谷風(fēng)林 張林輝 房一明 劉光華 沈紹斌 姜太玲 段春芳 宋記明 蔡瑩瑩 黃菲菲

摘 要 測(cè)量云南省不同產(chǎn)地草果的物理性狀、單粒重，并采用水蒸氣蒸餾法提取草果揮發(fā)油，GC-MS法分析鑒定草果精油的化學(xué)成分。結(jié)果表明，云南省不同產(chǎn)地草果的物理長(zhǎng)寬比和單粒重存在較大差異，水蒸氣蒸餾法提取的精油，共分離鑒定出39種化合物，主要為單萜類化合物。不同產(chǎn)地的揮發(fā)油主要成分相似，含量存在差異，本研究可為鑒別草果真實(shí)性及評(píng)價(jià)其質(zhì)量提供依據(jù)。

關(guān)鍵詞 草果；物理性狀；揮發(fā)油；氣相色譜-質(zhì)譜

中圖分類號(hào) R284 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

Abstract The physical properties， mean weight and essential oil composition of Amomum tsao -ko from different origin of Yunnan， China were studied by gravimetric analysis， steam distillation and GC-MS. Results： A significant difference of physical properties exist among the thirteen samples， and thirty-nine compounds were isolated from the Amomum tsao-ko essential oil extracted by steam distillation， mainly monoterpenoid compounds. The main components of Amomum tsao -ko essential oil in different origins were similar， but the content was different， and the study provided a basis for the identification of the authenticity of Chinese Amomum tsao –ko and the evaluation of its quality.

Keywords Amomum tsao-ko； physical properties； essential oil； gas chromatography-mass spectrometry （GC-MS）

DOI 10.3969/j.issn.1000-2561.2018.07.026

草果（Amomum tsao-ko Crevost et Lemaire）又名草果仁、草果子、老蔻，為姜科豆蔻屬多年生草本植物草果的成熟果實(shí)[1]，是一種重要的藥食同源植物，主要分布在我國(guó)廣西、云南、四川和貴州等地，在云南主產(chǎn)于金平、元陽(yáng)、河口、屏邊、綠春、馬關(guān)、西疇、富寧、麻栗坡等地，其中尤以馬關(guān)縣、金平縣等地的產(chǎn)量最高，品質(zhì)優(yōu)良[2]。其味辛，性溫，入脾、胃二經(jīng)，具有燥濕除寒、祛痰截瘧、消食化積等功效[3]。據(jù)報(bào)道，草果還有清新口氣[4]和減輕體重[5]的作用。同時(shí)草果也是我國(guó)一種傳統(tǒng)的中藥材，性味辛溫，能燥濕散寒，具有溫中、健胃、消食[6]、順氣的功能。草果精油中桉油素具有驅(qū)風(fēng)、鎮(zhèn)靜、抗菌、抗病毒、殺滅寄生蟲及發(fā)汗作用，檸檬醛、-蒎烯等具有平喘、祛痰、抑菌的作用，樟腦具有刺激神經(jīng)、使頭腦清醒靈活的作用，-松油醇、香葉醇、橙花叔醇等有明顯的鎮(zhèn)靜、抗菌作用[7]。目前，已有一些文獻(xiàn)報(bào)道了云南幾個(gè)主產(chǎn)區(qū)的草果揮發(fā)油組成[8]，但對(duì)不同產(chǎn)地草果物理性狀和精油含量以及精油組成的研究尚未見報(bào)道。本研究通過(guò)比較云南不同產(chǎn)區(qū)草果果實(shí)物理性狀、精油含量與精油組成的差異，可以為草果精深加工和產(chǎn)品開發(fā)提供數(shù)據(jù)，也可以指導(dǎo)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，從而改進(jìn)種植措施提高產(chǎn)品品質(zhì)和農(nóng)業(yè)收益。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 草果原料 草果產(chǎn)于云南各個(gè)地區(qū)：怒江州貢山縣獨(dú)龍江鄉(xiāng)、云南紅河州綠春縣、怒江州貢山縣、云南文山州麻栗坡縣、臨滄市雙江縣、云南瑞麗市、云南德宏州隴川縣、云南保山市隆陽(yáng)區(qū)、龍陵縣、云南元陽(yáng)縣、云南滄源縣、云南瀾滄縣、文山州馬關(guān)縣，分別編號(hào)1～13。樣品經(jīng)50 ℃烘箱干燥24 h，粉碎，過(guò)40目篩備用。

1.1.2 試劑 無(wú)水碳酸鈉（分析純）由西隴化工股份有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 物理性狀測(cè)定 采用游標(biāo)卡尺測(cè)定草果鮮果的長(zhǎng)度和寬度，每個(gè)產(chǎn)地隨機(jī)取20個(gè)樣品測(cè)量，并取平均值；采用電子天平對(duì)每個(gè)產(chǎn)地的10個(gè)草果鮮果樣品進(jìn)行測(cè)定，測(cè)量3次取平均值。

1.2.2 草果精油含量測(cè)定 參考李付惠等[9]提取草果精油方法，并略作修改。稱取約30 g草果粉末加入1 000 mL圓底燒瓶中，加入防爆沸玻璃珠；加入200 mL蒸餾水浸泡1 h，補(bǔ)足蒸餾水至400 mL，回流7 h，保持5滴/min的蒸餾速度。蒸餾結(jié)束后待冷卻到室溫，讀取精油體積，精確至0.05 mL，重復(fù)3次，計(jì)算精油含量。最后收集精油，4 ℃靜置保存待用。

1.2.3 草果精油化學(xué)成分分析GC-MS分析 取精油樣品50 μL用正己烷稀釋500倍，過(guò)0.45 μm微孔膜，液體進(jìn)樣；色譜柱型號(hào)：DB-5MS毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）。升溫程序：起始溫度為40 ℃，以10 ℃/min 到100 ℃，以2 ℃/min到160 ℃，以10 ℃/min到250 ℃，280 ℃后運(yùn)行2 min；載氣（He）流速1.0 mL/min，進(jìn)樣量1.00 μL，不分流。全掃描：質(zhì)荷比30～300。

1.3 數(shù)據(jù)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用Origin 9.0和SPSS 9軟件及儀器自帶軟件處理，平均數(shù)之間的比較采用方差分析，顯著性水平0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 物理性狀比較

2.1.1 不同產(chǎn)地草果長(zhǎng)、寬比較 不同產(chǎn)地草果的長(zhǎng)度和寬度具有一定的差異性。由圖1可知，瑞麗市的草果長(zhǎng)度最長(zhǎng)，其次是龍陵縣的草果，它們與其余11個(gè)產(chǎn)地的草果長(zhǎng)度差異顯著（p< 0.05），馬關(guān)縣與麻栗坡縣的草果的長(zhǎng)度最短，除了麻栗坡縣、瑞麗市、龍陵縣、馬關(guān)縣外，其余9個(gè)縣/區(qū)的草果長(zhǎng)度接近；草果的寬度相差不大，瑞麗市草果的寬度最長(zhǎng)，除了與綠春縣、貢山縣、麻栗坡縣、滄源縣、馬關(guān)縣的草果寬度差異顯著外，與其余縣/區(qū)草果的寬度沒(méi)有顯著性差異。

2.1.2 不同產(chǎn)地草果的10粒重比較 由圖2可知，瑞麗市的草果最重，龍陵縣次之，這兩個(gè)地區(qū)的草果10粒重?zé)o顯著性差異，與其余11個(gè)縣/區(qū)的草果10粒重呈顯著性差異，麻栗坡縣草果的10粒重最輕。重量與前面的長(zhǎng)度和寬度結(jié)果存在一致性，果型大的重量大，說(shuō)明草果鮮果密度差異不大，主要還是由果實(shí)大小決定重量。

2.2 草果精油含量

由圖3可知，不同產(chǎn)地草果精油含量差異性較大，精油含量范圍1.3～2.7 mL/100 g。其中瑞麗市的草果精油含量最高，與其余12個(gè)縣/區(qū)的草果精油含量呈顯著性差異；麻栗坡縣和元陽(yáng)縣的草果精油含量最低，與其余11個(gè)縣/區(qū)草果精油含量呈顯著性差異。

2.3 草果精油化學(xué)成分分析

不同產(chǎn)地草果中揮發(fā)油的氣相色譜-質(zhì)譜分析結(jié)果如圖4所示。采用氣相色譜處理系統(tǒng)，結(jié)果并用峰面積歸一化法計(jì)算各組分的相對(duì)百分含量。經(jīng)過(guò)質(zhì)譜工作站系統(tǒng)檢索、人工譜圖解析，并查對(duì)有關(guān)質(zhì)譜圖集資料[10-14]，從而確定出草果揮發(fā)油中的化學(xué)成分，結(jié)果如表1所示。由表1可知，從13種草果中共分離鑒定出39種組分。

由圖4和表1可知，在精油色譜圖總峰面積中占比最高為2-癸烯醛的草果有9種，占比最高為桉油精的草果有3種，占比最高為3，7-二甲基-2，6-辛二烯醛的草果有1種。

云南紅河州綠春縣草果中分離鑒定出33種組分，占色譜總峰面積的96.69%，含量最高組分為2-癸烯醛占15.29%，其次為桉油精占13.72%，3，7-二甲基-2，6-辛二烯醛占13.14%，香葉醇占11.77%，相對(duì)含量比較高的還有1-乙基丙基苯占7.81%，檸檬醛占7.44%，反-2-十二烯醛占7.11%，橙花叔醇占3.94%，2-甲基-3-苯基-2-丙烯醛占3.61%，α-松油醇占2.78%等。

怒江州貢山縣草果中分離鑒定出32種組分，占總峰面積的95.87%，含量最高的組分2-癸烯醛占17.83%，其次為3，7-二甲基-2，6-辛二烯醛16.64%，桉油精13.14%，相對(duì)含量較高的還有1-乙基丙基苯9.36%，檸檬醛9.24%，反-2-十二烯醛6.83%，2-甲基-3-苯基-2-丙烯醛3.6%，橙花叔醇3.37%，α-松油醇3.04%等。

臨滄市雙江縣草果中分離鑒定出33種組分，占總峰面積的93.71%，含量最高的組分為2-癸烯醛17.28%，其次為桉油精15.12%，3，7-二甲基-2，6-辛二烯醛14.19%，相對(duì)含量較高的還有檸檬醛9.55%，反-2-十二烯醛7.6%，橙花叔醇5.43%，ρ-傘花烴4.52%，香葉醇4.32%，2-甲基-3-苯基-2-丙烯醛4.22%，α-松油醇3.01%等。

云南瑞麗市草果中分離鑒定出35種組分，占總峰面積的91.82%，含量最高組分2-癸烯醛占16.64%，其次為桉油精15.12%，3，7-二甲基-2，6-辛二烯醛12.01%，相對(duì)含量較高的還有反-2-十二烯醛8.89%，檸檬醛7.63%，橙花叔醇5.22%，1-乙基丙基苯4.48%，2-甲基-3-苯基-2-丙烯醛4.3%，α-松油醇2.96%，2-甲基-3-苯基-2-丙烯醛4.3%等。

云南保山市隆陽(yáng)區(qū)草果中分離鑒定出32種組分，占總峰面積的92.82%，含量最高組分2-癸烯醛占19.19%，其次為桉油精18.12%，3，7-二甲基-2，6-辛二烯醛14.09%，相對(duì)含量較高的還有檸檬醛7.63%，反-2-十二烯醛7.1%，橙花叔醇4.9%，2-甲基-3-苯基-2-丙烯醛3.71%，香葉醇3.54%，α-松油醇3.38%等。

保山市龍陵縣草果中分離鑒定出33種組分，占總峰面積的91.97%，含量最高組分2-癸烯醛占18.18%，其次為桉油精16.99%，3，7-二甲基-2，6-辛二烯醛12.63%，相對(duì)含量比較高的還有反-2-十二烯醛9.84%，檸檬醛8.21%，橙花叔醇5.82%，2-甲基-3-苯基-2-丙烯醛4.75%，α-松油醇3.16%等。

云南元陽(yáng)縣草果中分離鑒定出31種組分，占總峰面積的91.13%，含量最高組分2-癸烯醛占16.93%，其次為3，7-二甲基-2，6-辛二烯醛16.61%，桉油精15.26%，檸檬醛10.79%，相對(duì)含量比較高的還有反-2-十二烯醛8.47%，橙花叔醇4.34%，2-甲基-3-苯基-2-丙烯醛3.19%，α-松油醇3.03%等。

云南瀾滄縣草果中分離鑒定出29種組分，占總峰面積的91.59%，含量最高組分2-癸烯醛占20.59%，其次為桉油精15.12%，3，7-二甲基-2，6-辛二烯醛11.27%，相對(duì)含量比較高的還有檸檬醛9.67%，反-2-十二烯醛7.59%，2-甲基-3-苯基-2-丙烯醛5.69%，橙花叔醇4.81%，α-松油醇3.03%等。

文山州馬關(guān)縣草果中分離鑒定出29種組分，占總峰面積的91.35%，含量最高組分2-癸烯醛占18.14%，其次為3，7-二甲基-2，6-辛二烯醛15.85%，桉油精13.78%，相對(duì)含量比較高的還有檸檬醛9.26%，反-2-十二烯醛8.57%，香葉醇4.9%，橙花叔醇4.69%，2-甲基-3-苯基-2-丙烯醛4.1%等。

云南文山州麻栗坡縣草果中分離鑒定出33種組分，占總峰面積的96.73%，含量最高組分桉油精占18.42%，其次為2-癸烯醛17.62%，3，7-二甲基-2，6-辛二烯醛12.73%，反-2-十二烯醛10.4%，相對(duì)含量較高的還有1-乙基丙基苯7.78%，檸檬醛7.72%，橙花叔醇4.23%，α-松油醇3.63%，2-甲基-3-苯基-2-丙烯醛3.03%等。

云南德宏州隴川縣草果中分離鑒定出30種組分，占總峰面積的92.38%，含量最高組分桉油精占18.87%，其次為2-癸烯醛18.33%，3，7-二甲基-2，6-辛二烯醛13.87%，相對(duì)含量較高的還有反-2-十二烯醛9.48%，檸檬醛7.7%，2-甲基-3-苯基-2-丙烯醛5.73%，橙花叔醇3.79%，香葉醇3.58%等。

云南滄源縣草果中分離鑒定出33種組分，占總峰面積的90.66%，含量最高組分桉油精占18.26%，其次為2-癸烯醛18.2%，3，7-二甲基-2，6-辛二烯醛11.64%，相對(duì)含量比較高的還有檸檬醛7.32%，反-2-十二烯醛7.28%，橙花叔醇5.69%，2-甲基-3-苯基-2-丙烯醛4.28%，香葉醇4.07%，α-松油醇2.83%等。

怒江州貢山縣獨(dú)龍江鄉(xiāng)草果中分離鑒定出35種組分，占色譜總面積的95.77%，其中3，7-二甲基-2，6-辛二烯醛的含量最高，占18.43%，其次是2-癸烯醛占16.4%，桉油精占15.4%，檸檬醛占10.84%，相對(duì)含量較高的還有反-2-十二烯醛占9.41%，橙花叔醇占3.98%，α-松油醇占3.39%，2-甲基-3-苯基-2-丙烯醛占3.05%等。

3 討論

云南省是我國(guó)草果的主產(chǎn)區(qū)，主要分為三個(gè)片區(qū)：一是紅河片區(qū)，其中綠春、金平、屏邊和元陽(yáng)縣等地是主產(chǎn)區(qū)；二是滇西片區(qū)，包括保山、德宏和怒江州等地，以及臨界的緬甸八莫一帶，其中盈江和騰沖等地是主產(chǎn)區(qū)；三是文山片區(qū)，馬關(guān)縣到麻栗坡縣一帶是主產(chǎn)區(qū)。年產(chǎn)草果6 000 t到10 000 t。因不同產(chǎn)地氣候環(huán)境和土壤及管理?xiàng)l件不同，草果質(zhì)量差異較大。不同產(chǎn)地草果的物理性狀有較大差異，瑞麗市的草果長(zhǎng)、寬、10粒重都是最大的，麻栗坡縣、馬關(guān)縣的草果長(zhǎng)、寬都較小，10粒重較輕。羅曉霞[15]在報(bào)道中指出，果實(shí)長(zhǎng)橢圓形，靠果梗端短略小，具鈍三棱，長(zhǎng) 2.1～3.8 cm，直徑 1.5～2.3 cm，這與本文的研究結(jié)果有所不同，原因在于本研究測(cè)定的為草果鮮果，草果干燥后體型會(huì)明顯縮小。

雷恩等[16]研究表明梭形草果的單個(gè)小果重較高，為3.42 g；而橢圓形較低，為2.94 g。橢圓形草果果干重比最小，為19.9；而圓形和梭形的干重比表現(xiàn)較大。梭形草果干果長(zhǎng)度最大，為3.6 cm；其次是橢圓形；圓形最小，為2.9 cm。而3個(gè)栽培種的干果寬度卻無(wú)差異。梭形草果干果的長(zhǎng)寬比最大，為2.1；其次是橢圓形，為1.7；圓形表現(xiàn)最小，為1.4。這和本研究具有一定的一致性，同時(shí)也可以得出干果長(zhǎng)寬比是一個(gè)判斷或鑒別草果栽培種不同類型的有效的形態(tài)指標(biāo)。

不同產(chǎn)地草果揮發(fā)油的含量和成分均有差異，瑞麗市的草果精油含量最高，麻栗坡縣的精油含量最低，這可能與草果的種植環(huán)境、草果的形狀、大小、粒重有關(guān)，但是不同產(chǎn)地的草果揮發(fā)油的主要成分相似，2-癸烯醛、桉油精、3，7-二甲基-2，6-辛二烯醛、檸檬醛、反-2-十二烯醛的含量都比較高，其中2-癸烯醛的含量最高為20.59%，桉油精的含量最高為18.87%，3，7-二甲基-2，6-辛二烯醛的含量最高為18.43%，檸檬醛、反-2-十二烯醛在揮發(fā)油中也占有一定比重。云南紅河州綠春縣的草果精油中香葉醇的含量要比其他產(chǎn)地要高，占11.77%，和其他產(chǎn)地相比，云南紅河州綠春縣、怒江州貢山縣、云南文山州麻栗坡縣草果揮發(fā)油中的1-乙基丙基苯的含量高，分別占7.81%、9.36%和7.71%，香葉醇、橙花叔醇、2-甲基-3-苯基-2-丙烯醛、α-松油醇的含量相對(duì)較高。與前人的研究[17-25]相比較可以發(fā)現(xiàn)，桉油精在草果揮發(fā)油組分中均為主要成分。從化合物類型來(lái)看，在草果精油中，單萜類化合物（單萜和萜醇）為主要成分。此外，還含有倍半萜類化合物、醛類化合物、酯類化合物等。不同產(chǎn)地的草果葉中揮發(fā)油組成存在差異，以怒江州貢山縣獨(dú)龍江鄉(xiāng)、云南瑞麗的草果揮發(fā)油最為豐富。這種差異是否由草果種植環(huán)境差異所引起，有待進(jìn)一步證實(shí)。這些研究結(jié)果為草果的進(jìn)一步開發(fā)利用提供了科學(xué)依據(jù)。

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