劉東霞 李富偉 北京科為博生物科技有限公司 100081

鄭瑞峰 王玉田 潘興亮 北京市畜牧總站 100029

屎腸球菌是農(nóng)業(yè)部允許使用的微生物飼料添加劑，由于其具有許多優(yōu)點(diǎn)，因此在乳仔豬飼料中廣泛應(yīng)用。首先，屎腸球菌屬于兼性厭氧菌，抗逆性相對較強(qiáng)；其次屎腸球菌在動(dòng)物腸道可以正常定植，且生長代謝快、粘附能力強(qiáng)，腸道有益菌群中屎腸球菌占8%～16%；最后，屎腸球菌可產(chǎn)生益生抑菌物質(zhì)，增強(qiáng)機(jī)體免疫力。屎腸球菌在體內(nèi)發(fā)酵糖類，產(chǎn)生大量的乙酸和乳酸，使腸道內(nèi)的pH和氧化還原電位值Eh下降[1]。相對而言，糞腸球菌抑菌范圍較窄，屎腸球菌抑菌范圍較寬，除了對致病型腸球菌還對李斯特菌屬、梭狀芽孢菌屬及丙酸桿菌屬都具有抑制作用。但屎腸球菌的耐熱性較差，在飼料加工過程中低溫制粒及二次制粒中存活率較低。

本試驗(yàn)以北京科為博研究所自主研發(fā)的耐熱型屎腸球菌產(chǎn)品為研究對象，通過在乳仔豬飼糧中添加，探討其對乳仔豬生產(chǎn)性能和腹瀉率的影響。

1 材料與方法

（1）試驗(yàn)材料。試驗(yàn)用耐熱型屎腸球菌由北京科為博研究院研制并提供，有效活菌數(shù)為123×108CFU/g。

（2）試驗(yàn)動(dòng)物與設(shè)計(jì)。試驗(yàn)采用單因子設(shè)計(jì)，選取80 頭（30±2）日齡，平均體重為（8.17±0.05）kg 的杜×長×大三元雜交斷奶仔豬，按體重、性別和胎次基本一致原則分為2個(gè)處理組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10頭仔豬（公、母各半），每個(gè)重復(fù)為1欄。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中添加0.05%的屎腸球菌。試驗(yàn)期40天。兩組仔豬日糧組成和營養(yǎng)水均相同，參照 NRC（2012）設(shè)計(jì)基礎(chǔ)日糧（表 1）。

表1 日糧組成及營養(yǎng)水平（%，基礎(chǔ)日糧）

（3）飼養(yǎng)管理。試驗(yàn)前充分沖洗和嚴(yán)格消毒豬圈。試驗(yàn)期間每天喂料5次，以食槽略剩料為原則。試驗(yàn)仔豬在漏縫地面上飼養(yǎng)，自由采食、自由飲水。圈舍自然通風(fēng)，定期打掃，常規(guī)接種免疫，試驗(yàn)期為40天。

（4）指標(biāo)測定及方法。①生產(chǎn)性能。試驗(yàn)全程以重復(fù)（欄）為單位記錄采食量，分別于試驗(yàn)第1天和第41天早上08∶00點(diǎn)對空腹仔豬稱重，計(jì)算每頭仔豬的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。具體計(jì)算方法如下：平均日增重(ADG，kg/天)=欄總增重/（欄仔豬數(shù)×試驗(yàn)天數(shù)）；平均日采食量(ADFI,kg/天)=欄飼糧總消耗量/（欄仔豬數(shù)×試驗(yàn)天數(shù)）；料重比(F/G)=ADFI/ADG。

②腹瀉率。試驗(yàn)期間每天09∶00觀察仔豬糞便，并做好記錄。腹瀉率（DR，%）={（每欄仔豬腹瀉頭數(shù)×腹瀉天數(shù)）/（每欄仔豬總數(shù)×試驗(yàn)天數(shù)）}×100%。

③血液生化指標(biāo)。試驗(yàn)第41天09∶00，每個(gè)組每個(gè)重復(fù)選1頭接近平均體重的仔豬，前腔靜脈采血15mL，分裝成2管，常溫下靜置30分鐘，3500r/分鐘、4℃離心10分鐘，分別制備血清及血漿，取上清分裝于EP管中，-20℃保存，IgA、IgG、IgM含量的測定采用南京建成生物研究所的試劑盒。

（5）數(shù)據(jù)處理與分析。采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行顯著性方差分析，用LSD法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果

（1）屎腸球菌對斷奶仔豬生長性能的影響。由表2可知，試驗(yàn)組日增重顯著高于對照組（P＜0.05），試驗(yàn)組日增重比對照組高了6.78%；兩組日采食量和料重比均無顯著差異（P＞0.05）。

表2 屎腸球菌對斷奶仔豬生長性能的影響

（2）屎腸球菌對斷奶仔豬腹瀉率的影響。由表3可知，試驗(yàn)組腹瀉率、大腸桿菌均顯著低于對照組（P＜0.05），試驗(yàn)組乳酸桿菌顯著高于對照組（P＜0.05）。

表3 屎腸球菌對斷奶仔豬腹瀉率的影響

（3）屎腸球菌對斷奶仔豬免疫功能的影響。由表4可知，對照組和試驗(yàn)組差異不顯著（P＞0.05），但試驗(yàn)組有提高斷奶仔豬免疫力的趨勢。

表4 屎腸球菌對斷奶仔豬免疫功能的影響

3 討論

（1）屎腸球菌替代抗生素對斷奶仔豬生長性能的影響。仔豬早期斷奶極易引發(fā)機(jī)體腸道菌群失調(diào)，產(chǎn)生腹瀉和生長停滯等斷奶應(yīng)激綜合癥，影響經(jīng)濟(jì)效益[2]。屎腸球菌可在仔豬腸道內(nèi)定植，一方面有助于對飼糧中營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收和利用；另一方面，屎腸球菌進(jìn)入腸道內(nèi)能與致病菌競爭，抑制有害菌的繁殖，調(diào)整胃腸道菌群平衡[3]。吳忠良[4]報(bào)道，在仔豬出生早期飼喂乳酸桿菌有明顯的促生長效果，但隨著時(shí)間的推移這種效果逐漸降低，斷奶后第1周飼喂乳酸桿菌對生長速度已無顯著影響。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，日糧中添加屎腸球菌可提高仔豬的生產(chǎn)性能，而且日增重顯著高于對照組。這與劉虎傳等[5]所研究的在仔豬飼糧中添加含有屎腸球菌的益生菌制劑可以增加仔豬ADG，降低F/G的結(jié)果是一致的。

（2）屎腸球菌對斷奶仔豬腹瀉率的影響。仔豬早期斷奶易引起優(yōu)勢菌群更替,專性厭氧菌減少,兼性厭氧菌中大腸桿菌增加,而腸毒性大腸桿菌是導(dǎo)致仔豬腹瀉的一個(gè)重要原因。腸毒性大腸桿菌的增殖,導(dǎo)致pH值和氧化還原電勢迅速上升,腸毒性大腸桿菌大量繁殖的同時(shí)產(chǎn)生毒素,毒素刺激腸細(xì)胞,致使腸細(xì)胞分泌機(jī)能亢進(jìn),腸蠕動(dòng)增強(qiáng)而產(chǎn)生腹瀉,病理變化主要在小腸[6]。添加乳酸菌類微生態(tài)制劑可以有效地促進(jìn)有益菌的增殖，減少有害細(xì)菌的數(shù)量，從而保持腸道菌群平衡[7]。侯成立等[8]研究表明，斷奶仔豬飼糧中添加植物乳桿菌制劑能夠顯著增加糞中乳酸桿菌活菌數(shù)，并顯著降低大腸桿菌數(shù)量。Zhang等[9]研究表明，通過飼喂鼠李糖乳桿菌可以顯著降低仔豬糞便中大腸桿菌數(shù)量，顯著增加乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量。本試驗(yàn)結(jié)果表明：用發(fā)酵飼料替代抗生素后，斷奶仔豬腹瀉發(fā)生率顯著低于對照組，而且用10%發(fā)酵飼料全部替代抗生素組效果最好。

（3）屎腸球菌對斷奶仔豬免疫指標(biāo)的影響。血清中IgA、IgG、IgM水平可有效反映機(jī)體的免疫機(jī)能[10,11]。免疫球蛋白分為不同的種類，其中IgA可以阻止病原體吸附到黏膜表面，從而抵擋微生物的侵襲；IgM是B細(xì)胞最早產(chǎn)生的免疫球蛋白分子，是初次免疫應(yīng)答的主要抗體;IgG是體液免疫應(yīng)答產(chǎn)生的主要抗體，在抗細(xì)菌、抗病毒等防御機(jī)制中起著重要作用。王永等[12]研究表明，在仔豬日糧中添加0.05%的屎腸球菌，可提高斷奶仔豬抗應(yīng)激及免疫能力。本試驗(yàn)研究結(jié)果是，添加0.05%屎腸球菌，有提高斷奶仔豬免疫蛋白含量的作用，但差異不顯著（P＞0.05）。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)條件下，在基礎(chǔ)日糧中添加0.05%屎腸球菌，其日增重均顯著高于對照組，腹瀉率和大腸桿菌數(shù)顯著低于對照組（p＜0.05），乳酸桿菌顯著高于對照組（p＜0.05），IgA、IgG 和 IgM 含量差異不顯著（p＞0.05），但試驗(yàn)組含量有高于對照組的趨勢。

參考文獻(xiàn)：

[1]文靜，孫建安，周緒霞，等.屎腸球菌對仔豬生長性能、免疫和抗氧化功能的影響［J］.浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011(1):70-73.

[2]FRYDENDAHL K.Prevalence of serogroups and virulence genesin Escherichia coliassociated with postw eaning diarrhoea and edema disease in pigsand acomparison of diagnostic approaches ［J］.Veterinary Microbiology，2002，85(2):169-182.

[3]王婷婷，綦文濤，易建明，等.微膠囊化屎腸球菌及其特性研究［J］.中國畜牧雜志 2009,45(21):52-55.

[4]吳忠良，張瑞峰，王金義，等.乳酸桿菌對早期斷乳仔豬生產(chǎn)性能的影響［J］.畜牧獸醫(yī)雜志 2005，24(1):27-30.

[5]劉虎傳，張敏紅，馮京海，等.益生菌制劑對早期斷奶仔豬生長性能和免疫指標(biāo)的影響［J］.動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2012，24(6):1124－1131.

[6]禹慧明,廖玲,陳平潔,等.斷奶仔豬腸道菌群的研究[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志,2000,12(2):81-82.

[7]王前光，高惠林，劉秋.微生態(tài)制劑的研究進(jìn)展及其在養(yǎng)豬生產(chǎn)上的應(yīng)用［J］.飼料廣角,2010(24):45-46.

[8]侯成立，季海峰，周雨霞，等.植物乳桿菌對斷奶仔豬生產(chǎn)性能和生化指標(biāo)的影響［J］.飼料研究，2011(12):14-16.

[9]ZHANG L，XU Y Q，LIU H Y，et al.Evaluation ofLactobacillus rhamnosus GG using an Escherichia coli K88 model of piglet diarrhoea:effects on diarrhoea incidence，faecal microflora and immune responses ［J］.Veterinary Microbiology，2010，141:142-148.

[10]潘寶海，張建東，石現(xiàn)瑞，等.仔豬日糧中合生素替代抗生素的研究［J］.飼料研究，2007，(3):58-60.

[11]溫建新，王華友，李煥明.乳酸菌L-68型屎腸球菌對肉雞免疫功能的影響［J］.山東畜牧獸醫(yī)，2008，29(6):4-6.

[12]王永，楊維仁，張桂國.飼糧中添加屎腸球菌對斷奶仔豬生長性能、腸道菌群和免疫功能的影響 ［J］.動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，25(5)：1069-1076.