劉艷君 姜新超 李會(huì)榮 馮 蕾 楊在賓 楊維仁 姜淑貞 李祥明(山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，泰安 708)(中慧農(nóng)牧股份有限公司昌樂分公司，濰坊 6400)(山東省飼料質(zhì)量檢驗(yàn)所，濟(jì)南 500)

霉菌毒素是由霉菌產(chǎn)生的一類次生有毒代謝產(chǎn)物，其中的曲霉菌屬、鐮刀菌屬和青霉菌屬是產(chǎn)生毒素的最主要的霉菌[1]。鐮刀菌可分泌多種毒素，主要是玉米赤霉烯酮、單端孢霉毒素、伏馬毒素和嘔吐毒素等[2]，是污染糧食的主要產(chǎn)毒霉菌之一，對(duì)畜禽的危害尤為嚴(yán)重[3]。隨著我國(guó)養(yǎng)殖和飼料行業(yè)的迅速發(fā)展，利用微生物發(fā)酵技術(shù)來(lái)改善原料和飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，降解原料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子，提高飼料利用率，改善動(dòng)物生產(chǎn)水平，是我國(guó)飼料工業(yè)的重點(diǎn)發(fā)展方向之一[4-5]。研究表明，混菌發(fā)酵霉變?nèi)珒r(jià)飼料，24 h后pH呈現(xiàn)明顯的下降趨勢(shì)，隨著發(fā)酵深入，最終基本維持在平穩(wěn)的水平[6]。利用乳酸菌和酵母菌發(fā)酵母豬全價(jià)配合飼料，粗灰分含量與對(duì)照組相比有所提高[7]，因此，發(fā)酵后使OM的含量降低。不同乳酸菌劑發(fā)酵全混合日糧，在各時(shí)間點(diǎn)NH3-N含量穩(wěn)步上升[8]。在全株玉米青貯中添加不同類型的乳酸菌制劑pH顯著降低，同時(shí)提高了乳酸含量[9]。國(guó)內(nèi)外有關(guān)飼糧發(fā)酵研究主要集中在發(fā)酵改善常規(guī)飼料和原料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、降解原料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子，鮮見飼糧發(fā)酵對(duì)鐮刀菌毒素污染飼糧添加改性蒙脫石吸附劑的研究報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)旨在研究復(fù)合菌種(乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢桿菌分別為6.33×106、1.05×106、8.94×106cfu/g)發(fā)酵對(duì)鐮刀菌毒素飼糧pH、OM、NH3-N和乳酸含量的影響，同時(shí)評(píng)價(jià)改性蒙脫石吸附劑對(duì)鐮刀菌毒素飼糧發(fā)酵參數(shù)的影響，為生產(chǎn)中霉變飼料的處理提供參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

發(fā)酵菌種：乳酸菌(Lactobacillus)，5×109cfu/g；酵母菌(Yeast)，4.6×109cfu/g，枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)，1.9×1010cfu/g：北京科為博生物科技有限公司。

吸附劑(Calibrin-A，CA)，為焙燒改性蒙脫石吸附劑：美國(guó)Oil-Dri公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)分6個(gè)處理，每個(gè)處理6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)9桶。對(duì)照組(Contr.)為基礎(chǔ)飼糧，實(shí)驗(yàn)1(25 Myco.)和2組(50 Myco.)分別用25%和50%的發(fā)霉玉米和發(fā)霉玉米蛋白粉代替基礎(chǔ)飼糧中的玉米和玉米蛋白粉，實(shí)驗(yàn)3(Contr.+CA)、4(25 Myco.+CA)和5(50 Myco.+CA)組分別在基礎(chǔ)飼糧、實(shí)驗(yàn)1和實(shí)驗(yàn)2組的基礎(chǔ)上添加0.2%的CA。

1.3 實(shí)驗(yàn)飼糧與實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)飼糧的配制

斷奶仔豬基礎(chǔ)飼糧(Contr.)參考美國(guó)NRC(1998)營(yíng)養(yǎng)需要配制，用發(fā)霉的玉米和玉米蛋白粉代替基礎(chǔ)飼糧中的玉米和玉米蛋白粉配制成含有100%霉變飼糧，隨后用100%霉變的鐮刀菌毒素飼糧和對(duì)照飼糧按照1:3配制成25 Myco.飼糧，用100%霉變的鐮刀菌毒素飼糧和對(duì)照飼糧按照1:1配制成50 Myco.飼糧。分別將Contr.、25 Myco.和50 Myco.飼糧與0.2%的CA混合均勻得到Contr.+CA、25 Myco.+CA和50 Myco.+CA飼糧。飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表2。飼糧發(fā)酵實(shí)驗(yàn)開始前將一定比例發(fā)酵菌種(乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢桿菌分別為6.33×106、1.05×106、8.94×106cfu/g)配制成水溶液，均勻噴灑在所有實(shí)驗(yàn)飼糧中，然后噴灑蒸餾水調(diào)節(jié)飼糧含水量至50%，攪拌均勻，裝入塑料桶(50±0.36) kg，密封發(fā)酵，發(fā)酵溫度控制在16～18 ℃。

表1 飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))/%

注：1)每千克飼糧提供：VA 3 300 IU；VD3330 IU；VE 24 IU；VK30.75 mg；VB11.50 mg；VB25.25 mg；VB62.25 mg；VB120.026 mg；泛酸15.00 mg；尼克酸22.5 mg；生物素0.075 mg；葉酸0.45 mg；錳6.00 mg；鐵150 mg；鋅150 mg；銅9.00 mg；碘0.21 mg；硒0.45 mg。2)粗蛋白、鈣和總磷為實(shí)測(cè)值，其他營(yíng)養(yǎng)水平為設(shè)計(jì)值。

1.4 樣品的采集與制備

飼糧密封前采樣作為第0天的樣品，然后分別于飼糧發(fā)酵的第6天(每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇3桶，采樣完畢棄去)、第12天(每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇3桶，采樣完畢棄去)和第18天(每個(gè)重復(fù)剩余的3桶)采集樣品。采樣方法：距離桶邊約20 cm做一個(gè)圓，在圓上劃一個(gè)“十”字，“十”字與圓的4個(gè)交點(diǎn)和圓心作為取樣點(diǎn)；分別在距離發(fā)酵桶上表面約20 cm處、桶底約20 cm處和桶的中央采樣，每個(gè)采樣點(diǎn)采樣約500 g，然后將每個(gè)桶的上、中、下15個(gè)點(diǎn)的樣品混合，立即測(cè)定pH。按照四分法縮樣，最后將樣品平均分成2份(每份約500 g)，一份置于60 ℃烘箱中制成風(fēng)干樣，粉碎用于OM含量測(cè)定，另一份置于-20 ℃保存，用于NH3-N和乳酸含量測(cè)定。

1.5 檢測(cè)指標(biāo)與方法

1.5.1 飼糧中霉菌毒素的檢測(cè)

采用免疫親和柱層析凈化，以液相色譜法熒光檢測(cè)器測(cè)定玉米赤霉烯酮、黃曲霉毒素和赭曲霉毒素的含量，外標(biāo)法定量。采用免疫親和層析凈化高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，以液相色譜結(jié)合紫外檢測(cè)器測(cè)定伏馬毒素B1和B2、T-2毒素和嘔吐毒素的含量，外標(biāo)法定量。玉米赤霉烯酮、黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏馬毒素、T-2毒素和嘔吐毒素的最低檢測(cè)限為分別為0.1 mg/kg、1.0 μg/kg、0.5 μg/kg、0.25 mg/kg、0.02 μg/kg和0.1 mg/kg，實(shí)驗(yàn)各組霉菌毒素含量見表2。

表2 實(shí)驗(yàn)各組鐮刀菌毒素含量

1.5.2 pH測(cè)定

飼料中pH值測(cè)定采用Raclecki(1988)推薦的方法：稱取20 g發(fā)酵飼料放入燒杯中加入40 mL去離子水，用玻璃棒攪拌均勻，形成漿狀液，用pH計(jì)(便攜式酸度計(jì)PHB-1，杭州齊威儀器有限公司)測(cè)定其pH值。

1.5.3 OM測(cè)定

參照GB/T 6438—2007粗灰分測(cè)定方法操作，OM=飼糧-粗灰分。

1.5.4 NH3-N測(cè)定

采用靛酚藍(lán)比色法[10]，在強(qiáng)堿性介質(zhì)中，氨與苯酚和次氯酸鈉反應(yīng)生成靛酚藍(lán)，在以氨標(biāo)準(zhǔn)溶液做標(biāo)準(zhǔn)曲線，用分光光度計(jì)在625 nm下測(cè)定吸光度。

1.5.5 乳酸測(cè)定

乳酸(LD)測(cè)試盒(A019-2):南京建成生物工程研究所(南京)，具體處理和測(cè)定方法均按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS 9.2軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，用雙因素方差分析和三因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。用Duncan’s多重比較，顯著性水平為P<0.05。通過(guò)SPSS 17.0分析發(fā)酵各參數(shù)間皮爾遜相關(guān)系數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)pH的影響

飼糧pH隨發(fā)酵時(shí)間呈下降趨勢(shì)(表3，P<0.05)，發(fā)酵到第12天基本穩(wěn)定，所有處理第12和18天的pH差異不顯著(P>0.05)。添加CA沒有影響各時(shí)間點(diǎn)的pH(P>0.05)；但是與不添加CA相比，添加CA的全程平均pH顯著降低(P=0.018)。毒素水平顯著影響發(fā)酵0、12和18 d的pH(P<0.05)，發(fā)酵第0天時(shí)，對(duì)照組pH顯著高于25%毒素組(P<0.05)，25%毒素組又顯著高于50%毒素組(P<0.05)；發(fā)酵12 d和18 d，對(duì)照組pH則顯著低于25%和50%毒素組(P<0.05)，而25%毒素組和50%毒素組差異不顯著(P>0.05)。對(duì)照組發(fā)酵全程平均pH顯著高于25%毒素組(P<0.05)，25%毒素組又顯著高于50%毒素組(P<0.05)。發(fā)酵第0天，CA和鐮刀菌毒素具有顯著的交互作用(P<0.05)。

表3 發(fā)酵對(duì)飼糧pH的影響

注：同行肩注不同大寫字母者，差異顯著(P<0.05)，同列肩注不同小寫字母者，差異顯著(P<0.05)。下同。

2.2 對(duì)OM的影響

飼糧OM隨發(fā)酵時(shí)間呈下降趨勢(shì)(表4，P<0.05)，發(fā)酵到第6天基本穩(wěn)定，所有處理第6、12和18天的pH差異不顯著(P>0.05)。添加CA沒有影響各時(shí)間點(diǎn)和全程的平均OM(P>0.05)。毒素水平?jīng)]有影響各時(shí)間點(diǎn)的平均OM(P>0.05)；但是對(duì)照組發(fā)酵全程平均OM顯著低于50%毒素組(P=0.044)。CA和鐮刀菌毒素對(duì)發(fā)酵各時(shí)間點(diǎn)和全程的平均OM均沒有顯著的交互作用(P>0.05)。

2.3 對(duì)NH3-N的影響

飼糧NH3-N隨發(fā)酵時(shí)間呈上升趨勢(shì)(表5，P<0.05)。添加CA沒有影響各時(shí)間點(diǎn)和全程的平均NH3-N(P>0.05)。毒素水平顯著影響發(fā)酵各時(shí)間點(diǎn)的NH3-N(P<0.05)，發(fā)酵第0天時(shí)，50%毒素組NH3-N含量顯著低于25%毒素組(P<0.05)，25%毒素組NH3-N含量又顯著低于對(duì)照組(P<0.05)；發(fā)酵第6、12和18天，對(duì)照組NH3-N含量顯著低于25%和50%毒素組(P<0.05)，而25%毒素組和50%毒素組差異不顯著(P>0.05)。對(duì)照組發(fā)酵全程的平均NH3-N顯著低于25%毒素組和50%毒素組(P<0.05)。CA和鐮刀菌毒素對(duì)發(fā)酵各時(shí)間點(diǎn)和全程的平均NH3-N均沒有顯著的交互作用(P>0.05)。

2.4 對(duì)乳酸的影響

飼糧乳酸隨發(fā)酵時(shí)間呈上升趨勢(shì)(表6，P<0.05)，發(fā)酵到第12天基本穩(wěn)定。添加CA沒有影響各時(shí)間點(diǎn)和全程的平均乳酸含量(P>0.05)。毒素水平顯著影響發(fā)酵各時(shí)間點(diǎn)的乳酸(P<0.05)，整個(gè)發(fā)酵過(guò)程中，對(duì)照組乳酸含量顯著高于25%毒素組(P<0.05)，而25%毒素組乳酸含量又顯著高于50%毒素組(P<0.05)。對(duì)照組發(fā)酵全程的平均乳酸含量顯著高于25%毒素組(P<0.05)，而25%毒素組乳酸含量又顯著高于50%毒素組(P<0.05)。發(fā)酵0 d和12 d，CA和鐮刀菌毒素具有顯著的交互作用(P<0.05)。

表4 發(fā)酵對(duì)飼糧OM的影響/%

表5 發(fā)酵對(duì)飼糧NH3-N的影響/mg/g

表6 發(fā)酵對(duì)飼糧乳酸的影響/mmol/g

2.5 相關(guān)性分析

飼糧發(fā)酵各參數(shù)之間相關(guān)系數(shù)見表7。pH與OM呈顯著正相關(guān)(P=0.028)，而與NH3-N(P=0.044)和乳酸(P=0.007)呈顯著負(fù)相關(guān)。OM與NH3-N呈顯著正相關(guān)(P=0.004)，而與乳酸呈顯著負(fù)相關(guān)(P=0.018)。NH3-N和乳酸存在顯著的正相關(guān)(P=0.022)。

表7 發(fā)酵參數(shù)之間的皮爾遜相關(guān)系數(shù)

3 討論

關(guān)于全價(jià)飼糧發(fā)酵的研究，有些發(fā)酵全價(jià)飼糧[11]，有些則發(fā)酵原料[12]，但自然霉變的飼糧添加改性蒙脫石吸附劑的發(fā)酵實(shí)驗(yàn)尚鮮見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)飼料選擇只含有鐮刀菌毒素的自然霉變的玉米和玉米蛋白粉，因此，可以用于研究鐮刀菌毒素和改性蒙脫石吸附劑對(duì)全價(jià)飼糧發(fā)酵參數(shù)的影響。

3.1 鐮刀菌毒素對(duì)全價(jià)飼料發(fā)酵pH的影響

pH能綜合地反映出發(fā)酵的進(jìn)程。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，發(fā)酵初期，隨著毒素含量升高，飼料中的pH逐漸降低，推測(cè)原因可能是串珠鐮刀菌毒素通常以鈉鹽和鉀鹽形式存在的，其游離酸為強(qiáng)酸，pKa為0.0±0.05～1.7，化學(xué)性質(zhì)屬于半方酸陰離子，與無(wú)機(jī)酸性質(zhì)類似[13-14]。李永凱等[15]表明：乳酸菌是一類能發(fā)酵可利用碳水化合物產(chǎn)生大量乳酸的細(xì)菌。李紹章[16]等實(shí)驗(yàn)也證明了發(fā)酵飼料中乳酸的含量變化與pH值的變化規(guī)律一致。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)酵末期對(duì)照組pH(<4.5)達(dá)到良好飼料標(biāo)準(zhǔn)[17-18]。而鐮刀菌生長(zhǎng)消耗大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，致使發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)酸能力相對(duì)降低[19-20]，因而造成毒素組pH較高(4.57～4.63)。

3.2 鐮刀菌毒素對(duì)全價(jià)飼料發(fā)酵OM的影響

有機(jī)化合物含量是鑒別發(fā)酵飼料品質(zhì)的常用指標(biāo)之一[21]。楊旭等[22]采用固體發(fā)酵研究發(fā)酵對(duì)豆粕養(yǎng)分的影響表明，發(fā)酵后OM含量降低。高白茹等[23]也證明秸稈和秸稈殘?jiān)?jīng)過(guò)厭氧發(fā)酵后OM含量降低，與本實(shí)驗(yàn)的研究一致。但OM降低程度各不相同，這與發(fā)酵底物、發(fā)酵菌種和發(fā)酵溫度有關(guān)。盡管本研究毒素水平?jīng)]有顯著影響各時(shí)間點(diǎn)的平均OM，但是與發(fā)酵初始(0 d)相比，對(duì)照組、25%毒素組和50%毒素組OM分別降低了1.29%、1.15%和0.90%，而且對(duì)照組發(fā)酵全程平均OM顯著低于50%毒素組，說(shuō)明毒素影響了微生物發(fā)酵OM的能力，但其機(jī)理尚需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證實(shí)。

3.3 鐮刀菌毒素對(duì)全價(jià)飼料發(fā)酵NH3-N的影響

NH3-N是衡量飼料質(zhì)量?jī)?yōu)劣的重要指標(biāo)之一，飼料中的氨氮過(guò)量，將會(huì)影響動(dòng)物體內(nèi)的正常生理活動(dòng)甚至生存[24]。研究表明，細(xì)菌、放線菌和霉菌對(duì)豬糞發(fā)酵過(guò)程中的NH3-N釋放具有良好的抑制作用[25]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明，全價(jià)飼糧發(fā)酵初期，隨著毒素含量升高，飼料中的NH3-N含量逐漸降低，推測(cè)可能是鐮刀菌毒素對(duì)飼料中的NH3-N進(jìn)行了抑制或者鐮刀菌與飼料本身的其它菌共同作用抑制了NH3-N產(chǎn)生。NH3-N是飼料中蛋白質(zhì)、氨基酸和其他非蛋白氮化合物等分解的終產(chǎn)物[26]。組合菌種在發(fā)酵過(guò)程中分解蛋白質(zhì)變成氨，然后利用氨合成自身的菌體蛋白，這個(gè)過(guò)程中不是所有的氨都能被利用，最終導(dǎo)致發(fā)酵飼糧NH3-N濃度上升。本研究飼糧NH3-N的產(chǎn)生隨毒素水平升高而升高，與發(fā)酵初始(0天)相比，對(duì)照組、25%毒素組和50%毒素組NH3-N分別增加了281%、644%和1022%，對(duì)照組發(fā)酵全程的平均NH3-N顯著低于25%毒素組和50%毒素組。但是毒素影響NH3-N釋放的機(jī)理尚需進(jìn)一步證實(shí)。

3.4 鐮刀菌毒素對(duì)全價(jià)飼料發(fā)酵乳酸的影響

乳酸的產(chǎn)生，可以使總酸度提高，從而抑制了腐敗菌等有害菌的繁殖，有利于發(fā)酵飼料的長(zhǎng)期保存[27]。酵母菌和枯草芽孢桿菌可以分泌α-淀粉酶、蛋白酶、纖維素酶等多種胞外酶[28]，分解營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，生成糖類。在酵母菌和枯草芽孢桿菌幫助下，乳酸菌可利用這些碳水化合物發(fā)酵產(chǎn)生大量乳酸[29]，比單一乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生乳酸能力更高。本研究中，發(fā)酵末期(18 d)對(duì)照組、25%毒素組和50%毒素組的乳酸含量分別為發(fā)酵初始(0 d)的28.41、32.4和74.1倍。馮德明等[30]研究表明，主要以酵母菌和乳酸桿菌發(fā)酵生產(chǎn)黃酒過(guò)程中，乳酸含量隨著時(shí)間逐漸增加。崔彥召[31]也證明，運(yùn)用不同的乳酸菌劑對(duì)全混合日糧進(jìn)行發(fā)酵，各組乳酸含量逐漸增加，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。本研究發(fā)酵末期飼糧乳酸含量隨毒素水平升高而顯著降低，對(duì)照組發(fā)酵全程的平均乳酸含量顯著高于25%毒素組，而25%毒素組乳酸含量又顯著高于50%毒素組。但是毒素影響乳酸產(chǎn)生的機(jī)理尚需進(jìn)一步證實(shí)。

3.5蒙脫石吸附劑對(duì)鐮刀菌毒素全價(jià)飼料發(fā)酵參數(shù)的影響

蒙脫石吸水性很強(qiáng)，吸水后膨脹，蒙脫石在水介質(zhì)中可分散呈膠體狀態(tài)，即晶格底面間距增大，在高水化狀態(tài)時(shí)晶軸C0可達(dá)1.84～2.14 nm[32]。因此推測(cè)蒙脫石吸附飼料中的部分水分間接引起H+升高，導(dǎo)致酸度降低。本實(shí)驗(yàn)條件下，添加CA的全程平均pH顯著低于不添加CA組。鐮刀菌毒素和CA對(duì)發(fā)酵12 d的乳酸具有顯著的交互作用。

4 結(jié)論

4.1 本實(shí)驗(yàn)條件下，飼糧pH和OM含量隨發(fā)酵時(shí)間顯著下降，而NH3-N和乳酸水平隨發(fā)酵時(shí)間顯著升高。

4.2 飼糧(0 d)的pH和NH3-N水平均隨鐮刀菌毒素水平升高顯著降低。發(fā)酵末期(18 d)飼糧pH隨毒素水平升高顯著升高；對(duì)照組NH3-N顯著低于兩個(gè)毒素組；而乳酸含量隨毒素水平升高顯著降低。發(fā)酵全程平均的pH和乳酸含量隨毒素水平升高顯著降低；對(duì)照組發(fā)酵全程的平均OM顯著低于50%的毒素組；對(duì)照組發(fā)酵全程的平均NH3-N顯著低于兩個(gè)毒素組。

4.3 添加CA的全程平均pH顯著低于不添加CA組。

4.4 鐮刀菌毒素和CA對(duì)發(fā)酵第12天的乳酸具有顯著的交互作用。

4.5 pH與OM、OM與NH3-N、NH3-N和乳酸呈顯著正相關(guān)，而pH與NH3-N、pH與乳酸、OM與乳酸呈顯著負(fù)相關(guān)。

[1]LABUDA R,PARICH A,BERTHILLER F,et al.Incidence of trichothecenes and zearalenone in poultry feed mixtures from Slovakia[J].International Journal of Food Microbiology,2005,105(1):19-25

[2]單妹,許梓榮,馮建蕾.飼料中鐮刀菌毒素的危害和控制[J].飼料工業(yè),2006,27(5):48-49

SHAN M,XU Z R,FENG J L.Harm and control of fusarium toxin in feed[J].Feed Industry,2006,27(5):48-49

[3]安娜,李呂木.飼料中鐮刀菌毒素的研究進(jìn)展[J].中國(guó)飼料,2009(4):8-11

AN N,LI L M.Research progress on fusarium toxin in feed[J].China Feed,2009(4):8-11

[4]葉丙奎.混菌固態(tài)發(fā)酵對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及生長(zhǎng)育肥豬生產(chǎn)性能的影響[D].楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué),2009

YE Bingkui.Effects of mixed culture solid-state fermentation on feed nutritive value and performance of growthing-finishing pigs[D].Yangling:Northwest A&F University,2009

[5]付敏,何軍,余冰,等.混菌固態(tài)發(fā)酵對(duì)菜籽餅營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及抗?fàn)I養(yǎng)因子含量的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2013,25(7):1579-1586

FU M,HE J,YU B,et al.Effect of mixed microbial solid-state fermentation on nutrient values and antinutritional factor contents of rapeseed cake[J].Chinese Journal of Animal Nutrition,2013,25(7):1579-1586

[6]韓信,程茂基,吳超,等.混菌固態(tài)發(fā)酵霉變?nèi)珒r(jià)飼料特性的研究[J].安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2015,42(2):223-227

HAN X,CHENG M J,WU C,et al.Research on the characteristics of the mixed solid-state fermentation bacteria dealing with moldy complete feed[J].Journal of Anhui Agricultural University,2015,42(2):223-227

[7]劉曉明,李玉霞,楊在賓.母豬全價(jià)配合飼料發(fā)酵前后營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)變化分析[J].山東畜牧獸醫(yī),2014,35(11):8-10,22-23

LIU X M,LI Y X,YANG Z B.Analysis of nutrient changes before and after fermentation of complete feed for sows[J].Shandong Journal of Animal Science and Veterinary Medicine,2014,35(11):8-10,22-23

[8]崔彥召.乳酸菌劑對(duì)發(fā)酵全混合日糧品質(zhì)及6種霉菌毒素含量的影響[D].南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué),2011

CUI Y Z.Effect of lactic acid bacteria inoculants on quality and content of 6 mycotoxins in fermented total mixed ration[D].Nanjing:Nanjing Agricultural University,2011

[9]HRISTOV A N,MCALLISTER T A.Effect of inoculants on whole-crop barley silage fermentation and dry matter disappearance in situ[J].Journal of Animal Science,2002,80(2):510-516

[10]趙良啟,韓廣業(yè).靛酚藍(lán)比色法的改進(jìn)及其在發(fā)酵過(guò)程中的應(yīng)用[J].山西大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),1999(3):265-269

ZHAO L Q,HAN G Y.Improvement on Indophenol-Blue colorimetry and its application in formentation process[J].Journal of Shanxi University(Natural Science Edition),1999(3):265-269

[11]呂鋒,程茂基,徐玉霞,等.混菌發(fā)酵袋裝全價(jià)飼料對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響[J].飼料工業(yè),2010,31(11):20-22

LYU F,CHENG M J,XU Y X,et al.Mixed bacteria ferments completed feed of pocket on performance of weaned piglets[J].Feed Industry,2010,31(11):20-22

[12]馬文強(qiáng),馮杰,劉欣.微生物發(fā)酵豆粕營(yíng)養(yǎng)特性研究[J].中國(guó)糧油學(xué)報(bào),2008,23(1):121-124

MA W Q,FENG J,LIU X.Study on the nutritional characteristics of fermented soybean meal[J].Journal of the Chinese Cereals and Oils Association,2008,23(1):121-124

[13]高思,雷明彥,齊德生,等.串珠鐮刀菌毒素的理化性質(zhì),毒作用機(jī)理及中毒動(dòng)物概況[J].飼料工業(yè),2012(8):53-57

GAO S,LEI M Y,QI D S,et al.The toxic effect and mechanism of moniliformin and the overview of poison animals[J].Feed Industry,2012(8):53-57

[14]KANDLER W,NADUBINSKA M,PARICH A,et al.Determination of moniliformin in maize by ion chromatography[J].Analytical and Bioanalytical Chemistry,2002,374(6):1086-1090

[15]李永凱,毛勝勇,朱偉云.益生菌發(fā)酵飼料研究及應(yīng)用現(xiàn)狀[J].畜牧與獸醫(yī),2009(3):90-93

LI Y K,MAO S Y,ZHU W Y.The present situation of the research and application of probiotics fermented feed[J].Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2009(3):90-93

[16]李紹章,趙娜,楊學(xué)海,等.不同工藝對(duì)益生菌發(fā)酵飼料感觀,pH值與重量損耗的影響[J].飼料工業(yè),2010,31(18):31-34

LI S Z,ZHAO N,YANG X H,et al.Research on the effect of sensory analysis,pH and weight of lactobacillus plantarum fermentated feed technology[J].Feed Industry,2010,31(18):31-34

[17]程銀華,雷雪芹,徐廷生,等.玉米秸稈揉絲微貯與傳統(tǒng)青貯飼料發(fā)酵過(guò)程中pH和微生物的變化[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2014,42(5):17-21

CHENG Y H,LEI X Q,XU T S,et al.Changes of pH and microorganism during the fermentation of microbial and traditional silages with corn straw knead wire[J].Journal of Northwest Sci-Tech University of Agriculture and Forestry:Natural Science Edition,2014,42(5):17-21

[18]周元軍.秸稈飼料加工與應(yīng)用及技術(shù)圖說(shuō)[M].鄭州:河南科學(xué)技術(shù)出版社，2003:88-89

ZHOU Y J.Straw feed processing and application and technical plan[M].Zhengzhou:Henan Science and Technology Press,2003:88-89

[19]SEEFELDER W,GOSSMANN M,HUMPF H U.Analysis of Fumonisin B1 in Fusarium proliferatum-Infected Asparagus Spears and Garlic Bulbs from Germany by liquid chromatography-electrospray ionization mass spectrometry [J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2002,50(10):2778-2781

[20]劉承蘭.鐮刀菌侵染對(duì)蘆筍產(chǎn)品中伏馬菌素B1/B2污染的影響及蘆筍中農(nóng)藥殘留分析[D].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué),2005

LIU C L.Study on effect of fusarium infection on fumonisin B1 and B2 contamination in asparagus production and analysis of pesticides residue in asparagus[D].Beijing:China Agricultural University,2005

[21]程建華,熊升偉,姜濤,等.灼燒恒質(zhì)對(duì)飼料粗灰分測(cè)定的影響研究[J].糧食儲(chǔ)藏,2009,38(1):43-47

CHENG J H,XIONG S W,JIANG T,et al.Influence of ignition to constant weight on the determination of feed crude ash[J].Grain Storage,2009,38(1):43-47

[22]楊旭,蔡國(guó)林,曹鈺,等.固態(tài)發(fā)酵提高豆粕蛋白含量的條件優(yōu)化研究[J].中國(guó)釀造,2008,27(5):17-20+38

YANG X,CAI G L,CAO Y,et al.Optinization of solid-substrate fermentation to improve the content of soybean meal protein[J].China Brewing,2008,27(5):17-20+38

[23]高白茹,常志州,葉小梅,等.堆肥預(yù)處理對(duì)稻秸厭氧發(fā)酵產(chǎn)氣量的影響[J].農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào),2010(5):251-256

GAO BR,CHANG ZZ,YE XM,et al.Effect of compost pre-treatment on biogas production from rice straw[J].Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering,2010(5):251-256

[24]閻鋒,馬國(guó)林,吳旭東.魚粉飼料中氨氮量的測(cè)定[J].化學(xué)傳感器,1994,3:024

YAN F,MA G L,WU X D.Determination of ammonia nitrogen in fish feed[J].Chemical Sensors,1994,3:024

[25]高穎,褚維偉,張霞,等.豬糞生物除臭劑的制備及其除臭效果的測(cè)定[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2011(8):80-81

GAO Y,CHU X W,ZHANG X,et al.Preparation of pig manure bio deodorizer and determination of its deodorizing effect[J].Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine,2011(8):80-81

[26]沈美英.日糧內(nèi)不同粗飼料品質(zhì)對(duì)綿羊瘤胃發(fā)酵功能和微生物區(qū)系的影響[D].呼和浩特:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué),2006

SHEN M Y.The effect of different forage quality on rumen fermentation and microflora of sheep[D].Huhehaote:Inner Mongolia Agricultural University,2006

[27]蘇建華,尹召華.啤酒糟微貯實(shí)驗(yàn)初報(bào)[J].動(dòng)物科學(xué)與動(dòng)物醫(yī)學(xué),1999,16(3):43-44

SU J H,YIN Z H.Preliminary report about the experiment of beer dross micro-storage[J].Animal science and animal medicine,1999,16(3):43-44

[28]LUTHER R M.Effect of microbial inoculation of whole-plant corn silage on chemical characteristics,preservation and utilization by steers[J].Journal of Animal Science,1986,63(5):1329-1336

[29]李龍.復(fù)合益生菌發(fā)酵飼料工藝參數(shù)優(yōu)化及品質(zhì)評(píng)定[D].上海:上海交通大學(xué),2010

LI L.Composite probiotic fermented feed process parameters optimization and quality assessment[D].Shanghai Shanghai Jiao Tong University,2010

[30]馮德明,朱長(zhǎng)俊,王玉潔,等.黃酒發(fā)酵過(guò)程中乳酸含量分析及變化規(guī)律的研究[J].中國(guó)釀造,2009,28(7):158-160

FENG D M,ZHU C J,WANG Y J,et al.Determination of lactic acid concentration and its change during rice wine fermentation[J].China Brewing,2009,28(7):158-160

[31]崔彥召，黃克和,徐國(guó)忠,等.不同乳酸菌劑對(duì)發(fā)酵全混合日糧霉菌毒素含量的影響[J].上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)科學(xué)版),2013,31(1):82-87

CUI Y S,HUANG K H,XU G Z,et al.Effect of Different Lactic Acid Bacteria Inoculants on Mycotoxins in fermented total mixed ration[J].Journal of Shanghai Jiao Tong University(Agricultural Science),2013,31(1):82-87

[32]韓秀山,許家亮.動(dòng)物用蒙脫石的定義和界限[J].山東畜牧獸醫(yī),2008,8:39-41

HAN X S,XU J L.With the definition of montmorillonite animal[J].Shandong Journal of Animal Science and Veterinary Medicine,2008,8:39-41.