李建玲 ， 趙 慶 ， 蔡擴(kuò)軍 ， 王 濤 ， 任 皓 ， 蒲敬偉 ， 蘇 艷

(1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院 ， 新疆 烏魯木齊 830052 ； 2.新疆烏魯木齊市動(dòng)物疾病控制與診斷中心 ， 新疆 烏魯木齊 830063 ； 3.烏魯木齊市畜牧水產(chǎn)草原技術(shù)推廣中心 , 新疆 烏魯木齊 830063 ;4.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第十二師畜牧獸醫(yī)工作站 ， 新疆 烏魯木齊 830009)

豬瘟(CSF)、高致病性豬藍(lán)耳病(HP-PRRS)和豬口蹄疫(FMD)3種疫病是威脅我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的主要疫病，疫苗接種是控制這3種疫病流行的主要措施。通過(guò)吮吸母豬的初乳，仔豬可獲得對(duì)CSF、HP-PRRS、FMD病毒的被動(dòng)免疫保護(hù)，使仔豬在獲得疫苗免疫之前，免受這3種病毒的感染，然而母源抗體的存在會(huì)干擾仔豬首次免疫，母源抗體會(huì)中和疫苗病毒，影響免疫應(yīng)答和抗體上升，導(dǎo)致空窗期的出現(xiàn)，不利于疫病預(yù)防[1]。因此，仔豬后期獲得堅(jiān)強(qiáng)抗體保護(hù)力的關(guān)鍵在于確定3種疫苗的首免日齡，消除母源抗體干擾。一些養(yǎng)殖戶(hù)盲目照搬現(xiàn)有的免疫方案，根本不考慮自己豬場(chǎng)的實(shí)際情況，也不經(jīng)過(guò)嚴(yán)格試驗(yàn)來(lái)確定首免時(shí)間，豬群免疫抗體水平不能得到保證。為了減少免疫失敗，有效防控這3種豬病的發(fā)生，對(duì)初生哺乳仔豬進(jìn)行了母源抗體消長(zhǎng)的測(cè)定，確定3種疫苗的最佳首免日齡，以制定符合生產(chǎn)實(shí)際的免疫程序提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 在米東區(qū)三道壩鎮(zhèn)某養(yǎng)豬場(chǎng)選取4頭母豬剛剛生產(chǎn)的30頭仔豬進(jìn)行試驗(yàn)，4頭母豬在配種前1周分別免疫過(guò)CSF活疫苗(脾淋源)、HP-PRRS活疫苗(JXAI-R株)和豬O型FMD滅活疫苗(O/MYA98/XJ/2010株+O/GX/09-7株)。

1.2 檢測(cè)試劑 韓國(guó)金諾豬瘟病毒抗體(CSFV-Ab)C-ELISA檢測(cè)試劑盒，北京金諾百特科技有限公司總代理，批號(hào)：107HS479。

韓國(guó)金諾豬繁殖和呼吸綜合征病毒抗體(PRRSV-Ab)間接ELISA檢測(cè)試劑盒，由北京金諾百特科技有限公司總代理，批號(hào)：107HS483。

口蹄疫 0 型抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒，由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，批號(hào)：2014092301。

1.3 方法 在第0、1、7、14、21、28、35、42日齡，分別采集豬血液，離心、制備血清，將所有血清保存在-20 ℃冰箱中，集中檢測(cè)CSF、HP-PRRS和O型FMD的母源抗體。

1.3.1 CSF抗體檢測(cè) 用ELISA法(參照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作)檢測(cè)CSF母源抗體水平。試驗(yàn)成立條件為：[陰性對(duì)照血清]OD450平均值>0.5；[陽(yáng)性對(duì)照血清]OD450平均值<0.2。結(jié)果判定：樣品百分率PC≥40%，判為陽(yáng)性；樣品百分率PC<40%，判為陰性。樣品阻斷率(%PC)=([陰性對(duì)照血清]OD450平均值-樣品OD450值)×100%/([陰性對(duì)照血清]OD450平均值-[陽(yáng)性對(duì)照血清]OD450平均值)。

1.3.2 HP-PRRS抗體檢測(cè) 用ELISA法(參照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作)檢測(cè)HP-PRRS母源抗體水平。試驗(yàn)成立條件為：[陽(yáng)性對(duì)照血清]OD450平均值≥0.5；[陰性對(duì)照血清]OD450平均值≤0.3。結(jié)果判定：S/P值≥0.4，判為陽(yáng)性；S/P值<0.3，判為陰性；0.3≤S/P值<0.4，判為可疑。S/P值=(樣品OD450值-[陰性對(duì)照血清]OD450平均值)/([陽(yáng)性對(duì)照血清]OD450平均值-[陰性對(duì)照血清]OD450平均值)。

1.3.3 O型FMD抗體檢測(cè) 用液相阻斷ELISA法(參照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作)檢測(cè)O型FMD母源抗體水平。試驗(yàn)成立條件為：病毒抗原對(duì)照平均OD492值在1.0～2.0范圍內(nèi)；陽(yáng)性對(duì)照血清抗體效價(jià)在1∶1 024 ±1 滴度；陰性對(duì)照血清抗體效價(jià)<1∶8。臨界值=病毒抗原對(duì)照平均OD492值×50%。樣品抗體效價(jià)≥1∶64為O型FMD抗體合格。

2 結(jié)果與分析

在第0、1、7、14、21、28、35、42日齡，分別對(duì)30頭仔豬采集血清，進(jìn)行CSF、HP-PRRS和O型FMD母源抗體檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)表1、圖1～圖3。

表1 3種豬病母源抗體檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

圖1 仔豬CSF母源抗體群體保護(hù)率趨勢(shì)

圖2 仔豬HP-PRRS母源抗體群體保護(hù)率趨勢(shì)

圖3 仔豬O型FMD母源抗體群體保護(hù)率趨勢(shì)

2.1 按照農(nóng)業(yè)部重大動(dòng)物疫病免疫方案的要求：CSF和HP-PRRS抗體ELISA檢測(cè)試驗(yàn)抗體陽(yáng)性判定為合格；O型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)試驗(yàn)抗體效價(jià)在1∶64以上(含1∶64 )為合格；抗體合格，即認(rèn)為免疫達(dá)到了保護(hù)要求，整體免疫抗體群體保護(hù)率≥70%為合格。從表1可以看出：試驗(yàn)仔豬在28日齡時(shí)，CSF、HP-PRRS和FMD抗體陽(yáng)性率分別是70%、73.3%和73.3%，隨后35日齡已經(jīng)下降到63.3%、70%和66.7%，CSF和FMD母源抗體的保護(hù)率已低于臨界值70%，不能達(dá)到有效保護(hù)，而HP-PRRS母源抗體仍有保護(hù)，到42日齡突然驟減到46.7%。

2.2 通過(guò)圖1～圖3可知，仔豬在吃到初乳之前并沒(méi)有CSF、HP-PRRS和O型FMD抗體。其母源抗體全部來(lái)自母豬乳汁，試驗(yàn)仔豬在1～7日齡時(shí)，母源抗體保護(hù)率迅速達(dá)到峰值；之后，隨著仔豬的生長(zhǎng)，母源抗體水平逐漸呈現(xiàn)緩慢下降趨勢(shì)；35日齡以后，母源抗體水平下降速度加快。

2.3 從仔豬母源抗體群體保護(hù)率趨勢(shì)圖可以看出：CSF的母源抗體的持續(xù)期為28～32 d、HP-PRRS為30～35 d、豬FMD為29～34 d。

3 討論

3.1 本研究結(jié)果說(shuō)明：仔豬的母源抗體主要通過(guò)母乳獲得，母豬并不能通過(guò)胎盤(pán)傳遞母源抗體；如果泌乳期母豬血清中有抗體水平，分析其與仔豬抗體的相關(guān)性更有意義；仔豬的母源抗體水平與仔豬的生長(zhǎng)呈負(fù)相關(guān)；仔豬的母源抗體持續(xù)時(shí)間與母豬自身的抗體水平和仔豬是否吃初乳有關(guān)，因此要使仔豬獲得較高的母源抗體，應(yīng)提高母豬的自身抗體并讓仔豬及時(shí)吃到初乳。

3.2 在確保不發(fā)病的情況下，根據(jù)3種疫病母源抗體的持續(xù)期，確定3種疫苗聯(lián)合免疫時(shí)的最佳首免日齡為28～35日齡。

3.3 在本試驗(yàn)中，仔豬的母源抗體水平1～7日齡達(dá)到最高峰，7日齡之后，母源抗體逐漸衰減，并與日齡呈負(fù)相關(guān)。這與王波等認(rèn)為的產(chǎn)后 1 日齡達(dá)到最高有一定差異，與姚俊庸等報(bào)道的7日齡仔豬母源抗體最高一致[2-3]。

3.4 保證母豬在泌乳前維持有高效的母源抗體是本研究成立的關(guān)鍵因素，因此生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)在母豬配種前對(duì)母豬的抗體進(jìn)行血清學(xué)監(jiān)測(cè)，對(duì)沒(méi)有產(chǎn)生抗體或產(chǎn)生抗體較弱的母豬應(yīng)及時(shí)采取補(bǔ)免。其次，產(chǎn)生抗體較好的母豬在分娩后，要保證所有仔豬都能獲得母源抗體，先天性體格較大的仔豬更有優(yōu)勢(shì)吃到初乳。對(duì)未吃到初乳的仔豬可以單獨(dú)飼喂以保證獲得母源抗體。

3.5 本文著重分析了母源抗體水平對(duì)首免日齡的影響，疫苗首免時(shí)間除了考慮母源抗體水平外，還應(yīng)考慮發(fā)病的時(shí)間，受試驗(yàn)條件限制，未做深入的研究分析。

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[2] 王波，陳靜，王敏，等．仔豬豬瘟母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律[J].中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2010，30(4)：453-455.

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