張新漸 王洪云 劉淑萍 饒高雄 張建英 左愛學(xué)

【摘 要】 目的：研究毛茛科烏頭屬植物雪上一支蒿的化學(xué)成分。方法：用乙醇回流提取濃縮得到浸膏后，用3.6%鹽酸溶解，溶解部分用氨水（25%）調(diào)pH9-10，再用氯仿萃取，所得生物堿膏經(jīng)硅膠、氧化鋁等柱層析方法進行分離和純化，得到單體化合物，利用波譜分析確定化合物結(jié)構(gòu)。結(jié)果：從雪上一支蒿的乙醇提取物中分離得到11個化合物，分別鑒定為：雪上一支蒿甲素（denudatine， 1）、songoramine（2）、brachyaconitine A（3）、brachyaconitineB（4）、松果靈（songorine， 5）、15-乙酰松果靈 （15-actylsongorine， 6）、12-epinapelline （7）、oxonitine （8）、β-谷甾醇（β-sitosterol， 9）、胡蘿卜苷（daucosterol， 10、（2S， 3S， 4R， 12E， 2？R）-2-（2′-羥基二十二碳酰胺基）二十碳-1， 3， 4-三羥基-12-烯（（2S， 3S， 4R， 12E）-N-[2′-（R）-hydroxy docosanoate]-1， 3， 4-trihydroxy-2-amino-eicosanoate-12-ene， 11）；其中化合物6，7，8，11為首次從雪上一支蒿中分離得到。

【關(guān)鍵詞】 雪上一支蒿；化學(xué)成分；二萜生物堿

【中圖分類號】R284.1 【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2018）13-0013-05

Abstract：To study the chemical constituents of Aconitumbrachypodum， multiple methods such as column chromatography， recrystallization were applied. eleven compounds were determined by spectroscopic methods as：denudatine （1）， songoramine （2）， brachyaconitine A （3）， brachyaconitine B（4）， songorine （5）， 15-actylsongorine （6），12-epinapelline（7）， oxonitine （8）， β-sitosterol （9）， daucosterol （10）， （2S， 3S， 4R， 12E）-N-[2′-（R）-hydroxy docosanoate]-1， 3， 4-trihydroxy-2-amino-eicosanoate-12-ene （11）； compounds 6， 7， 8 and 10 were isolated from the Aconitum brachypodum for the first time.

Keywords：Aconitumbrachypodum； Diterpenoidalkaloids； Chemical Constituents

毛茛科烏頭屬（Aconitum）植物約有350種，主要分布于亞洲?！吨袊参镏尽酚涊d我國約有167種，大多數(shù)分布于云南北部、四川西部和西藏東部的高山地帶[1]。目前已經(jīng)有40余種烏頭屬植物當作藥物使用[2]，從烏頭屬植物中開發(fā)了草烏甲素、高烏甲素、3-乙酰烏頭堿等藥品應(yīng)用于臨床。雪上一支蒿來源于毛茛科烏頭屬植物短柄烏頭Aconitum brachypodum Diels.塊根，是云、貴、川等地區(qū)廣泛使用的民間用藥，尤其是在云南應(yīng)用較為普遍，主產(chǎn)于云南北部的東川、會澤等地，具有祛風鎮(zhèn)痛的功效，用于治療風濕疼痛、跌打損傷等癥[3]。1974年版《云南省藥品標準》和1977年版《中國藥典》一部曾經(jīng)收載。以雪上一枝蒿為原料開發(fā)的藥品如雪上一枝蒿總堿片、雪上一枝蒿總堿注射劑、骨痛靈酊以及搽劑、氣霧劑等制劑已經(jīng)用于臨床[4-6]，主要用于治療風濕疼痛、關(guān)節(jié)炎等疾病。但雪上一枝蒿化學(xué)成份研究報道較少，目前認為二萜生物堿是其主要成分[7-9]；為了進一步認識其物質(zhì)基礎(chǔ)，課題組開展了雪上一枝蒿的化學(xué)成分研究；從雪上一枝蒿乙醇提取物中分離鑒定了11個化合物，其中8個二萜生物堿，2個甾體類化合物，1個神經(jīng)酰胺。

1 儀器與材料

1.1 儀器 Yanaco顯微熔點儀；Autospec-3000質(zhì)譜儀；AM-400或DRX-500型核磁共振波譜儀。

1.2 材料柱色譜所用硅膠（200～300目）、薄層色譜硅膠板（青島海洋化工廠、煙臺大學(xué)生物科學(xué)與工程研究所）；柱層析氧化鋁（100～200目）（上海陸都化學(xué)試劑廠）；葡聚糖凝膠LH-20（Pharmacia公司）。層析用試劑甲醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、環(huán)己烷等試劑均用重蒸工業(yè)級；二乙胺為分析純；實驗用水為反滲透濾純化水；萃取氯仿為普通工業(yè)級；再結(jié)晶用試劑為重蒸工業(yè)級試劑。顯色劑采用10%的硫酸乙醇溶液，改良碘化鉍鉀溶液。

雪上一支蒿購于云南省東川地區(qū)，經(jīng)云南中醫(yī)學(xué)院中藥鑒定教研室楊竹雅副教授鑒定為毛茛科烏頭屬短柄烏頭（Aconitum brachypodum Diels.）的塊根。

2 提取與分離

干燥的雪上一支蒿藥材（30kg）粉碎后以95%的乙醇回流提取3次，回收溶劑得棕色浸膏，浸膏用3.6%的鹽酸溶液反復(fù)捏溶過濾，濾液合并后用氨水（25%）調(diào)pH至9～10，用氯仿多次萃取，合并氯仿萃取液，回收溶劑得總生物堿膏（393g）。

總生物堿膏利用氧化鋁柱色譜（100～200目）分離，以石油醚-丙酮-二乙胺（20∶1∶1～3∶1∶1）溶系統(tǒng)梯度洗脫，經(jīng)TLC檢查合并為7個組分（Fr.A-Fr.G）。

Fr.A組分利用硅膠柱色譜（200～300目）層析，以環(huán)己烷-乙酸乙酯-二乙胺（30∶1∶1～5∶1∶1）溶劑系統(tǒng)梯度洗脫，經(jīng)TLC檢查合后合并為3個流分段A-1～3。其中A-1流份用氧化鋁色譜分離，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺（20∶1∶1～5∶1∶1）溶劑系統(tǒng)洗脫，丙酮重結(jié)晶，得化合物5（15.5g）。A-3流分利用硅膠柱色譜分離以環(huán)己烷-丙酮（10∶1～4∶1）梯度洗脫，再用氯仿重結(jié)晶，得化合物9（3.1g）

FrB部分以石油醚-丙酮（1 ∶ 1）為洗脫劑經(jīng)氧化鋁柱層析、色點相同的部分合并為4部分B1～4；B1部分經(jīng)硅膠柱層析及SephadexLH-20柱層析（CHCl3/MeOH， 1∶1），得化合物1（14mg）；B2流分利用氧化鋁色譜以環(huán)己烷-乙酸乙酯-二乙胺（10∶1∶1～5∶1∶1）梯度洗脫后經(jīng)葡聚糖凝膠LH-20柱色譜（甲醇）純化，再用丙酮重結(jié)晶得化合物7（33mg）；B3流分用環(huán)己烷-丙酮-二乙胺（15∶1∶1～10∶1∶1）溶劑系統(tǒng)進行硅膠柱色譜分離，用環(huán)己烷-乙酸乙酯（12∶1～8∶1）溶劑系統(tǒng)反復(fù)進行中性氧化鋁柱色譜純化，再用丙酮重結(jié)晶，得化合物3（20mg）和8（76mg）；B4流分用環(huán)己烷-丙酮-二乙胺（10∶1∶1～8∶1∶1）溶劑系統(tǒng)反復(fù)進行硅膠柱色譜層析，再用丙酮重結(jié)晶得化合物6（26mg）。

Fr.C組分用利用硅膠柱色譜，以氯仿-丙酮系統(tǒng)梯度（40∶1～20∶1）洗脫，經(jīng)TLC檢查后合為3個流分段C1～3。其中C-1流分用丙酮重結(jié)晶得到化合物4（25mg）；C-2流分用環(huán)己烷-丙酮-二乙胺（8∶1∶0.1～5∶1∶0.1）溶劑系統(tǒng)反復(fù)進行硅膠柱色譜，再用丙酮重結(jié)晶，得化合物11（54mg）。

Fr.D組分利用利用氧化鋁色譜，以環(huán)己烷-乙酸乙酯系統(tǒng)（30∶1～5∶1）梯度洗脫，經(jīng)TLC檢查合并，劃分為3個流份B-1～3。其中B-1流份經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析及葡聚糖凝膠LH-20柱色譜純化，得化合物2（87mg）。B2流分用氯仿-甲醇系統(tǒng)梯度（20∶1～9∶1）系統(tǒng)進行硅膠柱色譜分離，再用甲醇重結(jié)晶，得化合物10（37 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色無定型粉末，碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性，分子式：C22H33O2N。H-NMR（400 MHz， C5H5N）δ：6.63（1H， d， J = 6.4 Hz， OH-11）， 5.77（1H， br.s， OH-15）， 5.30（1H， dd， J = 2.3， 2.0 Hz， αH-17）， 4.68（1H， dd， J = 2.4， 1.8 Hz， βH-17）， 4.09（1H， dd， J = 6.7， 4.6 Hz， H-15）， 3.46（1H， br.s， H-20）， 3.39（1H， dd， J = 7.9， 5.6 Hz， H-11）， 1.19（1H， d， J = 6.9 Hz， H-5）， 1.06（3H， d， J = 7.1 Hz， NCH2CH3）， 0.63（3H， s， H-18）； 13C-NMR （100 MHz， C5H5N） δ：40.8（C-1）， 23.5（C-2）， 28.7（C-3）， 34.2（C-4）， 52.9（C-5）， 21.3（C-6）， 42.9（C-7）， 46.1（C-8）， 54.1（C-9）， 44.4（C-10）， 72.7（C-11）， 48.5（C-12）， 25.3（C-13）， 27.2（C-14）， 78.3（C-15）， 155.8（C-16）， 109.5（C-17）， 26.9（C-18）， 57.8（C-19）， 72.5（C-20）， 51.1（NCH2CH3）， 14.1（NCH2CH3）；H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻[10]報道一致，鑒定為雪上一支蒿甲素。

化合物2：白色粉末，分子式：C22H29O3N。H-NMR （400 MHz， C5D5N）δ：5.31（1H， br.s， αH-17）， 5.20（1H， br.s， βH-17）， 4.40（1H， d， J = 2.6 Hz， H-15）， 3.98（1H， d， J = 5.2 Hz， H-1）， 3.81（1H， br.s， H-19）， 3.15（1H， d， J = 2.6 Hz， H-13）， 2.84（3H， s， H-20）， 1.56（1H， d， J = 8.4 Hz， H-5）， 1.03（3H， d， J = 7.2 Hz， NCH2CH3）， 0.84（3H， s， H-18）；13C-NMR（100 MHz， C5D5N）：67.6（C-1）， 30.0（C-2）， 24.1（C-3）， 37.7（C-4）， 48.5（C-5）， 24.1（C-6）， 46.0（C-7）， 50.0（C-8）， 31.2（C-9）， 51.9（C-10）， 30.1（C-11）， 208.4（C-12）， 53.6（C-13）， 37.5（C-14）， 76.8（C-15）， 149.6（C-16）， 111.0（C-17）， 18.9（C-18）， 92.8（C-19）， 66.4（C-20）， 48.5（NCH2CH3）， 14.3（NCH2CH3）；H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻報道[11]一致，鑒定為songoramine。

化合物3：白色顆粒（丙酮），分子式：C32H41O10N。H-NMR （400 MHz， C5D5N）δ：8.01（1H， s， N-CHO）， 7.99（2H， brd，J= 7.3 Hz， OBz-2′， 6′）， 7.31（1H， brt，J= 7.8 Hz， OBz-4′）， 7.30（2H， brt，J= 7.3 Hz， OBz-3′， 5′）， 4.92（1H， d，J= 5.8 Hz， H-14）， 4.69 （1H，brd， J =3.6 Hz， H-3）， 4.25（1H， d，J = 4.8 Hz， H-15）， 4.19（1H， d， J = 7.2 Hz， H-6）， 4.01（1H， brs， H-17）， 3.98（1H， d， J =7.5 Hz， H-19）， 3.84（1H， d， J = 8.8 Hz， H-18）， 3.80（3H， s， 16-OCH3）， 3.47（1H， d， J=4.8 Hz， H-16）， 3.09（3H， s， 18-OCH3）， 3.07（3H， s， 6-OCH3）， 3.04（1H， brd， J = 7.2 Hz， H-1）， 3.02（3H， s， 1-OCH3）， 5.05（1H， d， J = 8.8 Hz， H-18）， 2.98（1H， d，J = 7.5 Hz， H-19）， 2.94（1H， d，J = 14.2 Hz， H-12α）， 2.85（1H， t， J = 5.8 Hz， H-9）， 2.77（1H， brs， H-7）， 2.40（1H， d， J =7.2 Hz， H-5）， 2.38（1H， dd， J = 12.8， 7.2 Hz， H-2β）， 2.17（1H， m， H-10）， 2.17（1H， d， J = 14.2 Hz， H-12β）， 2.08（3H， s， 3-Ac）， 1.38（1H， d，J= 12 8， 3.6 Hz， H-2α）， 1.35（3H， s， 8-Ac）；13C-NMR （100 MHz， C5D5N）：79.5（C-1）， 31.3（C-2）， 70.8（C-3）， 41.3（C-4）， 46.9（C-5）， 83.1（C-6）， 51.6（C-7）， 92.1（C-8）， 43.8（C-9）， 40.4（C-10）， 48.6（C-11）， 35.7（C-12）， 75.1（C-13）， 79.1（C-14）， 79.2（C-15）， 90.5（C-16）， 57.5（C-17）， 71.6（C-18）， 39.3（C-19）， 58.6（18-OCH3）， 61.3（16-OCH3）， 57.9（6-OCH3）， 55.2（1-OCH3）， 20.6（3-CH3C=O）， 21.1（8-CH3C=O）， 171.8（8-CH3C=O）， 169.7（3-CH3C=O）， 166.0（C-7′）， 129.7（C-1′）， 129.7（C-2′， 6′）， 133.4（C-4′）， 128.7（C-3′， 5′）， 162.7（N-CHO）；H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻報道[9]一致，鑒定為brachyaconitineA。

化合物4：白色無定型粉末（丙酮），分子式：C32H41O10N。HNMR（400 MHz， C5D5N）δ：8.15（2H， brd，J=7.3 Hz， OBz-2′， 6′）， 7.39（1H， brt，J = 7.8 Hz， OBz-4′）， 7.29（2H， brt，J= 7.3 Hz， OBz-3′， 5′）， 4.94（1H， d，J= 5.8 Hz， H-14）， 4.68（1H，brd， J = 3.6 Hz， H-3）， 4.65（1H， d，J = 4.8 Hz， H-15）， 4.11（1H， d， J = 7.2 Hz， H-6）， 8.15（1H， brs， H-17）， 2.31-2.43（1H， d， J = 7.5 Hz， H-19）， 2.94（1H， d， J = 8.8 Hz， H-18）， 3.24（3H， s， 16-OCH3）， 3.28（1H， d， J= 4.8 Hz， H-16）， 3.76（3H， s， 18-OCH3）， 3.24（3H， s， 6-OCH3）， 3.04（1H， brd， J = 7.2 Hz， H-1）， 3.12（3H， s， 1-OCH3）， 4.02（1H， d， J = 8.8 Hz， H-18）， 2.77-2.83（1H， d，J = 7.5 Hz， H-19）， 2，46（1H， d，J = 14.2Hz， H-12α）， 2.26-2.33（1H， t， J = 5.8 Hz， H-9）， 5.68（1H， brs， H-7）， 2.10（1H， d， J = 7.2 Hz， H-5）， 2.31（1H， dd， J = 12.8， 7.2 Hz， H-2β）， 2.46-2.57（1H， m， H-10）， 2.46-2.57（1H， d， J= 14.2 Hz， H-12β）， 1.98（3H， s， 3-Ac）， 1.19（1H， d，J= 12.8， 3.6 Hz， H-2α）；13C-NMR（100MHz， C5D5N）：80.3（C-1）， 30.3（C-2）， 72.1（C-3）， 47.1（C-4）， 42.5（C-5）， 86.9（C-6）， 130.4（C-7）， 138.1（C-8）， 40.3（C-9）， 41.5（C-10）， 42.5（C-11）， 40.3（C-12）， 76.6（C-13）， 80.3（C-14）， 73.1（C-15）， 94.0（C-16）， 72.1（C-18）， 52.7（C-19）， 57.4（1-OCH3）， 58.5（6-OCH3）， 61.8（16-OCH3）， 163.9（C-17）， 61.8（18-OCH3）， 20.8（3-CH3C=O） 169.8（3-CH3C=O）， 166.2（C-7′）， 133.0（C-4′）， 129.9（C-1′）， 130.3（C-2′， 6′）， 128.4（C-3′， 5′）；H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻報道[9]一致，鑒定為brachyaconitineB。

化合物 5：白色塊狀結(jié)晶， 分子式：C22H31O3N；H-NMR （400 MHz， CDCl3）δ：5.20（1H， br.s， αH-17）， 5.19（1H， br.s， βH-17）， 4.31（1H， br.s， H-15）， 3.82（1H， dd， J= 8.0， 7.6 Hz， H-1）， 3.50（3H， s， H-20）， 3.31（1H， t， J= 4.0 Hz）， 2.46（1H， dd， J= 18.6， 13.4Hz， βH -11）， 3.03（1H， s， H-13）， 2.16（1H， d， J= 12.5Hz， H-7）， 1.32（1H， d， J= 8.3 Hz， H -5）， 1.06（3H， d， J=8.3 Hz， NCH2CH3）， 0.76（3H， s， H-18）；13C-NMR （100 MHz， CDCl3） δ：71.9 （C-1）， 32.5 （C-2）， 32.6 （C-3）， 35.4 （C-4）， 51.3（C-5）， 23.7（C-6）， 45.3（C-7）， 53.3（C-8）， 36.9（C-9）， 50.5（C-10）， 39.6（C-11）， 213.5（C-12）， 55.2（C-13）， 39.4（C-14）， 78.0（C-15）， 151.8（C-16）， 111.7（C-17）， 26.5（C-18）， 58.2（C-19）， 67.3（C-20）， 52.2（NCH2CH3）， 13.8（NCH2CH3）；H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻報道[12]一致，鑒定為松果靈。

化合物6：白色結(jié)晶（丙酮），分子式為C24H33O4N。H-NMR （400 MHz， CDCl3）：δ：5.64（1H， d， J = 1.8 Hz， H-15）， 5.24（1H， d， J = 1.2 Hz， αH-17）， 4.94（1H， d， J = 1.2 Hz， βH-17）， 3.84（1H， dd， J = 8.9， 6.5 H-1）， 3.45（3H， s， H-20）， 3.09（1H， d， J = 4.1 Hz， H-13）， 2.27（1H， d， J = 5.2 Hz， H-7）， 2.11（3H， s， OAc-15）， 1.31（1H， d， J = 7.6 Hz， H -5）， 1.05（3H， d， J = 7.2 Hz， NCH2CH3）， 0.75（3H， s， H-18）。13C-NMR （100 MHz， CDCl3）：70.2（C-1）， 32.1（C-2）， 32.1（C-3）， 34.1（C-4）， 49.2（C-5）， 23.5（C-6）， 43.3（C-7）， 52.1（C-8）， 36.5（C-9）， 49.2（C-10）， 37.3（C-11）， 209.7（C-12）， 54.0 （C-13）， 37.9（C-14）， 77.0（C-15）， 145.3（C-16）， 112.6（C-17）， 26.1（C-18）， 57.1（C-19）， 65.7（C-20）， 50.9（NCH2CH3）， 13.6（NCH2CH3）， 170.6（OAc-15）， 21.5（OAc-15）；H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻報道[13]一致，鑒定為15-乙酰松果靈（15-actylsongorine）。

化合物7：白色塊狀結(jié)晶， 分子式為：C22H33O3N；H-NMR （500 MHz， C5D5N） δ：5.24（1H， br.s， αH-17）， 4.92（1H， br.s， βH-17）， 4.08（1H， br.s， H-15）， 4.14（1H， dd， J= 5.2， 2.6 Hz， H-12）， 3.30（3H， s， H-20）， 2.98（1H， dd， J= 9.2， 5.3 Hz， H-13）， 2.43（1H， d， J= 8.7 Hz， H-7）， 1.69（1H， d， J= 15.2 Hz， H-5）， 1.28（3H， d， J= 5.4 Hz， NCH2CH3）， 0.75 （3H， s， H-18）；13C-NMR （125 MHz， C5D5N） δ：67.3（C-1）， 26.7（C-2）， 31.2（C-3）， 35.2（C-4）， 51.3（C-5）， 24.2（C-6）， 45.6（C-7）， 40.0（C-8）， 45.0（C-9）， 52.2（C-10）， 31.2（C-11）， 71.9（C-12）， 49.0（C-13）， 35.2（C-14）， 78.1（C-15）， 154.7（C-16）， 112.3（C-17）， 25.2（C-18）， 58.7（C-19）， 69.6（C-20）， 52.2（NCH2CH3）， 13.7（NCH2CH3）；H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻[14]報道一致，鑒定為12-epinapelline。

化合物8：白色無定形粉，分子式為C33H43O12N。H-NMR （400 MHz， CDCl3） δ：1.40 （3H， s， 8-OAc）， 3.06， 3.11， 3.33， 3.77 （each 3H， s， 4 × OCH3）， 4.69 （1H， d， J = 13.6 Hz， H-14）， 7.41～8.26 （5H， m， Ar-H）， 8.62 （1H， s， N-COH）；13C-NMR （100 MHz， CDCl3） δ：83.6（C-1）， 35.4（C-2）， 67.4（C-3）， 43.1（C-4）， 50.0（C-5）， 80.5（C-6）， 52.2（C-7）， 90.9（C-8）， 44.2（C-9）， 40.9（C-10）， 49.0（C-11）， 36.2（C-12）， 75.4（C-13）， 79.9（C-14）， 79.4（C-15）， 92.4（C-16）， 58.3（C-17）， 72.5（C-18）， 39.1（C-19）， 162.9（C-21）， 55.4（1-OCH3）， 57.9（6-OCH3）， 61.6（16-OCH3）， 58.7（18-OCH3）， 172.1（15-CO-CH3）， 21.4（15-CO-CH3）， 166.3（Ar-CO）， 130.6（C-1′）， 130.0（C-2′， C-6′）， 129.0（C-3′， C-5′）， 133.6（C-4′）；H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻報道[11]一致，鑒定為oxonitine。

化合物9：白色鱗片狀晶體（氯仿），用3個展開系統(tǒng)經(jīng)TLC薄層色譜展開后用10%硫酸-乙醇顯色呈現(xiàn)單一紫紅色斑點，為一純化合物，與β-谷甾醇（β-Sitosterol）對照品經(jīng)TLC薄層對比，其Rf值和顯色情況與斑點形狀（色譜行為）一致，鑒定為β-谷甾醇。

化合物10：白色無定形粉末，用3個展開系統(tǒng)展開后用10%硫酸-乙醇顯色呈現(xiàn)單一藍紫色斑點，為一純化合物，與胡蘿卜苷（daucosterol）對照品經(jīng)TLC薄層對比，其Rf值和顯色情況與斑點形狀（色譜行為）一致，鑒定為胡蘿卜苷。

化合物11：白色粉末，分子式C42H83O5N，mp.123～125℃，F(xiàn)AB （+）-MS m/z：705[M+Na + H]+；H NMR（400MHz， C5H5N）δ：8.57 （1H， d， J = 8.4 Hz， NH）， 5.49 （2H， m， H-12， 13）， 5.09 （1H， brs， H-2）， 4.59 （1H， m， H-2′）， 4.50 （1H， m， H-1）， 4.40 （1H， m， H-1）， 4.33 （1H， brs， H-3）， 4.27 （1H， m， H-4）， 0.85（2′CH3）；13C NMR（C5D5N）：δ：62.0（C-1）， 53.0（C-2）， 76.8（C-3）， 72.5（C-4）， 33.8（C-5）， 26.8（C-6）， 29.5～30.4（C-7 to 10， C-15 to 17）， 33.3（C-11）， 130.8（C-12）， 130.7（C-13）， 33.0（C-14）， 33.0（C-18）， 23.0（C-19）， 14.3（C-20）；175 .1（C-1′）， 73.0（C-2′）， 35.7（C-3′）， 25.8（C-4′）， 29.5～30.4 （C-5′ to 19′）， 33.3（C-20′）， 23.0（C-21′）， 14 .3（C-22′）； 以上數(shù)據(jù)與文獻報道[15]數(shù)據(jù)基本一致鑒定為（2S， 3S， 4R， 12E， 2′R）-2-（2′-羥基二十二碳酰胺基）二十碳-1， 3， 4-三羥基-12-烯。

3 討論

從雪上一支蒿的生物堿膏分離得到11個單體化合物，結(jié)構(gòu)類型主要為二萜生物堿、甾體、神經(jīng)酰胺等；在分離得到的單體化合物中，化合物1-8為二萜生物堿，9和10為甾體，11為神經(jīng)酰胺類化合物。其中化合物6-8和11為首次從雪上一支蒿中分離得到。

神經(jīng)酰胺是鞘脂類物質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)，是由長鏈鞘氨醇的氨基和長鏈脂肪酸的羧基形成的酰胺類化合物，具有重要生物學(xué)活性，在多個生理病理過程中發(fā)揮重要作用。神經(jīng)酰胺擔任細胞因子TNF-α、IL-1β和IFN-γ的第二信使，參與幾種淋巴細胞表面蛋白的信號傳遞。在大多數(shù)炎性細胞中，刺激CD95導(dǎo)致迅速且長時間的神經(jīng)酰胺生成[16]。外源性神經(jīng)酰胺增強脂多糖LPS誘導(dǎo)的環(huán)加氧酶2表達[17]，抑制MAPK激活，抑制PMA和TNF-α誘導(dǎo)的中性白細胞釋放超氧化物，抑制磷酸酶D的活性，從而減少中性粒細胞炎癥反應(yīng)。而雪上一枝蒿在各民族民間主要用來治療類風濕性關(guān)節(jié)炎，這些化學(xué)成分與其用于治療炎癥的用法是否有相關(guān)性仍需進一步探討。研究豐富了雪上一枝蒿的化學(xué)成分的認識，為探討雪上一枝蒿用于治療類風濕性關(guān)節(jié)炎等研究提供物質(zhì)基礎(chǔ)。

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