王叢瑤 沈利君 孔毅 翁建華 葉曉莉

中圖分類號 R944.9 文獻標(biāo)志碼 A 文章編號 1001-0408（2018）13-1780-06

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.13.13

摘 要 目的：合成有機聚合物聚乙二醇化聚十六烷基氰基丙烯酸酯（mPEG-PHDCA），制備載藥mPEG-PHDCA納米粒，并研究其體外釋藥行為。方法：采用Knoevenagel反應(yīng)和陰離子聚合反應(yīng)合成mPEG-PHDCA，通過核磁共振氫譜（1H-NMR）進行表征，凝膠滲透色譜（GPC）法測定重均分子量和多分散系數(shù)（PDI）。以阿霉素為模型藥，采用復(fù)乳-溶劑揮發(fā)法制備載阿霉素的mPEG-PHDCA納米粒，透射電鏡觀察其微觀形貌，粒徑儀測定其粒徑和Zeta電位。高效液相色譜法測定納米粒中阿霉素的含量并計算載藥量和包封率，透析袋法考察其體外釋藥特性，比較其與阿霉素溶液的體外釋藥效果。結(jié)果：經(jīng)過1H-NMR和GPC表征，成功合成mPEG-PHDCA，重均分子量約為6 000，PDI為1.13。所制載阿霉素的mPEG-PHDCA納米粒呈圓球顆粒狀，表面光滑、大小均勻、分布良好，無團聚現(xiàn)象，粒徑、Zeta電位、載藥量和包封率分別為（94.61±3.91） nm、（-11.68±0.83） mV、（2.17±0.67）%、（79.54±4.66）%（n=3）。載阿霉素的mPEG-PHDCA納米粒48 h的體外累積釋藥率達到85.38%，釋藥曲線符合Weibull方程（R2=0.979 4）；阿霉素溶液體外4 h已基本釋藥完全。結(jié)論：成功合成具有良好載藥性能、生物相容性和緩釋特性的mPEG-PHDCA，其有望成為新型納米遞藥載體。

關(guān)鍵詞 聚乙二醇化聚十六烷基氰基丙烯酸酯；納米粒；緩釋特性；阿霉素

ABSTRACT OBJECTIVE： To synthesize Monomethoxy-polyethyleneglycolcyanoacrylate-co-poly-hexadecylcyanoacrylate （mPEG- PHDCA）， prepare adriamycin-loaded mPEG-PHDCA nanoparticle and study its in vitro drug release behavior. METHODS： Knoevenagel reaction and anionic polymerization were adopted to synthesize mPEG-PHDCA， and it was characterized with 1H-NMR. Weight-average molecular weight and polydispersity index （PDI） were determined by gel permeation chromatography （GPC）. Using adriamycin as model drug， complex emulsion-solvent evaporation method was used to prepare adriamycin-loaded mPEG-PHDCA nanoparticle. TEM was adopted to observe its micromorphology； particle size and Zeta potential were determined by particle size instrument. The content of adriamycin， drug-loading amount and encapsulated efficiency in nanoparticle were determined by HPLC. The characteristics of drug release in vitro were investigated by dialysis bag method. The drug release in vitro of it was compared with that of adriamycin. RESULTS： After characterized with 1H-NMR and GPC， mPEG-PHDCA was synthesized successfully； mass average molar mass was about 6 000， and PDI was 1.13. Prepared adriamycin-loaded mPEG-PHDCA nanoparticle was round ball-like granule and had smooth appearance， uniform size and good distribution without agglomeration. Particle size， Zeta-potential， drug-loading amount and entrapment efficiency were （94.61±3.91） nm， （-11.68±0.83） mV， （2.17±0.67）%， （79.54±4.66）% （n=3）. Accumulative release rate of adriamycin-loaded mPEG-PHDCA nanoparticle reached 85.38% within 48 h. Drug release curve was Weibull equation distribution （R2=0.979 4）. The adriamycin solution was released completely in vitro after 4 h. CONCLUSIONS： mPEG-PHDCA is synthesized with good drug loading efficiency， biocompatibility and sustained-release properties. It is expected to be a new nano drug delivery carrier.

KEYWORDS mPEG-PHDCA； Nanoparticles； Sustained-release characteristics； Adriamycin

隨著納米技術(shù)的不斷發(fā)展，開發(fā)新型納米制劑為診斷和治療惡性腫瘤等疾病開辟了方向，其中，納米粒（Nanoparticles，NPs）作為一類新型藥物載體，能夠?qū)⑺幬锇d于載體內(nèi)部，具有增強藥物穩(wěn)定性、提高難溶性藥物溶解度、增加藥物生物利用度、控制藥物釋放及靶向遞藥等優(yōu)點[1]。根據(jù)制備納米粒的不同材料可分為無機材料（介孔硅、碳納米管、四氧化三鐵、金納米粒等）和有機聚合物[聚乳酸（PLA）、聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）、聚己內(nèi)酯（PCL）、聚酰胺-胺（PAMAM）等]。無機材料往往存在生物體內(nèi)降解困難和生物毒性等問題，難以進行臨床應(yīng)用[2-3]；而有機聚合物因其具有體內(nèi)降解作用，且降解產(chǎn)物毒副作用小的優(yōu)點，已有眾多有機聚合物制備的納米制劑進入臨床試驗[3]。因此，新型有機聚合物及其在納米制劑中的應(yīng)用也逐漸成為醫(yī)藥工作者的研究熱點。

聚乙二醇化聚十六烷基氰基丙烯酸酯（Monomethoxy-polyethyleneglycolcyanoacrylate-co-poly-hexadecylcyanoacrylate，mPEG-PHDCA）是一種新型有機聚合物，與氰基丙烯酸正丁酯、氰基丙烯酸異丁酯等相比較，其具備聚合度可控、毒性更小、生物相容性更好的優(yōu)勢[4-5]，國內(nèi)尚無上市產(chǎn)品。如果將載藥mPEG-PHDCA制備成納米粒，將能夠賦予藥物緩釋特性等優(yōu)點，并且聚乙二醇鏈的親水性和柔性可賦予納米粒在血液中的長循環(huán)特性，能夠改變藥物的體內(nèi)藥動學(xué)行為，防止被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)清除，延長藥物的血液循環(huán)時間，提高間接靶向性，減輕藥物對人體正常組織的毒副作用[6]。本文將合成有機聚合物mPEG-PHDCA，以臨床抗腫瘤藥阿霉素為模型藥，制備載阿霉素的mPEG-PHDCA納米粒（mPEG-PHDCA- NPs）并對其進行質(zhì)量評價。

1 材料

1.1 儀器

Bruker Avance-400型核磁共振儀（德國Bruker公司）；JEM-1200EX型透射電鏡（日本電子株式會社）； Nano-ZS 90型激光粒度分析儀（英國Malvern公司）；2695型高效液相色譜儀、1515型凝膠色譜儀（美國Waters公司）；ST16R型臺式離心機（美國Thermo Fisher Scientific公司）；Mill-Q型超純水儀（美國Millpore公司）。

1.2 藥品與試劑

十六醇（批號：H103439）、氰基乙酸（批號：C105698）、甲醛（批號：01342055）、吡咯烷（批號：P108562）、單甲氧基聚乙二醇（mPEG，相對分子量： 2 000，批號：01050886）、二環(huán)己基碳二亞胺（DCC，批號：01085167）、二甲氨基吡啶（DMAP，批號：01292960）均購自上海阿拉丁試劑有限公司，均為分析純，純度：均>95%；阿霉素原料藥（浙江海正制藥有限公司饋贈，批號：A20150910，純度：98%）；阿霉素對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：130509-200306，純度：>99%）；泊洛沙姆188（德國BASF公司，批號：P21489）；甲醇、乙腈（美國Honeywell公司，色譜純）；其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 載體材料的合成

2.1.1 十六烷基氰基乙酸酯的合成 取十六醇200 mmol和氰基乙酸240 mmol，置于500 mL三頸燒瓶中，加入120 mL 二氯甲烷和20 mL乙酸乙酯，1 000 r/min磁力攪拌溶解；緩慢滴加溶有300 mmol縮合劑DCC和20 mmol催化劑DMAP的60 mL 二氯甲烷溶液，氮氣保護攪拌室溫反應(yīng)24 h；加入100 mL蒸餾水破壞DCC，抽濾，收集濾液，濾渣用乙酸乙酯洗滌至白色，合并濾液置于分液漏斗萃取，用適量過飽和NaCl溶液洗滌2次，加入無水硫酸鈉，除去有機相中的水分，旋蒸有機溶劑，析出十六烷基氰基乙酸酯（Hexadecylcyanoacrylate，HDCA）粗品。所得HDCA粗品經(jīng)研磨后，用無水乙醇打漿重結(jié)晶，純化3次后得純品HDCA淡黃色固體（約46.4 g，產(chǎn)率：75.1%，純度：>90%）。

2.1.2 聚乙二醇氰基乙酸酯的合成 取聚乙二醇10 mmol、DCC 15 mmol和DMAP 10 mmol，置于250 mL的三頸燒瓶中，加入150 mL 二氯甲烷和25 mL乙酸乙酯，1 000 r/min磁力攪拌溶解。另稱取氰基乙酸12 mmol溶于30 mL的二氯甲烷和10 mL的乙酸乙酯中，緩慢滴加至燒瓶中，室溫下氮氣保護攪拌反應(yīng)24 h；加入100 mL蒸餾水，破壞DCC，經(jīng)抽濾、二氯甲烷洗滌、分液漏斗萃取、收集有機層、過飽和NaCl溶液洗滌、無水硫酸鈉除水、旋蒸有機溶劑，得到聚乙二醇氰基乙酸酯（Monomethoxy-polyethyleneglycolcyanoacrylate cyanoacetate，mPEG-CA）粗品。所得mPEG-CA粗品經(jīng)研磨后，用適量的乙酸乙酯打漿重結(jié)晶，純化3次后得純品mPEG-CA白色蠟狀固體（約17.2 g，產(chǎn)率：82%，純度：>90%）。

2.1.3 聚十六烷基氰基丙烯酸酯的合成 聚十六烷基氰基丙烯酸酯（Poly-hexadecylcyanoacrylate，PHDCA）是由單體HDCA聚合而成。取HDCA 10 g，置于100 mL三頸燒瓶中，加入30 mL二氯甲烷和10 mL無水乙醇， 1 000 r/min磁力攪拌溶解，向反應(yīng)液中滴加37%甲醛溶液3.6 mL和吡咯烷0.2 mL，室溫下氮氣保護攪拌反應(yīng)24 h；將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用10%鹽酸洗滌，每次30 mL，洗滌3次，蒸餾水洗滌，每次20 mL，洗滌2次，最后用適量過飽和NaCl溶液洗滌2次，收集有機層，加入無水硫酸鈉除去有機相中的水分，旋蒸有機溶劑，析出PHDCA粗品。所得PHDCA粗品經(jīng)研磨后，用適量的無水乙醇打漿重結(jié)晶，純化3次后得純品PHDCA黃色固體（約8.6 g，產(chǎn)率：78.4%，純度：>90%）。

2.1.4 mPEG-PHDCA的合成 mPEG-PHDCA是經(jīng)Knoevenagel反應(yīng)和陰離子聚合反應(yīng)而成[4]。稱取PHDCA 22 g和mPEG-CA 10 g，置于三頸燒瓶中，加入100 mL二氯甲烷和50 mL乙酸乙酯，1 000 r/min磁力攪拌溶解后滴加37%甲醛溶液1.8 mL和吡咯烷0.1 mL，室溫下氮氣保護攪拌反應(yīng)48 h；將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用10%鹽酸洗滌，每次30 mL，洗滌3次，蒸餾水洗滌，每次20 mL，洗滌2次，最后用適量過飽和NaCl溶液洗滌2次，收集有機層，加入適量無水硫酸鈉除去有機相中的水分，旋蒸有機溶劑，析出mPEG-PHDCA粗品。所制mPEG-PHDCA粗品用少量二氯甲烷溶解后，冰乙醚沉淀2次，固體經(jīng)油泵抽真空干燥，得到純品mPEG-PHDCA淡黃色固體（約23.4 g，產(chǎn)率：72.8%，純度：>90%）。mPEG-PHDCA的合成路線見圖1。

2.2 載體材料的表征

2.2.1 核磁共振氫譜 通過核磁共振儀測定“2.2”項下合成所得產(chǎn)物HDCA、mPEG-CA、PHDCA、mPEG-PHDCA的核磁共振氫譜（1H-NMR）。結(jié)果顯示，HDCA的1H-NMR（CDCl3，400 Hz），δ（ppm）：0.88（CH3—，3H），1.26（—C13H26—，26H），1.68（—CH2—CH2—OCO—，2H），3.45（—OCO—CH2—CN，2H），4.20（—CH2—CH2—OCO—，2H）；mPEG-CA的1H-NMR（CDCl3，400 Hz），δ （ppm）：3.42（CH3—O—，3H），3.50～3.75（—C2H4—O—，182H），3.81（—OCO—CH2—CN，2H），4.36（—CH2—OCO—，2H）；PHDCA的1H-NMR（CDCl3，400 Hz），δ （ppm）：0.88（CH3—，3H），1.28（—C13H26—，26H），1.75（—CH2—CH2—OCO—，2H），2.20～2.55（—C—CH2—C—，—C—CH2—CH2—C—，—OCO—CH（CN）—CH2—，3.46H），4.27（—CH2—CH2—OCO—，2H）；mPEG-PHDCA的1H-NMR（CDCl3，400 Hz），δ（ppm）：0.88（CH3—，3H），1.26（—C13H26—，26H），1.71（—CH2—CH2—OCO—，2H），2.10～2.55（—C—CH2—C—，—C—CH2—CH2—C—，—OCO—CH（CN）—CH2—，3.05H），3.42（CH3—O—，0.29H），3.50～3.75（—C2H4—O—，14.52H），4.26（—CH2—OCO—，2.36H）。1H-NMR圖譜見圖2。

由圖2所示，化學(xué)位移0.9左右為十六醇上烷基鏈甲基的特征峰，化學(xué)位移3.4左右為聚乙二醇上端甲氧基的特征峰，將這2個特征峰上的3個氫作為標(biāo)準(zhǔn)值，用于峰強度和推算評估各聚合物的純度或重均分子量。經(jīng)計算，HDCA和mPEG-CA合成純度均大于95%，而PHDCA和mPEG-PHDCA的純度均大于90%。在聚合物mPEG-PHDCA中，mPEG的重均分子量為2 000，其結(jié)構(gòu)中重復(fù)單元—C2H4—O—對應(yīng)約180個氫，圖2D相應(yīng)化學(xué)位移峰強度約為15，表明mPEG-PHDCA中的重復(fù)單元HDCA約為12個（180/15=12），因此推算出mPEG- PHDCA的重均分子量約為6 000（即2 000+85-18+12×309+12×30-12×18=5 919）。

2.2.2 重均分子量 采用凝膠滲透色譜法測定mPEG- CA、PHDCA、mPEG-PHDCA的重均分子量和多分散系數(shù)（PDI）。結(jié)果顯示，mPEG-CA、PHDCA、mPEG-PHDCA的重均分子量分別為2 110、3 470、5 850，PDI分別為1.07、1.05、1.13。mPEG-PHDCA的重均分子量接近“2.2.1”項下估算的結(jié)果。繪制重均分子量分布曲線，結(jié)果見圖3。

由圖3顯示，PHDCA和mPEG-CA重均分子量分布均一，而mPEG-PHDCA重均分子量分布曲線中有一個前展肩峰，可能是由于聚合反應(yīng)中有少量的PHDCA直鏈雙側(cè)均偶聯(lián)了mPEG-CA所致。

2.3 載阿霉素的mPEG-PHDCA-NPs的制備

在前期工藝考察的基礎(chǔ)上，筆者采用復(fù)乳-溶劑揮發(fā)法[7]制備mPEG-PHDCA-NPs，稱取阿霉素 10 mg，用去離子水溶解成2.5 mg/mL的內(nèi)水相貯備液；稱取50 mg mPEG-PHDCA，溶于2 mL有機溶劑[二氯甲烷-乙酸乙酯（1 ∶ 1，V/V）]中構(gòu)成有機相；將0.5 mL內(nèi)水相貯備液加入到有機相中，探頭超聲（功率：40 W，冰浴超聲：5 min）乳化分散，形成初乳（W/O）；另取10 mL質(zhì)量濃度為0.5%的泊洛沙姆188水溶液，調(diào)節(jié)pH至9.0左右構(gòu)成外水相；在1 000 r/min磁力攪拌下，將外水相逐滴加入初乳中，滴畢，繼續(xù)攪拌30 min，形成復(fù)乳（W/O/W）；將復(fù)乳置于40 ℃減壓旋蒸除去有機溶劑和部分水，最終用純水定容至10 mL，得到橙紅色乳光的載阿霉素的mPEG-PHDCA-NPs混懸液，并具有明顯乳光。相同方法，不加阿霉素，制備空白mPEG-PHDCA-NPs混懸液。

2.4 阿霉素的含量測定

采用高效液相色譜法檢測阿霉素的含量[8]，色譜柱：安捷倫ODS型（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：乙腈-0.02 mol/L磷酸二氫鈉（磷酸調(diào)pH=3）（30 ∶ 70，V/V）；流速：1.0 mL/min；柱溫：25 ℃；檢測波長：233 nm；進樣量：20 μL；出峰時間：5.14 min。以峰面積（y）為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度（x）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，阿霉素檢測質(zhì)量濃度的線性范圍為0.5～50 ?g/mL，回歸方程為y=85.38x-10.87（r=0.999 8，n=6），檢測限為0.1 ?g/mL，定量限為0.5 ?g/mL。50、5、0.5 ?g/mL阿霉素溶液的日內(nèi)和日間RSD均小于2%（n=3），重復(fù)性試驗中峰面積的RSD為1.26%（n=3），平均回收率為96.9%，RSD均小于2%（n=3），24 h穩(wěn)定性試驗中峰面積的RSD為1.49%（n=3），均符合方法學(xué)要求。

2.5 載阿霉素的mPEG-PHDCA-NPs的質(zhì)量評價

2.5.1 粒徑及Zeta電位 取少量載阿霉素的mPEG- PHDCA-NPs混懸液于樣品池中，蒸餾水稀釋，激光粒度分析儀測定其平均粒徑及Zeta電位。結(jié)果顯示，平均粒徑為（94.61±3.91） nm，Zeta電位為（-11.68±0.83） mV（n=3）。載阿霉素的mPEG-PHDCA-NPs的粒徑分布圖見圖4。

2.5.2 外觀形貌 取一滴載阿霉素的mPEG-PHDCA-NPs混懸液滴于銅網(wǎng)上，用2.0 %磷鎢酸溶液負(fù)染，透射電鏡觀察其外觀形貌。結(jié)果顯示，載阿霉素的mPEG-PHDCA-NPs呈圓球顆粒，表面圓滑，大小均勻，分布良好，粒子之間未見粘連及團聚現(xiàn)象。載阿霉素的mPEG-PHDCA-NPs的透射電鏡圖見圖5。

2.5.3 包封率和載藥量 精密取1 mL載阿霉素的mPEG-PHDCA-NPs混懸液，20 000 r/min（離心半徑6.8 cm）離心30 min，取上清液按“2.1”項下方法測定游離的阿霉素濃度，計算包封率和載藥量。包封率=（阿霉素的加入量-游離的阿霉素的量）/阿霉素的加入量×100%；載藥量=（阿霉素的加入量-游離的阿霉素的量）/載阿霉素的mPEG-PHDCA-NPs的量×100%。結(jié)果顯示，載阿霉素的mPEG-PHDCA-NPs的載藥量為（2.17±0.67）%，包封率為（79.54±4.66）%（n=3），表明mPEG-PHDCA具有較佳的載藥能力。

2.5.4 體外釋藥考察 以pH 7.4磷酸鹽緩沖液作為釋放介質(zhì)，采用透析法考察載阿霉素的mPEG-PHDCA-NPs體外釋藥特性。分別取阿霉素水溶液和載阿霉素的mPEG-PHDCA-NPs混懸液適量（折合阿霉素為1 mg）倒入透析袋內(nèi)，用透析夾封口后置于200 mL釋放介質(zhì)中，放于37 ℃恒溫水浴振蕩（60 r/min）中恒溫振蕩，分別于0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、12、24、48 h取樣1 mL，同時補加等量空白釋放介質(zhì)，測定取樣液中阿霉素的含量，計算累積釋藥率（Q），繪制體外釋藥曲線，再分別用零級動力學(xué)、一級動力學(xué)、Higuchi模型、Weibull模型對其體外釋藥行為進行擬合。體外累積釋藥曲線見圖6，體外釋藥曲線方程擬合結(jié)果見表1。

由圖6顯示，阿霉素水溶液在釋放介質(zhì)中釋藥很快，4 h時藥物已基本全部釋放，累積釋藥率達到95.32%。載阿霉素的mPEG-PHDCA-NPs混懸液的釋藥行為可以分為突釋和緩釋兩相，開始時釋放較快，3 h內(nèi)的累積釋藥率為42.25%，這可能由于部分藥物吸附在納米粒表面故釋放較快，而隨后釋藥曲線漸趨平穩(wěn)，緩慢釋藥，48 h內(nèi)累積釋藥率為85.38%。擬合方程結(jié)果表明，載阿霉素的mPEG-PHDCA-NPs在磷酸鹽緩沖液中的釋藥行為符合Weibull方程。

3 討論

雖然納米制劑為診斷和治療惡性腫瘤等疾病帶來了曙光，但是能夠最終進入臨床試驗甚至推向應(yīng)用的產(chǎn)品卻非常稀少，究其原因一方面是納米制劑發(fā)揮作用時所依賴的滯留效應(yīng)在臨床試驗中并不明顯，使動物實驗與臨床試驗結(jié)果相差甚遠(yuǎn)[9-10]；另一方面在于制備納米制劑的載體材料不能滿足臨床要求，無機材料雖具備較高的穩(wěn)定性和載藥能力，但同時受到難降解性和毒性的制約；有機聚合物具備優(yōu)良的生物相容性和可降解性，但往往穩(wěn)定性差和載藥量低而難以應(yīng)用[3，11]。因此，納米制劑的研究既需要以更加準(zhǔn)確的臨床理論為指導(dǎo)，同時也需要完美的載體材料為依托，本研究中合成和考察的mPEG-PHDCA載體材料也許可為納米制劑的發(fā)展提供參考。

在制備納米粒工藝中，與其他方法（自乳化溶劑擴散法、納米沉淀法、乳液聚合法等）比較，本研究選擇的復(fù)乳-溶劑揮發(fā)法更加有利于制備包載水溶性藥物的納米粒[12-13]，其原理是將水溶性藥物溶液作為內(nèi)水相，通過兩步乳化形成W/O/W型乳滴，再通過減壓旋蒸除去有機溶劑，在聚合物載體析出組裝成球的過程的同時包載內(nèi)水相的藥物，其中穩(wěn)定的初乳是該法成功的關(guān)鍵，整體工藝更復(fù)雜，要求較高。由于在制備過程中水溶性藥物難以避免地會向外水相泄漏，或者在旋蒸除去有機溶劑過程中吸附在納米粒表面，故可造成載藥性能降低，但相較于已報道[14-15]的材料，載體材料mPEG-PHDCA仍然具有較佳的包封率和載藥量。

綜上，本研究采用Knoevenagel反應(yīng)和陰離子聚合反應(yīng)成功合成了有機聚合物mPEG-PHDCA，以復(fù)乳-溶劑揮發(fā)法制備了載阿霉素的mPEG-PHDCA-NPs，該研究證實納米粒具有較佳的包封率和載藥量、粒徑均一、分散性好及一定的緩釋特性，初步顯示出mPEG-PHDCA的良好的生物相容性，并有望成為一種合適的納米遞藥載體材料，但其體內(nèi)外生物安全性有待進一步研究。

參考文獻

[ 1 ] ULBRICH K，HOL? K，S?BR V，et al. Targeted drug delivery with polymers and magnetic nanoparticles：covalent and noncovalent approaches，release control，and clinical studies[J]. Chem Rev，2016，116（9）：5338-5431.

[ 2 ] ZHENG H，GAO F，VALTCHEV V. Nanosized inorganic porous materials：fabrication，modification and application[J]. J Mater Chem A，2016，4（43）：16756-16770.

[ 3 ] BOBO D，ROBINSON KJ，ISLAM J，et al. Nanoparticle- based medicines：a review of FDA-approved materials and clinical trials to date[J]. Pharm Res，2016，33（10）：2373-2387.

[ 4 ] PERACCHIA MT，DESMA?LE D，COUVREUR P，et al. Synthesis of a novel poly （MePEG cyanoacrylate-co-alkyl cyanoacrylate） amphiphilic copolymer for nanoparticle technology[J]. Macromolecules，1997，30（4）：846- 851.

[ 5 ] PERACCHIA MT，F(xiàn)ATTAL E，DESMAELE D，et al. Stealth PEGylatedpolycyanoacrylate nanoparticles for intravenous administration and splenic targeting[J]. J Control Release，1999，60（1）：121-128.

[ 6 ] KOLATE A，BARADIA D，PATIL S，et al. PEG：a versatile conjugating ligand for drugs and drug delivery systems[J]. J Control Release，2014，192（28）：67-81.

[ 7 ] ZAFAR N，AGUSTI G，F(xiàn)ESSI H，et al. Elaboration of sponge-like biodegradable cationic particles via double- emulsion solvent evaporation[J]. J Disper Sci Technol，2017，38（4）：577-583.

[ 8 ] WANG CY，KONG Y，SHEN LJ，et al. Preparation and cellular uptake mechanism evaluation of liposomal coating-cationic mesoporous silica nanoparticles[J]. Chin J Pharm，2017，48（8）：1138-1147.

[ 9 ] SHI J，KANTOFF PW，WOOSTER R，et al. Cancer nanomedicine：progress，challenges and opportunities[J]. Nat Rev Cancer，2017，17（1）：20-37.

[10] 徐紅，高萌，褚秋辰，等.脂蟾毒配基PLGA-TPGS納米粒的體外細(xì)胞攝取及毒性研究[J].中國藥房，2017，28（16）：2252-2255.

[11] SUNDAR DS，ANTONIRAJ MG，KUMAR CS， et al. Recent trends of biocompatible and biodegradable nanoparticles in drug delivery：a review[J]. Curr Med Chem，2016，23（32）：3730-3751.

[12] YADAV K，YADAV D，YADAV M，et al. Noscapine loaded plga nanoparticles prepared using oil-in-water emulsion solvent evaporation method[J]. J Nanopharm Drug Deliv，2016，3（1）：97-105.

[13] VAUTHIER C. Polymer nanoparticles for in vivo applications：progress on preparation methods and future challenges[M]. Berlin：Springer International Publishing，2016：3-16.

[14] SCHLEICH N，SIBRET P，DANHIER P，et al. Dual anticancer drug/superparamagnetic iron oxide-loaded PLGA- based nanoparticles for cancer therapy and magnetic resonance imaging[J]. Int J Pharm，2013，447（1/2）：94-101.

[15] CAO J，SU T，ZHANG L，et al. Polymeric micelles with citraconic amide as pH-sensitive bond in backbone for anticancer drug delivery[J]. Int J Pharm，2014，471（1/2）：28-36.

（收稿日期：2017-12-15 修回日期：2018-05-21）

（編輯：鄒麗娟）