王 微，胡 毅，鄢人雨，蘭吉玉

（黔東南州農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測中心 ，貴州 凱里 556000）

“柴米油鹽醬醋茶”，俗稱開門七件事，可見茶的重要性。黔東南州是茶葉生產(chǎn)大州，茶產(chǎn)業(yè)亦是雷山縣的支柱產(chǎn)業(yè)，已成為茶區(qū)農(nóng)民增收致富奔小康的重要途徑。截止2016年，雷山縣茶園面積1.07萬hm2（其中無公害茶葉基地達1萬hm2，有機茶葉面積達到624.5 hm2）。登記茶企業(yè)156家，其中合作社51家、省級龍頭企業(yè)5家、州級龍頭企業(yè)7家、州級示范社1家、獲得對外貿(mào)易經(jīng)營資格2家。

2013年，雷山縣獲中國國際茶文化研究會授予的“中國茶文化之鄉(xiāng)”，雷山銀球茶被授予“中華文化名茶”稱號；2015年，“雷山銀球茶”獲國家地理標志保護產(chǎn)品、貴州省首屆春茶斗茶大賽綠茶類金獎“茶王”和百年世博中國名茶金獎。

目前，我國茶園中仍存在農(nóng)藥用量大、次數(shù)多甚至濫用等情況[1-2]，農(nóng)藥污染后的茶葉，除降低其品質(zhì)外，飲用隨之帶來的對人體的急慢性毒性問題，特別是致癌和致突變等問題更是讓人聞之后怕[3]。為了解雷山縣茶葉農(nóng)藥殘留情況，我們對雷山縣春茶農(nóng)藥殘留進行了檢測分析。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器

分散機（德國IKA），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠），氮吹儀（UGC-24C 北京優(yōu)晟），離心機（TG-16-WS 湖南湘儀），電子天平（JY5002 上海舜宇恒平），三重四級桿串聯(lián)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（7890B-7000C 安捷倫），三重四級桿串聯(lián)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（AcQuity H/TQ-Smicro沃特世）。

1.1.2 試劑

乙腈（色譜純），甲苯（色譜純），正己烷（TEDIA公司，色譜純），氯化鈉（分析純），無水硫酸鈉（分析純），Cleanert TPT柱（艾杰爾）。

1.2 樣品采集

雷山縣以春茶為主，約占該縣茶葉生產(chǎn)總量的90%以上，其中名優(yōu)茶占40%、大眾茶占60%。采集當?shù)厣a(chǎn)的有代表性的綠茶、紅茶樣品，每份樣品取樣量不少于500 g，同時記錄原料來源和生產(chǎn)批次。采樣時間：春茶4月至5月15日。共采集樣品59個。

1.3 檢測指標

吡蚜酮、蟲螨腈、敵百蟲、啶蟲脒、甲胺磷、甲拌磷、甲基對硫磷、甲基硫環(huán)磷、克百威、硫環(huán)磷、氯唑磷、滅線磷、內(nèi)吸磷、氰戊菊酯、三氯殺螨醇、水胺硫磷、特丁硫磷、辛硫磷、氧樂果、茚蟲威、滅多威、乙酰甲胺磷、氯氰菊酯、滴滴涕、溴氰菊酯、殺螟硫磷、氟氰戊菊酯、六六六、氯菊酯、苯醚甲環(huán)唑、除蟲脲、硫丹、噻嗪酮、噠螨靈、丁醚脲、聯(lián)苯菊酯、氯氟氰菊酯和高效氯氟氰菊酯、甲氰菊酯、吡蟲啉、多菌靈、噻蟲嗪、氟氯氰菊酯和高效氟氯氰菊酯、噻螨酮、喹螨醚、氯噻啉、毒死蜱、殺撲磷、炔螨特、丙溴磷、噻蟲胺、乙螨唑、氟苯蟲酰胺、唑蟲酰胺、氟蟲脲、百菌清、噻蟲啉、西瑪津、莠去津、吡唑醚菌酯、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、甲萘威、草甘膦和草銨膦共63個農(nóng)藥指標和1個化學物質(zhì)：蒽醌[4]。

1.4 樣品前處理

提取：稱取5.0 g茶葉于100 mL離心管中，加入 25 mL 乙腈，15000 r/min 均質(zhì)提取 1 min，4500 r/min 離心 5 min 取上清液 10 mL。凈化：用 Cleanert TPT 柱凈化后濃縮定容至 2 mL。待測上機：上述液體取1 mL進行GC-MS/MS上機檢測，取1 mL用甲醇-水進行溶劑交換并定容1 mL，進行LC-MS/MS上機檢測。

1.5 數(shù)據(jù)分析方法

檢測后根據(jù)GB 2763-2016中規(guī)定的茶葉限量要求進行判定樣品的合格率，同時作農(nóng)藥指標的檢出規(guī)律和殘留水平等分析；并根據(jù)膳食評估公式對樣品進行風險評估分析。膳食暴露評估是食品危險度評估的重要組成部分，也是膳食安全性的衡量指標，分為長期膳食攝入和慢性風險評估

長期膳食攝入評估[5]：按照FAO（聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織）統(tǒng)計數(shù)據(jù)[6]中國居民每人每天飲茶 11.4 g、成人體重按照60 kg，用公式（1）計算國家估算每日攝入量：

式中：NEDI—國家估算每日攝入量，單位mg/kg bw/d；STMR—農(nóng)產(chǎn)品的規(guī)范試驗殘留平均值，單位mg/kg；F—農(nóng)產(chǎn)品的消費量，單位kg/d；bw—人群平均體重，單位kg。

農(nóng)殘慢性攝入風險[7]用國家估算每日攝入量占ADI的百分比表示，用公式（2）計算：

式中：ADI—每日允許攝入量，單位mg/kg bw/d；%ADI—慢性風險。

%ADI≤100%時，表示慢性風險可以接受，%ADI越小，風險越?。划?ADI＞100%時，表示有不可接受的慢性風險，%ADI越大，風險越大。

短期膳食攝入評估[8]：根據(jù)世界衛(wèi)生組織數(shù)據(jù)，中國居民茶葉消費的大份餐（LP）每天為 75.88 g。

式中：NESTI—國家估計急性攝入量，單位mg/kg bw/d；LP—大份餐，即某類食品一餐的最大消費量，一般以日消費量的97.5百分位點值為準；單位kg/d；HR—最高殘留量，單位mg/kg；%ARfD — 急性膳食攝入風險；SM—安全界限，單位mg/kg。

%ARf D 越小風險越小，當 % ARf D ≤ 100%時，表示風險在可以接受范圍；反之，% ARf D＞100%時，表示風險不可以接受。

借鑒 VRC 的獸藥殘留風險排序矩陣[9]，并用農(nóng)藥毒性指標代替獸藥藥性指標，進行農(nóng)藥殘留風險排序。用公式（6）計算農(nóng)藥使用頻率：

公式（7）計算各樣品中各農(nóng)藥殘留的風險得分（S）：

其中：FOD—農(nóng)藥使用頻率；P—為果實發(fā)育日數(shù)，單位為d（天）；T—果實發(fā)育過程中使用該農(nóng)藥的次數(shù) ；A—毒性得分；B—毒效得分；C—膳食比例得分；D—農(nóng)藥使用頻率得分；E—高暴露人群得分；F—殘留水平得分；S—殘留風險得分。

毒性（A）采用急性經(jīng)口毒性（LD50）；毒效（B）采用ADI值；殘留水平采用殘留檢測值；膳食比例根據(jù)中國茶葉產(chǎn)量、出口量及貯藏損耗率推算中國居民茶葉暴露量占總膳食的比例。每種農(nóng)藥殘留的風險得分以該農(nóng)藥在所有樣品中殘留風險得分平均值計算，風險得分越大，殘留風險越高。

2 結(jié)果與分析

2.1 回收率與精密度

本 實 驗方法 在 GB/T 23204-2008[10]和 GB 23200.13-2016[11]的前處理方法上進行了優(yōu)化，使前處理更簡單、便捷，一個前處理后能同時進行GC-MS/MS和LC-MS/MS上機檢測。本方法采用乙腈提取，能很好的提取出大部分農(nóng)藥殘留；與GB/T 23204-2008標準相比，減少了一個濃縮步驟，能盡量減少前處理中的損失；同時采用TPT柱進行凈化，能很好的去除色素和雜質(zhì)[12]。本方法的大部分農(nóng)藥在添加量為0.1 mg/kg時，回收率在85%～105%之間，表示該方法滿足檢測要求；部分指標如甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂果、氟胺氰菊酯和丁醚脲等的回收率為80%～120%，其回收率仍在可行范圍；相對偏差RSD值在1.8%～5.6%之間，RSD＜10%，表示該方法的精密度較好。

2.2 樣品的檢測結(jié)果

59份樣品中，共檢出含農(nóng)藥殘留樣品33份，檢出率55.9%，未檢出農(nóng)藥殘留樣品26份。按照食品中農(nóng)藥最大殘留限量GB 2763-2016[13]中規(guī)定值，樣品合格率為100%；其中檢出指標17個，檢測項次101次（表1）。

由表1可見，草甘膦、聯(lián)苯菊酯、唑蟲酰胺、氯氟氰菊酯、噻嗪酮等5種農(nóng)殘檢出率較高。其中，檢出率最高的為草甘膦和聯(lián)苯菊酯，其次是唑蟲酰胺和氯氟氰菊酯。唑蟲酰胺在GB 2763-2016中沒有規(guī)定其最大殘留限量，其檢出范圍在0.0141～0.4402 mg/kg，無法判定殘留情況。此外，檢出率較高、在GB 2763-2016中沒有規(guī)定其最大殘留限量的吡唑醚菌酯，其檢出率達到 10.17%，檢出范圍 0.0093～0.0681 mg/kg。另檢出率較高的噻嗪酮，檢出率達到16.95%，但其殘留限量為10 mg/kg，檢出值低于殘留限量標準10倍以上，可視為較安全的。而在GB 2763-2016中雖沒有規(guī)定最大殘留限量指標的唑蟲酰胺、吡唑醚菌酯、毒死蜱3種農(nóng)藥，但仍有一定的使用和檢出，應引起重視。

2.3 樣品風險評估

2.3.1 慢性膳食攝入風險

根據(jù)膳食評估公式計算得到表2。從表2可以看出，17個農(nóng)藥的慢性風險（%ADI）均小于100%，表示慢性風險可以接受。%ADI越小表示慢性風險越小，表2中所有指標的慢性風險均小于1%（0.004%～0.544%），表示雷山茶葉的慢性風險是完全可以接受的，且均很低。其中檢出率最高的草甘膦的慢性風險為0.004%，遠低于1%，風險可以接受，但是除草劑的使用不僅僅影響茶葉的品質(zhì)，還會破壞環(huán)境的生態(tài)平衡，仍需慎重使用。檢出農(nóng)藥中最高的聯(lián)苯菊酯的慢性風險值為0.544%，也小于1%。

2.3.2 急性膳食攝入風險

根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）數(shù)據(jù)庫，除草甘膦、噠螨靈和唑蟲酰胺3個指標沒有急性參考劑量（ARfD）外，其余指標的急性參考劑量（ARfD）見表2。急性風險（%ARfD）＜100%時，急性風險可接受。表2可以看出，雷山茶葉14項農(nóng)藥急性風險（%ARfD）均＜100%，急性風險都可接受，%ARfD范圍在0.007%～42.285%。但是聯(lián)苯菊酯的急性風險%ARfD為42.285%，急性風險較高，應引起重視。結(jié)果表明，所檢農(nóng)藥的最高殘留值均低于安全界限（SM），進一步證實了這些農(nóng)藥的急性膳食風險很低。

表1 茶葉中農(nóng)藥殘留檢出結(jié)果Table 1 Determination result of pesticides residues in tea

表2 農(nóng)藥殘留慢性風險和急性風險評估Table 2 Chronic and acute risk assessment of pesticide residues in Tea

2.3.3 農(nóng)藥殘留風險排序

根據(jù)中國茶葉產(chǎn)量、出口量及貯藏損耗率推算，中國居民茶葉暴露量占總膳食比例小于2.5%，因此膳食比例得分（C）為0；按照農(nóng)藥標簽和調(diào)研資料顯示農(nóng)藥每季在茶樹上使用次數(shù)最多不超過3次，按最大3次計，每季按90 d計算，則農(nóng)藥使用頻率評分（D）為1分。由于無確定性資料判定是否存在高暴露人群，因此沒有高暴露人群得分（E）為3分。由表2可見每種農(nóng)藥的殘留水平，計算得到每種農(nóng)藥的殘留水平得分。殘留水平中的MRL值以GB 2763-2016中限量值來作為參考值，其中毒死蜱、唑蟲酰胺和吡唑醚菌酯沒有限量要求，則以歐盟標準中茶葉限量要求作為參考。

圖1 茶葉中17種農(nóng)藥殘留的風險排序（A：高風險；B：中風險；C：低風險）Fig.1 Ranking of residue risk of 17 pesticides in Tea

借鑒 VRC 獸藥殘留風險排序矩陣，根據(jù)公式（4）計算各農(nóng)藥的殘留風險得分，進行茶葉產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留風險排序，結(jié)果如圖1所示。根據(jù)各農(nóng)藥的殘留風險得分將風險大小劃分為3類，第1類為高風險農(nóng)藥，風險得分均≥20，共有3種，分別為毒死蜱、聯(lián)苯菊酯和唑蟲酰胺；第2類為中風險農(nóng)藥，風險得分在15～20之間，共有8種；第3類為低風險農(nóng)藥，共有6種，風險得分介于10～15之間。17種農(nóng)藥在低、中和高風險水平的比例分別為35.3%、47.1%和17.6%。由此可見，茶葉中農(nóng)藥殘留總體上處在中低風險水平，但需重點關注3種高風險水平的農(nóng)藥。

3 結(jié)論與建議

增加檢測指標后，農(nóng)藥檢出率大幅提高[14]。本次實驗可看出：本次采集的59份樣品，農(nóng)藥殘留檢出率為55.9%，檢出指標均遠低于GB 2763-2016規(guī)定的最大殘留限量，全部合格；其中，有26份未檢出任何農(nóng)藥殘留，占44.1%。所有樣品均未檢出含有化學污染物蒽醌。所檢出的農(nóng)藥慢性攝入風險和急性攝入風險均在可接受范圍，且大部分都很低。所檢出農(nóng)藥中，大部分是中低風險農(nóng)藥（82.4%），高風險農(nóng)藥僅為3種（17.6%）。

黔東南州雷山縣地勢較高，茶園位置在海拔900～1400 m之間，且初春氣溫較低，因此，茶樹的病蟲害相對較少。據(jù)調(diào)查，雷山茶園病蟲害春季均較少，隨氣溫和雨水量的增加，以夏秋季節(jié)病蟲害為主。因此，夏秋季節(jié)的病蟲害可能會導致農(nóng)藥的大量使用，從而增大農(nóng)藥殘留風險。但春茶農(nóng)藥檢出率較高，所以夏秋季節(jié)農(nóng)藥殘留問題應更加重視。建議首先從源頭抓起，科學合理用藥，注意農(nóng)藥的安全間隔期。其次，政府相關部門加強農(nóng)資市場和基地監(jiān)管，禁止銷售、使用國家禁用農(nóng)藥。同時，大力推廣物理防治和生物農(nóng)藥、植物源農(nóng)藥或者水浸出率低的農(nóng)藥。

[1]蘭凌.我國綠茶衛(wèi)生質(zhì)量的現(xiàn)狀與綠茶質(zhì)量安全控制[J].信陽農(nóng)業(yè)高等?？茖W校學報,2006,16(2):81-83.

[2]沈向紅,張晶,管建,等 .浙江省部分食品中農(nóng)藥殘留水平研究[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2007,17(8):1347-1380.

[3]李玲琴.茶葉中農(nóng)藥殘留動態(tài)及降解技術[D].福州：福建農(nóng)林大學,2007.

[4]何正和,魏斌,魏云計,等 .氣相色譜 -串聯(lián)質(zhì)譜法快速測定茶葉中的蒽醌[J].化學分析計量,2017,26(3):18-21.

[5]喬浩,孫小鳳,韓燕,等 .柴達木地區(qū)枸杞農(nóng)藥殘留風險評估[J].農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全,2017(5):38-42.

[6]吳雪原.茶葉中農(nóng)藥殘留的最大限量及風險評估研究[D].安徽農(nóng)業(yè)大學,2007.

[7]葉孟亮,聶繼云,徐國峰,等 .蘋果中 4 種常用農(nóng)藥殘留及其膳食評估[J].中國農(nóng)業(yè)科學,2016,49(7):1289-1302.

[8]高仁君,王蔚,陳隆智,等 .JMPR 農(nóng)藥殘留急性膳食攝入量計算方法[J].中國農(nóng)學通報.2006,22(4):101-105.

[9]聶繼云,李志霞,劉傳德,等 .蘋果農(nóng)藥殘留風險評估[J].中國農(nóng)業(yè)科學,2014,47（18）:3655-3667.

[10]中華人民共和國農(nóng)業(yè)部 .GB/T 23204-2008.茶葉中 519 種農(nóng)藥及相關化學品殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜法[S].北京:中國標準出版社,2008.

[11]中華人民共和國農(nóng)業(yè)部 .GB 23200.13-2016.茶葉中 519 種農(nóng)藥及相關化學品殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜法[S].北京:中國標準出版社,2016.

[12]顏鴻飛,王美玲,陳紅,等 .固相萃取 -氣相色譜法 -串聯(lián)質(zhì)譜法測定茶葉中9種農(nóng)藥殘留限量[J].化學分析計量,2016,25(6):62-66.

[13]中華人民共和國農(nóng)業(yè)部 .GB 2763-2016 食品安全國家標準 食品中農(nóng)藥最大殘留限量[S].北京:中國標準出版社,2016.

[14]任韌,王姝婷,何華麗,等 .杭州地區(qū)市售茶葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留調(diào)查和分析[S].中國衛(wèi)生檢驗雜志.2016,26(16):1465-1467.