張鳳鳳

（陜西省西安市未央?yún)^(qū)動物疾病預(yù)防中心 710016）

現(xiàn)代畜牧業(yè)和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)幾乎都離不開獸藥，因為合理使用獸藥能夠減少動物的發(fā)病率和死亡率，促進(jìn)動物生長從而提高經(jīng)濟(jì)效益。但也有一些養(yǎng)殖戶為了追求更高的經(jīng)濟(jì)效益，肆意濫用、超量使用獸藥，造成獸藥在動物體能殘留過量，給消費者帶來危害。因此，獸藥殘留分析方法顯得尤為重要，當(dāng)前獸藥殘留分析方法包含樣品前處理和測定方法兩部分。本文將介紹獸藥多殘留樣品前處理技術(shù)，對現(xiàn)階段已有動物樣本前處理技術(shù)進(jìn)行研究和推廣，針對不同樣本具有的特點對樣本前處理技術(shù)進(jìn)行選擇，以期能實現(xiàn)檢測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

1 沉淀蛋白技術(shù)

沉淀蛋白技術(shù)作為一種動物樣品前處理的方法，其作用機(jī)理是通過對蛋白質(zhì)進(jìn)行沉淀，釋放動物樣品中的存在的藥物成分，然后對動物樣品中存在的藥物成分進(jìn)行監(jiān)測，獲得準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，評估動物樣品中的藥物殘留情況。通過對蛋白質(zhì)的沉淀去除可有效的防止提取過程中的發(fā)泡情況，這不僅可以降低樣品發(fā)生乳化幾率，同時還可以有效的保護(hù)儀器，延長儀器使用時間。作為獸藥殘留濃度監(jiān)測的第一步，動物身體部位的不同也會導(dǎo)致同一種獸藥的殘留含量不同。如在取動物內(nèi)臟后首先清除組織殘留的血液，然后加入適量生理鹽水，研磨以后離心，沉淀后吸取適量上清液進(jìn)行檢測。通常情況下使用有機(jī)溶劑對獲得的蛋白質(zhì)進(jìn)行溶解，但如果存在水溶性蛋白質(zhì)可以用酸類使蛋白質(zhì)沉淀，過濾獲得蛋白。在所有有機(jī)溶劑中，乙腈是最好的一種溶劑，使用乙腈可有效的提高組分分離度，獲得較好的分離峰。如果使用高氯酸進(jìn)行分離，則沉淀蛋白最好不要直接使用色譜柱進(jìn)行分析，應(yīng)在調(diào)整合適酸堿度的情況下用滲透膜進(jìn)行過濾。這樣的操作可以避免因酸液的酸性太強(qiáng)損壞色譜柱。與其他樣品前處理技術(shù)相比，蛋白沉淀技術(shù)操作相對方便，但存在準(zhǔn)確度和靈敏度較低的缺點。

2 液-液提取技術(shù)

液-液提取技術(shù)作為獸藥殘留檢測過程中對樣品進(jìn)行前處理較為多用的一種技術(shù)在現(xiàn)階段也得到大范圍的推廣。這種技術(shù)主要包括液相萃取技術(shù)、多次提取技術(shù)及離子對提取技術(shù)。液相萃取技術(shù)同傳統(tǒng)萃取技術(shù)相似，是通過對與樣品不相同的溶解度選擇，利用待測組分在不同溶劑中溶解度不同，對待測組分進(jìn)行提取。對于現(xiàn)階段，大部分獸藥主要屬于脂溶性獸藥，在對生物樣品進(jìn)行前處理過程中，其他物質(zhì)大多數(shù)屬于水溶性的。因此，可以利用液相萃取技術(shù)對雜質(zhì)進(jìn)行分離，實現(xiàn)待測組分的純化。如對可能含有較高獸藥殘留的樣本，如動物血液、皮毛、肌肉等進(jìn)行處理。在進(jìn)行實際操作過程中，檢驗人員可以根據(jù)相似相容原則，選取合適的溶劑如乙醚、乙醇等進(jìn)行，在進(jìn)行溶劑選擇時要注意選取的溶劑純度要達(dá)到分析純以上，這樣可以降低溶劑中存在的水分對分離造成的影響。此外，選取的溶劑在熔沸點、揮發(fā)性等特性方面也有較高的要求，這有利于降低對紫外檢測造成的影響。同時，為了保證實驗過程中的安全性，選取的溶劑應(yīng)具有較高的化學(xué)穩(wěn)定性。可以根據(jù)待測組分的極性對溶劑進(jìn)行選擇，但在所有有機(jī)溶劑中盡量避免使用氯仿作為溶劑。不過液-液提取技術(shù)也存在一定的缺陷，就是需要較長的操作時間，且消除基質(zhì)干擾得到的效果并不明顯，還需要用到較多的有機(jī)溶劑，而這些有機(jī)溶劑對人體和環(huán)境是有害的。

3 固相萃取技術(shù)

固相萃取技術(shù)是現(xiàn)階段應(yīng)用最為廣泛的生物樣品處理技術(shù)，相對于液-液提取技術(shù)更為常用。其在原理上同高效液相色譜、氣相色譜的原理基本一致，同樣是通過相似相容原理對待測物質(zhì)進(jìn)行提取。經(jīng)過幾十年的發(fā)展，固相萃取技術(shù)已較為成熟?，F(xiàn)階段固相萃取技術(shù)主要通過4步完成對待測物質(zhì)的萃取工作。首先，選擇合適的固相萃取柱，其口徑等都需要滿足實驗要求。然后進(jìn)行萃取柱的填裝，填料粒度等同樣需要進(jìn)行選擇，接著將樣品通過萃取柱，實現(xiàn)對測量樣本的分離工作。雖然固相萃取技術(shù)具有較好的優(yōu)點，但由于其不能使用高壓進(jìn)行萃取，因此消耗時間較多。如果基質(zhì)比較復(fù)雜的情況下，則會存在低回收率且容易造成填料堵塞等問題。

4 總結(jié)

通過對當(dāng)前使用最多的幾種動物樣品前處理技術(shù)分析可以發(fā)現(xiàn)，不同動物樣本具有不同的特點。要實現(xiàn)通過這些樣本的檢測獲得較為準(zhǔn)確獸藥殘留量檢測必須選擇合適的樣品前處理技術(shù)。因此，必須加強(qiáng)對現(xiàn)有樣品前處理技術(shù)的學(xué)習(xí)，同時注意對新的處理技術(shù)進(jìn)行研發(fā)。如此才能通過先進(jìn)的、準(zhǔn)確的獸藥多殘留樣品前處理技術(shù)獲得動物產(chǎn)品的獸藥殘留情況，從而服務(wù)于動物產(chǎn)品的市場準(zhǔn)入，使食品安全問題得到有效解決，使消費者身體健康得到進(jìn)一步的保障。