付至江 高 云 張 偉 劉宗超， 張華文 劉世貴 黃陳翼 高 銀 高海明

1.西南醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院骨科，瀘州，646000，中國

2.西南醫(yī)科大學(xué)人體解剖學(xué)教研室，瀘州，646000，中國

3.西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科、核醫(yī)學(xué)與分子影像四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，瀘州，646000，中國

4.西南醫(yī)科大學(xué)司法鑒定中心，瀘州，646000，中國

5.西南醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院影像科，瀘州，646000，中國

隨著生活節(jié)奏的逐步加快，精神壓力的逐漸增加，抑郁癥（depression）的發(fā)病率逐年升高，有研究證實(shí)普通人群的患病率高達(dá)20%。抑郁癥是一種危害健康且容易復(fù)發(fā)的心理障礙，給患者的心理和生理健康帶來嚴(yán)重的傷害［1-2］。研究表明抑郁癥會(huì)對人的消化、免疫及神經(jīng)系統(tǒng)等機(jī)能產(chǎn)生影響，甚至?xí)斐蓢?yán)重的損傷［3］。就骨代謝方面，抑郁癥患者的骨形成代謝指標(biāo)與骨吸收代謝指標(biāo)較正常人均有顯著改變，容易導(dǎo)致骨質(zhì)疏松［4］，但抑郁癥是否會(huì)影響骨折愈合，通過何種機(jī)制影響骨折愈合，尚無文獻(xiàn)報(bào)道。

抑郁癥患者由于精神壓力導(dǎo)致全身各分泌系統(tǒng)異常，進(jìn)而影響骨折愈合所需的細(xì)胞及介質(zhì)，而必然會(huì)影響骨折愈合。本課題前期研究結(jié)果表明抑郁癥患者骨折愈合時(shí)間明顯較無抑郁癥同類別患者延緩。因此，科學(xué)的假設(shè)抑郁癥患者在骨折愈合過程中存在一些機(jī)制導(dǎo)致骨折愈合與正常愈合差異。本課題建立抑郁癥和正常大鼠脛骨中上1/3骨折模型，通過觀察大鼠血清鈣、磷、堿性磷酸酶（Ca、P、ALP）濃度，脛骨DR骨痂量，HE染色，脛骨三點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn)，Micro-CT骨痂體積等指標(biāo)，探討抑郁癥影響大鼠骨折愈合的現(xiàn)象，進(jìn)一步探索抑郁癥延緩骨折愈合的機(jī)制，為臨床抑郁癥患者的骨折治療提供新的思路及方法。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

8月齡SD大鼠300只，♀，清潔級(jí)，體質(zhì)量（242.6±11.2） g，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK（川）2013-065，由西南醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑

Ca、P、ALP測定試劑盒，購自邁瑞醫(yī)療；注射用青霉素鈉，批號(hào)：B170413，購自魯抗制藥股份有限公司；水合氯醛，購自上海凜恩科技發(fā)展有限公司。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

AG-1S型電子萬能力學(xué)實(shí)驗(yàn)機(jī)，日本島津制作所；BS生化分析儀，邁瑞醫(yī)療；數(shù)字化X射線影像（digital X-ray image，DR），西門子；Micro PET-CT，西門子。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)分組

將大鼠首先進(jìn)行蔗糖水偏好實(shí)驗(yàn)（sucrose preference test）和曠場實(shí)驗(yàn)（open field test），得到行為學(xué)評分，從中篩選出得分均一的大鼠220只，將大鼠隨機(jī)分為手術(shù)對照組（A組）100只，假手術(shù)組（B組）20只和抑郁癥組（C組）100只。C組采用孤籠結(jié)合飼養(yǎng)，每天給予1種刺激，總周期28 d。A、B組保持在正常飼養(yǎng)條件下，每籠4只，不遭受任何刺激。

1.2.2 抑郁癥動(dòng)物模型構(gòu)建

大鼠100只，分為5組，每組20只，抑郁癥動(dòng)物給予不可預(yù)知的慢性應(yīng)激性刺激。第一組：強(qiáng)迫游泳30 min·d-1，可調(diào)節(jié)電擊器電擊足底，共30次；第二組：4℃冰水游泳5 min，電吹風(fēng)45℃熱刺激5 min；第三組：血管鉗夾尾1 min，鋸尾根，禁水禁食12 h；第四組：晝夜顛倒，白天用黑色遮光布蓋住鼠籠，夜里用200 W白熾燈照射，一燈六籠，每天搖晃鼠籠5次，每次5 min；第五組：潮濕墊料，每天傾斜鼠籠12 h。每組大鼠每天隨機(jī)以上五組刺激，針對同一組大鼠的相同刺激間隔時(shí)間≥48 h。刺激后每周行抑郁癥評價(jià)測試，包括蔗糖水偏好實(shí)驗(yàn)、曠場實(shí)驗(yàn)。

1.2.3 蔗糖水偏好實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)前對大鼠進(jìn)行適應(yīng)蔗糖水訓(xùn)練，每籠同時(shí)放置2個(gè)水瓶，第1個(gè)24 h，2瓶均盛1%蔗糖水。第二個(gè)24 h，一個(gè)瓶盛l%蔗糖水，另一個(gè)瓶盛純水。隨后對大鼠禁食、水24 h，每只大鼠給予已稱量好的2瓶水，一瓶1%蔗糖水，一瓶純水。1 h后，取2瓶水稱量。每周1次。

1.2.4 曠場實(shí)驗(yàn)

將動(dòng)物置入80 cm×80 cm×40 cm周壁、箱底為黑色的箱內(nèi)，且其底面由25塊相等的16 cm×16 cm正方形組成，以白線劃分。將動(dòng)物放入正中央格后開始測定，每次測定5 min，測試過程采用攝像機(jī)記錄，每只大鼠只進(jìn)行一次行為測定。根據(jù)動(dòng)物穿越底面方格塊數(shù)作為水平活動(dòng)（distance traveled）得分，以直立（雙足離地）次數(shù)作為垂直活動(dòng)（standing uptight）得分，水平和垂直活動(dòng)得分總和為總評分。測定完畢，糞便清理干凈后，用75%酒精擦拭干凈箱底，再進(jìn)行下一只測定，采用單盲法，每周測定1次。

1.2.5 骨折動(dòng)物模型建立

手術(shù)對照組（A組）和抑郁癥組（C組）動(dòng)物均在10%水合氯醛按3 mL·kg-1腹腔麻醉下，于一側(cè)脛骨中段建立骨折模型，以直徑1 mm克氏針?biāo)鑳?nèi)固定，假手術(shù)組（B組）僅給予相同的手術(shù)，但不建立骨折模型。術(shù)后肌注青霉素4萬U·d-1，連續(xù)7 d，分籠飼養(yǎng)。抑郁癥組動(dòng)物每天給與可預(yù)知的慢性應(yīng)激性刺激，每周進(jìn)行蔗糖水偏好實(shí)驗(yàn)測試，檢測大鼠抑郁情況是否存在。

1.2.6 血清Ca、P、ALP含量檢測

各組于慢性應(yīng)激刺激后28 d后8 h行手術(shù)，術(shù)后7 d、14 d、21 d行大鼠尾靜脈抽血，將血清標(biāo)本用Ca、P、ALP邁瑞測試盒測定大鼠血清中Ca、P、ALP含量。具體操作步驟如下：選擇610 nm、520 nm的酶標(biāo)儀、試管、微量移液器、漩渦混運(yùn)器氣浴箱等設(shè)備。按照試劑盒說明書將10 μL大鼠血清置于測定孔中，測試吸光度（absorbance，A）值，然后按測試盒說明書給出的公式計(jì)算出血清中Ca、P、ALP含量。

1.2.7 影像學(xué)檢測

術(shù)后d 14、d 28、d 56，A組和C組每只大鼠的雙后肢在同樣的外展位攝正位和側(cè)位X線片，測量采用DR閱片的影像歸檔和通信系統(tǒng)（picture archiving and communication systems，PACS），攝片和測量由兩位醫(yī)生按照雙盲原則進(jìn)行測定。骨痂體積測量采用Perkins法，即V=2πr1（r2-r1） L，其中，r1為骨半徑，r2為骨痂半徑，L為骨痂長度。

1.2.8 病理組織學(xué)檢測

于術(shù)后d 14、d 28、d 56分別處死A組和C組大鼠各5只，取出脛骨標(biāo)本各5根，立即剖取骨折部骨外膜骨痂和骨折端連接骨痂（非骨折組取相同部位），修剪成1 cm×1 cm大小標(biāo)本，置于10%中性福爾馬林液中固定，石蠟包埋，進(jìn)行HE染色。光學(xué)顯微鏡下觀察其病理學(xué)改變。

1.2.9 生物力學(xué)檢測

分別于術(shù)后d 35和d 56處死A組和C組各10只，取出脛骨標(biāo)本各10根，將脛骨標(biāo)本置放于跨距15 mm的萬能材料實(shí)驗(yàn)機(jī)的兩個(gè)支點(diǎn)上進(jìn)行三點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn)。加載速5 mm·min-1，加載載荷為500 N，由儀器自動(dòng)記錄每次加載后產(chǎn)生的位移，計(jì)算機(jī)自動(dòng)處理各組大鼠脛骨的測量值。

1.2.10 Micro CT

術(shù)后d 28、d 56隨機(jī)處死A組和C組各10只大鼠，取脛骨骨折段行micro CT檢測。骨標(biāo)本水平放于樣品架中，設(shè)定電壓80 kV和電流500 μA。選擇骨折線上下各5 mm區(qū)域進(jìn)行掃描。分析指標(biāo)包括骨小梁厚度、骨體積分?jǐn)?shù)、骨表面積體積比、骨小梁數(shù)量和骨小梁間距，其中骨小梁厚度、骨體積分?jǐn)?shù)、骨小梁數(shù)量為正向成骨指標(biāo)，骨小梁間距和骨表面積體積比為負(fù)向指標(biāo)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間差異顯著性的比較采用單因素方差分析或t檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 蔗糖水偏好指數(shù)

慢性應(yīng)激性刺激前及刺激后d 7、d 14，A、B、C組大鼠蔗糖偏好指數(shù)差異無顯著性；刺激 21 d，C組大鼠蔗糖偏好指數(shù)下降（P＜0.05）；刺激28 d，C組大鼠蔗糖偏好指數(shù)顯著下降（P＜0.01）（Tab.1）（A、B組合為非抑郁組）；術(shù)后各周C組大鼠蔗糖偏好指數(shù)顯著下降（P＜0.01）（Tab.2）。

2.2 曠場實(shí)驗(yàn)評估結(jié)果

慢性應(yīng)激刺激前及刺激后d 7、d 14，C組大鼠水平運(yùn)動(dòng)和自立運(yùn)動(dòng)總分與正常組相比無明顯差異；刺激后d 21、d 28，C組運(yùn)動(dòng)總分較正常組顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）（Tab.3）。

2.3 血清Ca、P、ALP含量

慢性應(yīng)激刺激后28 d后8 h行手術(shù)，術(shù)后7 d、14 d、21 d，C組血清ALP含量明顯低于A組和B組（P＜0.01）；C組Ca含量與A組和B組無明顯差異；C組P含量低于A組和B組（P＜0.05）（Tab.4）。

2.4 DR骨痂量計(jì)算結(jié)果

術(shù)后14 d A組和C組均可見清晰骨折線，很少量低密度骨痂生長，骨痂量無明顯差異； 術(shù)后28 d C組骨折線尚清晰，骨痂陰影密度、骨痂量低于A組（P＜0.05）；術(shù)后56 d A組骨痂生長速度較快，骨折斷端有骨性連接，骨折線不清晰，C組可見模糊的骨折線，但有明顯骨痂形成并橋接骨折斷端，骨痂量C組低于A組（P＜0.05）（Tab.5，F(xiàn)ig.1）。

Tab.1 Preoperative sucrose water preference test（%，±s，n=10）

Tab.1 Preoperative sucrose water preference test（%，±s，n=10）

Note：Compared with group A+B and C.Control（group A）； Sham Control（group B）； Depression（group C） groups，*P＜0.05，**P＜0.01.

Group0 d7 d14 d21 d28 d A+B 79.7±8.182.3±7.679.4±10.276.5±12.476.3±14.5 C 81.6±11.378.4±9.475.3±11.360.1±12.7*39.4±8.7**

Tab.2 Sucrose water preference test after operation（%，±s，n=10）

Tab.2 Sucrose water preference test after operation（%，±s，n=10）

Note：Compared with group A and B.Control（group A）； Sham Control（group B）； Depression（group C） groups，**P＜0.01.

Group7 d14 d21 d28 d35 d A 83.4±10.679.2±9.181.3±7.178.5±6.279.3±5.5 B 79.3±9.576.6±11.277.3±13.676.4±8.578.7±10.2 C 46.4±10.7**43.6±8.9**38.7±6.9**40.2±10.7**43.9±9.1**Group42 d49 d56 d A 78.4±9.476.3±11.679.9±8.8 B 75.3±8.980.3±10.676.5±12.8 C 39.9±11.2**47.6±5.2**50.6±6.7**

Tab.3 Total score of open field experimental exercise（score ±s，n=10）

Tab.3 Total score of open field experimental exercise（score ±s，n=10）

Note：Compared with group A and B，Control（group A）； Sham Control（group B）； Depression（group C） groups，**P＜0.01.

Group0 d7 d14 d21 d28 d A+B 125.4±16.6120.6±23.4118.9±16.3121.7±17.9119.7±18.5 C 123.7±19.5117.3±19.2112.5±18.765.4±14.4**58.3±9.2**

Tab.4 Ca，P and ALP（±s，n=10）

Tab.4 Ca，P and ALP（±s，n=10）

Note：Compared with group A and B，Control（group A）； Sham Control（group B）； Depression（group C） groups，*P＜0.05，**P＜0.01.

TimeGroupALP（U·L-1）Ca（mmol·L-1）P（mmol·L-1）Stimulate 28 dA+B 103.7±14.62.54±0.232.06±0.13 C 57.7±10.8**2.23±0.431.28±0.09*7 d after operationA105.3±16.42.16±0.842.05±0.54 B 113.7±21.92.24±0.562.15±0.19 C 52.4±7.9**2.13±0.091.31±0.04*14 d after operationA112.5±18.82.43±0.512.47±0.91 B 98.3±16.52.51±0.282.35±0.74 C 62.7±12.5**2.33±0.161.64±0.18*21 d after operationA116.6±12.42.18±0.332.29±0.84 B 126.8±19.72.09±0.742.41±0.09 C 69.2±9.3**2.13±0.081.53±0.06*

Tab.5 Calculated results of DR callus volume（mm3，±s，n=10）

Tab.5 Calculated results of DR callus volume（mm3，±s，n=10）

Note：Compared with Group A，Control（group A）； Sham Control（group B）； Depression（group C） groups，*P＜0.05.

Group14 d28 d56 d A5.74±0.1528.74±9.1898.56±12.96 C5.26±0.0719.38±5.63*53.27±18.48*

2.5 病理組織學(xué)結(jié)果

手術(shù)后14 d C組有少量纖維結(jié)締組織增生（白色箭頭所示），大量新生毛細(xì)血管形成、局部充血（紅色箭頭所示），A組纖維結(jié)締組織比C組增多，毛細(xì)血管減少，各組可見少量壞死骨片（淺藍(lán)色箭頭所示）；手術(shù)后28 d C組纖維結(jié)締組織增多，少量成骨細(xì)胞聚集（深藍(lán)色箭頭所示），A組可見大面積纖維組織，少量新生骨小梁（黃色箭頭所示）、軟骨內(nèi)成骨（綠色箭頭所示）；手術(shù)后56 d C組可見新生骨小梁，軟骨內(nèi)成骨，大量成骨細(xì)胞聚集，A組可見成熟骨小梁同時(shí)在纖維成骨和軟骨內(nèi)成骨（Fig.2～3）。

2.6 三點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn)結(jié)果

對2組大鼠脛骨的三點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn)，得到大鼠脛骨愈合過程中彎曲力學(xué)性能實(shí)驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果表明，A組在彎曲剛度、彎曲強(qiáng)度、彎曲撓度、彎曲載荷、彎矩及比撓度均優(yōu)于C組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（Tab.6）。

Fig.1 DR imaging data of group C and group A at 14，28 and 56 d after operation（red arrow showing callus）

Fig.2 Pathological changes of group A and group C at 40-fold microscope 14，28 and 56 d after operation

Fig.3 The pathological changes of group A and group C at 200 times of microscope 14, 28 and 56 d after operation

Tab.6 Mechanical indices of tibial three-point bending（±s，n=10）

Tab.6 Mechanical indices of tibial three-point bending（±s，n=10）

Note：The indexes of group A were compared with those of group C.Control（group A）； Depression（group C） groups，*P＜0.05.

GroupBending load（N）Bending moment（N·mm-1）Bending flexibility（mm）35 d56 d35 d56 d35 d56 d A 75.36±14.25*98.54±19.37*479.57±29.56*689.37±38.29*0.27±0.11*0.31±0.09*C34.58±9.2858.78±15.69298.64±15.45498.76±11.870.21±0.030.24±0.05 Group Contrast flexibility（×10-2）Bending strength（MPa）Bending rigidity（104，N·mm-1·deg-1）35 d56 d35 d56 d35 d56 d 0.75±0.03*0.89±0.06*112.74±9.15*138.34±14.26*1.34±0.11*1.84±0.16*C 0.61±0.050.69±0.0887.62±5.46105.04±7.391.03±0.061.19±0.08 A

2.7 Micro-CT成骨指標(biāo)結(jié)果

d 28，C組大鼠骨折線清晰，可見少量骨痂形成，A組可見少量新生骨小梁，無橋梁骨癡形成，未見骨折愈合；d 56，C組骨痂形成較多，可見新生骨小梁；A組有不同程度的成骨現(xiàn)象，與d 28相比，骨痂量有明顯的增多，可見橋梁骨痂形成；d 28、d 56，C組骨體積分?jǐn)?shù)、骨小梁厚度、骨小梁數(shù)量均低于A組（P＜0.05）；C組骨小梁間隙和骨小梁面積體積大于對照組（P＜0.05）（Tab.7，F(xiàn)ig.4）。

3 討論

抑郁癥是一種危害公眾健康的世界性疾病，在西方國家，抑郁癥是僅次于高血壓的第二大常見疾?。?］。據(jù)世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）預(yù)測，2020年抑郁癥將成為僅次于缺血性心臟病第二大疾病，在全球范圍內(nèi)，這兩種疾病都會(huì)導(dǎo)致殘疾生命調(diào)整年（disability-adjusted life years，DALYs）的損失，而且會(huì)給發(fā)達(dá)中國家?guī)沓林氐纳鐣?huì)負(fù)擔(dān)［6-7］。抑郁癥不僅僅是大腦的代謝異常，由于其中樞和外周生理和生化環(huán)境的改變而引起全身實(shí)質(zhì)器官的功能代謝障礙，骨代謝的改變是其中的一種，越來越多的文獻(xiàn)證明抑郁癥會(huì)嚴(yán)重影響骨代謝［8-10］。本課題前期通過臨床觀察得出抑郁癥患者骨折愈合時(shí)間延遲以及不愈合率增加，進(jìn)一步通過制備大鼠的抑郁骨折模型觀察骨折愈合的指標(biāo)，揭示抑郁癥對骨折愈合的潛在影響。

以往的研究證實(shí)抑郁癥患者骨折后愈合較正常人差，骨折的持續(xù)狀態(tài)會(huì)給病人的日常生活帶來不便，往往會(huì)導(dǎo)致抑郁的加重，而骨折后的抑郁加重又會(huì)延緩骨折的愈合，造成惡性循環(huán)［11-14］。

抑郁癥的影響骨代謝因素大體可分為：生物學(xué)因素（炎癥因子、HPA軸失調(diào)等）；行為學(xué)因素（吸煙、酗酒、缺乏運(yùn)動(dòng)、厭食等）；醫(yī)源性因素（抗抑郁藥的應(yīng)用、住院等）；合并疾?。ùx性疾病、炎癥性疾病、甲狀腺功能障礙、庫欣病和性腺功能減退等），這些因素都會(huì)導(dǎo)致患者骨密度的改變，影響骨折愈合。但是Samuel等通過對這些生活方式的調(diào)整后，抑郁癥患者的骨齡仍然低于對照組，這說明抑郁癥跟骨密度之間存在一種必然的關(guān)系［15］。那么我們提出的科學(xué)的假設(shè)抑郁癥通過影響骨代謝進(jìn)而影響骨折愈合。本實(shí)驗(yàn)選用同一批大鼠，相同的環(huán)境飼養(yǎng)，統(tǒng)一規(guī)格的飼料喂食，盡量排除飲食環(huán)境等的影響。其血清Ca、P、ALP含量測定顯示術(shù)后7 d、14 d、21 d抑郁癥組較手術(shù)對照ALP、P濃度明顯下降（P＜0.01，P＜0.05），進(jìn)一步證實(shí)我們的假設(shè)抑郁癥通過影響骨代謝影響骨折愈合。本實(shí)驗(yàn)中Ca濃度術(shù)后21 d內(nèi)無明顯差異（P＞0.05），但術(shù)后28 d micro-CT成骨指標(biāo)顯示抑郁癥組大鼠有骨質(zhì)疏松趨勢，可能由于骨內(nèi)沉積Ca早期釋放入血導(dǎo)致含量無明顯變化。

Tab.7 Comparison of Micro-CT Osteogenesis Indicators（±s，n=10）

Tab.7 Comparison of Micro-CT Osteogenesis Indicators（±s，n=10）

Note：Comparisons of time points between group C and group A Control（group A）； Depression（group C） groups，*P＜0.05.

GroupBone volume fraction（%）Trabecular thickness（L·μm-1）Trabecular number（L·mm-1）28 d56 d28 d56 d28 d56 d A9.54±1.2517.48±2.6458.34±2.3669.37±3.572.74±0.153.34±0.26 C6.33±0.86*10.34±1.95*49.64±1.45*56.76±1.87*1.62±0.46*2.04±0.39*GroupBone area volume ratio（L·mm-1）Trabecular separation（μm）28 d56 d28 d56 d A 44.34±1.9539.32±2.35427.64±26.35349.62±19.95 C 50.15±2.75*47.39±3.05*485.39±30.21*417.74±24.65*

Fig.4 Micro CT showed osteogenesis 28 and 56 d after operation

抑郁癥可導(dǎo)致機(jī)體的生物學(xué)改變進(jìn)而影響內(nèi)源性皮質(zhì)醇，睪丸素和炎癥因子的釋放，募集和凋亡，降低骨的形成，促進(jìn)骨的再吸收。多數(shù)等證明抑郁癥的下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)調(diào)節(jié)改變導(dǎo)致骨代謝異常，血漿皮質(zhì)醇的增加會(huì)加速骨吸收，生物活性的睪丸素也可以促進(jìn)骨吸收［16-21］。其他研究證明抑郁癥患者的某些骨標(biāo)志物的水平較正常人有明顯改變，例如骨吸收的主要標(biāo)志物IL-6的表達(dá)水平在抑郁癥患者明顯升高［22-25］。本研究實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示：抑郁癥組的DR骨痂、HE染色、三點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn)、骨體積分?jǐn)?shù)、骨小梁厚度、骨小梁數(shù)量均低于對照組，而骨小梁間隙和骨小梁面積體積大于對照組，均提示抑郁癥組的大鼠初始骨痂在形成和生長過程中明顯滯后，此現(xiàn)象與上述研究不謀而合，進(jìn)一步證明抑郁癥可影響大鼠骨折愈合。后期的研究我們將進(jìn)一步從血管生成素、骨形成蛋白等指標(biāo)及相關(guān)通路揭示產(chǎn)生這些現(xiàn)象的進(jìn)一步機(jī)制。

4 本實(shí)驗(yàn)不足之處

第一，本實(shí)驗(yàn)以大鼠為實(shí)驗(yàn)對象，大鼠與人尚存在比較大的差異性，后期可改進(jìn)至大型靈長類動(dòng)物和臨床試驗(yàn)。

第二，本實(shí)驗(yàn)對于大鼠抑郁程度無法進(jìn)行量化，僅通過其行為表現(xiàn)來判斷是否抑郁，抑郁的程度無法確定，故骨折愈合的程度是否與抑郁成正相關(guān)無法確定。

第三，抑郁后每只大鼠的飲食量會(huì)有不同的降低，導(dǎo)致鈣，磷等攝入減少，本實(shí)驗(yàn)未對每只大鼠的飲食量進(jìn)行記錄，分析，可能對實(shí)驗(yàn)造成一定誤差，但也有文獻(xiàn)報(bào)道，厭食對抑郁癥的骨代謝影響較?。?6］。

第四，本實(shí)驗(yàn)只有抑郁癥手術(shù)組，而沒有抑郁癥對照組，關(guān)于手術(shù)是否會(huì)加重抑郁癥尚不清楚。

總之，本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證實(shí)了抑郁癥影響大鼠骨折愈合的變化趨勢，為該病的機(jī)制研究提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，但是抑郁癥通過哪些機(jī)制影響骨折愈合，是單一還是復(fù)合，尚需要更深入的研究和探討。