陳立萍，楊 峻，聶東興，袁善奎，李富根

(農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所，北京 100125)

水稻稻瘟病(Rice blast)是危害水稻生產(chǎn)的最重要病害之一，在水稻整個(gè)生育期均能發(fā)生，引起苗瘟、葉瘟、穗頸瘟和節(jié)瘟，嚴(yán)重影響水稻的產(chǎn)量和品質(zhì)[1]。防治稻瘟病的傳統(tǒng)藥劑如三環(huán)唑、稻瘟靈、異稻瘟凈等近年來(lái)抗性產(chǎn)生情況較為普遍[2-3]，需要合理選擇不同類(lèi)型殺菌劑，以延緩抗性的產(chǎn)生，同時(shí)保證藥劑的防治效果和減少農(nóng)藥的使用量。

甲氧基丙烯酸酯類(lèi)殺菌劑是目前最熱門(mén)的一類(lèi)殺菌劑，其全球銷(xiāo)售額超過(guò)30億美元，占全球殺菌劑總市場(chǎng)的21.2%[4]。目前國(guó)內(nèi)外已有多家農(nóng)藥公司在我國(guó)取得該農(nóng)藥的登記，這些產(chǎn)品劑型不同，防治對(duì)象迥異，不同廠商推薦使用的劑量懸殊較大，顯得比較混亂。其中嘧菌酯在稻瘟病上正式登記的廠家有29家，劑型有可濕性粉劑、懸浮劑、微囊懸浮劑、水分散性粒劑、微乳劑等，不同登記產(chǎn)品的推薦使用劑量差別非常大，在防治水稻稻瘟病的最高劑量與最低劑量之間相差近8倍。

為了驗(yàn)證不同嘧菌酯產(chǎn)品對(duì)水稻稻瘟病的防治效果，以明確不同劑型、相同劑型不同企業(yè)產(chǎn)品的防效是否存在差異，本研究選擇了幾個(gè)有代表性的廠家的產(chǎn)品，從離體抑菌活性、盆栽小苗和田間藥效等方面開(kāi)展比較研究，以期評(píng)價(jià)劑型及加工工藝對(duì)嘧菌酯防治水稻稻瘟病的效果的影響，為科學(xué)用藥和農(nóng)藥登記管理提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑 試驗(yàn)藥劑共包括6個(gè)嘧菌酯制劑產(chǎn)品(表1)，其中懸浮劑3個(gè)，可濕性粉劑、微囊懸浮劑、水分散粒劑各1個(gè)。

表1 嘧菌酯試驗(yàn)藥劑基本信息

另設(shè)對(duì)照藥劑75%三環(huán)唑可濕性粉劑(序號(hào)：G)，由江蘇省通州正大農(nóng)藥化工有限公司生產(chǎn)，使用劑量300 g a.i./hm2；清水空白對(duì)照(序號(hào)：H)。

1.2 供試病原菌 稻瘟病菌菌株(Magnaporthegrisea), 由安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全研究所提供。

1.3 離體試驗(yàn)

1.3.1 菌絲培養(yǎng) 將稻瘟病菌接種到PSA培養(yǎng)平板上，置于生化培養(yǎng)箱中，28℃條件下培養(yǎng)7～10d備用。

1.3.2 含藥平板的制備 在無(wú)菌條件下，吸取藥液加入融化的PSA培養(yǎng)基中，制成終濃度為5、2.5、1.25、0.63和0.31μg/mL的含藥平板；為防止病菌旁路呼吸而影響結(jié)果，培養(yǎng)基中同時(shí)加入100μg/mL水楊肟酸。同時(shí)設(shè)置不含藥平板(含同濃度溶劑和水楊肟酸)作空白對(duì)照，每處理重復(fù)3次。

1.3.3 接種 在無(wú)菌條件下用打孔器打出直徑5mm的菌碟，接種到含藥平板上，每皿在中央接種3個(gè)菌碟，置于28℃的生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10d。

1.3.4 結(jié)果調(diào)查與計(jì)算 以十字交叉測(cè)量菌落直徑，計(jì)算平均值，再減去接種菌碟直徑，得出菌落增長(zhǎng)直徑，然后計(jì)算菌落生長(zhǎng)抑制率(%)=100×(對(duì)照菌落增長(zhǎng)直徑-處理菌落增長(zhǎng)直徑)/對(duì)照菌落增長(zhǎng)直徑。

將濃度轉(zhuǎn)化為對(duì)數(shù)，抑制率轉(zhuǎn)化為幾率值，利用DPS分析軟件，求出毒力回歸曲線方程及EC50、EC90。

1.4 盆栽試驗(yàn)

1.4.1 孢子培養(yǎng) 將菌絲塊接種到大麥培養(yǎng)基上，28℃條件下培養(yǎng)15d，待菌絲長(zhǎng)滿后倒出，平攤在濕布上保濕培養(yǎng)，待長(zhǎng)出孢子后用滅菌水沖洗下孢子，配成1.0×105孢子/mL懸浮液用于接種。

1.4.2 水稻秧苗準(zhǔn)備 供試品種為原豐早，種于Φ15cm盆缽中，每盆種25粒種子，適量施用氮肥，于4葉期進(jìn)行試驗(yàn)。

1.4.3 接種 用噴霧塔每盆秧苗噴孢子液20mL，蓋塑料薄膜保濕并遮陰，以利孢子侵入和發(fā)病。

1.4.4 施藥 每種藥劑設(shè)50、25、12.5、6.25、3.1μg/mL等5個(gè)濃度梯度和清水對(duì)照(CK)。于接種后24h用小型手捏式噴霧器每盆噴20 mL藥液。適當(dāng)遮陰增濕，確保發(fā)病。

1.4.5 結(jié)果調(diào)查與計(jì)算 按GB/T17980.19-2000調(diào)查和計(jì)算防效，EC50、EC90的計(jì)算方法同離體試驗(yàn)。

1.5 大田試驗(yàn)

1.5.1 試驗(yàn)條件 大田試驗(yàn)在安徽省義安區(qū)天門(mén)鎮(zhèn)進(jìn)行，前茬為冬閑田，土壤為水稻土，土壤有機(jī)質(zhì)為1.3%，供試水稻品種為皖稻153，感稻瘟病。6月4日直播，播種量30kg/hm2。土壤肥力中等，基肥施碳酸氫氨600kg/hm2、過(guò)磷酸鈣300kg/hm2。分蘗肥和穗肥各追施尿素75kg/hm2。試驗(yàn)田常規(guī)管理，水稻長(zhǎng)勢(shì)均勻。

1.5.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 所有嘧菌酯產(chǎn)品均設(shè)3個(gè)劑量(75、150、300 g a.i./hm2)；三環(huán)唑設(shè)1個(gè)劑量(300 g a.i./hm2)。重復(fù)3次，隨機(jī)區(qū)組排列。

1.5.3 施藥時(shí)期和方法 破口前5～7d(8月21日)和抽穗期(8月30日)各1次。用Jacto PJ-16型手動(dòng)噴霧器(噴孔直徑1.0mm，工作壓力0.4～0.5MPa)進(jìn)行噴霧施藥；由低劑量處理向高劑量處理逐個(gè)進(jìn)行細(xì)霧均勻噴灑，用液量450 kg/hm2，不同藥劑處理間施藥前均用清水洗滌噴霧器；空白對(duì)照區(qū)噴等量清水。

1.5.4 結(jié)果調(diào)查與計(jì)算 按GB/T17980.19-2000規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行調(diào)查和防效計(jì)算。

2 結(jié)果與分析

2.1 離體試驗(yàn) 離體實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，不同嘧菌酯產(chǎn)品對(duì)稻瘟病菌的離體活性存在顯著差異。如表2所示，25%嘧菌酯懸浮劑(產(chǎn)品A)和250 g/L嘧菌酯懸浮劑(產(chǎn)品E)對(duì)稻瘟病菌的抑制效果最好，EC50最低，分別為0.54和0.57 μg/mL，35%嘧菌酯懸浮劑(產(chǎn)品C)的抑制效果較差，對(duì)稻瘟病菌的EC50為1.45 μg/mL，是產(chǎn)品A的2.7倍。各藥劑對(duì)稻瘟病菌的EC90與EC50趨勢(shì)一致，也是產(chǎn)品A、E最好，產(chǎn)品C效果較差。

表2 不同嘧菌酯產(chǎn)品對(duì)稻瘟病菌的離體抑制作用

2.2 苗瘟盆栽試驗(yàn) 不同嘧菌酯產(chǎn)品對(duì)苗瘟的防治效果與離體抑菌活性一致。產(chǎn)品A和產(chǎn)品E效果最好，EC50分別為5.54和6.79μg/mL，產(chǎn)品B、D、F的效果次之，產(chǎn)品C的效果最差，EC50為10.26μg/mL，是A的1.9倍。產(chǎn)品A、B、D、E、F的EC90都在30μg/mL左右，而產(chǎn)品C的EC90為42.24μg/mL，比其它5個(gè)產(chǎn)品高約0.4倍(表3)。

表3 不同嘧菌酯產(chǎn)品對(duì)苗瘟盆栽試驗(yàn)的防治效果

2.3 大田穗瘟試驗(yàn)結(jié)果 不同嘧菌酯產(chǎn)品的大田穗瘟防治效果(表4)，不同產(chǎn)品的防效均隨劑量上升而提高，其中在300g a.i./hm2的使用條件下，產(chǎn)品E的防效最高，為86.83%；產(chǎn)品C最低，為77.17%；其余的4個(gè)產(chǎn)品A、B、D、F的防效都在80%～85%之間。在150g a.i./hm2的使用條件下，防效的趨勢(shì)基本一致，D產(chǎn)品防效最高(74.96%)，C產(chǎn)品最低(59.22%)，其余的防效都在65%～70%之間。而75g a.i./hm2的使用條件下，所有產(chǎn)品的防效均較差(<50%)。雖然產(chǎn)品A、C、E劑型相同，但防效也存在較大差異。

從上述結(jié)果可以看出，在相同施藥劑量下，除產(chǎn)品C外，其余嘧菌酯產(chǎn)品的防效均優(yōu)于對(duì)照藥劑三環(huán)唑；不同嘧菌酯產(chǎn)品之間的活性差異也較大，300g a.i./hm2劑量下防效差異達(dá)10%，150g a.i./hm2劑量下防效差異達(dá)16%。在大田應(yīng)用中，用嘧菌酯防治稻瘟要獲得較理想的防治效果，推薦使用劑量應(yīng)在150～300g a.i./hm2之間。

表4 不同嘧菌酯產(chǎn)品對(duì)大田穗瘟的防治效果(%)

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)研究過(guò)程中，由于各產(chǎn)品的實(shí)際檢測(cè)含量值與標(biāo)稱含量值相近，因此在試驗(yàn)中均按標(biāo)稱值進(jìn)行含量計(jì)算和分析。

通過(guò)離體抑菌、盆栽苗瘟和大田穗瘟的試驗(yàn)結(jié)果可以看出，趨勢(shì)基本一致，不同嘧菌酯產(chǎn)品對(duì)稻瘟病的防治效果確實(shí)存在一定的差異，且相同劑量下大多數(shù)嘧菌酯產(chǎn)品的防效優(yōu)于傳統(tǒng)藥劑三環(huán)唑。25%嘧菌酯懸浮劑(產(chǎn)品A)和250g/L嘧菌酯懸浮劑(產(chǎn)品E)效果最好，40%嘧菌酯可濕性粉劑(產(chǎn)品B)、10%嘧菌酯微囊懸浮劑(產(chǎn)品D)和50%嘧菌酯水分散粒劑(產(chǎn)品F)效果次之，35%嘧菌酯懸浮劑(產(chǎn)品C)的效果最差，但從各嘧菌酯產(chǎn)品登記的推薦使用劑量來(lái)看，產(chǎn)品C的推薦劑量反而最低，產(chǎn)品F的推薦使用劑量最高，因此，各產(chǎn)品推薦劑量差異與實(shí)際防效沒(méi)有相關(guān)性?？傮w上來(lái)看，在本試驗(yàn)條件下，僅產(chǎn)品A、F在推薦劑量下使用可獲得較好的防效，大多數(shù)嘧菌酯產(chǎn)品在推薦劑量下很難達(dá)到理想的防治效果。由于所有試驗(yàn)在相同條件下進(jìn)行，可以排除是因病原菌抗性導(dǎo)致的防效差異，也未觀察到劑型的差異與防效的相關(guān)性。因此，建議在農(nóng)藥登記管理中應(yīng)關(guān)注不同企業(yè)產(chǎn)品活性差異的客觀現(xiàn)象，即使是相同有效成分、相同含量、相同劑型的產(chǎn)品，也會(huì)因加工工藝、所使用助劑的差異導(dǎo)致田間防效的不同。