文/王玉堂

上接2018年7期

（三）國(guó)內(nèi)外水產(chǎn)疫苗的研究熱點(diǎn)

1.分子技術(shù)在水產(chǎn)疫苗研制中的應(yīng)用

在水產(chǎn)疫苗工業(yè)中最為常用的形式是滅活疫苗，到目前國(guó)內(nèi)外獲準(zhǔn)上市的疫苗仍以此類為主。近二十年來(lái)應(yīng)用分子技術(shù)研究水產(chǎn)疫苗成為熱點(diǎn)，這是由于分子疫苗有諸多優(yōu)點(diǎn)：化學(xué)性質(zhì)更為確定，免疫特性更為穩(wěn)定；化學(xué)結(jié)構(gòu)可知，可以進(jìn)行工程設(shè)計(jì)和改造以激發(fā)特定的免疫反應(yīng)；感染成分被除去，有關(guān)殘余毒性或毒性回復(fù)的隱患不再存在，而且最大限度的保留了功能成分；疫苗可以直接被合成或通過(guò)重組DNA技術(shù)生產(chǎn)，尤其是基因工程疫苗可將編碼某種抗原蛋白的基因通過(guò)原核或真核細(xì)胞在體外表達(dá)生產(chǎn)疫苗，具有安全、高效、價(jià)廉、便于工廠化生產(chǎn)，且可向多價(jià)疫苗研制發(fā)展。

國(guó)外在抗原分子結(jié)構(gòu)、抗原基因定位、基因分離、載體構(gòu)建、基因表達(dá)、產(chǎn)物分離、免疫應(yīng)答機(jī)理、細(xì)胞免疫活性以及基因工程疫苗的研制方法和技術(shù)等方面取得了豐碩的研究成果，如小瓜蟲(chóng)基因工程疫苗研究，IHNV和VHSV等的核酸疫苗研究，殺鮭氣單胞菌、嗜水氣單胞菌等的重組疫苗、基因缺失活疫苗、活載體疫苗等方面都取得了長(zhǎng)足的進(jìn)展。我國(guó)近年對(duì)海水魚弧菌、魚類嗜水氣單胞菌、鱖魚病毒、石斑魚神經(jīng)壞死病毒等在病原苗、弱毒疫苗、亞單位疫苗及DNA疫苗等不同層次類型疫苗的基礎(chǔ)研究方面逐步積累，在魚類單殖吸蟲(chóng)等抗原及基因組的分子生物學(xué)研究向深入發(fā)展，確定了抗原蛋白及其定位，構(gòu)建了部分基因文庫(kù)。這些工作推進(jìn)了我國(guó)疫苗實(shí)用化技術(shù)的進(jìn)程，部分疫苗進(jìn)入了田間實(shí)驗(yàn)階段。

2.水產(chǎn)疫苗接種施予技術(shù)強(qiáng)調(diào)實(shí)用化

限制水產(chǎn)疫苗推廣應(yīng)用的關(guān)鍵因素之一是：給苗不便，多以注射為主。注射法是將疫苗直接注入肌肉或腹腔，該方法具有用量少和免疫效果好的優(yōu)點(diǎn)，但不足之處是既耗時(shí)又費(fèi)力。近年挪威成功地研究出魚群疫苗自動(dòng)注射機(jī)，1臺(tái)自動(dòng)注射機(jī)每小時(shí)可注射數(shù)千尾魚，一人可同時(shí)操作數(shù)臺(tái)注射機(jī)。疫苗注射自動(dòng)化作業(yè)，首先是從飼養(yǎng)池通過(guò)管道或用吸魚泵將魚輸送到作業(yè)場(chǎng)所，將魚麻醉，送入輸送帶；人工調(diào)整魚頭的方向，在注射機(jī)上固定好魚，注射器自動(dòng)地將疫苗注入魚的腹腔，魚再由吸魚泵或管道送回原水池。手動(dòng)注射則采用各種連續(xù)注射器（如手槍式注射器），近年以高壓氣體作為輔助動(dòng)力，操作人員不必花太大的力氣就可注射較多的魚，現(xiàn)接種疫苗已成為一些國(guó)家專業(yè)化的作業(yè)。

水產(chǎn)疫苗的給苗途徑除了注射法，還包括浸泡、噴灑、淋浴和經(jīng)口（含肛門）等方法。浸泡法是將需要免疫接種的魚類直接放入或經(jīng)高滲溶液或增加表皮通透性處理后在疫苗中浸泡，魚類通過(guò)體表、鰓攝取抗原。噴霧法與浸泡法一樣均作用于魚體表，是將疫苗以一定的壓力直接噴射到魚體上進(jìn)行免疫，需要如疫苗噴射器、傳送帶等設(shè)備配置?？诜ㄊ菍⒁呙缰苯踊虬桊D或添加輔助劑投喂。水產(chǎn)疫苗免疫接種途徑各有利弊（見(jiàn)表4），如何合理利用一直是疫苗研究的重要內(nèi)容。浸泡法可對(duì)大批量魚苗進(jìn)行處理，實(shí)用性強(qiáng)，是近年研究的熱點(diǎn)，國(guó)外已有弧菌、殺鮭弧菌、魯氏耶爾森氏菌等浸泡型商品化菌苗。口服法免疫是最方便的一種途徑，使用不受時(shí)間地點(diǎn)和魚的大小限制，并對(duì)魚無(wú)損傷，但由于口服疫苗的保護(hù)效果不理想，因此研究者們開(kāi)始關(guān)注并開(kāi)展了納米材料、生物膠囊等包被技術(shù)研究。

表4 魚類免疫接種方式比較

（四）商業(yè)水產(chǎn)用病毒疫苗

迄今為止，已報(bào)道的可引起魚類病毒性疾病的病原已有上百種，常見(jiàn)的有虹彩病毒屬（流行性造血器官壞死癥病毒、傳染性脾腎壞死病毒、真鯛虹彩病毒、淋巴囊腫病毒）、皰疹病毒科（錦鯉皰疹病毒、斑點(diǎn)叉尾魚回病毒、鯉魚痘瘡病毒、鮭魚皰疹病毒、馬蘇大麻哈魚病毒）、彈狀病毒科（鯉春病毒血癥病毒、傳染性造血器官壞死病病毒、行動(dòng)性出血敗血病毒、鱖彈狀病毒）、呼腸弧病毒（草魚呼腸弧病毒）、雙節(jié)段RNA病毒（傳染性胰腺壞死癥病毒）、野田病毒科（病毒性神經(jīng)壞死病毒）和正黏病毒科（傳染性鮭魚貧血癥病毒）。

魚類病毒疫苗按照其制備方式分為以下幾類：

1.減毒活疫苗：減毒活疫苗是一類用經(jīng)特殊的培養(yǎng)方法獲得毒力減弱或無(wú)致病性但具有免疫原性的毒株制備的疫苗。減毒活疫苗可以在宿主體內(nèi)繁殖、經(jīng)體液免疫刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體，同時(shí)，通過(guò)細(xì)胞免疫抵抗病毒的入侵，對(duì)機(jī)體的免疫系統(tǒng)一直都有免疫刺激作用。

Fryer等從虹鱒魚分離出的傳染性造血器官壞死病毒（IHNV）病毒株接種STE-137細(xì)胞，傳代41代后減毒100倍而成為弱毒株，可以作為減毒疫苗候選毒株。但是，后續(xù)試驗(yàn)表明，該減毒疫苗對(duì)虹鱒魚依然有毒性。Eéout JF等也證實(shí)，用經(jīng)細(xì)胞馴化后形成的無(wú)致病性的魚傳染性胰腺壞死病毒（IPNV）分離毒株對(duì)鮭魚沒(méi)有免疫效果。吳淑勤等研發(fā)的草魚出血熱弱毒疫苗免疫效果良好，是中國(guó)第一個(gè)獲得新獸藥證書的魚用弱毒疫苗。

減毒活疫苗的免疫效果好，免疫劑量小，且不需要添加佐劑。但其不足之處在于可能會(huì)出現(xiàn)毒株返強(qiáng)現(xiàn)象，安全性差，并且由此導(dǎo)致在環(huán)境中失去控制，這限制了活疫苗的應(yīng)用于推廣。

2.滅活疫苗：滅活疫苗是指將病原體通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)放大培養(yǎng)后，利用化學(xué)方法將病原體滅活而制備成的疫苗。該疫苗依然保留著免疫原性，安全性評(píng)價(jià)較好，制備技術(shù)較為成熟，但免疫持續(xù)期較短，需要重復(fù)接種，并且需要添加一定的佐劑以增強(qiáng)免疫效果。

研究表明，用0.2%的福爾馬林，在4℃條件下滅活72小時(shí)后制備的傳染性造血器官壞死病毒（IHNV）滅活疫苗有很好的免疫效果，而且免疫效果從免疫后7天持續(xù)至70天。Nakajima等用福爾馬林滅活的真鯛虹彩病毒（RSIV）疫苗能有效控制虹彩病毒病。RSIV滅活疫苗現(xiàn)已在日本投放市場(chǎng)，成為首個(gè)預(yù)防海水魚的病毒疫苗，主要宿主為真鯛、鰤屬魚類等。臺(tái)灣針對(duì)臺(tái)灣石斑魚虹彩病毒病研制了新的滅活疫苗，內(nèi)陸也針對(duì)傳染性脾腎壞死病毒（ISKNV）、RSIV、研制的滅活疫苗進(jìn)入臨床階段。菲律賓的石斑魚神經(jīng)壞死病毒（RGNNV）滅活疫苗用于免疫褐點(diǎn)石斑魚，同時(shí)對(duì)其它海水魚類的病毒性神經(jīng)壞死病毒（VNNV）也有很好的交叉免疫效果。

總體而言，通過(guò)一定劑量及反復(fù)的免疫，滅活疫苗對(duì)宿主有很好的免疫保護(hù)作用。智利、加拿大、美國(guó)及歐洲一些飼養(yǎng)高經(jīng)濟(jì)價(jià)值魚類的國(guó)家已經(jīng)把接種滅活疫苗作為預(yù)防傳染性疾病的重要方法，同時(shí)要求制藥企業(yè)獲得疫苗生產(chǎn)許可后才能生產(chǎn)魚類病毒滅活疫苗，只有這樣，滅活疫苗的生產(chǎn)和使用都會(huì)更加規(guī)范。

3.亞單位疫苗：亞單位疫苗是除去病原中與免疫反應(yīng)無(wú)關(guān)的成分，保留有效免疫原成分而制成的疫苗。亞單位疫苗要求對(duì)病毒免疫保護(hù)基因的核酸序列及氨基酸序列有很好的前期研究，并找到編碼特定抗原的基因序列進(jìn)行克隆及表達(dá)。亞單位疫苗具有無(wú)傳染性、低成本、可大規(guī)模生產(chǎn)、生產(chǎn)技術(shù)相對(duì)單一的特點(diǎn)，能很好地提高體液免疫。

Gilmore等利用大腸桿菌首次表達(dá)傳染性造血器官壞死病毒G蛋白來(lái)增強(qiáng)虹鱒魚免疫力。用不同劑量及注射頻率注射大腸桿菌更穩(wěn)定平日GNNV的病毒樣顆?？捎糜陬A(yù)防GNNV，免疫4周后，血清中抗體依然可以中和活病毒。用桿狀病毒表達(dá)傳染性造血器官壞死病毒（IHNV）和病毒性出血性敗血病病毒（VHSV）的G蛋白，能夠刺激體液免疫，具有比原核表達(dá)更大的表達(dá)量，同時(shí)還解決了原核的G蛋白由于沒(méi)有糖基化免疫效果不穩(wěn)定問(wèn)題，因此，可作為亞單位疫苗的候選。由IPNV的VP2和PV3組成的病毒樣顆粒（VLPs）包含有病毒結(jié)構(gòu)抗原表位、具淋巴細(xì)胞和分泌抗IPNV抗體的強(qiáng)大增殖能力，IPNV病毒樣顆粒可以用于IPNV亞單位疫苗。用桿狀病毒表達(dá)的NNV亞單位病毒顆粒，對(duì)歐洲鱸魚有很好的免疫保護(hù)效果。大腸桿菌表達(dá)諾達(dá)病毒主衣殼重組蛋白酶recCP，對(duì)大西洋鮭比對(duì)比目魚的免疫保護(hù)更顯著，可用作預(yù)防諾達(dá)病毒的亞單位疫苗。

采用微量免疫中和法證實(shí)，大腸桿菌表達(dá)草魚呼腸弧病毒（GCRV，又稱草魚出血病毒，GCHV）的VP5亞單位疫苗免疫草魚，可以預(yù)防GCRV；ELISA方法也證實(shí)，口服GCRV的PV5亞單位免疫的保護(hù)率高達(dá)90%以上。

4.合成肽疫苗：用單克隆抗體中和蛋白的抗原表位的結(jié)合，讓合成肽作為疫苗成為可能。一旦魚的T細(xì)胞和B細(xì)胞的抗原表位被識(shí)別，運(yùn)用合成肽技術(shù)生產(chǎn)合成肽疫苗就變?yōu)楝F(xiàn)實(shí)，這種合成肽疫苗具有穩(wěn)定性好、沒(méi)有傳染性和易于生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。合成肽疫苗的使用，必須建立在魚體對(duì)不同抗原免疫應(yīng)答機(jī)制的深入研究基礎(chǔ)之上，關(guān)鍵在于確定抗原決定簇中能促使產(chǎn)生免疫應(yīng)答成分的氨基酸序列。Fridholm等證明，原核表達(dá)的PV2蛋白與從病毒中分離純化的PV2蛋白，利用兔子模型來(lái)在代本外進(jìn)行中和病毒實(shí)驗(yàn)，兩者引起相同的免疫反應(yīng)。

5.DNA疫苗（基因工程疫苗）：DNA疫苗又稱基因工程疫苗或核酸疫苗，是將編碼病原的抗原基因插入環(huán)狀的真核表達(dá)DNA載體中，經(jīng)接種被宿主細(xì)胞攝取，從而被轉(zhuǎn)錄表達(dá)病原的抗原蛋白，刺激機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)答反應(yīng)。魚類的DNA疫苗通過(guò)肌肉注射而進(jìn)入魚體骨，被魚體的肌肉細(xì)胞和單核細(xì)胞攝取、表達(dá)、產(chǎn)生的抗原蛋白在肌肉細(xì)胞的MHCⅠ或抗原提呈細(xì)胞（APCs）的MHCⅠ和MHCⅡ的作用下，修飾成內(nèi)生源的抗原。1990年，Wolff等首次提出后，DNA疫苗得到迅速發(fā)展，預(yù)計(jì)此項(xiàng)技術(shù)將引領(lǐng)未來(lái)疫苗產(chǎn)業(yè)化的革命性發(fā)展，因此，也被業(yè)界稱為“第三代疫苗”。

由于缺乏有效的病毒疫苗和滅活疫苗，且目前無(wú)法制備病毒疫苗，DNA疫苗將是今后魚類病毒疫苗的發(fā)展趨勢(shì)。1996年，首次報(bào)道了IHNV的DNA疫苗的應(yīng)用，通過(guò)使用含有IHNV的G蛋白基因的質(zhì)粒免疫虹鱒，可以有效預(yù)防虹鱒JHNV。2005年，IHNV DNA疫苗在加拿大獲得注冊(cè)新獸藥，并得到廣泛推廣應(yīng)用。用VHSV病毒G蛋白構(gòu)建的DNA疫苗，能夠誘導(dǎo)70%的虹鱒產(chǎn)生較高水平的免疫保護(hù)率。目前，這兩種DNA疫苗已廣泛應(yīng)用。De Las Heras Al等對(duì)IPNV的PV2基因進(jìn)行藻酸鹽微球包裝成DNA疫苗，并首次應(yīng)用于大麻哈魚，保護(hù)率達(dá)80%。Zhang等通過(guò)構(gòu)建pCN86的DNA疫苗對(duì)大工菱鲆進(jìn)行免疫，發(fā)現(xiàn)免疫后的大菱鲆對(duì)抵抗RBIC-C1有很好的效果，因此，能夠廣泛地用于預(yù)防虹彩病毒性腫大細(xì)胞病毒病。

盡管DNA疫苗的科學(xué)性得到驗(yàn)證，但其發(fā)展過(guò)程仍面臨著規(guī)范化等一系列問(wèn)題。美國(guó)食品藥品監(jiān)督局（FDA）、歐洲藥品監(jiān)督局（EMA）和世界衛(wèi)生組織（WHO）都陸續(xù)頒布了相關(guān)指導(dǎo)意見(jiàn)，主要強(qiáng)調(diào)染色體整合外源DNA、DNA耐受能力和DNA疫苗是否會(huì)誘導(dǎo)自身免疫疾病等方面的相關(guān)問(wèn)題。國(guó)際上對(duì)是否認(rèn)定免疫DNA疫苗的動(dòng)物為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物存在不同標(biāo)準(zhǔn)，因此有必要統(tǒng)一。若免疫DNA疫苗的魚被認(rèn)為是轉(zhuǎn)基因生物，則必須對(duì)其產(chǎn)品銷售加以標(biāo)識(shí)，這將直接影響消費(fèi)者的消費(fèi)意愿。由于不確定DNA 疫苗在魚體內(nèi)以及環(huán)境中的影響，歐洲當(dāng)局對(duì)于如何標(biāo)識(shí)DNA疫苗免疫的動(dòng)物仍存在爭(zhēng)議。

二、我國(guó)水產(chǎn)疫苗在水產(chǎn)養(yǎng)殖病害防治中的應(yīng)用

目前，我國(guó)水產(chǎn)疫苗在水產(chǎn)養(yǎng)殖病害防治中的應(yīng)用處于零星、局部、小規(guī)模、不規(guī)范的狀態(tài)，尚無(wú)一種疫苗實(shí)現(xiàn)真正意義上的產(chǎn)業(yè)化。盡管如此，以草魚疫苗為例，我們走過(guò)了40多年的發(fā)展歷程，讓我們嘗試了孕育的艱辛與喜悅，也預(yù)示著我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖病害防治的疫苗變革期的到來(lái)。

（一）草魚土法免疫技術(shù)為我國(guó)水產(chǎn)疫苗的應(yīng)用做出了開(kāi)創(chuàng)性的貢獻(xiàn)

草魚易患爛鰓、赤皮、腸炎、出血等病，對(duì)草魚養(yǎng)殖業(yè)危害性大，1969年中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院珠江水產(chǎn)研究所科研人員從獸醫(yī)方面以病鴨制備滅活組織漿疫苗防治鴨瘟取得良好效果中得到啟發(fā)，成功制成草魚組織疫苗（亦稱“草魚土法疫苗”），在廣東順德試驗(yàn)取得了草魚成活率80%以上的良好效果。由于土法疫苗制備技術(shù)簡(jiǎn)單，成本便宜，效果顯著，深受群眾歡迎，成為七十年代防治草魚病的主要技術(shù)措施之一，直至現(xiàn)在，該疫苗技術(shù)仍在廣東、江西等塘魚生產(chǎn)區(qū)廣泛采用。草魚土法免疫技術(shù)的成功應(yīng)用，不僅僅是解決草魚病的問(wèn)題，而且還為廣大水產(chǎn)養(yǎng)殖者認(rèn)識(shí)水產(chǎn)疫苗上了第一課，為我國(guó)未來(lái)在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)大規(guī)模使用疫苗打下了良好的觀念基礎(chǔ)。

（二）草魚出血病細(xì)胞疫苗展示了人工疫苗在水產(chǎn)病害防治中的優(yōu)越性

草魚出血病細(xì)胞疫苗是通過(guò)病毒在人工敏感細(xì)胞擴(kuò)增的途徑制備而成，它解決了土法疫苗依賴于病魚材料，并且成分復(fù)雜、穩(wěn)定性差、大面積應(yīng)用受限制等問(wèn)題。自上世紀(jì)80年代以來(lái)，草魚出血病細(xì)胞滅活疫苗和草魚出血病細(xì)胞弱毒疫苗已在廣東、廣西、福建、海南、湖北、湖南、四川、浙江、江蘇等省市進(jìn)行應(yīng)用或區(qū)域性試驗(yàn)，從體重12g左右的草魚種到1000g以上的成魚均可注射接種，其中草魚出血病細(xì)胞弱毒疫苗的免疫保護(hù)率高達(dá)90%以上。草魚出血病細(xì)胞疫苗技術(shù)的建立標(biāo)志著我國(guó)最大宗養(yǎng)殖品種草魚主要病患可獲得人工免疫的預(yù)防，結(jié)合草魚爛鰓、赤皮、腸炎“三病”細(xì)菌三聯(lián)疫苗的使用，其保護(hù)范圍得到擴(kuò)展而更具應(yīng)用價(jià)。同時(shí)該項(xiàng)技術(shù)水平達(dá)到國(guó)際先進(jìn)的事實(shí)反映了我國(guó)具有自主研發(fā)的能力，為我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)全面實(shí)施疫苗增強(qiáng)了信心。

（三）多樣化疫苗在水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)病害防治中初顯良好效果

我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖品種多樣化，隨之疾病類型多樣化、疫苗研究也多樣化，尤其是近年來(lái)一些進(jìn)入了田間試驗(yàn)階段的疫苗初步顯示了良好的免疫保護(hù)效果，如淡水養(yǎng)殖魚類細(xì)菌性敗血癥疫苗對(duì)鯽魚注射的有效率達(dá)90%以上、甲魚口服相對(duì)成活率約60%、鰻鱺佐劑苗口服相對(duì)成活率約80%；抗鱖魚病毒疫苗粗制劑可分別提高苗種和親魚子代存活率5%～35%和5%～15%；海水魚類弧菌（哈維氏弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、創(chuàng)傷弧菌、最小弧菌、鰻弧菌）雙價(jià)苗、二聯(lián)苗、三聯(lián)苗、基因弱毒苗浸泡接種提高成活率約10%～40%，對(duì)對(duì)蝦可產(chǎn)生免疫增強(qiáng)的功效，提高對(duì)蝦養(yǎng)成率約10%～20%。在局部地區(qū)少部分疫苗已在潛移默化中替代部分高殘留化藥用于水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)病害的防治。

（四）新添國(guó)產(chǎn)疫苗— —嗜水氣單胞菌敗血癥滅活疫苗

魚嗜水氣單胞菌敗血癥滅活疫苗，于2012年的早些時(shí)候獲得生產(chǎn)批文，這是國(guó)內(nèi)第一個(gè)水產(chǎn)細(xì)菌性疫苗的生產(chǎn)批文，也是繼草魚出血病滅活疫苗獲得批文后的第二個(gè)水產(chǎn)疫苗生產(chǎn)批文。該疫苗有兩個(gè)優(yōu)點(diǎn)：一是免疫接種保護(hù)率高。嗜水氣單胞菌來(lái)源活疫苗主要用于預(yù)防由嗜水氣單胞菌引起的魚類急性出血性敗血癥，又稱暴發(fā)性流行性病、出血病、出血性腹水病等。自上世紀(jì)80年代末以來(lái)，我國(guó)的大多數(shù)水產(chǎn)養(yǎng)殖地區(qū)都不同程度地發(fā)生此病，并大規(guī)模流行，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重時(shí)魚的發(fā)病率高達(dá)100%，重癥病魚死亡率可高達(dá)95%以上；患此病癥的魚從發(fā)病到死亡時(shí)間僅3天～5天時(shí)間。目前多為使用各類抗菌藥物防治，但因細(xì)菌耐藥性的問(wèn)題，藥物防治效果呈逐年下降趨勢(shì)，急需采取新的防治措施。南京農(nóng)業(yè)大學(xué)等單位在2001年研發(fā)了魚嗜水氣單敗血病滅活疫苗，因種種原因一直未投入生產(chǎn)。中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院珠江水產(chǎn)研究所自2007年與南京農(nóng)業(yè)大學(xué)合作，開(kāi)始該疫苗的實(shí)驗(yàn)室研究和推廣應(yīng)用示范。試驗(yàn)室的注射接種試驗(yàn)組相對(duì)免疫保護(hù)率為75%～85%，浸泡接種免疫保護(hù)率為62%～66%；目前已在廣東等10個(gè)省區(qū)示范應(yīng)用。二是浸泡接種操作方便。浸泡免疫簡(jiǎn)便，能大批量接種免疫，勞動(dòng)強(qiáng)度較低，尤其適用于魚苗接種免疫。