王運(yùn)雷，張 輝

（吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院，吉林 吉林 132109）

馬鈴薯糖苷生物堿存在于馬鈴薯的莖葉、皮、塊莖中，國(guó)內(nèi)外的研究表明其對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)都存在毒性的同時(shí)也存在著藥用價(jià)值［1］。 其對(duì)癌細(xì)胞有抑制作用［2-5］，抗真菌、病毒等病原微生物［6-8］，作為疫苗的免疫佐劑能夠使細(xì)胞的免疫反應(yīng)增強(qiáng)，能夠降低膽固醇、低密度脂蛋白，還有消炎、活血、鎮(zhèn)痛的作用［9-10］。該文對(duì)馬鈴薯皮、馬鈴薯渣、馬鈴薯塊莖中α-茄堿的含量進(jìn)行了測(cè)定，以期為馬鈴薯淀粉渣等馬鈴薯副產(chǎn)品作為飼料的應(yīng)用提供了試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

α-茄堿，為上海源葉生物科技有限公司生產(chǎn)；馬鈴薯，產(chǎn)地為吉林。

1.2 試驗(yàn)儀器

圖1 α-茄堿的標(biāo)準(zhǔn)曲線

臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)，型號(hào)為SORVALL MICRO 21R，生產(chǎn)廠家為德國(guó)Thermo；紫外分光光度計(jì)，型號(hào)為L(zhǎng)8，生產(chǎn)廠家為上海儀電分析儀器有限公司；磁力攪拌器，型號(hào)為99-3，生產(chǎn)廠家為金壇市華城開(kāi)元實(shí)驗(yàn)儀器廠；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，型號(hào)為Value-G3，生產(chǎn)廠家為德國(guó)Heidolph；超凈工作臺(tái)，型號(hào)為ACB-4A1，生產(chǎn)廠家為藝思高科技有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 乙醇—乙酸法提取α-茄堿：①分別稱量馬鈴薯皮、馬鈴薯渣、馬鈴薯塊莖各20 g，加入100 mL的乙醇（體積分?jǐn)?shù)95%）和30 mL的乙酸，用磁力攪拌器攪拌15 min，之后過(guò)濾［11］。②將濾液放進(jìn)索氏脂肪提取器的稱脂瓶，用濾紙包住濾渣，用線纏住，放進(jìn)索氏脂肪抽提器的抽提管里，在溫度為55～65℃條件下進(jìn)行水浴抽提16 h后，冷卻、過(guò)濾，之后把剩下的乙醇倒進(jìn)蒸發(fā)皿里，把乙醇揮發(fā)掉［11］。 ③取 30 mL 5%的 H2SO4把殘?jiān)芙?，然后過(guò)濾，收集濾液，再用濃氨水來(lái)調(diào)節(jié)pH值至10.0～10.5 左右，冷卻，在冰箱里過(guò)夜［11］。 ④4 ℃下，5 000 r/min離心，之后去掉上清液，用1%的氨水去洗滌，再進(jìn)行離心，再洗滌，直至洗滌液澄清，再離心，所得沉淀則是 α-茄堿的粗提品［11］。1.3.2 α-茄堿含量的測(cè)定

1.3.2.1 α-茄堿標(biāo)準(zhǔn)曲線：精確稱取5 mg α-茄堿的標(biāo)準(zhǔn)品，用1%的H2SO4溶解，移入50 mL的容量瓶里邊，隨后加1%的H2SO4溶液至刻度，搖勻，制備α-茄堿標(biāo)準(zhǔn)溶液。

分別量取 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL 標(biāo)準(zhǔn)溶液，用體積分?jǐn)?shù)為1%的H2SO4稀釋到2 mL，在冰浴里慢慢加入5 mL的H2SO4放置1 min，同樣在冰浴中滴加2.5 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的甲醛，放置90 min后，于波長(zhǎng)為530 nm下測(cè)定各濃度標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度。

以α-茄堿含量作為橫坐標(biāo)，吸光度作為縱坐標(biāo)，繪制α-茄堿的標(biāo)準(zhǔn)曲線。α-茄堿的標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y=0.7957X+0.0111，R2=0.9366。詳細(xì)情況見(jiàn)圖1。

1.3.2.2 樣品的測(cè)定：把α-茄堿粗提品用1%的H2SO4溶解，然后定容到10 mL。稱量2 mL的溶解液，然后按照制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的操作步驟進(jìn)行操作，在520 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，計(jì)算α-茄堿的含量［12］。

α-茄堿含量的計(jì)算公式：

X=ρ×V×50/m

X：100 g樣品中含有 α-茄堿的量（mg/100 g）；ρ：測(cè)定結(jié)果相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)濃度（mg/mL）；V：樣品提取之后定容體積（mL）；m：樣品量（g）。

1.3.3 加標(biāo)法測(cè)定α-茄堿回收率：取已測(cè)定了α-茄堿含量的樣品，加入一定質(zhì)量的α-茄堿標(biāo)準(zhǔn)品，用乙醇—乙酸法提取，按樣品測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算其回收率。

α-茄堿回收率的計(jì)算公式：

Y=（m2-m3）/m1×100%

Y：α-茄堿的回收率（%）；m1：加入 α-茄堿標(biāo)準(zhǔn)品的量（g）；m2：加標(biāo)試樣的測(cè)定值（g）；m3：試樣的測(cè)定值（g）

2 結(jié)果與討論

由表1可知，馬鈴薯的不同部位所含有的α-茄堿的量不同，馬鈴薯皮比馬鈴薯塊莖中的α-茄堿含量高，α-茄堿含量依次為馬鈴薯皮＞馬鈴薯渣＞馬鈴薯塊莖（肉）。

表1 馬鈴薯皮、渣、塊莖中α-茄堿含量 mg/kg

由表2可知，加標(biāo)法測(cè)定的回收率平均值為92.33%，表明用乙醇—乙酸法提取、測(cè)定α-茄堿含量的結(jié)果真實(shí)、可靠。

目前關(guān)于馬鈴薯中α-茄堿的提取方法一般采用乙醇—乙酸法，含量的測(cè)定采用的比色法，所用的儀器設(shè)備和操作都比較簡(jiǎn)單，而且結(jié)果真實(shí)可靠，是普遍采用的方法。

3 小結(jié)

該試驗(yàn)提取馬鈴薯α-茄堿所用的乙醇—乙酸法，簡(jiǎn)便、快速、操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。α-茄堿含量依次為馬鈴薯皮＞馬鈴薯渣＞馬鈴薯塊莖（肉），總平均回收率為92.33%。

表2 馬鈴薯皮、渣、塊莖中α-茄堿回收率

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