張 坤 , 樊海平 , 張蕉南 , 胡 兵 , 邱曼麗 , 薛凌展 , 陳 斌 , 鐘全福
(1.福建天馬科技股份集團(tuán)股份有限公司,福建福州 350308;2.福建省特種水產(chǎn)配合飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,福建福州 350308;3.福建省淡水水產(chǎn)研究所,福建福州 350002)
大刺鰍(Mastacembelus aculeatus)主要分布于我國廣東、廣西、云南、海南以及福建等地的河流、湖泊中(林偉強(qiáng)等,2016),其肌肉中鮮味氨基酸總量超過青魚、草魚,肉味鮮美,無肌間刺,具有較高的營養(yǎng)價值和經(jīng)濟(jì)價值(Anu等,2013)。大刺鰍為底棲淡水魚類,主要捕食水生昆蟲、小魚、小蝦等小型無脊椎動物和水生植物(黃永春,1999),胃壁厚,腸道粗而短。目前,大刺鰍營養(yǎng)物質(zhì)的需求量及飼料配方研究應(yīng)用等鮮見報道,馴養(yǎng)主要使用水蚯蚓、冰鮮及鰻鱺配合飼料。
本文采用正交設(shè)計法,考察飼料中蛋白質(zhì)、蛋氨酸及脂肪不同含量水平對大刺鰍幼魚生長性能和形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響,篩選出大刺鰍幼魚適宜飼料配方,以期為大刺鰍配合飼料的研制和應(yīng)用提供依據(jù)。
1.1 試驗(yàn)材料及試驗(yàn)魚 試驗(yàn)用飼料、蛋氨酸及魚油均由福建省天馬科技集團(tuán)股份有限公司提供。飼料原料以全過100目篩,逐級混合均勻的魚粉及豆粕為主要蛋白源,以魚油為主要脂肪源,以預(yù)糊化淀粉作為黏合劑,另外添加少量維生素及礦物質(zhì)預(yù)混料。
試驗(yàn)魚為順昌縣兆興魚種養(yǎng)殖有限公司利用野生大刺鰍自繁育的同批次子一代苗種,經(jīng)浮游動物、水蚯蚓、鰻鱺配合飼料系列餌料培育至幼魚,平均體重和全長分別為 (8.63±0.23)g和(14.87±0.32)cm。挑選外表正常,健康的個體于直徑1.5 m的玻璃纖維桶中暫養(yǎng)2周,暫養(yǎng)期間24 h不間斷充氣,保證水體溶解氧穩(wěn)定,水源為經(jīng)充分曝氣24h以上的地下水,溫度維持26~28℃,每日分別于7∶00和16∶00投喂鰻鱺配合飼料2次,投餌量為魚體總重的2%,分別于投餌后1.5 h清污換水,日換水量40%左右,待魚體穩(wěn)定攝食后移至150 L玻璃缸中進(jìn)行正式試驗(yàn)。
1.2 試驗(yàn)設(shè)計 采用正交表L9(34)設(shè)計,以蛋白質(zhì)、蛋氨酸及脂肪含量為因素,設(shè)置3個水平,其中蛋白質(zhì)水平為44%、47%、50%,蛋氨酸水平為1.4%、1.7%、2.0%,脂肪水平為 4%、6%、8%,分別配制G1~G9共9組不同營養(yǎng)水平配合飼料 (表1)。9個處理組,每組放養(yǎng)36尾經(jīng)停食24 h的大刺鰍幼魚,每組設(shè)置2個重復(fù)。每天分別于7∶00、16∶00投餌,日投餌率為魚體總重的2.5%~3%。攝食結(jié)束1.5 h后虹吸排污,日換水量為70%,試驗(yàn)持續(xù)60 d,試驗(yàn)期間利用電加熱棒維持水溫為27~28℃,溶解氧≥6.0 mg/L,氨氮 <0.2 mg/L,亞硝酸鹽 <0.02 mg/L,pH 7.3±0.3。每日記錄飼料攝食量和死亡魚尾數(shù),每隔10 d每組隨機(jī)抽樣6尾大刺鰍稱重后調(diào)整飼料投喂量。
表1 配方飼料的正交試驗(yàn)設(shè)計表L9(34)
1.3 樣品采集與處理 試驗(yàn)結(jié)束前24 h停止投餌,稱量每組魚體總重后,每組隨機(jī)取6尾魚稱重并測定體長,然后在冰盤上進(jìn)行解剖,分離并稱量內(nèi)臟重、肝臟重和腸系膜脂肪重,生理鹽水分別沖洗肝臟和腸道,濾紙吸干后分別加入9倍體積(V/m)的預(yù)冷生理鹽水,冰水浴中勻漿制成10%組織液,3000 r/min離心10 min,取上清液保存待測。
1.4 指標(biāo)測定 生長性能采用增重率、特定生長率、蛋白質(zhì)效率和餌料系數(shù)表示;形態(tài)學(xué)指標(biāo)采用肥滿度、臟體比、肝體比、腸系膜脂肪體比表示。具體計算公式如下:
存活率/%=Nt/N0×100;
增重率/%=(Wt-W0)/W0×100;
特定生長率/%=(ln Wt-ln W0)/t×100;
蛋白質(zhì)效率=(Wt-W0)/WP;
餌料系數(shù)=F/(Wt-W0);
肥滿度/%=100×m/L3×100;
臟體比/%=100×mv/m×100;
肝體比/%=ml/m×100;
腸系膜脂肪體比/%=mi/m×100;
式中:Wt為試驗(yàn)結(jié)束時魚體質(zhì)量,g;W0為試驗(yàn)開始時魚體質(zhì)量,g;WP為蛋白質(zhì)攝入量,g;t為飼喂天數(shù),d;F為飼料攝食量,g;N0試驗(yàn)初始尾數(shù);Nt為試驗(yàn)?zāi)┪矓?shù);ml為肝臟重量,g/尾,mv為內(nèi)臟重量,g/尾,mi為腸系膜脂肪重量,g/尾;m 為魚體重量,g/尾;L 為魚體體長,cm/尾。
1.5 數(shù)據(jù)處理與分析 所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析,并進(jìn)行多重比較,P<0.05表示各組間差異顯著。直觀分析法及方差分析考察3種試驗(yàn)因素對大刺鰍幼魚增重率和餌料系數(shù)的影響,層次分析法(郭穗勛等,2004)考察試驗(yàn)因素各水平對增重率和餌料系數(shù)的影響權(quán)重。
2.1 飼料營養(yǎng)水平對大刺鰍幼魚生長性能的影響 結(jié)果見表2。試驗(yàn)期間大刺鰍幼魚攝食正常,存活率均超過97%,組間差異不顯著 (P>0.05)。 G7處理組試驗(yàn)魚的增重率(WGR)、特定生長率(SGR)和蛋白質(zhì)效率(PER)最大,分別為177.38%、1.65%和2.65%,其中WGR、SGR除與G9組差異不顯著外(P>0.05),與其余各處理組差異顯著(P<0.05),分別較其余處理組提高了8.09%~26.81%和5.45%~18.79%;PER較G4處理組顯著提高了26.79%(P<0.05),與其余各組差異不顯著(P>0.05)。G9處理組的餌料系數(shù)(FCR)最小,較G3處理組顯著降低了32.35%(P<0.05),與其余各組差異不顯著(P>0.05)。
表2 試驗(yàn)飼料營養(yǎng)水平對大刺鰍幼魚生長性能的影響
2.2 飼料營養(yǎng)水平對大刺鰍幼魚形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響 結(jié)果見表3。大刺鰍幼魚肥滿度(CF)及腸系膜脂肪比(IPF)受飼料中蛋白質(zhì)、蛋氨酸及脂肪添加水平影響不顯著(P>0.05)。G5處理組肝體 比 (HSI) 較 G4、G6、G8處 理 組 顯 著 增 大 了13.55%、11.68%、13.55%(P < 0.05),與其余各組差異不顯著(P>0.05)。 G9處理組臟體比(VSI)較G8處理組顯著升高了27.08%,除與G3處理組差異不顯著外(P>0.05),與其余各組差異顯著(P < 0.05)。
表3 試驗(yàn)飼料營養(yǎng)水平對大刺鰍幼魚形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響%
2.3 正交試驗(yàn)結(jié)果分析
2.3.1 直觀分析法 結(jié)果見表4。以增重率和餌料系數(shù)為考察指標(biāo),三種試驗(yàn)因素對大刺鰍幼魚增重率和餌料系數(shù)的極差 (R)值分別為24.21、10.87、5.81 和 0.17、0.08、0.02,R 值的主次順次為A(蛋白質(zhì))因素 >C(蛋氨酸)因素>B(脂肪)因素,因此試驗(yàn)因素中蛋白質(zhì)的含量是影響大刺鰍幼魚增重率的主要因素,其次為蛋氨酸含量,再者為脂肪含量。通過比較各因素水平間k值的大小得出,大刺鰍幼魚的飼料配方以A3B3C2為佳。
表4 試驗(yàn)飼料營養(yǎng)水平對大刺鰍幼魚生長的效應(yīng)分析(2個重復(fù))
2.3.2 方差分析法 結(jié)果見表5。以增重率為考察指標(biāo),蛋白質(zhì)對大刺鰍幼魚增重率影響極其顯著(P=0.000),其次是蛋氨酸含量(P=0.025),脂肪含量對大刺鰍幼魚增重率影響不顯著(P=0.233)。以餌料系數(shù)為考察指標(biāo),3種飼料主要成分均對大刺鰍幼魚餌料系數(shù)影響顯著 (P<0.05)。因模型誤差同試驗(yàn)誤差顯著差異(P<0.05),說明試驗(yàn)因素間存在交互作用,進(jìn)行各因素水平間的多重比較無實(shí)際意義,為尋求最優(yōu)水平組合,需進(jìn)行試驗(yàn)各處理組間的多重比較。
2.3.3 層次分析法 結(jié)果見表6。以增重率和餌料系數(shù)為考察指標(biāo),試驗(yàn)因素不同水平對大刺鰍幼魚增重率和餌料系數(shù)的影響權(quán)重最大的分別是A3、B3和C2,各因素的主次順序由各水平影響權(quán)重之和的大小決定,增重率各因素水平權(quán)重之和分別為 A:0.592,B:0.183,C:0.265;餌料系數(shù)各因素 水 平 權(quán) 重 之 和 分 別 為 A:0.613,B:0.077,C:0.311。因此主次順序?yàn)锳>C>B,試驗(yàn)最優(yōu)處理組合為A3B3C2,與直觀分析法一致。
表5 試驗(yàn)飼料營養(yǎng)水平對大刺鰍幼魚生長的方差分析(2個重復(fù))
表6 試驗(yàn)飼料營養(yǎng)水平對大刺鰍幼魚生長的層次分析
配合飼料具有營養(yǎng)全面均衡、利用效率高、安全方便、便于儲存等優(yōu)點(diǎn),是大刺鰍養(yǎng)殖業(yè)規(guī)?;?、集約化、標(biāo)準(zhǔn)化和產(chǎn)業(yè)化的物質(zhì)基礎(chǔ),其質(zhì)量決定了大刺鰍養(yǎng)殖效益和產(chǎn)品質(zhì)量與安全(宋青春,2009)。然而有關(guān)大刺鰍的營養(yǎng)生理、代謝規(guī)律、營養(yǎng)需求及有害物質(zhì)的危害量等研究及其系列配合飼料研發(fā)仍處于起步階段,因此優(yōu)化大刺鰍幼魚飼料配方,對大刺鰍養(yǎng)殖業(yè)具有重要意義。
以增重率、餌料系數(shù)為考察指標(biāo),蛋白質(zhì)的的含量對養(yǎng)殖效果影響最大,其次是蛋氨酸含量,而脂肪含量的養(yǎng)殖效果影響差異不顯著;以形態(tài)學(xué)指標(biāo)為考察指標(biāo),3種飼料中主要營養(yǎng)成分均對大刺鰍幼魚肥滿度、腸系膜脂肪比重影響不顯著,這與奧尼羅非魚(林仕梅等,2008)、大菱鲆(魏玉婷,2010)等研究結(jié)果一致。在9種飼料配方中,養(yǎng)殖生長性能各項(xiàng)指標(biāo)最好的是G7處理組,即50%蛋白質(zhì)、4%脂肪和3%蛋氨酸,而餌料系數(shù)最低的為G9處理組,即50%蛋白質(zhì)、8%脂肪和1.7%蛋氨酸,這表明在一定范圍內(nèi),提高脂肪含量有利于節(jié)約蛋白質(zhì)。但此含量是否已達(dá)“上限”,繼續(xù)提高蛋白質(zhì)和脂肪含量,大刺鰍幼魚生長性能是否會更好,還有待于進(jìn)一步研究。本研究馴食轉(zhuǎn)料的幼鰻配合飼料3種主要營養(yǎng)成分分別為粗蛋白質(zhì)45%,蛋氨酸1.4%,粗脂肪4%,與正交試驗(yàn)粗蛋白質(zhì)50%,蛋氨酸1.7%,粗脂肪8%的優(yōu)化組合相比,粗蛋白質(zhì)、蛋氨酸和粗脂肪水平均有所降低。飼喂結(jié)果顯示投喂幼鰻飼料大刺鰍幼魚生長速度、餌料系數(shù)等指標(biāo)較優(yōu)化組合飼料差,表明大刺鰍幼魚對蛋白、蛋氨酸和脂肪需求量大于幼鰻。
研發(fā)優(yōu)質(zhì)配合飼料的基礎(chǔ)之一是營養(yǎng)需求的研究,魚類的營養(yǎng)需求包括蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、碳水化合物、維生素和礦物質(zhì)等多種因子,且各營養(yǎng)成分的種類和含量及各因子間的相互作用均對水產(chǎn)動物產(chǎn)生影響,只有將多種飼料成分相配合才能滿足水產(chǎn)動物的生理需求 (王曉娟等,2010)。良好的大刺鰍配合飼料配方,一方面要以大刺鰍營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)為理論依據(jù),運(yùn)用大刺鰍營養(yǎng)調(diào)控理論與技術(shù),提高飼料的誘食性及其消化吸收率,增進(jìn)大刺鰍免疫力,充分滿足大刺鰍生長與繁殖的需要,另一方面又要考慮大刺鰍養(yǎng)殖模式及季節(jié)和地區(qū)的差異,并根據(jù)大刺鰍種類、規(guī)格及養(yǎng)殖過程出現(xiàn)的各種具體情況作出適當(dāng)?shù)卣{(diào)整,以開發(fā)出安全高效環(huán)境友好型大刺鰍配合飼料(何志剛等,2010)。本研究僅設(shè)計蛋白質(zhì)、蛋氨酸和脂肪3因素3水平正交試驗(yàn),且經(jīng)方差分析表明3種因素間存在交互作用,因此開展維生素、礦物鹽及不同種類、質(zhì)量蛋白源等對魚體的影響研究,對大刺鰍飼料配方的進(jìn)一步優(yōu)化具有積極意義。
本試驗(yàn)應(yīng)用平均體質(zhì)量為(8.63±0.23)g的大刺鰍幼魚,采用正交表L9(34)設(shè)計9組不同蛋白質(zhì)、蛋氨酸及脂肪含量水平的配合飼料,以增重率和餌料系數(shù)作為生長評定指標(biāo),結(jié)果表明,飼料中蛋白質(zhì)水平、蛋氨酸及脂肪含量水平對大刺鰍幼魚的WGR和FCR影響顯著;對肥滿度、臟體比、肝體比和腸系膜脂肪比影響不顯著。大刺鰍幼魚配合飼料中適宜蛋白質(zhì)、蛋氨酸及脂肪含量分別為50%、1.7%和8%。
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