吳 燕，劉 菁，安 彥，李華龍

(天津市藥品檢驗研究院，天津 300070)

甲基纖維素是一種長鏈取代纖維素，其中約27%～32%的羥基以甲氧基的形式存在。甲基纖維素作為藥用輔料通常以包衣材料、乳化劑、助懸劑、崩解劑和黏合劑等形式而被廣泛用于口服制劑和局部用制劑中，臨床中也常作為人工晶體植入術(shù)的輔助藥物,通常被認(rèn)為無毒、無致敏、無刺激性[1-3]。

甲基纖維素已被多國藥典收載[4-6]，但均未見粒度和粒度分布檢測方法。作為藥用輔料的功能性指標(biāo)之一，結(jié)合藥品醫(yī)療器械審評審批制度改革專項課題要求，本文建立了甲基纖維素的粒度與粒度分布的濕法測定方法并進(jìn)行了方法學(xué)研究[7-9]，為甲基纖維素質(zhì)量控制提供技術(shù)支撐。

1 儀器與試藥

Mastersizaer 2000型激光粒度散射儀，大容量Hydro 2000MU型濕法分散系統(tǒng)，Mastersizaer 2000分析軟件；ZEISS MERLIN Compact型高分辨率場發(fā)射掃描電鏡；甲基纖維素樣品均為廠家提供。無水乙醇、吐溫80均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品測定方法 取樣品180 mg，置900 ml無水乙醇中，使檢測器遮光率為10%，不啟動超聲，以2 200 r/min的轉(zhuǎn)速攪拌5 min后測定。

2.2 測定方法的選擇

2.2.1 分散介質(zhì)的選擇 粒度與粒度分布是甲基纖維素作為藥用輔料的重要功能性指標(biāo)。由于甲基纖維素溶于水，本課題組前期曾建立干法測定其粒度與粒度分布的方法；在課題進(jìn)一步研究中，探討濕法測定甲基纖維素粒度與粒度分布的可能性?？紤]甲基纖維素不溶于無水乙醇，故選擇無水乙醇作分散介質(zhì)，建立了甲基纖維素粒度與粒度分布的濕法測定方法。

2.2.2 樣品濃度的確定 由于樣品濃度影響測定時的遮光度，可能對測定結(jié)果產(chǎn)生影響，故對樣品濃度進(jìn)行了考查，具體為：于900 ml無水乙醇中加入適量樣品，使樣品遮光度分別為5%、10%和15%。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：三個濃度樣品的d(0.1)、d(0.5)、d(0.9)無明顯差異，粒度分布結(jié)果受樣品量影響較小。試驗中選擇樣品測定濃度為遮光度10%。

2.2.3 樣品攪拌速度的確定 考查800、1 500、2 200、2 800和3 000 r/min不同攪拌速度對樣品粒度與粒度分布測定結(jié)果的影響。于900 ml無水乙醇中加入適量樣品，使樣品遮光度為10%，不同轉(zhuǎn)速下攪拌5 min后測定。經(jīng)比較，d(0.1)、d(0.5)、d(0.9)值均無明顯差異，在保證攪拌速度以使物質(zhì)不產(chǎn)生沉降的同時又避免攪動過大產(chǎn)生氣泡干擾測定結(jié)果，本文選擇2 200 r/min的攪拌速度。

2.2.4 樣品攪拌時間的確定 加樣后，分別于攪拌5、10、20和30 min后考查樣品的粒度與粒度分布。經(jīng)比較，d(0.1)、d(0.5)、d(0.9)值均無明顯差異，故攪拌5 min后測定即可保證樣品分散均勻。

2.2.5 超聲時間的選擇 考查超聲對樣品粒度與粒度分布測定結(jié)果的影響。分別于超聲3、5和15 min后進(jìn)行測定。結(jié)果顯示無顯著差異，表明攪拌即可達(dá)到樣品較好地分散與穩(wěn)定；故可不進(jìn)行外部超聲。啟動內(nèi)部超聲時，無水乙醇會產(chǎn)生大量氣泡，測定時會干擾測定結(jié)果，故不宜采用內(nèi)部超聲。

2.2.6 分散助溶劑的選擇 表面活性劑吐溫80的加入可以增加樣品的溶解度，試驗中對是否加入助溶劑進(jìn)行比對。分別以無水乙醇及含0.05%、0.1%和0.2%吐溫80的無水乙醇溶液作為分散介質(zhì)，攪拌5 min后對樣品進(jìn)行粒度分布測定，結(jié)果吐溫80濃度在0%～0.2%之間時，d(0.1)、d(0.5)、d(0.9)值均無明顯差異，故選擇不添加助溶劑。

2.2.7 計算結(jié)果模型的選擇 根據(jù)Mastersizaer 2000分析軟件說明：單峰模型主要針對粒徑分布較窄的樣品，而甲基纖維素的粒度分布較寬，在利用單峰模型進(jìn)行計算時，存在模型失真，所以選擇適用于大多數(shù)磨細(xì)的和天然的樣品分析的通用計算模型[10]。

2.2.8 測量時間的確定 最佳測量時間取決于樣品的粒度及其粒度分布，粒度分布范圍廣的物質(zhì)需要較長的測量時間，以確保正確反應(yīng)樣品的粒度分布情況。試驗中將樣品測量時間與背景測量時間統(tǒng)一，分別考查3、5、8和10 s不同測量時間條件下，甲基纖維素粒度與粒度分布測定結(jié)果。結(jié)果顯示無顯著差異，考慮甲基纖維素粒度分布較寬，采用5 s為測量時間。

2.2.9 光學(xué)參數(shù)的確定 Mastersizaer 2000型激光粒度散射儀采用雙波長激光器，分別是633 nm的氦-氖紅色氣態(tài)激光器和466 nm的藍(lán)色固體發(fā)光二極管(LED)激光器。對于甲基纖維素這種粒度較大的樣品，只使用藍(lán)光光源即可以獲得理想的測試效果。藍(lán)光折射率設(shè)為1.336；樣品為白色，故吸收率設(shè)定為0；采用無水乙醇為分散介質(zhì)，分散劑折射率為1.32。

2.3 樣品測定結(jié)果 按“2.1”項下測定方法，對3個廠家共計10批樣品進(jìn)行測定，測定結(jié)果見表1，粒度分布曲線見圖1(以6批樣品為例)。

2.4 中間精密度 按“2.1”項下測定方法，選擇3 d對同一批樣品進(jìn)行測試，每日平行測定兩次，結(jié)果顯示方法重復(fù)性較好。見表2。

2.5 溶液穩(wěn)定性考查 取樣品溶液室溫放置2和4 h后同法測定粒度與粒度分布，結(jié)果無顯著差異，提示室溫放置4 h樣品溶液中粒子未發(fā)生聚集，性質(zhì)較穩(wěn)定。

表1 樣品粒度分布測定結(jié)果 μm

圖1 6批樣品(1#、3#、5#、6#、8#、9#)粒度分布曲線

表2 中間精密度試驗結(jié)果μm

3 討論

3.1 粒度分布曲線分析 粒度分布曲線反映出樣品中不同粒徑顆粒占顆?？偭康陌俜?jǐn)?shù)。當(dāng)樣品的粒度分布較集中時，曲線多呈現(xiàn)較窄的單峰；而試驗中10批甲基纖維素樣品的粒度分布曲線均呈現(xiàn)雙峰，提示樣品顆粒分布不均勻，存在分別以1 μm及100 μm兩種粒徑為中心，粒子集中分布的情況。

3.2 方法比對 本文采用掃描電鏡對3個廠家10批甲基纖維素樣品進(jìn)行分析，如圖2所示(以6批樣品為例)?？芍?，3個廠家的樣品粒度分布均較分散，大粒徑與小粒徑均占有一定比例，與激光粒度分析法得出的結(jié)論基本相符。

圖2 6批樣品(1#、3#、5#、6#、8#、9#)電鏡照片

激光散射法具有粒徑測定范圍廣、結(jié)果重現(xiàn)性好等特點[11，12]。目前國內(nèi)未見甲基纖維素粒度分析的文獻(xiàn)報道，為加強(qiáng)藥用輔料功能性指標(biāo)的研究，本文建立了濕法測定甲基纖維素的粒度及粒度分布方法。通過方法學(xué)研究，顯示本方法簡便、快速、準(zhǔn)確，可用于甲基纖維素藥用輔料的質(zhì)量控制。