王沖 付秋雁 譚建新 于玲莉 劉芬 董正龍 李建平

摘 要 本著“服務(wù)創(chuàng)新驅(qū)動(dòng)、保障藥品質(zhì)量安全”的宗旨，為支持和推動(dòng)嵌合抗原受體T細(xì)胞（chimeric antigen receptor T cell， CAR-T）類免疫細(xì)胞產(chǎn)品的產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程，探討風(fēng)險(xiǎn)控制策略，并按藥品管理規(guī)范指導(dǎo)和規(guī)范這類產(chǎn)品的產(chǎn)業(yè)化，由上海藥品審評(píng)核查中心組織發(fā)起，上海市免疫細(xì)胞治療產(chǎn)業(yè)聯(lián)盟的相關(guān)企業(yè)共同參與，起草編撰了《自體CAR-T免疫細(xì)胞產(chǎn)品生產(chǎn)指南（討論稿）》。該生產(chǎn)指南經(jīng)過業(yè)界專家的多次討論和多方征求意見，現(xiàn)已形成初稿，本文就其編撰及內(nèi)容作一簡要介紹并提出相關(guān)思考，希望能給業(yè)界提供參考和借鑒。

關(guān)鍵詞 嵌合抗原受體T細(xì)胞 免疫細(xì)胞治療 生產(chǎn)指南

中圖分類號(hào)：R951 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：C 文章編號(hào)：1006-1533（2018）11-0015-06

Consideration on drafting a discussion paper on Guidelines for the Production of Autologous CAR-T Immune Cell Products

WANG Chong*， FU Qiuyan， TAN Jianxin， YU Lingli， LIU Fen， DONG Zhenglong， LI Jianping**（Shanghai Center for Drug Evaluation and Inspection， Shanghai 201203， China）

ABSTRACT To discuss the risk control strategy and guide and regulate the industrialization of chimeric antigen receptor T cell （CAR-T） immune cell production according to the specifications of drug management so as to implement the strategy for the innovation-driven development and ensure drug quality and safety and promote and support the industrialization and standardization of such pharmaceuticals. The discussion paper on the Guidelines for the Production of Autologous CAR-T Immune Cell Products was drafted and compiled by Shanghai Center for Drug Evaluation and Inspection combined with the Shanghai Alliance for Immune Cell Therapy Industries. A first draft of these production guidelines was formed after many discussions and multi-party comments by industry experts. A brief introduction to its compilation and content was given and the relevant thinking was proposed in this article.

KEy WORDS chimeric antigen receptor T cell； immune cell therapy； production guidelines

諾華公司開發(fā)的CTL-019獲得美國FDA腫瘤藥物咨詢委員會(huì)全票批準(zhǔn)推薦的消息引起了醫(yī)藥界對(duì)嵌合抗原受體T細(xì)胞（chimeric antigen receptor T cell， CAR-T）療法的高度關(guān)注。這是因?yàn)?，CAR-T是一類區(qū)別于傳統(tǒng)小分子和生物藥物的新藥物形態(tài)，可為腫瘤治療提供一種新型治療手段，且其作用已基本得到全球權(quán)威藥品審評(píng)機(jī)構(gòu)美國FDA的認(rèn)可[1]。我國之前按照國家衛(wèi)生部的相關(guān)規(guī)定和要求，參照衛(wèi)生部發(fā)布的《醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法》[2]，將自體干細(xì)胞和免疫細(xì)胞療法列為第三類醫(yī)療技術(shù)予以管理。鑒于免疫細(xì)胞治療技術(shù)漸趨完善，2017年12月國家食品藥品監(jiān)督管理總局藥品審評(píng)中心印發(fā)了《細(xì)胞治療產(chǎn)品研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》（試行）[3]。該指導(dǎo)原則適用于符合《中華人民共和國藥品管理法》第一百零二條關(guān)于藥品的定義并符合以下要求的產(chǎn)品：①來源于人自體或異體的活細(xì)胞，但不包括生殖細(xì)胞及其相關(guān)干細(xì)胞；②可與輔助材料結(jié)合或經(jīng)體外誘導(dǎo)分化、或進(jìn)行基因改造操作的人源細(xì)胞。這意味著細(xì)胞治療產(chǎn)品研發(fā)可以參照《藥品注冊(cè)管理辦法》進(jìn)行規(guī)范管理了。

隨著相關(guān)技術(shù)的不斷發(fā)展，全球、包括我國的免疫細(xì)胞治療產(chǎn)業(yè)正在迅速形成并壯大。上海市作為全國的科創(chuàng)中心及生物醫(yī)藥研發(fā)產(chǎn)業(yè)重地，在CAR-T類免疫細(xì)胞產(chǎn)品研發(fā)方面頗為活躍且已初具產(chǎn)業(yè)化基礎(chǔ)，跨過早期研發(fā)階段進(jìn)入立項(xiàng)到申報(bào)前階段的企業(yè)為數(shù)不少，有些企業(yè)已有或正在建生產(chǎn)車間，發(fā)展水平處于國內(nèi)領(lǐng)先地位。但國內(nèi)尚無成功申報(bào)獲得批準(zhǔn)上市的CAR-T類免疫細(xì)胞產(chǎn)品案例，現(xiàn)有的相關(guān)法規(guī)和常規(guī)的藥品管理方式又不完全適用于這類產(chǎn)品，研發(fā)企業(yè)正面臨申報(bào)和廠房建設(shè)要求方面的困境，監(jiān)管部門也面臨如何提高專業(yè)監(jiān)管能力等多方面的挑戰(zhàn)[4]。

為支持和推動(dòng)上海市CAR-T類免疫細(xì)胞產(chǎn)品的產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程，探討風(fēng)險(xiǎn)控制策略，并按藥品管理規(guī)范指導(dǎo)和規(guī)范這類產(chǎn)品的產(chǎn)業(yè)化，由上海藥品審評(píng)核查中心組織發(fā)起，上海市免疫細(xì)胞治療產(chǎn)業(yè)聯(lián)盟相關(guān)企業(yè)共同參與，起草編撰了《自體CAR-T免疫細(xì)胞產(chǎn)品生產(chǎn)指南（討論稿）》（以下簡稱為“生產(chǎn)指南”）。該生產(chǎn)指南經(jīng)過業(yè)界專家的多次討論和多方征求意見，現(xiàn)已形成初稿，本文就其編撰依據(jù)及主要內(nèi)容作一簡要的框架性介紹并提出相關(guān)思考。

1 編撰依據(jù)

《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》[5]、《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》附錄1“無菌藥品”[6]和歐盟發(fā)布的《Guidelines on Good Manufacturing Practice specific to Advanced Therapy Medicinal Products》[7]。

2 主要內(nèi)容

CAR-T是一類新型免疫細(xì)胞產(chǎn)品，其由符合倫理學(xué)要求的細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)和嵌入針對(duì)特定抗體的抗原制成。本生產(chǎn)指南旨在為CAR-T類免疫細(xì)胞產(chǎn)品的規(guī)范生產(chǎn)和質(zhì)量控制提供參考和借鑒，并探討了風(fēng)險(xiǎn)控制策略。

2.1 廠址選擇和廠房整體布局

為降低污染和交叉污染風(fēng)險(xiǎn)，廠房、生產(chǎn)設(shè)施及設(shè)備應(yīng)根據(jù)所生產(chǎn)藥品的特性、工藝流程和相應(yīng)的潔凈度級(jí)別要求合理設(shè)計(jì)、布局和使用。

2.1.1 生產(chǎn)區(qū)和貯存區(qū)

生產(chǎn)區(qū)和貯存區(qū)應(yīng)有足夠的空間，以確保能有序地存放設(shè)備、物料、中間產(chǎn)品、待包裝產(chǎn)品和成品，避免不同產(chǎn)品或物料的混淆、交叉污染，避免生產(chǎn)或質(zhì)量控制操作發(fā)生遺漏或差錯(cuò)。

應(yīng)根據(jù)藥品品種、生產(chǎn)操作要求和外部環(huán)境狀況等配置空調(diào)凈化系統(tǒng)，使生產(chǎn)區(qū)有效通風(fēng)，并有溫度、濕度控制和空氣凈化過濾，保證藥品的生產(chǎn)環(huán)境符合要求。潔凈區(qū)與非潔凈區(qū)之間、不同級(jí)別潔凈區(qū)之間的壓差應(yīng)≥10 Pa；必要時(shí)，相同潔凈度級(jí)別的不同功能區(qū)域（操作間）之間也應(yīng)保持適當(dāng)?shù)膲翰钐荻取?/p>

2.1.2 生產(chǎn)中間控制區(qū)

生產(chǎn)中間控制區(qū)如設(shè)置在潔凈生產(chǎn)車間內(nèi)部，應(yīng)避免交叉污染、混淆等藥品質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)。

2.1.3 倉儲(chǔ)區(qū)

倉儲(chǔ)區(qū)的設(shè)置和分區(qū)應(yīng)避免不同產(chǎn)品或物料的混淆和交叉污染。①體細(xì)胞接收區(qū)：應(yīng)每份體細(xì)胞均貼有完整標(biāo)簽，進(jìn)行唯一識(shí)別碼登記、編錄和標(biāo)識(shí)。應(yīng)有獨(dú)立的血液樣本存放冰箱，并根據(jù)生產(chǎn)工藝合理制定血液樣本的接收、儲(chǔ)存和發(fā)放規(guī)程。②原輔料儲(chǔ)存區(qū)：同藥品GMP。③CAR-T產(chǎn)品儲(chǔ)存區(qū)：應(yīng)注意液氮罐補(bǔ)充液氮的便捷性，并對(duì)液氮儲(chǔ)存條件進(jìn)行適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測。使用不同液氮罐或同一液氮罐、但不同欄架儲(chǔ)存待檢品、成品、留樣和穩(wěn)定性考察的CAR-T產(chǎn)品時(shí)，應(yīng)進(jìn)行必要的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，并采取相應(yīng)的控制措施。

2.1.4 質(zhì)量控制區(qū)

一般需分為體細(xì)胞檢測區(qū)、細(xì)胞檢測區(qū)、微生物檢測區(qū)、理化檢測區(qū)和分子檢測區(qū)等。體細(xì)胞檢測區(qū)應(yīng)獨(dú)立設(shè)置，使用專用檢驗(yàn)設(shè)備，并應(yīng)配備原位滅活或消毒的設(shè)備。如有空調(diào)凈化系統(tǒng)，應(yīng)獨(dú)立設(shè)置。應(yīng)有獨(dú)立的分子檢測區(qū)域，以避免氣溶膠的產(chǎn)生與交叉污染。分子檢測區(qū)域應(yīng)至少包括試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和基因擴(kuò)增三個(gè)功能操作間，三個(gè)功能操作間應(yīng)相互獨(dú)立，避免空氣的直接流通，以避免交叉污染。如具備條件，建議每個(gè)區(qū)域配置緩沖間?；陲L(fēng)險(xiǎn)，部分區(qū)域應(yīng)設(shè)置獨(dú)立的廢氣排放系統(tǒng)。

2.1.5 輔助區(qū)

包括清洗清潔區(qū)、滅菌區(qū)和廢棄物處理區(qū)。應(yīng)有獨(dú)立的廢棄物處理區(qū)，對(duì)生物活性物質(zhì)進(jìn)行滅活處理。

2.2 生產(chǎn)設(shè)備

主要生產(chǎn)設(shè)備如生物安全柜、離心機(jī)、冰箱、顯微鏡、純化設(shè)備、過濾設(shè)備和泵等的設(shè)計(jì)或選型、校驗(yàn)、清洗和維護(hù)的要求同藥品GMP。宜使用一次性系統(tǒng)，以避免污染和交叉污染。

CAR-T產(chǎn)品生產(chǎn)中需用到一些特殊設(shè)備。①分選設(shè)備：分選設(shè)備一般為含有磁力的設(shè)備系統(tǒng)，操作和放置時(shí)應(yīng)注意周圍不得有磁性物體，以避免干擾及長期干擾后產(chǎn)生磁性。②中間體檢測用到的設(shè)備：常用的中間體檢測設(shè)備如流式細(xì)胞儀、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和顯微鏡的設(shè)計(jì)或選型、校驗(yàn)、清洗和維護(hù)的要求同藥品GMP。

質(zhì)粒、病毒載體和CAR-T產(chǎn)品的生產(chǎn)區(qū)應(yīng)分別設(shè)置為獨(dú)立區(qū)域，病毒載體和CAR-T產(chǎn)品的生產(chǎn)不應(yīng)共用空調(diào)凈化系統(tǒng)。

2.2.1 質(zhì)粒生產(chǎn)設(shè)備

在CAR-T產(chǎn)品的生產(chǎn)過程中，如有質(zhì)粒中間品，應(yīng)有獨(dú)立的質(zhì)粒生產(chǎn)區(qū)。質(zhì)粒生產(chǎn)區(qū)內(nèi)應(yīng)至少包括發(fā)酵、純化和除菌分裝三個(gè)功能區(qū)，其中發(fā)酵和純化功能區(qū)至少為控制區(qū)，除菌分裝功能區(qū)的潔凈度至少為“C+A”。宜選用耐高溫高壓滅菌的系統(tǒng)或一次性發(fā)酵系統(tǒng)，以避免不同種質(zhì)?；虿煌钨|(zhì)粒的交叉污染。如未使用耐高溫高壓滅菌的系統(tǒng)或一次性發(fā)酵系統(tǒng)，則至少每種質(zhì)粒發(fā)酵使用一種系統(tǒng)。不同種質(zhì)粒的純化不得共用同一純化層析柱和層析介質(zhì)。由于質(zhì)粒的生產(chǎn)宿主是革蘭陰性菌大腸埃希菌，純化系統(tǒng)應(yīng)確保能有效去除宿主菌殘留的內(nèi)毒素。

2.2.2 病毒載體生產(chǎn)設(shè)備

病毒載體的生產(chǎn)區(qū)應(yīng)符合藥品GMP要求。病毒載體生產(chǎn)區(qū)應(yīng)至少分為細(xì)胞培養(yǎng)、病毒轉(zhuǎn)染（如有）、病毒純化和除菌過濾等功能區(qū)。應(yīng)選用耐高溫高壓滅菌的系統(tǒng)或一次性發(fā)酵系統(tǒng)，以避免不同批次的交叉污染及外源性微生物污染。

2.2.3 CAR-T產(chǎn)品生產(chǎn)設(shè)備

CAR-T產(chǎn)品的生產(chǎn)區(qū)應(yīng)符合藥品GMP要求。CAR-T產(chǎn)品生產(chǎn)區(qū)應(yīng)至少分為體細(xì)胞分離分選、細(xì)胞擴(kuò)增和細(xì)胞冷凍（如有）等功能區(qū)。CAR-T產(chǎn)品的生產(chǎn)應(yīng)符合無菌技術(shù)操作規(guī)范。為避免不同來源T細(xì)胞的交叉污染，CAR-T產(chǎn)品生產(chǎn)過程中宜選用一次性生產(chǎn)用耗材。

如CAR-T產(chǎn)品的生產(chǎn)采用非全封閉系統(tǒng)操作，應(yīng)避免不同供者來源體細(xì)胞的CAR-T產(chǎn)品生產(chǎn)發(fā)生交叉污染、污染和混淆，操作完畢后須清場；如CAR-T產(chǎn)品的生產(chǎn)采用了全封閉系統(tǒng)操作，應(yīng)注意避免在取樣、加樣等環(huán)節(jié)可能發(fā)生的交叉污染。對(duì)部分非全封閉系統(tǒng)操作，應(yīng)按非全封閉系統(tǒng)要求執(zhí)行。

2.2.4 公用系統(tǒng)

壓縮空氣、二氧化碳和氧氣（同藥品GMP要求）。水系統(tǒng)（同藥品GMP要求）。

2.3 生產(chǎn)過程

CAR-T產(chǎn)品生產(chǎn)主要分為三個(gè)生產(chǎn)過程。①質(zhì)粒生產(chǎn)過程（如有）：至少包括細(xì)菌復(fù)蘇、細(xì)菌擴(kuò)增、細(xì)菌破碎、質(zhì)粒純化和除菌過濾等工藝流程。②病毒載體生產(chǎn)過程：至少包括細(xì)胞擴(kuò)增、質(zhì)粒轉(zhuǎn)染（如有）、病毒收獲、病毒純化和除菌過濾等工藝流程。③CAR-T產(chǎn)品生產(chǎn)過程：至少包括細(xì)胞分離、細(xì)胞分選（如有）、T細(xì)胞激活、病毒感染、細(xì)胞擴(kuò)增、細(xì)胞收獲和細(xì)胞冷凍（如有）等工藝流程。

2.3.1 質(zhì)粒生產(chǎn)過程（如有）

質(zhì)粒生產(chǎn)以復(fù)蘇攜帶質(zhì)粒的工程菌為起始點(diǎn)，經(jīng)細(xì)菌擴(kuò)增，收獲細(xì)菌，裂解、破碎菌體后釋放質(zhì)粒，去除相關(guān)細(xì)菌蛋白和細(xì)菌基因組，去除細(xì)菌內(nèi)毒素，純化得超螺旋質(zhì)粒，最后除菌過濾獲得質(zhì)粒中間品。

2.3.2 病毒載體生產(chǎn)過程

病毒載體的生產(chǎn)過程如下：擴(kuò)增生產(chǎn)細(xì)胞至一定規(guī)模（如采用瞬轉(zhuǎn)工藝，則需投入質(zhì)粒和轉(zhuǎn)染復(fù)合物以包裝出目的病毒），收獲病毒上清液，經(jīng)純化和去除牛血清白蛋白、DNA和蛋白等雜質(zhì)后，濃縮至一定滴度，最后除菌過濾獲得病毒載體中間品。

2.3.3 CAR-T產(chǎn)品生產(chǎn)過程

CAR-T產(chǎn)品的生產(chǎn)需先獲取供者或患者的免疫細(xì)胞，經(jīng)分離、分選（如有）獲得T細(xì)胞，激活后再使用病毒載體感染T細(xì)胞，擴(kuò)增生產(chǎn)至一定量，收獲CAR-T并清洗。

2.3.4 非冷凍制劑生產(chǎn)過程

在清洗后的CAR-T中加入生理鹽水或其他藥用輔料，分裝至輸血袋。

2.3.5 冷凍制劑生產(chǎn)過程

加入冷凍保護(hù)劑，分裝至凍存袋，從室溫冷凍至液氮溫度后保存。

2.4 物料

2.4.1 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和標(biāo)識(shí)

參照《中華人民共和國藥典》2015年版三部生物制品通則中“生物制品生產(chǎn)用原材料及輔料質(zhì)量控制規(guī)程”對(duì)生物制品生產(chǎn)過程中使用的原材料和輔料質(zhì)量控制的通用性要求。

2.4.1.1 血液樣本唯一識(shí)別碼

供者或患者體細(xì)胞的獲得應(yīng)符合倫理學(xué)要求，體細(xì)胞從入庫至生產(chǎn)、檢定應(yīng)編制唯一識(shí)別碼，并使用該識(shí)別碼作為對(duì)應(yīng)來源的唯一憑證，同時(shí)必須保護(hù)隱私信息。

2.4.1.2 物料供應(yīng)商管理

物料供應(yīng)商應(yīng)提供物料質(zhì)量證明文件或合格證，部分進(jìn)口試劑和耗材應(yīng)有進(jìn)口許可文件。

2.4.2 物料和產(chǎn)品的接收

同《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》附錄3中“生物制品”的要求。

2.4.3 生產(chǎn)過程中的物料管理

同藥品GMP，注意質(zhì)粒（如有）和病毒載體的留樣。

2.4.4 檢驗(yàn)與放行

2.4.4.1 CAR-T制劑的快速檢驗(yàn)與放行

應(yīng)制定有條件放行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，以備臨床急需。應(yīng)將重點(diǎn)放在安全性檢測項(xiàng)目方面，如無菌檢查、支原體檢查和病毒自我復(fù)制能力檢查等。

2.4.4.2 CAR-T制劑的標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)與放行

應(yīng)制定適用的檢驗(yàn)方法與放行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

2.4.5 包裝和運(yùn)輸儲(chǔ)存

CAR-T制劑的外包裝上應(yīng)明確患者的相關(guān)信息，外包裝材料宜選用保溫隔熱材料。

如CAR-T制劑保存在液氮中，應(yīng)注意避免不同批次和不同供者來源的制劑混淆及相互污染，同時(shí)對(duì)液氮儲(chǔ)存條件進(jìn)行適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測。CAR-T制劑運(yùn)輸時(shí)應(yīng)保存在液氮或干冰中，應(yīng)測試運(yùn)輸條件的穩(wěn)定性，運(yùn)輸過程中也應(yīng)對(duì)溫度進(jìn)行持續(xù)的監(jiān)測。

在CAR-T制劑出庫發(fā)貨時(shí)應(yīng)核對(duì)其唯一識(shí)別碼，并建立醫(yī)療機(jī)構(gòu)接收回執(zhí)，內(nèi)容至少包括制劑袋外觀檢查、輸液口完整性檢查、接收時(shí)間及數(shù)量等。

2.5 確認(rèn)和驗(yàn)證

2.5.1 無抗生素培養(yǎng)無菌工藝模擬驗(yàn)證

在CAR-T產(chǎn)品的生產(chǎn)過程中應(yīng)進(jìn)行無抗生素培養(yǎng)無菌模擬工藝驗(yàn)證，以證明生產(chǎn)體系的無菌性、無支原體性。驗(yàn)證時(shí)宜選用生產(chǎn)用培養(yǎng)基、緩沖液或增菌培養(yǎng)基等模擬最優(yōu)和最差培養(yǎng)環(huán)境，以驗(yàn)證CAR-T產(chǎn)品的無菌性。

2.5.2 總體工藝驗(yàn)證

通常情況下，工藝驗(yàn)證應(yīng)至少包括常規(guī)生產(chǎn)條件下的三個(gè)連續(xù)批。如使用其他批數(shù)量，應(yīng)考慮可否通過使用標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)方法、已有相似產(chǎn)品或工藝、起始物料的可變性、臨床適應(yīng)證等予以合理解釋。

對(duì)多種質(zhì)粒生產(chǎn)系統(tǒng)，如生產(chǎn)工藝相同，基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，可只對(duì)其中一種質(zhì)粒中間品進(jìn)行工藝驗(yàn)證，結(jié)果需符合質(zhì)粒中間品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

CAR-T產(chǎn)品的生產(chǎn)可使用不同來源的T細(xì)胞，但結(jié)果均需符合CAR-T產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

2.5.3 清潔驗(yàn)證

2.5.3.1 質(zhì)粒純化系統(tǒng)（如有）

質(zhì)粒的純化系統(tǒng)如為非一次性系統(tǒng)，應(yīng)進(jìn)行清潔驗(yàn)證。

2.5.3.2 病毒載體純化系統(tǒng)

病毒載體的純化系統(tǒng)如為非一次性系統(tǒng)，應(yīng)進(jìn)行清潔驗(yàn)證。

2.5.3.3 CAR-T產(chǎn)品純化系統(tǒng)

CAR-T產(chǎn)品的純化系統(tǒng)如為非一次性或非全封閉系統(tǒng)，清潔驗(yàn)證應(yīng)驗(yàn)證細(xì)菌、真菌、分枝桿菌和支原體等項(xiàng)目，以避免交叉污染。如同一個(gè)CAR-T產(chǎn)品純化車間涉及不同種的病毒載體，應(yīng)進(jìn)行批間清潔，并對(duì)清潔效果進(jìn)行病毒載體去除驗(yàn)證。

2.6 關(guān)鍵控制項(xiàng)目

病毒載體滴度：病毒載體滴度的檢測方法應(yīng)經(jīng)驗(yàn)證，確定感染復(fù)數(shù)范圍，確保感染效率符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

T細(xì)胞占比和T細(xì)胞數(shù)：對(duì)來源于供者的外周血細(xì)胞，經(jīng)分離、分選（如有）獲得T細(xì)胞群后，應(yīng)檢測其中的T細(xì)胞占比和T細(xì)胞數(shù)。

CAR-T的CAR+占比：病毒感染72 h后，一般宜檢測CAR-T的CAR+占比，因?yàn)镃AR-T在擴(kuò)增過程中其CAR+占比可能會(huì)下降，導(dǎo)致CAR-T產(chǎn)品的CAR+占比不符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

3 挑戰(zhàn)與思考

3.1 認(rèn)知的時(shí)代性

本生產(chǎn)指南是主要基于目前的認(rèn)知提出的有關(guān)CAR-T類免疫細(xì)胞產(chǎn)品良好生產(chǎn)規(guī)范方面的一般考慮。隨著相關(guān)技術(shù)發(fā)展、認(rèn)知提高和經(jīng)驗(yàn)積累，對(duì)這類產(chǎn)品生產(chǎn)規(guī)范方面的認(rèn)識(shí)必會(huì)更加深入、細(xì)化和提高。

3.2 個(gè)體化治療產(chǎn)品的特殊性

CAR-T類免疫細(xì)胞產(chǎn)品屬個(gè)體化治療產(chǎn)品，來源于不同供者的T細(xì)胞給生產(chǎn)工藝的標(biāo)準(zhǔn)化和產(chǎn)品的一致性帶來了極大的挑戰(zhàn)，決定了這類產(chǎn)品在生產(chǎn)的不同工序階段可能存在著不同的工藝控制路徑。因此，相對(duì)于傳統(tǒng)藥品的管理，如何保證這類產(chǎn)品的安全、有效和質(zhì)量可控具有極大的挑戰(zhàn)性。

3.3 為臨床試驗(yàn)用樣品生產(chǎn)規(guī)范提供參考

基于CAR-T類免疫細(xì)胞產(chǎn)品的特殊性，這類產(chǎn)品的研究與開發(fā)周期與傳統(tǒng)藥物相比相對(duì)較短，因此多數(shù)研發(fā)機(jī)構(gòu)在早期的生產(chǎn)工藝開發(fā)階段就考慮到了后續(xù)臨床試驗(yàn)用樣品以及商業(yè)化生產(chǎn)的需求。本生產(chǎn)指南同樣可為臨床試驗(yàn)用CAR-T類免疫細(xì)胞產(chǎn)品的生產(chǎn)規(guī)范提供參考。

3.4 其他類別細(xì)胞治療產(chǎn)品的適用性

本生產(chǎn)指南為CAR-T類免疫細(xì)胞產(chǎn)品的規(guī)范生產(chǎn)提供參考和建議，以支持和推動(dòng)這類產(chǎn)品的產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程。對(duì)其他類別的細(xì)胞治療產(chǎn)品，本生產(chǎn)指南僅供借鑒，但有些通用原則應(yīng)是基本相同的。

3.5 CAR-T產(chǎn)品的臨床需求日益增加

CAR-T類免疫細(xì)胞療法的發(fā)展十分迅速，為腫瘤治療提供了一種新的有效手段。然而，在學(xué)術(shù)研究階段，CAR-T產(chǎn)品的生產(chǎn)往往采用科研級(jí)別的耗材且未使用全自動(dòng)生產(chǎn)系統(tǒng)，成本高、生產(chǎn)效率低，無法進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)。由于臨床上對(duì)CAR-T產(chǎn)品的需求日益增加，因此可考慮在研發(fā)階段即采用臨床許可耗材并設(shè)計(jì)全封閉的生產(chǎn)系統(tǒng)等，進(jìn)而加快研發(fā)進(jìn)程。

4 結(jié)語

為貫徹落實(shí)國家對(duì)藥品審評(píng)審批制度改革的要求，支持和推進(jìn)上海市前沿生物制藥的產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程，更好地保障藥品質(zhì)量和安全，上海藥品審評(píng)核查中心積極創(chuàng)新，專門組建了生物組，主動(dòng)探索以品種為主線的全鏈條監(jiān)管模式。本生產(chǎn)指南是上海藥品審評(píng)核查中心生物組探索藥品全鏈條監(jiān)管模式的重要舉措之一，希望能實(shí)現(xiàn)以監(jiān)管創(chuàng)新推動(dòng)藥品創(chuàng)新的目標(biāo)。

致謝：感謝上海食品藥品檢驗(yàn)所生化藥品生物制品室陳鋼主任、國家上海新藥安全評(píng)價(jià)研究中心常艷主任、華道（上海）生物醫(yī)藥有限公司、上海恒潤達(dá)生生物科技有限公司、科濟(jì)生物醫(yī)藥（上海）有限公司、復(fù)星凱特生物科技有限公司、上海藥明巨諾生物科技有限公司和通用電氣醫(yī)療集團(tuán)生命科學(xué)部對(duì)本生產(chǎn)指南編撰所給予的專業(yè)建議和大力支持；感謝上海藥品審評(píng)核查中心生物組成員吳浩、張一瓊、曹萌、丁力承和劉凌毅對(duì)本生產(chǎn)指南編撰的辛勤付出。

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