姚麗媛 華金珠 張瑜瑜 尹利方
【摘 ?要】 青刺果,屬薔薇科李亞科扁核木屬植物。由于青刺果具有十分廣泛的應(yīng)用價(jià)值,合理有效地開發(fā)利用青刺果已產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)、社會(huì)和生態(tài)效益,已逐步成為地方經(jīng)濟(jì)轉(zhuǎn)型升級(jí)的支柱產(chǎn)業(yè)之一。本研究通過對(duì)青刺果側(cè)芽誘導(dǎo),深入探究青刺果側(cè)芽誘導(dǎo)技術(shù)方法。通過對(duì)青刺果外植體的組織培養(yǎng)發(fā)現(xiàn),以MS培養(yǎng)基為基質(zhì),在含基質(zhì)4.74g/L、糖30 g/L、瓊脂6.5 g/L的母液中加入0.5mg/L 6-BA(細(xì)胞分裂素)和0.1mg/L IBA(生長(zhǎng)素)的培養(yǎng)基,對(duì)于青刺果側(cè)芽的誘導(dǎo)效果最佳。本研究對(duì)青刺果種植資源進(jìn)行良種繁育、繁育馴化、育苗、栽 培管理等方面可提供技術(shù)支持。
【關(guān)鍵詞】 青刺果;組織培養(yǎng);側(cè)芽誘導(dǎo)
Optimization of lateral bud induction technology
of Yunnan characteristicoil plant
Yao Liyuan ? Hua Jinzhu ? Zhang Yuyu ? Yin Lifang
青刺果(Prinsepia utilis Royle),中文學(xué)名總花扁核木,屬薔薇科(Rosaecae)李亞科扁核木屬(PrinsepiaRoyle)植物,別名青刺尖、打油果在云南具有悠久的藥用歷史,果仁、葉中含有多種對(duì)人體所必需的常量和微量元索,含有較高的粗脂肪,具有清熱解毒、消炎、活血、止痛、消食、健胃等作用”[1-2]。青刺果果油作為一種特殊食用油在民間已使用多年,該油是一種較好的綠色食品,經(jīng)常食用可降低血脂,調(diào)節(jié)血壓,促進(jìn)微循環(huán),增強(qiáng)機(jī)體的抵抗力。同時(shí)由于該油富含不飽和脂肪酸,組成與人體皮脂類接近,所以還具有使皮膚再生修復(fù)和保濕的作用。青刺果提取液對(duì)水果保鮮具有一定作用,且對(duì)常見食品腐敗菌有很強(qiáng)的抑菌效力[3-5]。
由于青刺果具有十分廣泛的應(yīng)用價(jià)值,合理有效地開發(fā)利用青刺果已產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)、社會(huì)和生態(tài)效益,已逐步成為地方經(jīng)濟(jì)轉(zhuǎn)型升級(jí)的支柱產(chǎn)業(yè)之一。目前青刺果的研究主要以生理和藥用價(jià)值研究為主,其繁育技術(shù)主要以野生資源利用為主,其繁殖方式主要是扦插[6]。而植物組培繁殖快,不占空間,遺傳性狀一致,根系發(fā)達(dá),生長(zhǎng)旺盛目前有些果樹已利用組培技術(shù)建立起工廠化育苗的生產(chǎn)線,在很多地方實(shí)現(xiàn)了商品化生產(chǎn)。
1 ?實(shí)驗(yàn)材料
成熟青刺果的種子(購買于麗江)用于自培青刺果、成熟的青刺果外植體、MS培養(yǎng)基。
自培青刺果:將青刺果的種子剝皮后放入40℃~45℃的熱水中浸泡半小時(shí),保持水溫,浸泡完畢后,將種子放到鋪墊有濕潤(rùn)紙片的培養(yǎng)皿中,放入恒溫箱中培養(yǎng),待種子發(fā)芽后將其轉(zhuǎn)入土壤中栽培,待植株生長(zhǎng)高度達(dá)到大約15~20cm時(shí),剪除根部,葉片后將植株裁剪成每段1cm左右的莖段,保證莖段含1~2個(gè)腋芽或頂芽。
2 ?處理方法
(1)母液養(yǎng)基配置。以MS培養(yǎng)基為基質(zhì),每配1L培養(yǎng)基,稱取基質(zhì)4.74g、糖30g、瓊脂6.5g,加水至1L,攪拌均勻,將PH值調(diào)為5.8,在以25mL分裝到培養(yǎng)瓶中,高溫滅菌20min。
(2)實(shí)驗(yàn)共設(shè)3個(gè)對(duì)照組,每個(gè)對(duì)照組兩個(gè)配方,每個(gè)配方30個(gè)培養(yǎng)瓶。以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)分別以MS+0.5mg/L6-BA、MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LIBA,MS+1mg/L6-BA+0.1mg/LIBA 、MS+1mg/L6-BA ,MS+2mg/L6-BA+0.1mg/LIBA、MS+2mg/L6-BA為對(duì)比進(jìn)行組織培養(yǎng)。
(3)外植體處理:將外植體用流水沖洗半小時(shí)后置于含洗滌劑的水中浸泡 30 min,再用流水沖洗半小時(shí)以去除殘留的洗潔精,沖洗結(jié)束后轉(zhuǎn)移到無菌操作臺(tái),用酒精浸泡25s左右,然后用高溫滅菌過的蒸餾水洗滌三次,再用砷汞浸泡消毒8min左右,再次用高溫滅菌過的無菌水洗滌5次,將植株接種到培養(yǎng)基中,為防止培養(yǎng)基被污染導(dǎo)致植株生長(zhǎng)失敗,因此一瓶培養(yǎng)基只接入一段植株,放入恒溫25℃的環(huán)境下觀察。
3 ?實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
(1)由表1可知,相同6-BA濃度下,添加IBA的培養(yǎng)基中,植株成活率和要高于于不添加IBA的培養(yǎng)基中的植株。1號(hào)培養(yǎng)基>2號(hào)培養(yǎng)基;3號(hào)培養(yǎng)基>3號(hào)培養(yǎng)基;4號(hào)培養(yǎng)基>5號(hào)培養(yǎng)基。在相同IBA濃度下,6-BA濃度為0.5mg/L時(shí)植株側(cè)芽生長(zhǎng)情況最好。
(2)通過表2可知,6種配方的培養(yǎng)基中,相同6-BA濃度下,添加IBA的培養(yǎng)基中,植株側(cè)芽生長(zhǎng)度要高于不添加IBA的培養(yǎng)基中的植株。1號(hào)培養(yǎng)基>2號(hào)培養(yǎng)基>3號(hào)培養(yǎng)基>>4號(hào)培養(yǎng)基>5號(hào)培養(yǎng)基>6號(hào)培養(yǎng)基
(3)通過表3可以看出,相同培養(yǎng)條件下,成熟外植體的生長(zhǎng)狀況明顯優(yōu)于弱小的外植體(表3下轉(zhuǎn)至第39頁)。
4 ?討論與結(jié)論
4.1 ? 討論
經(jīng)過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),細(xì)胞分裂素6-BA和生長(zhǎng)素IBA的添加有利于青刺果的側(cè)芽誘導(dǎo),但濃度過高或者過低都對(duì)植株生長(zhǎng)不利,濃度過低會(huì)導(dǎo)致植株生長(zhǎng)過慢,或無法促使植株生長(zhǎng),但6-BA濃度過高,會(huì)直接抑制植株生長(zhǎng),導(dǎo)致植株的側(cè)芽生長(zhǎng)發(fā)生玻璃化苗的情況。因此在以后的青刺果組培試驗(yàn)中,應(yīng)當(dāng)注意所使用的激素濃度,避免玻璃化苗情況的發(fā)生
4.2 ?結(jié)論
(1)通過本次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),用于青刺果的組織培養(yǎng)的最佳濃度為0.5mg/L的6-BA和0.1mg/L的IBA,6-BA濃度過高或者過低都對(duì)植株生長(zhǎng)不利,濃度過低會(huì)導(dǎo)致植株生長(zhǎng)過慢,或無法促使植株生長(zhǎng),濃度過高,會(huì)抑制植株生長(zhǎng)。
(2)健壯的外植體更有利于組織培養(yǎng)的成活率。
參考文獻(xiàn):
[1] 楊建華,范志遠(yuǎn),李淑芳,等.云南青刺果野生種質(zhì)資源調(diào)查[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué).2010,38(33):18759-18760.
[2] 陳繼坤,康圖.三江并流區(qū)域野生青刺果植物資源及合理開發(fā)淺析[J].中國野生植物資源,2007,26(2):23.
[3] 張謄青刺果油的保濕性研究[J].日用化學(xué)品科學(xué),31(10):22-25.
[4] 王毓杰,張藝,檄禺,等.民族藥青刺尖抗炎活性成分的初步研究[J].華西藥學(xué)雜志,2006,21(2):154-156.
[5] 董麗萍大理州野生青刺果經(jīng)石濟(jì)價(jià)值及栽培技術(shù)初探[J].林業(yè)調(diào)查規(guī)劃,2004,(29):287-288.
[6] 范志遠(yuǎn),習(xí)學(xué)良,歐陽和,等.青刺果的植物學(xué)特性及其人工栽培技術(shù)[J].西部林業(yè)科學(xué),2005,34(4):47-52.