王典　吳照輝　郭芳陽

摘要：為了研究SPAD-502葉綠素儀在河南平原煙區(qū)烤煙葉片上的應(yīng)用方法，選取河南許昌煙區(qū)主栽品種中煙100和豫煙系列新品種豫煙9號(hào)作為試驗(yàn)材料進(jìn)行研究。結(jié)果顯示，在一天中隨著光照度的變化，兩個(gè)烤煙品種葉片的SPAD值也有相應(yīng)的變化。綜合考慮測(cè)量的穩(wěn)定性和可操作性等因素，上午8：00-10：00是測(cè)定的最佳時(shí)間段。用酒精棉擦拭測(cè)點(diǎn)和SPAD儀測(cè)試窗口，發(fā)現(xiàn)清潔后測(cè)得的結(jié)果有顯著變化。分別在團(tuán)棵期、旺長(zhǎng)期和成熟期等煙葉生長(zhǎng)發(fā)育期內(nèi)對(duì)兩個(gè)烤煙品種不同葉位的SPAD值進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，頂部完全展開葉的第3片葉測(cè)定結(jié)果相較于其他葉位變異系數(shù)較低，測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定；將頂3葉葉面分為10個(gè)測(cè)定位點(diǎn)進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，主脈中部左右兩側(cè)位點(diǎn)均值的變異系數(shù)和代表系數(shù)都較低，結(jié)果的穩(wěn)定性和代表性為最優(yōu)。

關(guān)鍵詞：SPAD葉綠素儀；烤煙；河南平原煙區(qū)

中圖分類號(hào)：S572；Q945.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2018）03-0051-06

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.03.013

Abstract： In order to study the method of SPAD-502 chlorophyll meter application in flue-cured tobacco of Henan plain tobacco region，the field experiment was conducted and choose two varieties Zhongyan 100 and Yuyan No.9 as materials. Results showed that，the leaf SPAD value of two varieties has certain change with the change of light intensity in one day. To comprehensively consider the factors such as stability and maneuverability of measurement，8：00 AM to 10：00 AM is the best determination period. After alcohol-tempon to clean site and test window，the measured results had significant changes compared with before. The leaf SPAD value of two varieties in different sites such as resettling period， vigorous growing period and mature period were analyzed，and it was found that，compared with the other leaves，the determination results variation coefficient of the top fully expanded third leaf was low，so the determination results had better stability；Dividing the top of the third leaf into 10 loci and it was found that the variation coefficient and representation coefficient of mean value of the main central vein left and right sides were low，so the results of the stability and the representative were the best.

Key words： SPAD chlorophyll meter； flue-cured tobacco； Henan plain tobacco region

植物全氮可以很好地反映植物的氮營(yíng)養(yǎng)狀況，并且與作物產(chǎn)量也有較好的相關(guān)性[1]，因此植物全氮是一個(gè)很好的診斷指標(biāo)。在烤煙整個(gè)生育期內(nèi)，煙株生長(zhǎng)和生理代謝都對(duì)氮素十分敏感[2]。然而在中國烤煙生產(chǎn)中存在著過量或過遲施氮的問題，這不僅增加生產(chǎn)成本、降低煙葉產(chǎn)質(zhì)量，還因?yàn)榉柿侠寐瘦^低引起環(huán)境污染[3]。河南作為濃香型煙葉最重要的產(chǎn)區(qū)，近年來備受品種的困擾，而外引品種并不能充分彰顯本地區(qū)的生態(tài)優(yōu)勢(shì)，本地選育品種具有抗病性強(qiáng)、農(nóng)田長(zhǎng)勢(shì)良好和濃香型質(zhì)量風(fēng)格突出的特點(diǎn)，但耐肥性差、適宜的氮水平范圍狹窄，生產(chǎn)中往往由于施肥的問題不能充分彰顯品種特性。

傳統(tǒng)上多憑借土壤肥力、前茬和煙株的外在特征來調(diào)控?zé)熤甑臓I(yíng)養(yǎng)和判斷煙株氮素的豐缺，但往往不夠精準(zhǔn)或調(diào)控出現(xiàn)偏差，而利用測(cè)定煙株全氮的方法不僅破壞植株，同時(shí)化驗(yàn)周期長(zhǎng)、操作麻煩，難以實(shí)現(xiàn)作物生長(zhǎng)期間的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。因此，實(shí)時(shí)快速地監(jiān)測(cè)田間煙株的氮素營(yíng)養(yǎng)狀況，進(jìn)而指導(dǎo)田間烤煙施肥，對(duì)于提高氮肥利用效率和煙葉的產(chǎn)量與質(zhì)量意義重大。氮素是葉綠素的主要組成物質(zhì)[4]，利用葉綠素儀獲得的植株葉片SPAD值（葉綠素的相對(duì)含量）與植株氮營(yíng)養(yǎng)狀況具有良好的相關(guān)性[5]，并且在檢測(cè)植株葉片時(shí)有快速、簡(jiǎn)便、無損的特點(diǎn)，便于人們及時(shí)采取營(yíng)養(yǎng)干預(yù)和農(nóng)藝措施來調(diào)整作物的生長(zhǎng)發(fā)育，因此受到廣大植物營(yíng)養(yǎng)學(xué)家的青睞，被廣泛應(yīng)用在水稻、小麥、棉花、油菜等大農(nóng)作物上。陳曉群等[6]利用SPAD值提出了基于水稻不同生育期葉綠素診斷值的氮肥推薦施用量。胡昊等[7]研究發(fā)現(xiàn)SPAD值可以進(jìn)行葉綠素的診斷，并且通過SPAD值可以對(duì)冬小麥進(jìn)行估產(chǎn)。關(guān)于烤煙方面的研究也有一些報(bào)道，王維等[3]研究發(fā)現(xiàn)利用葉綠素儀進(jìn)行實(shí)時(shí)氮肥管理，獲得了較高的煙葉產(chǎn)質(zhì)量，煙葉的化學(xué)成分更加協(xié)調(diào)。賀廣生等[8]研究發(fā)現(xiàn)烤煙K326品種在氮肥實(shí)時(shí)管理模式下的SPAD閾值40.5～43.0內(nèi)（氮肥用量為75～110 kg/hm2）能獲得較高的煙葉產(chǎn)量、產(chǎn)值和氮肥利用率。

然而，葉綠素在植物葉片中的分布會(huì)因物種、測(cè)定時(shí)期、測(cè)定位置的不同而不同，因此SPAD儀測(cè)出的結(jié)果也不盡相同?？聥闺钡萚9]利用SPAD-502葉綠素儀對(duì)中國南方4種木本植物葉綠素相對(duì)含量進(jìn)行測(cè)定發(fā)現(xiàn)，不同物種、不同葉齡、同一葉片不同部位、主脈左右兩側(cè)等因素都會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生影響。陳琴等[4]測(cè)定5種牧草葉片上不同部位的SPAD值得出同一葉片上葉尖部>葉中部>葉基部的特點(diǎn)，葉中部的值穩(wěn)定且更接近平均值，是最佳測(cè)定部位。煙草葉片在成熟期葉長(zhǎng)能達(dá)到60～72 cm，葉寬30～40 cm，葉片數(shù)達(dá)到18～23片。煙草葉片寬大及葉片數(shù)多的特點(diǎn)，導(dǎo)致葉綠素含量分布有差異，選擇哪片葉、同一葉片的測(cè)定部位以及測(cè)定時(shí)間等都需要進(jìn)行綜合考量，才能確定最能代表該煙葉的葉綠素相對(duì)含量的部位，目前關(guān)于SPAD葉綠素儀在河南平原煙區(qū)煙葉上的使用方法還沒有系統(tǒng)研究，針對(duì)河南平原煙區(qū)主栽品種的研究更少。為此，試驗(yàn)選擇河南主栽品種為研究材料，利用SPAD-502葉綠素儀測(cè)定兩個(gè)品種在一天中不同時(shí)間點(diǎn)、不同生育時(shí)期不同葉位、是否用酒精清洗葉片和測(cè)試窗口等的SPAD值，確定兩個(gè)品種適宜的SPAD值測(cè)定位置，以期建立SPAD-502葉綠素儀在河南平原煙區(qū)的應(yīng)用方法體系，為評(píng)價(jià)河南平原煙區(qū)烤煙煙葉的生長(zhǎng)性能和營(yíng)養(yǎng)狀況提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)在河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院煙草研究所實(shí)驗(yàn)地進(jìn)行，供試土壤為潮褐土。供試品種是河南省主栽品種中煙100和河南省推廣應(yīng)用的豫煙系列新品種豫煙9號(hào)。試驗(yàn)肥料用量為兩個(gè)品種的習(xí)慣施肥水平：中煙100的氮肥用量為施純氮67.5 kg/hm2，豫煙9號(hào)的氮肥用量為施純氮45 kg/hm2，N∶P2O5∶K2O=1∶1.5∶3，試驗(yàn)所用肥料為硝酸磷銨、過磷酸鈣、硫酸鉀。試驗(yàn)小區(qū)長(zhǎng)23 m，寬1.2 m，每個(gè)處理4行，每個(gè)處理面積110.4 m2。

1.2 測(cè)定項(xiàng)目和方法

1）測(cè)定時(shí)間。在煙葉旺長(zhǎng)期的某一晴朗天氣（此階段是煙葉生長(zhǎng)發(fā)育最快時(shí)期，煙葉的光合作用最強(qiáng)），每個(gè)品種選擇長(zhǎng)勢(shì)一致的煙株5株，固定某一葉位（頂3葉），從6：00到19：00，每隔1 h測(cè)定兩個(gè)品種葉片的SPAD值，并繪制成曲線；同時(shí)用照度儀測(cè)定一天中不同時(shí)段的光強(qiáng)并繪制成曲線。

2）葉位和位點(diǎn)的選擇。分別在煙葉生長(zhǎng)的團(tuán)棵期、旺長(zhǎng)期和成熟期，每個(gè)品種選擇長(zhǎng)勢(shì)一致的煙株5株，用SPAD-502葉綠素儀測(cè)定每株頂部3片葉片的中部，每片葉測(cè)定4次，取其平均值作為該葉片的SPAD值。分別在煙葉生長(zhǎng)團(tuán)棵期、旺長(zhǎng)期和成熟期選擇長(zhǎng)勢(shì)一致的煙株5株，將頂部第3片葉片沿?zé)熑~邊緣（SPAD-502葉綠素儀測(cè)試窗口能測(cè)到的最深位置）分成A、B、C、D、E、F、G、H、J、K等10個(gè)測(cè)量點(diǎn)（圖1），測(cè)定各個(gè)位點(diǎn)的SPAD值，每個(gè)位點(diǎn)測(cè)定4次，取平均值作為此位點(diǎn)的SPAD值。由于葉脈對(duì)SPAD-502葉綠素儀的讀數(shù)有影響，因此，測(cè)量時(shí)應(yīng)避開葉脈集中的部位，以減小測(cè)量誤差。

3）參數(shù)計(jì)算。烤煙葉片相對(duì)較大，同一葉片不同位置的SPAD值不同，魚歡等[10]認(rèn)為要通過綜合葉片SPAD值的代表系數(shù)和變異系數(shù)來確定能代表葉片葉綠素水平的SPAD值。代表系數(shù)由所測(cè)位點(diǎn)的SPAD值與整個(gè)葉片各位點(diǎn)平均值差值的絕對(duì)值表示，代表系數(shù)越小表示所測(cè)SPAD值越能代表該葉片的真實(shí)值；變異系數(shù)則是由各位點(diǎn)所測(cè)SPAD值的標(biāo)準(zhǔn)差與該位點(diǎn)的平均值的比值表示，變異系數(shù)越小，說明該位點(diǎn)的SPAD值越穩(wěn)定。

計(jì)算方法：代表系數(shù)=│測(cè)定位點(diǎn)SPAD值-平均值│，變異系數(shù)=測(cè)定位點(diǎn)SPAD值的標(biāo)準(zhǔn)差/平均值。

1.3 數(shù)據(jù)處理

應(yīng)用Excel 2010進(jìn)行數(shù)據(jù)匯總及初步處理，采用Origin 9.0繪制圖表，采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行5%水平的差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 測(cè)定時(shí)間對(duì)煙葉SPAD值的影響

從圖2a可得，一天中從6：00到19：00的光強(qiáng)呈拋物線變化趨勢(shì)，即先升高后降低，中午從11：00開始光強(qiáng)急劇加強(qiáng)，12：00-13：00光強(qiáng)最強(qiáng)，14：00后光強(qiáng)逐漸下降，但仍處于較強(qiáng)的光照。在8：00-10：00、12：00-14：00兩個(gè)階段，兩個(gè)品種煙葉的SPAD值處于較穩(wěn)定階段（圖2b），其他時(shí)段SPAD值的波動(dòng)較大，這兩個(gè)階段是利用SPAD儀進(jìn)行測(cè)定的最佳時(shí)段。綜合考慮，12：00-14：00是一天中光強(qiáng)最強(qiáng)的時(shí)間，此時(shí)田間溫度最高，不宜于進(jìn)行大田測(cè)定，而8：00-10：00光強(qiáng)較弱，溫度相對(duì)較低，SPAD測(cè)定值較穩(wěn)定，是大田測(cè)定SPAD值的理想時(shí)間。

2.2 葉位的選擇對(duì)煙葉SPAD值的影響

從表1可知，團(tuán)棵期，兩個(gè)品種頂部3片葉的SPAD值沒有顯著變化，中煙100頂1葉和頂3葉的變異系數(shù)較低，豫煙9號(hào)頂部3片葉中變異系數(shù)較低的是頂3葉；旺長(zhǎng)期，兩個(gè)品種頂部3片葉子的SPAD值從上到下依次升高，中煙100頂2葉和頂3葉的變異系數(shù)較低，而豫煙9號(hào)頂部3片葉子中變異系數(shù)最低的是頂3葉，為0.02；而在成熟期，中煙100頂部3片葉的SPAD值沒有顯著變化，其中頂3葉的變異系數(shù)最低，豫煙9號(hào)頂部3片葉的SPAD值依次呈現(xiàn)不顯著的降低趨勢(shì)，而頂1葉和頂3葉的SPAD值相對(duì)較低。綜合不同時(shí)期的比較結(jié)果，頂部完全展開葉的第3片葉是測(cè)定SPAD值的最佳葉位。

2.3 位點(diǎn)的選擇對(duì)煙葉SPAD值的影響

烤煙葉片上10個(gè)測(cè)量位點(diǎn)的劃分見圖1。由表2可知，團(tuán)棵期，中煙100頂3葉SPAD值代表系數(shù)較小的位點(diǎn)在（C+H）/2、（B+G）/2，即葉片中部和中部靠基部的位置；旺長(zhǎng)期，中煙100頂3葉各個(gè)位點(diǎn)中SPAD值代表系數(shù)較低的位點(diǎn)為（B+G）/2、（C+H）/2、（D+J）/2，即葉片的中部位置；煙株進(jìn)入成熟期后，頂3葉上代表系數(shù)較低的位點(diǎn)為B、C、J、K。從這3個(gè)時(shí)期可知，葉中部的SPAD值代表系數(shù)較低，與整個(gè)葉片的平均值最接近，最能代表葉片的SPAD值。3個(gè)時(shí)期頂3葉各位點(diǎn)的SPAD值沒有顯著變化，但這3個(gè)時(shí)期中（C+H）/2位點(diǎn)的SPAD值變異系數(shù)均為最小值，說明這個(gè)位點(diǎn)測(cè)定的SPAD值最穩(wěn)定。綜上，中煙100在團(tuán)棵期、旺長(zhǎng)期和成熟期均表現(xiàn)在葉片中部測(cè)定的SPAD值代表系數(shù)最低，數(shù)值相對(duì)穩(wěn)定，因此測(cè)定中煙100的葉片SPAD值的最適位置是頂3葉中部葉脈兩側(cè)的均值。

由表3可知，豫煙9號(hào)在團(tuán)棵期階段頂3葉各位點(diǎn)SPAD值的代表系數(shù)較低的位點(diǎn)有C、H、（B+G）/2、（C+H）/2，且代表系數(shù)較高的位點(diǎn)有E和K，說明靠近葉尖部的SPAD代表系數(shù)較大不適宜作為測(cè)定位點(diǎn)；旺長(zhǎng)期時(shí)，10個(gè)基本位點(diǎn)中C、D、K代表系數(shù)較低，均值點(diǎn)中（C+H）/2、（E+K）/2代表系數(shù)較低；煙株進(jìn)入成熟期后，代表系數(shù)較低的位點(diǎn)有J、（B+G）/2、（C+H）/2、（D+J）/2，基本都在葉片中部位置。綜上可知，3個(gè)時(shí)期中，豫煙9號(hào)頂3葉中部葉脈兩側(cè)均值（C+H）/2的代表系數(shù)最小，是最適合的測(cè)定部位。在團(tuán)棵期和旺長(zhǎng)期，頂3葉各位點(diǎn)的SPAD值沒有顯著區(qū)別，進(jìn)入成熟期，由于葉片成熟落黃，葉尖部的SPAD值明顯低于其他部位。并且，這3個(gè)時(shí)期中（C+H）/2位點(diǎn)的變異系數(shù)均相對(duì)較小，說明這個(gè)位點(diǎn)獲得的SPAD值較穩(wěn)定。綜上所述，豫煙9號(hào)在各個(gè)時(shí)期最能代表煙株葉片SPAD值的位點(diǎn)為頂3葉中部葉脈兩側(cè)的均值。

因此，最佳測(cè)定部位是葉片中部?jī)蓚?cè)。頂3葉中部葉脈兩側(cè)SPAD值的均值最能代表煙株葉片的SPAD值。

2.4 酒精處理葉片對(duì)SPAD值的影響

中煙100移栽后25 d（圖3a），經(jīng)過酒精擦拭后，葉片的SPAD值與未處理相比變化趨勢(shì)一致，方差分析結(jié)果表明，經(jīng)過酒精擦拭的葉片SPAD值呈現(xiàn)顯著降低；移栽后70 d（圖3b），經(jīng)過酒精處理后同樣出現(xiàn)了顯著降低，但酒精擦拭前后的變化值小于移栽后25 d。同樣的，酒精擦拭對(duì)豫煙9號(hào)葉片的SPAD值有顯著影響（圖3c、3d）。因此，在測(cè)定煙葉葉片SPAD值時(shí)，需要用酒精棉對(duì)測(cè)點(diǎn)和測(cè)試窗口進(jìn)行擦拭，然后再進(jìn)行測(cè)定。

3 小結(jié)與討論

3.1 測(cè)量點(diǎn)和時(shí)間的選擇

試驗(yàn)結(jié)果表明，中煙100和豫煙9號(hào)各個(gè)生育期用SPAD葉綠素儀診斷氮素營(yíng)養(yǎng)時(shí)，時(shí)間上選擇一天中的8：00-10：00，選擇頂部完全展開葉的第3片葉子，主脈中部?jī)蓚?cè)每個(gè)位點(diǎn)測(cè)定4次，取其平均值作為該葉片的SPAD值。測(cè)定時(shí)要用酒精棉將測(cè)定位點(diǎn)和測(cè)試窗口擦拭干凈。

SPAD儀主要用于營(yíng)養(yǎng)快速診斷、葉綠素含量預(yù)測(cè)、氮素含量監(jiān)測(cè)等方面，研究手段多樣，研究結(jié)果也不盡相同。李鵬程等[11]發(fā)現(xiàn)棉花早熟品種主莖葉全生育期SPAD值呈現(xiàn)倒1葉<倒2葉<倒3葉<倒4葉的規(guī)律，而中熟品種在盛鈴期以前主莖4片葉SPAD值也呈現(xiàn)和早熟品種相同的規(guī)律，但盛鈴期以后SPAD值葉序變化不規(guī)則。有研究認(rèn)為水稻葉片上距離葉基部1/2處的SPAD值穩(wěn)定，是合適的測(cè)定位點(diǎn)[12]；但也有研究認(rèn)為最佳的測(cè)定位點(diǎn)為距離葉基部2/3處[13]。在棉花上，有的選擇功能葉的底部、中部、基部，也有的在功能葉上均勻地測(cè)定5個(gè)點(diǎn)，求得平均值代表這個(gè)葉片的SPAD值水平[14]。徐照麗等[15]在云南省的田間試驗(yàn)得出葉綠素儀在烤煙上的最佳測(cè)量部位為葉片基部；而李佛琳等[16]分析了煙株葉位和葉片部位的葉綠素計(jì)值發(fā)現(xiàn)葉綠素計(jì)測(cè)定煙葉時(shí)葉片各個(gè)部位均可選擇，但從穩(wěn)定性和可操作性考慮，烤煙最佳測(cè)定部位為完全展開葉的中部。王維等[3]的研究結(jié)果表明，頂3葉的葉中位置SPAD值與葉片葉綠素含量、總氮含量的相關(guān)性最好，且變異系數(shù)小，是較為理想的指示葉或參照葉。本研究參考魚歡等[10]對(duì)胡椒葉片SPAD值的研究，煙葉SPAD值的測(cè)量部位需要考慮葉片SPAD值代表性和穩(wěn)定性，由于煙葉葉片的特殊性，還需要考慮葉位和位點(diǎn)的選擇。中煙100在團(tuán)棵期、旺長(zhǎng)期和成熟期3個(gè)時(shí)期頂部第3片葉的變異系數(shù)較低，說明測(cè)得的SPAD值最穩(wěn)定，因此中煙100測(cè)定SPAD值的最佳葉位應(yīng)選擇頂部第3片葉。豫煙9號(hào)得出同樣的結(jié)果。綜上，中煙100和豫煙9號(hào)測(cè)定SPAD值在葉位上應(yīng)選擇頂部第3片葉。葉位選擇上，由于煙葉面積大，不同部位植物葉肉組織成熟程度不同植物光生態(tài)情況不同[4]，所測(cè)SPAD值結(jié)果不同，因此將煙葉葉片按照主脈對(duì)稱沿葉邊緣（SPAD-502儀測(cè)試窗口能測(cè)到的最深位置）分為10個(gè)測(cè)量點(diǎn)，結(jié)果顯示，中煙100和豫煙9號(hào)在團(tuán)棵期、旺長(zhǎng)期和成熟期頂3葉SPAD值代表系數(shù)較小的位點(diǎn)均在葉片中部位置，說明葉片中部所測(cè)的SPAD值與平均值最接近，此位置最具有代表性。變異系數(shù)代表所測(cè)位點(diǎn)SPAD值的穩(wěn)定性，比較各個(gè)位點(diǎn)的變異系數(shù)發(fā)現(xiàn)，兩個(gè)品種在各生長(zhǎng)時(shí)期的變異系數(shù)相對(duì)其他位點(diǎn)都較低，綜合考慮各位置讀數(shù)的穩(wěn)定性及其代表性，葉片中部的SPAD值與整個(gè)葉片各位置SPAD值的平均水平最接近，最能代表該葉的平均水平。因此綜合各位點(diǎn)測(cè)定結(jié)果的穩(wěn)定性和代表性發(fā)現(xiàn)，煙葉頂部第3片葉的中部位置是最佳的測(cè)量位點(diǎn)，主脈中部?jī)蓚?cè)SPAD值的平均值更能代表整個(gè)葉片的SPAD值水平。

SPAD值取決于葉片葉綠素對(duì)特定波段光線的吸收，在同一天中，隨著光輻射照度的增強(qiáng)，測(cè)得的SPAD值會(huì)有降低趨勢(shì)。本文研究了兩個(gè)品種在一天中隨著光輻射變化葉片SPAD值的變化趨勢(shì)，發(fā)現(xiàn)一天中隨著光照幅度增加，SPAD值出現(xiàn)降低趨勢(shì)，這與陳防等[17]的研究結(jié)果一致。并且發(fā)現(xiàn)在8：00-10：00和12：00-14：00這兩個(gè)時(shí)間段內(nèi)測(cè)得的SPAD值比較穩(wěn)定，綜合考慮大田測(cè)量的可操作性、代表性等因素，選擇8：00-10：00進(jìn)行大田煙葉SPAD值的測(cè)定。

3.2 葉片清潔度

烤煙葉片清潔度對(duì)SPAD值測(cè)定結(jié)果的影響未見有相關(guān)報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)，中煙100和豫煙9號(hào)兩個(gè)品種葉片經(jīng)酒精擦拭后，葉片的SPAD值出現(xiàn)顯著的變化。生育前期（移栽后25 d）酒精擦拭葉片和測(cè)定窗口后SPAD值變化顯著且幅度較大，生育中后期（移栽后70 d）葉片清潔后的SPAD值測(cè)定結(jié)果變化較小，整體趨勢(shì)基本保持一致。其原因可能為煙葉葉片表面分布著大量的腺毛，葉片從幼葉到進(jìn)入生理成熟期，葉片黏性物質(zhì)分泌增多[18]，而分泌物對(duì)葉片表面具有覆蓋作用，尤其在生育前期測(cè)量易受到農(nóng)事操作和氣候的影響，葉面往往附著物較多，因此煙葉葉片表面需經(jīng)過酒精擦拭，剔除其他外界雜質(zhì)獲得的值更能代表葉片的真實(shí)值，所以在實(shí)踐應(yīng)用中，應(yīng)使用酒精棉簽擦拭測(cè)定窗口，如一次測(cè)量數(shù)據(jù)數(shù)較少可不擦。

參考文獻(xiàn)：

[1] 李志宏，劉宏斌，張福鎖.應(yīng)用葉綠素儀診斷冬小麥氮營(yíng)養(yǎng)狀況的研究[J].植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)，2003，9（4）：401-405.

[2] 李春儉，張福鎖，李文卿，等.我國烤煙生產(chǎn)中的氮素管理及其與煙葉品質(zhì)的關(guān)系[J].植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)，2007，13（2）：331-337.

[3] 王 維，陳建軍，呂永華，等.烤煙氮素營(yíng)養(yǎng)診斷及精準(zhǔn)施肥模式研究[J].農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，2012，28（9）：77-84.

[4] 陳 琴，陳莉敏，鄭群英，等.5種牧草葉片上不同部位的SPAD值比較[J].草業(yè)科學(xué)，2014，31（7）：1318-1322.

[5] 朱哲燕，鮑一丹，黃 敏，等.油菜葉綠素與氮含量關(guān)系的試驗(yàn)研究[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)（農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版），2006，32（2）：152-154.

[6] 陳曉群，張學(xué)軍，白建忠.基于水稻不同生育期葉綠素值推薦追施氮量的研究初報(bào)[J].中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2010，26（7）：147-151.

[7] 胡 昊，白由路，楊俐蘋.基于SPAD-502與Greenseeker的冬小麥氮營(yíng)養(yǎng)診斷研究[J].中國生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2010，18（4）：748-752.

[8] 賀廣生，文 俊，葉為民，等.基于SPAD值的田間氮肥管理模式對(duì)烤煙產(chǎn)質(zhì)量及氮肥利用率的影響[J].煙草科技，2010（3）：51-55.

[9] 柯嫻氡，賀立靜，蘇志堯.南方4種木本植物相對(duì)葉綠素指標(biāo)及其分布[J].中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，30（8）：82-86.

[10] 魚 歡，祖 超，楊建峰，等.應(yīng)用SPAD葉綠素儀測(cè)定不同位置胡椒葉片的SPAD值[J].熱帶作物學(xué)報(bào)，2012，33（10）：1890-1895.

[11] 李鵬程，董合林，劉愛忠，等.棉花上部葉片葉綠素SPAD值動(dòng)態(tài)變化研究[J].中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2012，28（3）：121-126.

[12] TARKALSON D，PAYERO J. Comparison of nitrogen fertilization methods and rates for subsurface drip irrigated corn in the semiarid Great Plains[J].Transactions of the ASAE，2008，51（5）：1633-1643.

[13] ESFAHANI M，ABBASI H，RABIEI B，et al. Improvement of nitrogen management in rice paddy fields using chlorophyll meter（SPAD）[J].Paddy and Water Environment，2008，6（2）： 181-188.

[14] 屈衛(wèi)群，王紹華，陳兵林，等.棉花主莖葉SPAD值與氮素營(yíng)養(yǎng)診斷研究[J].作物學(xué)報(bào)，2007，33（6）：1010-1017.

[15] 徐照麗，李天福.SPAD-502葉綠素儀在烤煙生產(chǎn)中的應(yīng)用研究[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，34（4）：23-24.

[16] 李佛琳，趙春江，王紀(jì)華，等.應(yīng)用葉綠素計(jì)診斷烤煙氮素營(yíng)養(yǎng)狀況[J].植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)，2007，13（1）：136-142.

[17] 陳 防，魯劍巍.SPAD-502葉綠素計(jì)在作物營(yíng)養(yǎng)快速診斷上的應(yīng)用初探[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，1996（2）：31-34.

[18] 張紀(jì)利，戴才萍，李章海，等.生態(tài)和栽培因素對(duì)煙葉腺毛密度及分泌物的影響綜述[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（23）：12439-12440.