賈金宏，王傳樸，楊繼民

（山東省菏澤市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，菏澤 274000）

0 引言

近些年，隨著山東省菏澤市牛羊養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)不斷向前發(fā)展，牛羊動(dòng)物疫病呈現(xiàn)高發(fā)趨勢，給畜牧養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)健康可持續(xù)發(fā)展造成的威脅越來越大，其中牛羊蠕蟲病是危害十分嚴(yán)重的寄生蟲疾病之一。在牛羊蠕蟲病防控過程中，由于不合理的使用驅(qū)蟲藥物，使得蠕蟲對藥物產(chǎn)生了較強(qiáng)的耐藥性，防控難度越來越大，所以進(jìn)一步做好本地區(qū)蠕蟲病流行病學(xué)調(diào)查，篩選有效的藥物，對指導(dǎo)養(yǎng)殖戶科學(xué)防治有著重要的現(xiàn)實(shí)意義。

1 牛羊蠕蟲病流行病學(xué)調(diào)查

1.1 調(diào)查對象

調(diào)查選取了山東省菏澤市牡丹區(qū)、定陶區(qū)、曹縣、成武縣、單縣、巨野縣6個(gè)縣區(qū)作為調(diào)查區(qū)域，調(diào)查了上述6個(gè)縣區(qū)79家牛羊?qū)I(yè)養(yǎng)殖戶和當(dāng)?shù)孬F醫(yī)門診。

1.2 調(diào)查方法

通過實(shí)地走訪各個(gè)實(shí)驗(yàn)地，在各個(gè)養(yǎng)殖專業(yè)戶進(jìn)行實(shí)地調(diào)查，采集牛羊新鮮糞便，并結(jié)合當(dāng)?shù)孬F醫(yī)門診的實(shí)際情況，開展實(shí)驗(yàn)診斷。

1.3 蠕蟲蟲卵實(shí)驗(yàn)室檢查方法

1.3.1 糞便采集

根據(jù)不同養(yǎng)殖場的養(yǎng)殖規(guī)模，按照10%的比例采集哺乳犢牛羔羊、育成牛育成羊、成年母牛成年母羊的新鮮糞便，每頭牛羊采集新鮮糞便50 g，分別放置在采樣袋中，并逐一編號(hào)登記，帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行診斷，不能及時(shí)送回實(shí)驗(yàn)室的，要放到4 ℃冰箱中冷藏。

1.3.2 直接涂片鏡檢

取一個(gè)潔凈的載玻片上，其中滴入1滴生理鹽水，用棉簽挑取綠豆大小的糞便，和生理鹽水充分混合均勻后，蓋上蓋玻片，在高倍顯微鏡下觀察，察看糞便中是否存在蟲卵。每個(gè)樣本可以連續(xù)做3～5個(gè)切片進(jìn)行鏡檢，提高檢測的準(zhǔn)確率[1]。

1.3.3 集蟲法

對于個(gè)體較小的蟲卵可以采用飽和食鹽水過濾法進(jìn)行檢測。取2 g新鮮糞便，放置于燒杯中，向其中加入10倍飽和食鹽水，充分混合均勻，使用過濾裝置過濾到另一個(gè)燒杯中，然后使用滴管將飽和食鹽水加滿到液面略高于瓶口，但不能溢出，在瓶口上蓋上蓋玻片，確保蓋玻片與液面緊密結(jié)合，不存在空氣，靜置30 min后，輕輕取下載玻片，在顯微鏡下觀察蟲卵。對于蟲卵個(gè)體較大的，主要采用沉淀法進(jìn)行診斷[2]。取5 g新鮮糞便，放置在燒杯中，使用清水混合均勻后，再加入20倍左右的清水，攪拌均勻，使用濾網(wǎng)，過濾到另一個(gè)燒杯，加滿水，靜置30 min后，舍去上層，留下沉淀物，然后再向其中加滿水，靜置30 min，如此反復(fù)，直到液體變得清澈，取沉淀物涂抹到載玻片上，鏡檢檢查蟲卵。

1.3.4 蠕蟲幼蟲檢查

采集病死牛羊病變臟器或直腸糞便，放入直徑10 cm的銅篩中，取一個(gè)長15 cm的玻璃漏斗，下端連接長10 cm的膠皮管，將漏斗放置于漏斗架上，向其中加入40 ℃溫水，然后將銅扇放置于溫水中，淹沒糞便，靜置2 h，舍去上層清液，將沉淀物放置在載玻片上，低倍顯微鏡下能夠觀察到活動(dòng)的成蟲。此外，針對某些圓形線蟲病，還可以采用幼蟲培養(yǎng)法，孵化幼蟲，進(jìn)一步明確幼蟲種類。

1.4 調(diào)查結(jié)果

調(diào)查共選取不同年齡階段的羊1200只，不同年齡階段的牛900頭。調(diào)查結(jié)果顯示，羊蠕蟲病感染率為34.47%。其中羊線蟲、吸蟲、絳蟲感染率分別為52.25%、34.25%和16.92%；牛蠕蟲病感染率為31.48%。其中牛線蟲、吸蟲、絳蟲感染率分別為43.00%、29.56%和21.89%。詳細(xì)情況見表1。本次調(diào)查過程，共檢測出11種蠕蟲，蟲卵和幼蟲，其中線蟲5種，絳蟲3種，吸蟲3種。而羊線蟲和捻轉(zhuǎn)血矛線蟲是優(yōu)勢種群，感染數(shù)量分別達(dá)到17.58%（211/1200）和18.00%（216/1200）。

表1 牛羊蠕蟲病流行現(xiàn)狀調(diào)查結(jié)果

2 牛羊蠕蟲病驅(qū)蟲試驗(yàn)

2.1 試驗(yàn)對象選取

研究選取上述流行病學(xué)調(diào)查的經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室診斷確診的體重相當(dāng)、年齡相當(dāng)?shù)幕疾∨Ｑ蚋?0只作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。驅(qū)蟲藥物選擇使用芬苯達(dá)唑、伊維菌素、吡喹酮。

2.2 試驗(yàn)方法

按照隨機(jī)原則，分別將80頭牛和80只羊劃分為4個(gè)組別，命名為實(shí)驗(yàn)1組，實(shí)驗(yàn)2組，實(shí)驗(yàn)3組和對照組，其中實(shí)驗(yàn)1組口服芬苯達(dá)唑，劑量為15 mg/kg。實(shí)驗(yàn)2組皮下注射伊維菌素注射液，劑量為0.2 mg/kg。實(shí)驗(yàn)3組口服吡喹酮，劑量為20 mg/kg[3]。第4組作為對照組，不使用任何藥物。在用藥之前，選擇麥克馬斯特計(jì)數(shù)法，對每克牛羊糞便蟲卵數(shù)量進(jìn)行計(jì)算。使用飽和食鹽水漂浮法，將得到的濾液注入麥克馬斯特計(jì)數(shù)室內(nèi)，靜置2 min后，在顯微鏡下計(jì)算蟲卵數(shù)量，再乘以200，即為每克糞便中蟲卵數(shù)量。

2.3 療效觀察

用藥之后，持續(xù)觀察實(shí)驗(yàn)組和對照組牛羊的臨床癥狀、采食、飲水情況，并及時(shí)采集新鮮糞便，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷，記錄糞便中蟲卵數(shù)量。在用藥12 h后開始記錄，每間隔12 h記錄1次。連續(xù)3 d在糞便中檢測不到蟲卵時(shí)，采集牛羊直腸糞便，采用上述方法計(jì)算糞便中蟲卵數(shù)量。分別在用藥后的第10天、第20天和第30天，采集糞便，進(jìn)行蟲卵檢查。

2.4 牛羊蠕蟲病驅(qū)蟲效果

牛羊蠕蟲病驅(qū)蟲效果見表2。結(jié)合表2數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，不同驅(qū)蟲藥物蟲卵減少率存在較大差異，其中皮下注射伊維菌素注射液的驅(qū)蟲效果最佳，牛、羊蟲卵減少率分別高達(dá)94.31%和91.61%，而口服芬本達(dá)唑和吡喹酮，蟲卵減少率差異性不明顯，但驅(qū)蟲效率高達(dá)80%以上，驅(qū)蟲效果較好。詳細(xì)情況見表2。

表2 牛羊蠕蟲病驅(qū)蟲效果

3 結(jié)束語

牛羊蠕蟲病是牛羊養(yǎng)殖過程中一種常見的體內(nèi)寄生蟲病，蠕蟲蟲卵廣泛存在于自然環(huán)境中，衛(wèi)生條件的良好與否，直接與該種疾病的發(fā)病率有著密切聯(lián)系，飼養(yǎng)條件不良，可加重該種疾病的發(fā)生。通過對山東省菏澤市牛羊蠕蟲病流行病學(xué)調(diào)查，可以發(fā)現(xiàn)，該地區(qū)牛羊蠕蟲病發(fā)病相對較為嚴(yán)重，同時(shí)存在多種蠕蟲病混合感染現(xiàn)象，種類十分復(fù)雜，其中危害最為嚴(yán)重的是吸蟲病和線蟲病。結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查，選取了患病牛羊各80頭，分別選擇使用阿苯達(dá)唑、伊維菌素、吡喹酮進(jìn)行驅(qū)蟲治療，驅(qū)蟲試驗(yàn)結(jié)果顯示，上述3種藥物均沒有出現(xiàn)明顯的毒副作用，藥物使用劑量安全，其中以伊維菌素注射液驅(qū)蟲效果最佳，而剩余2種驅(qū)蟲藥物的蟲卵減少率都高達(dá)80%以上，驅(qū)蟲效果較好。在今后臨床治療過程中，可以將上述3種藥物交替使用，避免蠕蟲產(chǎn)生耐藥性。在進(jìn)行大面積驅(qū)蟲治療過程中，伊維菌素應(yīng)該作為首選藥物。