劉巖 計小清 孔令娟 等
摘 要 黃芩(Scutellaria baicalensis Georgi)是我國常用的大宗中藥材,為唇形科多年生草本植物黃芩的根,主產(chǎn)于我國河北、山東、陜西、內(nèi)蒙、遼寧、山西、甘肅等地。黃芩具有抗癌、抗氧化、抗病毒、抗菌和保肝等藥理作用。因此,本研究選用河北承德、陜西商洛、山東沂蒙山區(qū)和甘肅渭源等四地的黃芩,觀察其水煎液對CC4致肝損傷小鼠肝組織的保護(hù)作用。
關(guān)鍵詞 黃芩 急性肝損傷 影響
中圖分類號:R285.5文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A
1材料與方法
1.1實(shí)驗(yàn)動物
健康昆明種小鼠120只,體重為(20?)g,雌雄鼠各半,[許可證號:SCXK(京)2012-0001],由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司提供,所有小鼠均于室溫下進(jìn)行適應(yīng)性飼養(yǎng)7d。
1.2實(shí)驗(yàn)試劑
CC4分析純(成都市鑫龍試劑廠,批號20150909);橄欖油化學(xué)純(成都市鑫龍試劑廠,批號20150617)。MDA測定試劑盒(南京建成生物工程研究所,批號:20150516)、SOD檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所,批號:20151001)。
1.3藥液制備
分別選取等量河北承德、陜西商洛、山東沂蒙山區(qū)和甘肅渭源的黃芩制備水煎液。取不同產(chǎn)地黃芩根部陰干后除雜,洗凈后將黃芩根部切成段狀,取一定量黃芩用水浸泡30min,黃芩:水=1:10,后文火煎煮50~60min,過濾,再次加水煎煮,黃芩:水=1:8,煎煮 40~50min,過濾合并兩次濾液,濃縮,濃度為150mg/ml,4℃保存?zhèn)溆谩?/p>
1.4實(shí)驗(yàn)方法及指標(biāo)測定
小鼠隨機(jī)分為6組,每組10只,雌雄各半,分為對照組、模型組、河北承德組、陜西商洛組、山東沂蒙組、甘肅渭源組,對照組及模型組小鼠按照每10g體重0.2ml生理鹽水灌胃,其余各組均按照6g/kg給予對應(yīng)產(chǎn)地黃芩灌胃,每日灌胃1次,連續(xù)7d。第7次灌胃結(jié)束后2h,各給藥組及模型組小鼠均按照0.1ml/10g腹腔注射0.1%CCl4橄欖油溶液制造急性肝損傷小鼠模型,對照組小鼠按照0.1ml/10g腹腔注射等量橄欖油溶液,所有小鼠注射結(jié)束,禁食18h后將小鼠處死,摘取小鼠眼球取血,靜置后離心,吸取血清備用。同時對小鼠進(jìn)行解剖,將小鼠肝臟取出,生理鹽水沖洗后用吸水紙吸干,稱量其濕重。
計算各小鼠肝指數(shù)(即肝臟質(zhì)量與小鼠體質(zhì)量的比值),根據(jù)檢測試劑盒說明測定血清中MDA、SOD。
2結(jié)果
應(yīng)用SPSS-17.0進(jìn)行方差分析,用均數(shù)北曜疾睿▁眘)表示。
結(jié)果顯示,模型組小鼠肝指數(shù)明顯大于對照組(P<0.05),河北承德組、陜西商洛組、山東沂蒙組、甘肅渭源組4個實(shí)驗(yàn)組小鼠肝指數(shù)明顯小于模型組(P<0.05),且與對照組無明顯差異(P>0.05)。模型組小鼠肝組織MDA水平明顯高于對照組,SOD水平明顯低于對照組,兩組比較具有明顯差異(P<0.05),各給藥組與模型組比較均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),詳見表1。
3討論
有研究表明,自由基增多、酶活性增強(qiáng)及脂質(zhì)的過氧化反應(yīng)在肝臟組織病變過程中起到重要作用,CC4誘導(dǎo)所致肝損傷模型是實(shí)驗(yàn)室常用模型之一,與人體肝損傷特點(diǎn)類似。CC4在肝內(nèi)代謝過程中會生成多種自由基,自由基與細(xì)胞內(nèi)多種大分子物質(zhì)結(jié)合會導(dǎo)致酶喪失原有功能,細(xì)胞膜上的脂質(zhì)過氧化作用會對細(xì)胞膜造成嚴(yán)重破壞,最終導(dǎo)致肝細(xì)胞的壞死及肝臟組織的病變。
MDA作為脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的產(chǎn)物,是對人體損傷較大的損害因子,能在一定程度上反應(yīng)機(jī)體內(nèi)的氧化反應(yīng)。SOD則可以清除脂質(zhì)過氧化過程中產(chǎn)生的高活性超氧陰離子,避免自由基反應(yīng)對肝臟細(xì)胞中膜性細(xì)胞器的影響及脂質(zhì)過氧化反應(yīng)產(chǎn)物對細(xì)胞的毒害作用,改善和穩(wěn)定肝臟功能。各給藥組與模型組小鼠比較血清MDA水平明顯降低,SOD水平明顯升高,提示黃芩可增強(qiáng)小鼠肝組織抗氧化能力。
綜上所述,不同產(chǎn)地黃芩均可通過增強(qiáng)肝臟抗氧化作用,減少自由基對人體的損害,改善并保護(hù)肝功能,且不同產(chǎn)地黃芩對急性肝損傷的保護(hù)作用有一定差異。
參考文獻(xiàn)
[1] 姚雪蓮,王磊,張文等.脂肽對ConA誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用[J].軍事醫(yī)學(xué),2016,40(05):366-369+378.