芮勇宇，王 前，裘宇容，鄭 磊

(南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院檢驗醫(yī)學(xué)科，廣州 510515)

《臨床微生物學(xué)檢驗》實驗課教學(xué)和實習(xí)帶教中，需要掌握的儀器多、項目多、技能多，學(xué)生們普遍反映聽得懂、學(xué)得會，但忘得快、記不牢。筆者所在科室近5年應(yīng)用3Dmax技術(shù)、視頻拍攝、Flash動畫技術(shù)，并整合相關(guān)文字、表格、圖譜、電子講稿和電子教材等材料，建立并不斷完善《臨床微生物學(xué)檢驗》虛擬教學(xué)實驗室[1-3]。內(nèi)容包括目前臨床實際開展的項目和使用的儀器，素材參照人民衛(wèi)生出版社和高等教育出版社的本科生教材、臨床檢驗操作規(guī)程、中國合格評定國家認(rèn)可委員會(CNAS)最新認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)、最新行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、最新專家共識或指南、臨床使用的試劑盒及儀器的說明書等權(quán)威資料，并應(yīng)用到實驗課教學(xué)[4-5]和“四生”(實習(xí)生、進修生、研究生、培訓(xùn)醫(yī)師)實習(xí)帶教、交流與答疑中取得較好效果，現(xiàn)報道如下。

1 《臨床微生物學(xué)檢驗》虛擬教學(xué)實驗室建設(shè)

1.1《臨床細菌學(xué)檢驗》虛擬教學(xué)實驗室建設(shè) 按臨床細菌學(xué)檢驗實驗室工作內(nèi)容分為涂片染色及鏡檢、標(biāo)本接種培養(yǎng)及鑒定、細菌藥敏試驗、醫(yī)療廢物處理等模塊。涂片染色及鏡檢模塊，包括生物安全柜使用(Ⅱ級30%外排)、臨床常見類型標(biāo)本(靜脈血、中段尿、痰液、穿刺液等)采集、涂片干燥固定、革蘭染色和抗酸染色，均拍攝視頻，并附標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP)電子版。收集日常工作中典型的涂片結(jié)果，利用顯微鏡配套的數(shù)碼攝像系統(tǒng)進行拍照。經(jīng)過近5年的積累，目前已拍攝照片近2 000張，按標(biāo)本類型整理分類，建立臨床常見標(biāo)本中常見細菌圖譜庫。

標(biāo)本接種培養(yǎng)及細菌鑒定模塊，包括臨床常用培養(yǎng)基、接種方法、培養(yǎng)箱及培養(yǎng)條件、細菌鑒定試驗(儀器法和手工法)、常見細菌鑒定要點流程圖、檢驗結(jié)果審核要點，均拍攝視頻，并附SOP電子版。臨床常見革蘭陰性桿菌鑒定要點流程圖見圖1。應(yīng)用3Dmax技術(shù)建立細菌鑒定試驗儀器法的模擬操作系統(tǒng)。3Dmax技術(shù)是基于PC系統(tǒng)的三維動畫制作軟件，具有可堆疊的建模方式、上手容易、性價比高，以三維呈現(xiàn)信息的方式建立虛擬現(xiàn)實環(huán)境。應(yīng)用Flash動畫技術(shù)建立細菌鑒定試驗手工法的系列鑒定試驗?zāi)M操作系統(tǒng)及結(jié)果觀察，已完成的鑒定試驗包括氧化酶試驗、觸酶試驗、凝固酶試驗(玻片法和試管法)、無乳鏈球菌CAMP試驗、嗜血桿菌衛(wèi)星試驗、葡萄糖氧化發(fā)酵試驗。拍攝常見細菌在常見平板上的菌落培養(yǎng)結(jié)果近500張，按細菌屬種分類整理。

圖1 臨床常見革蘭陰性桿菌鑒定要點流程圖

細菌藥敏模塊，包括K-B法藥敏試驗(手工法)、MIC法藥敏試驗(儀器法)、E-test藥敏試驗，均拍攝視頻，并附SOP電子版、常見屬種細菌藥敏試驗抗菌藥物選擇原則、K-B法和MIC法藥敏試驗結(jié)果解讀規(guī)則的電子版，應(yīng)用3Dmax技術(shù)建立MIC法藥敏試驗(儀器法)的模擬操作系統(tǒng)。醫(yī)療廢物處理模塊，包括垃圾分類、各類垃圾儲存及處理、高壓滅菌鍋使用，均拍攝視頻，并附SOP電子版，應(yīng)用3Dmax技術(shù)建立高壓滅菌鍋使用的模擬操作系統(tǒng)。

1.2《臨床真菌學(xué)檢驗》虛擬教學(xué)實驗室建設(shè) 按臨床真菌學(xué)檢驗實驗室工作內(nèi)容分為涂片染色及鏡檢、標(biāo)本接種培養(yǎng)及藥敏鑒定、真菌血清學(xué)檢測等模塊。涂片染色及鏡檢模塊，包括生物安全柜使用(Ⅱ級100%外排)、臨床常見類型標(biāo)本采集、棉酚蘭染色和革蘭染色，均拍攝視頻，并附SOP電子版。收集日常工作中典型的真菌涂片染色結(jié)果，按真菌屬種分類，目前已拍攝照片近1 000張。標(biāo)本接種培養(yǎng)及鑒定藥敏模塊，包括臨床常用真菌培養(yǎng)基、接種方法及培養(yǎng)條件、單細胞真菌鑒定、多細胞真菌鑒定、單細胞真菌藥敏試驗板條法，均拍攝視頻，并附SOP電子版。真菌血清學(xué)檢測模塊，包括真菌葡聚糖(G試驗)和甘露聚糖(GM試驗)血清學(xué)檢測原理及操作，均拍攝視頻，并附SOP電子版，應(yīng)用3Dmax技術(shù)建立模擬操作系統(tǒng)。

1.3《臨床病毒學(xué)檢驗》虛擬教學(xué)實驗室建設(shè) 按臨床病毒學(xué)檢驗實驗室工作內(nèi)容分為免疫學(xué)方法檢測、分子生物學(xué)方法檢測和生物安全防護等模塊。免疫學(xué)方法檢測模塊，包括酶聯(lián)免疫吸附試驗、化學(xué)發(fā)光法、膠體金層析試紙條的方法原理、配套儀器操作、檢測病毒抗原抗體種類，均拍攝視頻，并附SOP電子版，應(yīng)用3Dmax技術(shù)建立酶聯(lián)免疫吸附試驗配套儀器和化學(xué)發(fā)光法配套儀器的模擬操作系統(tǒng)。分子生物學(xué)方法檢測模塊，包括熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)儀器、生物芯片檢測系統(tǒng)、基因測序儀的使用及可檢測病毒種類，均拍攝視頻，并附SOP電子版，應(yīng)用3Dmax技術(shù)建立模擬操作系統(tǒng)。生物安全防護模塊，包括發(fā)生職業(yè)暴露和銳器傷后的處理流程，均拍攝視頻，并附SOP電子版。

2 《臨床微生物學(xué)檢驗》虛擬教學(xué)實驗室應(yīng)用

2.1應(yīng)用于實驗課教學(xué)[6-7]和“四生”實習(xí)帶教[8-10]將上述素材放于本校《臨床微生物學(xué)檢驗》精品課程網(wǎng)站上，學(xué)生登錄校園網(wǎng)后可免費在線使用，由于虛擬實驗室的內(nèi)容緊密結(jié)合臨床實際工作，故內(nèi)容不僅適用于本科生實驗課輔助教學(xué)，也適用于“四生”和檢驗醫(yī)學(xué)科工作人員自學(xué)?！杜R床微生物學(xué)檢驗》實驗課要求學(xué)生掌握的基本技能很多，通過虛擬實驗室的建設(shè)和應(yīng)用，學(xué)生可很快掌握所有試驗和儀器的標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)范化操作，還通過附錄的SOP學(xué)習(xí)相關(guān)的理論知識，有助于學(xué)生復(fù)習(xí)鞏固理論知識，模擬實驗操作，提高動手能力。學(xué)生們普遍反映通過虛擬實驗室內(nèi)容的自學(xué)，熟練掌握了《臨床微生物學(xué)檢驗》工作的流程和各種操作，為未來實習(xí)和工作奠定了扎實的基礎(chǔ)。

2.2設(shè)計簽字式表格用于自學(xué)及考核[9]將需要學(xué)生掌握的內(nèi)容整理到3個簽字式表格中?！杜R床真菌學(xué)檢驗》簽字式表格的項目包括：生物安全柜使用(Ⅱ級100%外排)、臨床常見類型標(biāo)本采集、棉酚蘭染色、革蘭染色、臨床常用真菌培養(yǎng)基、接種方法及培養(yǎng)條件、單細胞真菌鑒定、多細胞真菌鑒定、單細胞真菌藥敏試驗板條法、真菌葡聚糖(G試驗)和甘露聚糖(GM試驗)血清學(xué)檢測?！杜R床病毒學(xué)檢驗》簽字式表格的項目包括：熒光定量PCR儀器、生物芯片檢測系統(tǒng)、基因測序儀的使用及檢測病毒種類；酶聯(lián)免疫吸附試驗、化學(xué)發(fā)光法、膠體金層析試紙條方法原理、配套儀器操作、檢測病毒抗原抗體種類；發(fā)生職業(yè)暴露和銳器傷后的處理流程。

在實驗課開課或?qū)嵙?xí)開始前將簽字式表格發(fā)放給學(xué)生或?qū)嵙?xí)生，在實驗課教學(xué)或?qū)嵙?xí)帶教后的業(yè)余時間，學(xué)生按簽字式表格中每一項目進行自學(xué)及自我考核。實驗課結(jié)束或?qū)嵙?xí)期滿后，由帶教教師從簽字式表格中隨機抽取內(nèi)容進行考核，并給出考核分?jǐn)?shù)。

2.3作為師生交流與答疑的平臺 學(xué)生與教師通過登錄校園網(wǎng)內(nèi)網(wǎng)進入虛擬教學(xué)實驗室后，采用延時通信(如BBS)和即時通信(如廣播)等方式來實現(xiàn)交流與答疑，能夠方便地與學(xué)生交流與討論，解答學(xué)生實驗或?qū)嵙?xí)中存在的疑問。在學(xué)生開展實驗期間，每次實驗課后當(dāng)天晚上7:00-9:00安排1名實驗課教師負責(zé)在線與學(xué)生溝通交流，可直接通過耳麥對話。“四生”在實習(xí)中遇到疑問均可隨時登錄內(nèi)網(wǎng)將問題放到網(wǎng)站上，實習(xí)帶教老師利用業(yè)余時間上網(wǎng)解答。

3 小 結(jié)

本科緊密結(jié)合臨床常見項目和常用儀器，建立并不斷完善《臨床微生物學(xué)檢驗》虛擬教學(xué)實驗室，應(yīng)用于實驗課教學(xué)和“四生”實習(xí)帶教，學(xué)生和“四生”普遍反映通過上述教學(xué)改革，可以在較短時間內(nèi)掌握各項目和各儀器的標(biāo)準(zhǔn)化操作及相關(guān)理論知識。接下來將根據(jù)每年發(fā)布的相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、專家指南等最新進展，不斷更新虛擬實驗室的內(nèi)容。目前虛擬實驗室主要供南方醫(yī)科大學(xué)在讀學(xué)生或南方醫(yī)院檢驗醫(yī)學(xué)科“四生”登錄校園網(wǎng)后免費在線使用，以后擬將具有自主知識產(chǎn)權(quán)的內(nèi)容整理后出版系列多媒體教材，使更多人受益。