周 瓊

(煙臺(tái)市牟平區(qū)檢驗(yàn)檢測(cè)中心，山東煙臺(tái)264100)

農(nóng)藥的發(fā)明在很大程度上提高了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)力，我國作為一個(gè)傳統(tǒng)的農(nóng)業(yè)大國，每年的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)總量極大，但每年由于病蟲害的影響也會(huì)使我國的農(nóng)戶損失很大一部分的優(yōu)質(zhì)農(nóng)產(chǎn)品。根據(jù)統(tǒng)計(jì)，在我國每年利用化學(xué)防治的方法可以減少200～300億kg的糧食損失。但正是由于農(nóng)藥使用，能夠使農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)量得到有效保障，農(nóng)藥的使用開始泛濫，不根據(jù)當(dāng)?shù)貙?shí)際情況的肆意使用農(nóng)藥，不但使農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的成本增加，同時(shí)也影響到農(nóng)產(chǎn)品的食用安全。近些年隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展，人民生活水平不斷提高，為了保證食品安全在食用果蔬等食用農(nóng)產(chǎn)品時(shí)消費(fèi)者都會(huì)傾向選擇沒有施用農(nóng)藥的產(chǎn)品。同時(shí)隨著農(nóng)藥的大量使用，大量的病蟲都出現(xiàn)了抗藥性癥狀，導(dǎo)致農(nóng)民每年為了防治病蟲害，所要投入的農(nóng)藥總量都會(huì)逐年提升，而超過規(guī)定范圍之內(nèi)的農(nóng)藥用量，會(huì)造成農(nóng)產(chǎn)品表面大量殘留，不但影響到食用者的人身安全，同時(shí)大量的農(nóng)藥使用，也會(huì)造成地下水、土壤等環(huán)境的污染，嚴(yán)重的還有可能造成一些物種的瀕危滅絕[1]。

1 農(nóng)藥殘留檢測(cè)的意義

雖然農(nóng)藥的使用能夠使得農(nóng)業(yè)生產(chǎn)力得到大大的提升，但是由于近些年農(nóng)藥的濫用，也造成了極為嚴(yán)重的環(huán)境和食品安全問題。為此，許多國家都開始出臺(tái)相關(guān)的規(guī)定，以限制高毒高殘留的農(nóng)藥使用，對(duì)于進(jìn)出口農(nóng)作物，也要求其農(nóng)作物表面的農(nóng)藥殘留物，需要符合進(jìn)出口國家的相關(guān)規(guī)定，隨著我國加入WTO，農(nóng)作物的進(jìn)出口量在逐年提升，而農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)由于和國際標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行接軌，傳統(tǒng)的控制方式已經(jīng)難以滿足現(xiàn)行規(guī)定，所以需要一批新的有效檢測(cè)農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留的方法，以減少由于該問題所造成的我國農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)出口問題。我國作為人口大國，農(nóng)業(yè)大國，農(nóng)業(yè)進(jìn)出口大國，多重特殊的身份決定了我國必須在農(nóng)業(yè)種植領(lǐng)域站在世界領(lǐng)先水平。

近幾年，隨著相關(guān)工作人員不斷的研究農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，并且對(duì)不同的檢測(cè)方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)比對(duì)，目前我國工作人員所掌握的檢測(cè)技術(shù)精度已經(jīng)能夠達(dá)到現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)，在此基礎(chǔ)上，研究人員又將如何快速進(jìn)行檢測(cè)，作為研究工作的重點(diǎn)，在近幾年也得到了顯著的收獲[2]。

目前廣泛應(yīng)用的農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)主要分為化學(xué)檢測(cè)、生化檢測(cè)、生物檢測(cè)3大種類，目前最常使用的研究方法包括儀器分析法、生物傳感器法、免疫分析法。我國是一個(gè)農(nóng)業(yè)大國，自20世紀(jì)50年代開始，就進(jìn)行了初步的農(nóng)藥殘留分析技術(shù)的探索，但當(dāng)時(shí)所采用的方式僅僅限于化學(xué)方法、生物測(cè)定法和比色法3種。但是由于缺乏相關(guān)使用經(jīng)驗(yàn)，同時(shí)相關(guān)技術(shù)人員的培訓(xùn)工作進(jìn)度過慢，所以當(dāng)時(shí)各地區(qū)所采用的檢測(cè)方法，主要還是依據(jù)過去的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)中所得出的一些傳統(tǒng)方法來進(jìn)行檢測(cè)，當(dāng)時(shí)在我國進(jìn)行農(nóng)藥殘留檢測(cè)的方法種類較多，各種方法的檢測(cè)準(zhǔn)確度不同，但從整體來看，靈敏度普遍表現(xiàn)不高。自20世紀(jì)60年代起，我國開始采用農(nóng)藥殘留分析，這一舉動(dòng)大大的推動(dòng)了我國農(nóng)業(yè)殘留分析技術(shù)的發(fā)展，在這一時(shí)期也為我國相關(guān)方向的研究培養(yǎng)了一大批杰出的人才，為我國之后在這一領(lǐng)域的發(fā)展埋下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)，同時(shí)也提高了那一時(shí)期我國的農(nóng)藥殘留檢測(cè)總體精度，高性能的色譜柱可以將各組分與雜質(zhì)進(jìn)行分離，高靈敏度和專業(yè)性強(qiáng)的檢測(cè)器，也解決了早期我國檢測(cè)人員對(duì)于微量農(nóng)藥無法進(jìn)行檢測(cè)的問題，這一時(shí)期，我國檢測(cè)人員能夠首次對(duì)代謝物和降解產(chǎn)物進(jìn)行分析。進(jìn)入20世紀(jì)80年代，高效液相色譜法在農(nóng)藥殘留分析中開始大量使用，從那時(shí)開始，我國的農(nóng)藥檢測(cè)人員開始可以對(duì)熱不穩(wěn)定和離子性農(nóng)藥及代謝物進(jìn)行分析。進(jìn)入20世紀(jì)90年代，固相萃取、固相微萃取、超臨界流體提取等技術(shù)紛紛問世，各種新型的檢測(cè)技術(shù)如雨后春筍在這段時(shí)間的集中涌現(xiàn)，其中包括：毛細(xì)管區(qū)帶電泳、免疫分析、液譜質(zhì)譜聯(lián)機(jī)、傳感器技術(shù)、直接光譜分析技術(shù)、實(shí)驗(yàn)室機(jī)器人等新技術(shù)紛紛進(jìn)入到了農(nóng)業(yè)殘留檢測(cè)的工作環(huán)境中[3，4]。

2 儀器材料與實(shí)驗(yàn)方法

研究人員選取蘋果和普通白菜為代表，選用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定了二者的農(nóng)藥殘留。

2.1 儀器、材料與試劑

主要儀器有：氣-質(zhì)聯(lián)用儀Agilent 6890GC/5973MSD、高速臺(tái)式離心機(jī)、多功能粉碎機(jī)、組織搗碎機(jī)、自動(dòng)雙蒸純水蒸餾器、電子天平、馬弗爐、干燥箱、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；

農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品：甲基對(duì)硫磷、甲拌磷、甲基異硫磷、馬拉硫磷、毒死蜱、倍硫磷、敵敵畏、七氯、三唑酮；

主要試劑：乙腈、甲苯、正己烷、無水硫酸鈉。

2.2 樣品前處理

2.2.1 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

用移液槍移取一定量農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品于100mL容量瓶中，正己烷定容搖勻，放在冰箱里保存，留待后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

2.2.2 勻漿法前處理

挑選500g品相良好的蔬菜水果，將其放置在多功能粉碎機(jī)內(nèi)進(jìn)行打碎處理，然后稱取5g漿液，在這里需要注意的是為了保證最終實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，提取的漿液重量必須要符合相應(yīng)規(guī)定，按照規(guī)定，此時(shí)操作的精確值應(yīng)該達(dá)到0.01g的標(biāo)準(zhǔn)，然后加入50mL的乙腈，10g無水硫酸鈉進(jìn)行提取，在混勻機(jī)上進(jìn)行混勻處理，在12000轉(zhuǎn)/min的轉(zhuǎn)數(shù)下進(jìn)行離心，離心時(shí)間為2min。取上層清液過固相萃取柱，將提取到的液體進(jìn)行旋蒸，恒溫水浴溫度控制在40℃，蒸發(fā)到近干，再加入5mL正己烷進(jìn)行溶劑交換，重復(fù)2次。最后將濃縮液過有機(jī)濾膜，正己烷定容至1mL供GC-MS進(jìn)行分析。

2.2.3 氣相色譜質(zhì)譜條件

選擇不分流進(jìn)樣，柱前壓為12.5psi。為了取得較理想的分離效果，采用程序升溫法，50℃保持1min，以30℃每分鐘的速度升至140℃，以15℃每分鐘的速度升至 170℃，在 5℃每分鐘的速度升至270℃，保持5min，進(jìn)樣口溫度280℃。檢測(cè)以外標(biāo)法定量，使用樣品本底配制5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液用以消除基底效應(yīng)[7]。

離子源溫度：230℃；四級(jí)桿溫度150℃；離子化方式：EI源；電子能量：70 eV；傳輸線溫度：280℃。

2.3 回收率實(shí)驗(yàn)

分別稱取5g漿液樣品，然后分別進(jìn)行低中高3水平標(biāo)品添加，每個(gè)水平添加做8個(gè)重復(fù)，前處理過程同樣品前處理，最后得到3水平添加的加標(biāo)回收率在61.2%～117.4%之間和RSD均小于10%，符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求。

3 結(jié)論

本文回顧總結(jié)了國內(nèi)農(nóng)藥殘留檢測(cè)的發(fā)展和農(nóng)藥殘留檢測(cè)的意義。

本文采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定了蘋果和普通白菜的9種常見農(nóng)藥。

勻漿法是目前農(nóng)殘檢測(cè)非常實(shí)用的樣品前處理方法，通過計(jì)算回收率，對(duì)不同樣品中不同溶劑的選用，篩選毒性小，應(yīng)用范圍廣的有機(jī)提取試劑，探索更簡單易行的前處理方法，減輕實(shí)驗(yàn)人員的工作量將會(huì)是比較有意義的研究方向。