◎ 李紅衛(wèi),彭倩倩
(國家知識產(chǎn)權(quán)局專利局專利審查協(xié)作江蘇中心,江蘇 蘇州 215000)
海參屬棘皮動物門海參綱海參屬,是生活在海邊至8 000 m的海洋軟體動物。海參是我國一種重要的傳統(tǒng)海產(chǎn)品,具有高蛋白、低脂肪、低膽固醇以及氨基酸、微量元素含量豐富的特點。自古至今,海參以其美味的口感,豐富的營養(yǎng)價值,獨特的食療作用和藥用價值,被奉為筵上珍品,百補之首[1-3]。
海參多糖是海參體壁的重要組成物質(zhì),其占海參體壁干重的5%~10%。海參多糖為混合物,主要包括糖胺聚糖和巖藻多糖,這兩種物質(zhì)分別具有不同的化學(xué)結(jié)構(gòu)及生理活性。海參糖胺聚糖具有抗凝、纖溶、降低血黏度、調(diào)節(jié)血脂等活性,可作用于缺血性中風(fēng)(腦梗死)的各個環(huán)節(jié),從而達(dá)到治療缺血性中風(fēng)的目的。海參巖藻多糖具有保護(hù)神經(jīng)干細(xì)胞、預(yù)防胃潰瘍等功效,在功能性食品及藥物開發(fā)等方面已展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。
2005年以前,我國專利制度剛剛建立不久,科研人員和企事業(yè)單位專利申請概念較弱,專利申請積極性不高,專利申請數(shù)量較少。2000年以前,專利申請量不到50件;2001—2005年,專利申請量不到100件;2006年以后,科研人員和企事業(yè)單位的專利保護(hù)意識有了一定的提高,知識產(chǎn)權(quán)在企業(yè)發(fā)展中的作用越來越重要,專利申請量逐年增加,尤其是最近幾年,國家鼓勵科技創(chuàng)造,相關(guān)的專利申請量也明顯增多,其中2006—2010年專利申請量在50件,2011年以后,申請量增加明顯,2012—2016年4年中,申請量均在200件以上。
按照國際通用的專利分類體系IPC分類,海參在食品、保健品A23L領(lǐng)域中的應(yīng)用最多,申請的專利也最多,占比達(dá)到57%,常見的處理方法為水解、酶解、粉碎海參產(chǎn)品,加入到產(chǎn)品中。其次為醫(yī)藥、化妝品A61K中,占比達(dá)到18%,多以海參的單一或者多種活性物質(zhì),經(jīng)過冷凍干燥、膠囊化、片劑等現(xiàn)代高新技術(shù)獲得良好的產(chǎn)品形式。在酒和茶葉的C12G和A23F中,占比最少為4%,多以浸泡、粉末加入到產(chǎn)品中。
海參富含多種營養(yǎng)活性物質(zhì),海參多糖為最常見的有益成分?,F(xiàn)有技術(shù)為了獲得生物利用度高的海參產(chǎn)品,絕大部分是將海參原料預(yù)處理后,進(jìn)行水解、酶解或堿解,之后經(jīng)過分離獲得粗多糖,或者經(jīng)過純化獲得精多糖。例如,專利申請CN200510043648A記載了一種海參活性物質(zhì)凍干速溶粉的提取方法,采用清洗干雜、透析脫鹽、磨漿、酸性酶解、中性酶解、滅酶活性、粗濾、去除異味、超濾調(diào)味、冷凍真空干燥的方法,得到海參活性物質(zhì),含有海參肽、海參黏多糖、海參活性素,最大程度地保留了海參保健功效的有效活性成分,利于人體吸收和利用。酶解過程用到的酶,多為外源酶,也有專利申請涉及通過多種理化方法預(yù)處理后,借助鮮活海參自身的自溶酶,對海參原料進(jìn)行酶解,例如專利申請CN03111925A記載:隨著研究的深入,將粗多糖分離純化獲得精多糖的技術(shù)已經(jīng)非常成熟,過濾、超濾、微濾、層析、離子交換等現(xiàn)代高新分離技術(shù)已經(jīng)被用于其中;獲得的多糖產(chǎn)品,根據(jù)產(chǎn)品要求,經(jīng)過現(xiàn)代保健品加工技術(shù)和藥劑工程技術(shù),可以制成粉劑、口服劑、凍干劑、膠囊劑在內(nèi)的諸多產(chǎn)品形式[4-5]。
海參多糖中的巖藻聚糖和糖胺聚糖已被現(xiàn)代醫(yī)學(xué)證實具有諸多的醫(yī)學(xué)用途,糖胺聚糖及其衍生物具有抗凝血作用,巖藻聚糖及其衍生物具有多種生物活性,包括抗氧化、抗凝血、抑制腫瘤、降血脂、提高免疫力、抗炎、胃保護(hù)、抗病毒作用等。但由于這些多糖的分子量較大,不易于被人體吸收利用,而通過合適的方法降低分子量,獲得低分子量、小分子量的功能性明確的海參多糖,具有黏度低、易吸收、生物利用率好等優(yōu)點,為海參加工處理的研究熱點之一。降解的方法主要有化學(xué)降解法、生物降解法和物理降解法。專利申請CN101057859A記載了一種解聚海參糖胺聚糖組合物的制備方法,包括在5%雙氧水的條件下,將提取的海參多糖降解成重均分子量介于8 000~12 000 Da的解聚海參糖胺聚糖組合物,之后用凝膠柱收集解聚海參糖胺聚糖組合物[6]。專利申請CN102532340A記載了一種海參多糖的分離純化方法,包括:①分離步驟,對海參多糖進(jìn)行雙水相萃取,獲得萃取上相和萃取下相。②后處理步驟,將第一步獲得的萃取上相脫鹽、干燥獲得海參巖藻聚糖硫酸酯,將第一步獲得的萃取下相脫鹽、干燥獲得海參硫酸軟骨素,從而實現(xiàn)海參多糖的分離純化[7]。專利申請CN102993324A記載了一種利用纖維素離子交換柱層析純化海參多糖,獲得平衡純度和得率的巖藻聚糖方法,包括下列步驟:①玉足海參預(yù)處理。②堿解玉足海參體壁。③雙酶酶解玉足海參體壁。④酶解完畢后,用三氯乙酸去除雙酶酶解液中的蛋白質(zhì)。⑤用乙醇沉淀玉足海參糖胺聚糖。⑥干燥玉足海參糖胺聚糖粗糖。⑦用纖維素離子交換柱層析法純化玉足海參糖胺聚糖。⑧雙氧水脫色。⑨用乙酸鉀沉淀玉足海參糖胺聚糖。⑩干燥玉足海參糖胺聚糖精糖[8]。專利申請CN103087214A記載了一種利用超聲波物理方法打破糖苷鍵,降解海參巖藻聚糖硫酸酯,之后通過透析獲得低分子量的海參巖藻聚糖硫酸酯目標(biāo)產(chǎn)物[9]。
海參多糖的加工處理常規(guī)使用水解或者酶解海參原料,通過脫蛋白、沉淀獲得海參粗多糖、采用超濾、膜過濾在內(nèi)的多種分離純化技術(shù)獲得精多糖,這方面的專利申請量很大,后續(xù)的專利申請中,大都會涉及提取、分離、純化方法,這些技術(shù)手段已經(jīng)在本領(lǐng)域進(jìn)行了諸多的研究。在審查實踐中,不建議大量瀏覽酶解、提純的現(xiàn)有技術(shù),而是基于專利申請的發(fā)明目的和技術(shù)問題,針對該技術(shù)問題,采用的技術(shù)手段以及達(dá)到的技術(shù)效果,進(jìn)行技術(shù)手段的檢索,有可能快速地檢索到最接近的現(xiàn)有技術(shù)。
[1]曲 凱,范東升,朱鏡羲,等.海參產(chǎn)業(yè)領(lǐng)域?qū)@夹g(shù)現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢[J].中國漁業(yè)經(jīng)濟(jì),2013,31(2):22-29.
[2]林 楠,張通博,張閨賢,等.我國海參領(lǐng)域?qū)@夹g(shù)現(xiàn)狀分析[J].科技創(chuàng)新與應(yīng)用,2015(2):29-30.
[3]潘 誠.我國海參專利現(xiàn)狀初步分析[J].科學(xué)與管理,2008(6):69-71.
[4]王偉成.一種海參活性物質(zhì)凍干速溶粉的提取方法:中國,CN1871945A[P].2006-12-06.
[5]威海健方醫(yī)藥研究所.海參多糖的制備方法:中國,CN1440985A[P].2003-09-10.
[6]張登科.一種解聚海參糖胺聚糖組合物及其制備方法和用途:中國,CN101057859A[P].2007-10-24.
[7]中國海洋大學(xué).海參多糖的分離純化方法及雙水相萃取方法在其中的應(yīng)用:中國,CN102532340A[P].2012-07-04.
[8]青島市市立醫(yī)院.一種提取玉足海參糖胺聚糖的方法:中國,CN102993324A[P].2013-03-27.
[9]浙江大學(xué).低分子量海參巖藻聚糖硫酸酯的制備方法:中國,CN103087214A[P].2013-05-08.