邵軍民，高志學(xué)，王瑞龍

（寶雞公路動(dòng)物防疫監(jiān)督檢查站，陜西寶雞721312）

黃芪多糖（Astragaluspolysaccharin，APS）是黃芪的主要活性成分，具有促進(jìn)生長發(fā)育、抗病毒、抗腫瘤、抗衰老、抗氧化、調(diào)節(jié)免疫等生物學(xué)功能，是理想動(dòng)物飼料添加劑與免疫增強(qiáng)劑[1]。雞新城疫（Newcast l e di sease，ND）是由雞新城疫病毒（Newcast l e di sease vi rus，ND）引起的一種烈性傳染病，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為必須通報(bào)的動(dòng)物傳染病，我國將其列為一類動(dòng)物疫病，給我國養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失[2]。本研究探討黃芪多糖對肉仔雞新城疫疫苗免疫效果的影響，以期為黃芪多糖的產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 黃芪多糖、疫苗、肉雞黃芪多糖購自桐廬新天地生物科技有限公司；新城疫活疫苗購自山東省濱州沃華生物工程有限公司；AA白羽肉仔雞由寶雞市坪頭養(yǎng)雞場提供。

1.2 試驗(yàn)分組將60只7日齡AA白羽肉仔雞隨機(jī)分為2組（對照組、試驗(yàn)組），每組30只雞，對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中添加0.1%黃芪多糖，試驗(yàn)開始前對照組和試驗(yàn)組的試驗(yàn)肉仔雞均以滴鼻的免疫方式免疫新城疫弱毒活疫苗1頭份，試驗(yàn)期為35d，試驗(yàn)期間對照組和試驗(yàn)組的日常飼養(yǎng)管理均一致，自由采食與飲水。

1.3 血清樣品的采集與處理分別在疫苗免疫前、疫苗免疫后 7d、14d、21d、28d、35d于翅靜脈處對試驗(yàn)肉雞采集血液1.0mL，將采集的1.0mL血液全部打入1.5mL離心管中，將離心管置于37℃溫箱中傾斜45°放置1h，隨后將離心管置于4℃冰箱中放置2h，以5000 rpm離心10min，上清液即為待檢測的血清樣品。

1.4 1%雞紅細(xì)胞懸液的制備選取3只SPF成年公雞，在一次性注射器中加入0.2mL肝素后于公雞的翅靜脈處各采集血液2.0mL，將采集3只公雞血液混合后全部打入15mL離心管中，將離心管以2000rpm離心10min，棄去上清液，利用滅菌生理鹽水洗滌沉淀3次，洗滌后的沉淀即為雞紅細(xì)胞。在99mL滅菌生理鹽水中加入1mL雞紅細(xì)胞，即得1%雞紅細(xì)胞懸液。

1.5 抗體效價(jià)的測定利用常規(guī)血凝抑制試驗(yàn)方法分別測定疫苗免疫前、疫苗免疫后 7d、14d、21d、28d、35d 采集血清樣品的新城疫抗體效價(jià)。

1.6 數(shù)據(jù)分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行進(jìn)行單因素方差分析和多重比較，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果和分析

如表1所示，隨著免疫后時(shí)間的延長試驗(yàn)組和對照組的新城疫抗體效價(jià)均逐步提高，均在疫苗免疫后28d達(dá)到峰值。試驗(yàn)組和對照組相比較，在新城疫疫苗免疫前和疫苗免疫后的7d新城疫抗體效價(jià)差異均不顯著 （P＞0.05）；在疫苗免疫后的14d、21d、28d、35d，新城疫抗體效價(jià)均顯著提高（P＜0.05）。表明肉仔雞飼料中添加0.1%黃芪多糖對肉仔雞新城疫疫苗的免疫效果具有良好的增強(qiáng)作用。

表1 黃芪多糖對新城疫疫苗免疫效果的影響 log2

3 討論

抗體是介導(dǎo)動(dòng)物機(jī)體體液免疫的重要組成成分，抗體效價(jià)的高低可直接反映動(dòng)物機(jī)體的體液免疫狀態(tài)，檢測疫苗免疫后的血清抗體效價(jià)可簡單、直觀、有效的檢測疫苗的免疫效果，故本研究通過測定血清抗體效價(jià)來評價(jià)新城疫疫苗的免疫效果。黃芪多糖能夠顯著改善動(dòng)物機(jī)體的免疫功能，但黃芪多糖對雞群免疫功能的影響與雞的品種、機(jī)體狀態(tài)以及黃芪多糖的純度和添加劑量等均密切相關(guān)。孫波等[3]研究表明烏雞基礎(chǔ)日糧中添加500mg/kg和1000mg/kg黃芪多糖均能夠提高烏蒙烏雞的免疫功能。本研究結(jié)果表明肉仔雞基礎(chǔ)飼糧中添加0.1%的黃芪多糖可提高新城疫疫苗的免疫效果，與孫波等[3]的研究結(jié)果表現(xiàn)出了高度的一致性。說明飼料中添加黃芪多糖可以顯著提高雞群的免疫功能和疫苗的免疫效果，黃芪多糖可作為免疫增強(qiáng)劑在禽飼料中廣泛應(yīng)用。