姚詩晗 曹曉寬 劉正希 王歡 毛雪 鄒遠(yuǎn)霞 葉曉秀(通訊作者)(西南醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院 四川 瀘州 646000)
妊娠期肝內(nèi)淤積癥是臨床婦產(chǎn)科常見病,多發(fā)生于妊娠中晚期,在臨床中多表現(xiàn)為皮膚瘙癢、膽汁酸升高及其黃疸等,若不及時給予干預(yù)治療,可能導(dǎo)致嬰兒早產(chǎn)、胎兒窘迫及產(chǎn)后出血等,甚至初夏死胎等[1]。為了保證孕婦及胎兒的生命安全,臨床中必須采取有效干預(yù)措施。因此,本文通過構(gòu)建懷孕母鼠與胎鼠模型,分析茵梔黃口服液、熊去氧膽酸對妊娠膽?zhàn)瞿甘蠹疤ナ蟮挠绊?,現(xiàn)報告如下。
本次選取50只母鼠作為研究對象,由實驗動物中心提供,所有母鼠均健康,鼠齡(150~180)天,平均鼠齡(167.23±32.56)天;體重(210~260)g,平均體重(245.23±11.45)g。在室溫18攝氏度-25攝氏度,相對濕度60%~70%的屏障系統(tǒng)內(nèi)飼養(yǎng),對飼料及水不給予控制。在發(fā)情期與雄性大鼠按照4:1的同籠方式進(jìn)行飼養(yǎng),觀察陰栓脫落。陰栓脫落日為妊娠第一天,飼養(yǎng)到妊娠15天待用。根據(jù)用藥劑量不同,分為五組,每組10只。茵梔黃口服液低劑量組:體重(201~276)g,平均體重(254.12±10.45)g。茵梔黃口服液中劑量組:體重(212~265)g,平均體重(248.34±9.65)g。茵梔黃口服液中劑量組:體重(200~290)g,平均體重(267.67±11.89)g。茵梔黃口服液高劑量組:體重(220~289)g,平均體重(243.78±9.78)g。熊去氧膽酸正常劑量組:體重(231~298)g,平均體重(265.45±10.72)g??瞻讓φ战M:體重(225~287)g,平均體重(249.61±9.83)g。五組母鼠的體重經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析,無顯著差異(P>0.05)。
1.2.1 建立動物模型 50只母鼠根據(jù)藥物劑量分為五組,每組10只。茵梔黃口服液低劑量組:給予5ml茵梔黃口服液,每日3次,口服喂養(yǎng)母鼠。茵梔黃口服液中劑量組:給予10ml茵梔黃口服液,每日3次。茵梔黃口服液高劑量組:給予15ml茵梔黃口服液,每日3次。熊去氧膽酸正常劑量組:給予250mg熊去氧膽酸片,每日4次??瞻讓φ战M:不給予任何藥物。以上均連續(xù)治療2個療程,1個療程為7天。均于妊娠15天靜脈采血1ml,采用日本全自動生化分析儀測定血生化指標(biāo)。孕鼠均于妊娠第20天斷頭處死,取母鼠肝臟、胎盤和胎鼠心臟左心室組織進(jìn)行HE染色、組織學(xué)檢查、鏡下觀察拍照。
1.2.2 電鏡標(biāo)本觀察 模型成功后,于妊娠21天,取出母鼠肝臟組織和胎鼠心臟左心室組織,各切取數(shù)塊大小約1mm3組織塊,快速放入2.5%的戊二醛-多聚甲醛固定液中,4攝氏度固定2小時以上,經(jīng)磷酸緩沖液浸洗后,用1%的四氧化鋨后固定,乙醇系列脫水,包埋,Epon 812超薄切片機切片,鉛、鈾染色,透射電鏡觀察拍照。
臨床所有數(shù)據(jù)均采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析,例數(shù)采用%表示,用χ2檢驗;血清總膽汁酸水平采用(x-±s)表示,用t檢驗,若兩組差異P<0.05時,表示具有統(tǒng)計學(xué)意義。
治療后,五組的血清總膽汁酸水平與治療前相比,均有所改善,其差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。熊去氧膽酸正常劑量組的血清總膽汁酸水平明顯低于與其他四組,其差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。詳細(xì)見表1所示。
表1 五組治療前后的血清總膽汁酸水平比較(x-±s,mmol/L)
通過肝臟切片組織分析,得到圖1結(jié)果,如下所示。
圖1
妊娠期肝內(nèi)淤積癥孕婦膽汁中的膽鹽分泌較低,降低肝臟合成的凝血因子水平,且脂溶性維生素K+的吸收也發(fā)生障礙,極易使得凝血功能異常,增加了產(chǎn)后出血概率。同時,若胎胚內(nèi)有膽汁淤積,當(dāng)膽汁進(jìn)入到外周血組織循環(huán)中,其胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞將發(fā)生腫脹,絨毛間隙也將縮小,最終減少胎盤血流灌注,容易發(fā)生胎兒窘迫或者死胎[2]。在本次研究中,通過選取50只母鼠作為試驗對象,分別根據(jù)藥物劑量劃分五大組,主要采用茵梔黃口服液、熊去氧膽酸片治療母鼠肝內(nèi)淤積癥。茵梔黃口服液中的主要成分為梔子花、金銀花及其黃岑,幾種藥物綜合起來,具有清熱解毒及其祛除黃疸的功效。妊娠期膽汁淤積者采用該藥物,可有效改善臨床癥狀,降低胎兒圍產(chǎn)期危險率。不同劑量的茵梔黃口服液對妊娠期膽汁淤積的效果也有所不同。通過本次研究,低劑量的茵梔黃口服液治療妊娠期膽汁淤積母鼠,血清總膽汁酸水平比高中劑量的茵梔黃口服液低,劑量與膽汁酸水平呈現(xiàn)正相關(guān)[3]。本研究中,熊去氧膽酸片正常劑量組的血清總膽汁酸水平改善程度均優(yōu)于其他四組,由此表明:熊去氧膽酸片可有效改善妊娠期膽汁淤積者的臨床癥狀,保證孕婦及胎兒安全。
綜上所述,熊去氧膽酸對妊娠期膽汁淤積有較好療效,且不良反應(yīng)少,可用于臨床治療中。
[1]湯鵬,姚軍,李曼,等.GnRHa控制性超促排卵對小鼠種植窗期Ezrin表達(dá)的影響[J].廣東醫(yī)學(xué),2016,(23):3515-3518.
[2]張律維.茵梔黃口服液聯(lián)合熊去氧膽酸治療嬰兒肝炎綜合征的療效及安全性分析[J].臨床合理用藥雜志,2017,(8):73-74.
[3]時青云,趙晉,林宇庚,等.雌激素受體及膽汁酸代謝相關(guān)基因在膽汁淤積孕鼠胎鼠肝臟中的表達(dá)[J].首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2011,(2):272-275.