?33364.

［30］Wang W,Yang XJ.Role of sodium hydrogen exchanger isoform 1 in tumor microenvironmen［tJ］.Guoji Zhong Liu Xue Za Zhi,2017,44:205?208［.王偉,楊學(xué)軍.鈉氫交換體1在腫瘤微環(huán)境中的作用［J］.國際腫瘤學(xué)雜志,2017,44:205?208.］

［31］Wang HM,Pan Q,Wang W,Yang XJ.Research progress in invasive properties of malignant gliomas［J］.Guoji Zhong Liu Xue Za Zhi,2010,37:672?675［.王華民,潘強(qiáng),王維,楊學(xué)軍.惡性膠質(zhì)瘤侵襲性相關(guān)因素的研究［J］.國際腫瘤學(xué)雜志,2010,37:672?675.］

［32］Zhu M,Chen L,Zhao P,Zhou H,Zhang C,Yu S,Lin Y,Yang X.Store?operated Ca(2+)entry regulates glioma cell migration and invasion via modulation of Pyk2 phosphorylation［J］.J Exp Clin Cancer Res,2014,33:98.

［33］Zhu M,Yang XJ.Role of calcium signaling in neoplasms invasion and migration［J］.Guoji Zhong Liu Xue Za Zhi,2014,41:161?164［.朱蒙,楊學(xué)軍.鈣信號(hào)在惡性腫瘤侵襲遷移中的作用［J］.國際腫瘤學(xué)雜志,2014,41:161?164.］

［34］Zhu M,Zhou H,Zhang C,Zhao PF,Chen L,Zhao K,Wang LL,Yu SP,Yang XJ.Role of proline?rich tyrosine kinase 2 on invasion and migration of U251 glioma cell line［J］.Zhonghua Shi Yan Wai Ke Za Zhi,2015,32:2050?2053［.朱蒙,周華,張辰,趙鵬飛,陳磊,趙愷,王壘壘,于圣平,楊學(xué)軍.富含脯氨酸的酪氨酸激酶2在U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲遷移中的作用［J］.中華實(shí)驗(yàn)外科雜志,2015,32:2050?2053.］

［35］Eisele G,Wick A,Eisele AC,Clément PM,Tonn J,Tabatabai G,Ochsenbein A,Schlegel U,Neyns B,Krex D,Simon M,Nikkhah G,Picard M,Stupp R,Wick W,Weller M.Cilengitide treatment of newly diagnosed glioblastoma patients does not alter patterns of progression［J］.J Neurooncol,2014,117:141?145.