李美辰
(西華師范大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,四川南充637000)
茶多糖 (Tea Polysaccharides,TPS)又名茶活性多糖或茶葉多糖,茶多糖由茶葉中的糖類、蛋白質(zhì)和果膠等物質(zhì)組成,它的具有較好的保健食用、醫(yī)藥,美容等方面的功能,是一種極具開發(fā)潛質(zhì)的天然物質(zhì),所以它的提取方法也越來越受人們的關(guān)注。
茶多糖是一種外觀為淡褐色的酸性糖蛋白,易溶于熱水,不溶于高濃度的乙醇、丙酮,乙酸乙酯等有機(jī)溶劑,含有大量對人體有益的保健因子,已經(jīng)有研究表明茶多糖具有降血糖、血脂、血壓,抗血栓,防輻射,增強(qiáng)免疫力與防治糖尿病的功能[1]。
現(xiàn)在常用水提法、超聲波輔助提取法、酶提法、沉淀法 (水提乙醇析出沉淀法與CTAB沉淀法)、超濾法與微波技術(shù)來提取茶葉中的茶多糖。
3.1水法提取:利用水提法提取茶葉中的茶多糖,王黎明等[2]經(jīng)粉碎,去單糖與低聚糖,熱水浸提,濃縮等步驟,通過嶺脊分析找出最佳提取條件為:浸提時間90min,浸提溫度為70℃,料水比1:10(g/ml),浸提3次,該方法的成本低,安全性高,幾乎無污染。
3.2超聲波輔助提取法:此法是利用超聲波產(chǎn)生的空化效應(yīng)等特殊作用來提取茶多糖。黃永春等[3]采用超聲波輔助提取法得出提取茶多糖的最優(yōu)條件是:溫度60℃,料液比30:1(ml/g),時間40min,pH值7.0,超聲功率150W,提取率為5.15%,該方法雖然方便快捷且污染極小,但是存在可能會改變茶多糖的性質(zhì),致使其相對分子質(zhì)量降低的缺點(diǎn)。
3.3酶提法:利用酶的專一性、高效性等特性,傅博強(qiáng)等[4]采用纖維素酶法提取茶多糖,保持了茶多糖的活性,通過低溫水提、酶提二次結(jié)合法提取茶葉中的茶多糖,即第一次在50℃,茶葉與水質(zhì)量比1:15,水提時間30min,濾渣用于第二次酶提,濾渣用pH4.6的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖溶液加纖維素酶提取,經(jīng)過正交試驗(yàn)及其結(jié)果分析得出第二次酶提的最佳條件:55℃,固液比1:14,酶用量2.2μL/g(以茶葉質(zhì)量計(jì))時間120min,粗多糖 (干重)總提取率7.93% 。酶提法的得率雖然較高,但是也存在較多的局限性:對操作過程中的溫度和pH要求嚴(yán)格,對設(shè)備要求高等[5]。
3.4沉淀法:此法原理是利用茶多糖溶于熱水,不溶于乙醇,CTAB溶液等有機(jī)溶劑的理化性質(zhì)對茶葉中茶多糖進(jìn)行提取,包括水提乙醇析出沉淀法,CTAB沉淀法等。
3.4.1水提乙醇析出沉淀法:許旋等[6]以綠茶為原料,應(yīng)用正交實(shí)驗(yàn),討論得出采用水提醇析沉淀法提取茶多糖的最佳提取條件是:沸水浸提時間30min,等量氯仿萃取3次,等量乙酸乙酯萃取1次,沉析用的乙醇濃度為60%。最后得茶多糖產(chǎn)率2.42%。此方法簡單易行,但是使用了乙醇,氯仿,乙酸乙酯等有機(jī)溶劑,成本高于水提法且氯仿對人體健康有害。
3.4.2CTAB沉淀法:利用CTAB沉淀法提取茶葉中的茶多糖,楊其林等[7]以毛尖茶為原料,水為溶劑,CTAB為沉淀劑,通過正交試驗(yàn)得出CTAB沉淀法提取茶多糖的最優(yōu)條件是:離心時間12min,沉淀劑加入量25mL,沉淀時間6h,茶多糖得率1.34% 。此方法實(shí)驗(yàn)時必須嚴(yán)格控制多糖混合物的pH<8及無硼砂存在,否則中性多糖也會被沉淀下來[8]。
3.5超濾法:超濾法是一種具有選擇性分離功能的膜分離技術(shù),以膜兩側(cè)的壓力差為推動力,目的是使小分子物質(zhì)與大分子物質(zhì)分離,進(jìn)而使物質(zhì)得到純化。研究表明[9]超濾可以分離茶葉酶解提取液中的大分子多糖與小分子多酚等活性物質(zhì),三氯乙酸濃度為4%時,多糖得率為34.3% 。超濾法是一種衛(wèi)生環(huán)保的提取方法,分離效率高,操作簡單。
3.6微波技術(shù)提取:采用微波技術(shù)提取茶葉中的茶多糖,是利用茶葉能夠吸收微波能,使自身的溫度迅速升高,細(xì)胞破裂,細(xì)胞中的有效物質(zhì)流出,進(jìn)而進(jìn)行提取的原理。聶少平等[10]用微波處理茶葉后,用水作溶劑,無水乙醇作沉淀劑,經(jīng)離心分離,洗滌干燥后得茶葉粗多糖,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明微波技術(shù)提取茶葉中茶多糖的最佳條件是:茶葉與水質(zhì)量比1:15,微波強(qiáng)度100%,提取時間75s,提取率4.73% 。此方法具有提取速度快,得率高的優(yōu)點(diǎn),可用于茶多糖的提取,但是微波輻射對人體也有危害,因此使用此方法時應(yīng)加以注意。
隨著茶多糖的藥理作用被人們熟知,人們對茶多糖的興趣也越來越大,探索程度也越來越深,所以茶多糖的各種提取工藝也不斷地發(fā)展與完善中。
參考文獻(xiàn):
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[2]王黎明,夏文水.水法提取茶多糖工藝條件優(yōu)化 [J].食品科學(xué),2005(05):171-174.
[3]黃永春,馬月飛,謝清若等.超聲波輔助提取茶多糖及其分子量變化的研究 [J].食品科學(xué),2007(07):170-173.
[4]傅博強(qiáng),謝明勇,周鵬等.纖維素酶法提取茶多糖[J].無錫輕工大學(xué)學(xué)報 (食品與生物技術(shù)),2002(04):362-366.
[5]李春雷,步召勝,李志鵬.茶多糖提取分離工藝綜述[J].中國茶葉加工,2015(01):43-47.
[6]許旋,駱曉楓,陳兆星等.正交試驗(yàn)優(yōu)化綠茶中茶多糖醇析水提法的實(shí)驗(yàn)研究[J].中藥材,2005(04):327-329.
[7]楊其林,劉鐘棟,任健等.采用CTAB沉淀法提取茶多糖[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2004(10):139-142.
[8]王偉華,韓占江.茶多糖的提取純化及其藥理作用的研究進(jìn)展 [J].廣東微量元素科學(xué),2007(12):8-13.
[9]劉軍海.超濾法提取茶多糖研究 [J].食品工業(yè)科技,2007(09):124-126+129.
[10]聶少平,謝明勇,羅珍.微波技術(shù)提取茶多糖的研究[J].食品科學(xué),2005(11):83-87.