侯慧麗，劉傳敏

（河南省駐馬店農(nóng)業(yè)學(xué)校，河南 駐馬店 463000）

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)動物 商丘志元食品養(yǎng)殖基地的300頭保育豬，2月齡左右，體重20kg，雌雄比例為1∶1.

1.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器和試劑 微量移液器、超凈工作臺、酶標(biāo)儀、冷凍離心機(jī)等。

3-ABC-I-ELISA試劑盒、3-ABC基因表達(dá)蛋白。

1.2 試驗(yàn)方法

按照豬口蹄疫抗原檢測試劑盒（3-ABC-I-ELISA試劑盒）ELISA試劑盒說明書規(guī)定的方法，對300份全血樣品進(jìn)行ELISA檢測。

1.2.1 樣品的準(zhǔn)備 選擇商丘志元食品養(yǎng)殖基地臨床健康的保育豬。取動物全血，按照實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法分離血清。血清最好滅活處理，減少污染。分離好的血清作為待檢血清放于-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 血清學(xué)檢測 采用武漢科前動物生物制品有限責(zé)任公司生產(chǎn)的3-ABC-I-ELISA試劑盒的說明書進(jìn)行檢測。

從-20℃冰箱取出待檢血清后，放于-4℃融化。將待檢血清、陽性血清、陰性血請用PBS溶液作1：20倍稀釋，然后每孔加入100μL，陽性、陰性血清作2個(gè)平行對照，蓋上封口膜后，置于37℃培養(yǎng)箱45min。

（1）PBST溶液洗滌3次，每次10min，最后甩干。

（2）用PBS溶液稀釋酶標(biāo)二抗（1：100），每孔加100μL，37℃孵育1h。

（3）PBST溶液洗滌3次，每次10min。

（4）每孔加入顯色劑100μL，37℃避光下反應(yīng)15min。

（5）加入終止液100μL。然后于酶標(biāo)儀測定OD450值。

（6）血清效價(jià)測定：血清效價(jià)=（OD待檢血清-OD陰性血清）/（OD陽性血清-OD陰性血清）

（7）血清效價(jià)的判定：血清效價(jià)＞0.3是陽性；0.2＜血清效價(jià)＜0.3表現(xiàn)為可疑；血清效價(jià)＜0.2是陰性。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

商丘志元食品養(yǎng)殖基地隨機(jī)抽取90份豬血清，其中編號（1、4、6、7、16、18、26、27、28、30、31、37、39、40、42、44、46、52、54、57、60、61、63、64、65、74、78、79、82、83、85、89）檢測結(jié)果為陰性。編號（2、8、10、12、14、22、24、32、33、36、41、47、51、53、56、58、67、70、73、87）檢測結(jié)果為可疑。編號（3、5、9、11、13、15、17、19、20、21、23、25、29、34、35、38、43、45、48、49、50、55、59、62、66、68、69、71、72、75、76、77、80、81、84、86、88、90）檢測結(jié)果為陽性，說明豬已經(jīng)感染口蹄疫，要及時(shí)治療。

商丘志元食品養(yǎng)殖基地豬血清3-ABC-I-ELISA檢測結(jié)果

商丘志元食品養(yǎng)殖基地豬血清檢測90份，其中38份為陽性，陽性率為42.2%。說明38頭豬已經(jīng)攜帶口蹄疫病毒。

3 預(yù)防措施

仔豬出生后要注意保暖防寒，盡早吃上充足的初乳，提高機(jī)體的抵抗力，為了滿足仔豬的營養(yǎng)需要，應(yīng)盡早補(bǔ)料，補(bǔ)料的時(shí)候要確保料槽干凈衛(wèi)生，補(bǔ)料要有過渡時(shí)期，防止仔豬拉稀。

仔豬出生后要選擇相同血清型進(jìn)行免疫接種，一般采用豬口蹄疫滅火苗來預(yù)防口蹄疫。一般采用3次免疫，即30日齡，60日齡，90日齡，且每頭每次注射2ml。先接種健康豬群，后接種可疑的。

消毒是預(yù)防口蹄疫的一個(gè)重要的環(huán)節(jié)，包括圈舍外周圍環(huán)境的消毒，圈舍內(nèi)的消毒，消毒應(yīng)徹底。

破損的皮膚也是感染口蹄疫的一條重要途徑，因此生產(chǎn)中應(yīng)避免仔豬之間的互相打斗，對傷口要進(jìn)行包扎處理，防止繼發(fā)感染。

4 治療

口腔用0.1%的高錳酸鉀沖洗，對于潰爛的創(chuàng)面可用雙氧水除去壞死組織。

蹄部可用3%臭藥水或來蘇兒洗滌，擦干后涂松餾油或魚石脂軟膏，再用繃帶包扎。

為防止繼發(fā)感染，可用頭孢他啶+歐諾沙星。

5 結(jié)論

通過本次的流行病學(xué)調(diào)查，及血清學(xué)實(shí)驗(yàn)我們可以得出結(jié)論，該豬場已經(jīng)感染口蹄疫，而且陽性率達(dá)到42.2%，其余要么為陰性，要么為可疑，這說明該豬場的飼養(yǎng)管理和免疫存在很大的問題，導(dǎo)致大面積感染，這就告訴我們必須做好日常工作，保證舍內(nèi)的環(huán)境衛(wèi)生，發(fā)現(xiàn)病情及時(shí)上報(bào)等措施，以使本病得到良好的防治效果，提高豬只的成活率。

[1]楊春華，王強(qiáng)，王毅等.豬口蹄疫的診斷及其綜合防控[J].畜牧與飼料科學(xué)，2009，30（7-8）：12-16.

[2]高飛，孫國斌，張金鳳.國外口蹄疫流行現(xiàn)狀分析及防治策咯[J].北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2006，21（1）：76-80.

[3]董志強(qiáng)，張志，李曉成等.口蹄疫檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J].中國動物檢疫，2007，24（3）：48-50.