俞兆程

（武威市環(huán)境保護(hù)監(jiān)測(cè)站 甘肅武威 733000）

1 高效液相色譜儀基本原理

高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相,通過(guò)高壓泵進(jìn)入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分按照極性大小順序被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。

2 高效液相色譜儀的應(yīng)用

液相色譜法的分離機(jī)理是基于混合物中各組分對(duì)兩相親和力的差別。根據(jù)固定相的不同，可分為液固色譜、液液色譜和鍵合相色譜。高效液相色譜法與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會(huì)引起高阻力，需用高壓輸送流動(dòng)相。由于高效液相色譜法具有分離效能高、選擇性好、靈敏度高、分析速度快、適用范圍廣、色譜柱可反復(fù)使用的特點(diǎn)，在我國(guó)各項(xiàng)科學(xué)研究和檢測(cè)工作當(dāng)中都有廣泛的應(yīng)用。為保證高效液相色譜儀在物質(zhì)研究工作中的作用效果，在完成物質(zhì)溶液制備工作之后，還需要采取常規(guī)的方法對(duì)所配置的溶液實(shí)施簡(jiǎn)單檢測(cè)，明確溶液的基本物理性質(zhì)，配合適當(dāng)?shù)念A(yù)處理技術(shù)開展溶液色譜檢測(cè)工作。與單一物質(zhì)檢測(cè)設(shè)備相比，高效液相色譜儀具備分辨率高、反應(yīng)速度快和色譜柱利用性強(qiáng)等優(yōu)勢(shì)，能夠彌補(bǔ)其他儀器設(shè)備在物質(zhì)檢測(cè)時(shí)潛藏的弊端，使得其在我國(guó)生物化學(xué)工程、食品工程和環(huán)境現(xiàn)狀分析等事業(yè)中有著廣泛的應(yīng)用。

3 高效液相色譜儀常見(jiàn)故障排除

3.1 流動(dòng)相氣泡故障

對(duì)流動(dòng)相氣泡故障來(lái)說(shuō)，出現(xiàn)這一故障的原因在于流動(dòng)相濾頭長(zhǎng)時(shí)間浸泡在水或乙酸銨等緩沖液當(dāng)中，造成過(guò)濾器中霉菌大量繁殖。如果不能采取適當(dāng)措施控制這一現(xiàn)狀，必然導(dǎo)致過(guò)濾器堵塞，流動(dòng)相中出現(xiàn)氣泡的可能性大大提升。針對(duì)于這一故障，在高效液相色譜儀使用之前，應(yīng)將其過(guò)濾器浸泡在5%的硝酸溶液當(dāng)中，并利用超聲破進(jìn)行過(guò)濾器清晰。消除過(guò)濾器中污垢，從而減少流動(dòng)相中氣泡含量，保證流動(dòng)相在物質(zhì)溶液檢測(cè)過(guò)程中的作用效果。

3.2 柱壓過(guò)高故障

色譜柱作為高效液相色譜儀中重要組成部分，保證色譜柱內(nèi)部壓強(qiáng)的穩(wěn)定性，不僅能夠提升高效液相色譜儀運(yùn)行效果，還能夠改善高效液相色譜儀運(yùn)行弊端，使得物質(zhì)溶液檢測(cè)工作順利開展。但是該儀器設(shè)備在長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行過(guò)程中很有可能出現(xiàn)色譜柱內(nèi)部壓強(qiáng)過(guò)高的問(wèn)題，造成基線漂移，檢測(cè)準(zhǔn)確性下降，影響溶液檢測(cè)試劑作用效果。而且高效液相色譜儀出現(xiàn)柱壓過(guò)高故障的原因主要有緩沖液鹽分沉積和樣品污染沉積這兩方面，這就應(yīng)針對(duì)各項(xiàng)原因制定分類解決措施，避免柱壓過(guò)高這一故障延伸[2]。對(duì)于緩沖液鹽分沉積來(lái)說(shuō)，應(yīng)利用40℃—50℃的純水對(duì)色譜柱進(jìn)行全面沖洗，盡可能保證色譜柱中壓強(qiáng)降到規(guī)定的范圍內(nèi)。對(duì)于樣品污染沉積來(lái)說(shuō)，不僅需要利用純水沖洗色譜柱，還需要應(yīng)用適當(dāng)濃度的甲醇溶液對(duì)色譜柱進(jìn)行二次沖洗，控制樣品污染對(duì)高效液相色譜儀中色譜柱產(chǎn)生的影響，使得色譜柱在相應(yīng)檢測(cè)中的作用效果得以提升。

3.3 物質(zhì)溶液色譜檢測(cè)效果不佳

眾所周知，高效液相色譜儀的作用為物質(zhì)溶液色譜檢測(cè)。因此，在對(duì)相應(yīng)溶液進(jìn)行綜合檢測(cè)工作時(shí)，就應(yīng)保證高效液相色譜儀中各個(gè)零部件處于相互配合的狀態(tài)，減少高效液相色譜儀在運(yùn)行時(shí)出現(xiàn)問(wèn)題的可能，確保物質(zhì)溶液檢測(cè)工作順利開展。但是在完成物質(zhì)溶液綜合檢測(cè)工作之后，還有可能出現(xiàn)色譜檢測(cè)效果不佳這一弊端，而出現(xiàn)這一問(wèn)題的原因主要表現(xiàn)在色譜柱污染和柱頭填料塌陷這兩方面上。對(duì)于色譜柱污染來(lái)說(shuō)，需利用純水對(duì)色譜柱進(jìn)行反響沖洗，之后采用甲醇進(jìn)行物質(zhì)沖洗。重復(fù)進(jìn)行這兩步工作，在解決色譜柱污染問(wèn)題的同時(shí)，避免物質(zhì)溶液檢測(cè)之后出現(xiàn)色譜效果不佳等問(wèn)題[3]。對(duì)于柱頭填料塌陷這一故障來(lái)說(shuō)，應(yīng)及時(shí)清除色譜柱中遭受污染的填料，并在新填料裝入時(shí)輔助一定濃度的甲醇溶液，同時(shí)保證色譜柱中填料的密實(shí)性，有效控制儀器設(shè)備檢測(cè)效果不佳對(duì)高效液相色譜儀作用效果產(chǎn)生的影響。

3.4 檢測(cè)器峰型不規(guī)則

在對(duì)物質(zhì)容易實(shí)施綜合檢測(cè)時(shí)，可能會(huì)因?yàn)楦咝б合嗌V儀運(yùn)行狀態(tài)和檢測(cè)器作用效果不佳而出現(xiàn)檢測(cè)器峰型不規(guī)則的問(wèn)題。如果不能對(duì)這一故障實(shí)施有效排除，必然導(dǎo)致物質(zhì)溶液綜合檢測(cè)效果變差，對(duì)于溶液檢測(cè)真實(shí)性也有極大的影響。從檢測(cè)器峰型不規(guī)則的角度出發(fā)，了解到高效液相色譜儀在物質(zhì)溶液檢測(cè)時(shí)出現(xiàn)的不規(guī)則峰型主要有基線漂移、無(wú)峰、峰變寬、雙峰和前沿峰等問(wèn)題。而且不同奉行的誘發(fā)原因也存在很大的差異。這就應(yīng)從各類檢測(cè)器峰型不規(guī)則的原因制定針對(duì)性排除措施，控制外在因素對(duì)檢測(cè)器峰型產(chǎn)生的影響。在排除檢測(cè)器峰型不規(guī)則問(wèn)題的同時(shí)，一以保證高效液相色譜儀在物質(zhì)溶液綜合檢測(cè)中的作用效果得以彰顯。

結(jié)語(yǔ)

綜上所述，了解到高效液相色譜儀在我國(guó)各項(xiàng)研究工程中起到非常重要的作用。為此就應(yīng)加強(qiáng)高效液相色譜儀研究力度，以保證物質(zhì)監(jiān)測(cè)工作人員對(duì)這一儀器設(shè)備有一個(gè)全面的掌握。對(duì)于高效液相色譜儀在運(yùn)行過(guò)程中出現(xiàn)的故障來(lái)說(shuō)，還應(yīng)結(jié)合高效液相色譜儀運(yùn)行模式和其他方面因素制定故障排除策略，確保高效液相色譜儀在各項(xiàng)研究工程中的作用效果有進(jìn)一步提高。