李文軍，范桂虹，楊 明，王開綠

(四川省綿陽市第三人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科，四川 綿陽 621000)

肺癌是臨床常見的惡性腫瘤之一，2013年全國腫瘤登記中心調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，全國肺癌發(fā)病約73.28萬例，占全部惡性腫瘤新發(fā)病例的19.9%，位居第一位[1]。早期肺癌的預(yù)后較好，但無特異性癥狀，易被忽視，多數(shù)入院時已處于中晚期，經(jīng)抗腫瘤治療后整體預(yù)后情況仍較差，5年生存率僅為20%左右[2]。現(xiàn)階段，臨床尚無任何一個指標(biāo)可獨(dú)立預(yù)測腫瘤患者的預(yù)后，尋找新的有價值的肺癌預(yù)后因素一直是臨床研究熱點。腫瘤發(fā)展是一個多因素、多階段累積的過程，其中機(jī)體對腫瘤細(xì)胞免疫監(jiān)視、腫瘤細(xì)胞免疫逃逸等是腫瘤發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。輔助性T細(xì)胞(Th)是CD4+細(xì)胞的主要亞群，包括Th1細(xì)胞、Th2細(xì)胞、Th17細(xì)胞等，其中Th1/Th2失衡提示免疫功能紊亂，可增加腫瘤發(fā)生密切相關(guān)[3]。本研究分析肺癌患者血清Th1、Th2細(xì)胞因子及IL-18水平，并分析其與腫瘤T分期、預(yù)后的關(guān)系，初步探討細(xì)胞因子與腫瘤預(yù)后的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料2015年1月至2017年1月我院收治的非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者120例(NSCLC組)，納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)臨床病理明確診斷為原發(fā)性NSCLC，臨床分期明確；既往未接受放化療、手術(shù)治療；未接受免疫治療；年齡>18歲；病例資料及隨訪資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并肺結(jié)核、慢性阻塞性肺疾病、肺部急性感染等疾?。缓喜⑿?、肝、腎功能障礙；其他惡性腫瘤史；合并自身免疫性性疾病或其他免疫性疾病引起淋巴細(xì)胞亞群功能改變者；精神障礙、神經(jīng)系統(tǒng)疾?。蝗焉锲诨虿溉槠诨颊?。男76例，女44例，年齡35～82歲[(61.58±4.29)歲]；國際抗癌協(xié)會聯(lián)盟(UICC)制定的肺癌TNM分期：Ⅰ期9例，Ⅱ期22例，Ⅲ期53例，Ⅳ期36例。選取同期年齡、性別相匹配的體檢結(jié)果正常者85例(對照組)，男51例，女34例，年齡29～76歲[(59.49±5.67)歲]，兩組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2方法所有受試對象入院后均行空腹靜脈采血5 ml，3000 r/min離心10 min，分離血清，-80 ℃低溫下保存待檢。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清Th1細(xì)胞因子(IL-2、IFN-γ)、Th2細(xì)胞因子(IL-4、IL-10)、IL-18水平，試劑盒購自北京晶美生物工程有限公司。

1.3隨訪采用電話或門診的方式對NSCLC患者進(jìn)行隨訪，末次隨訪時間為2018年2月1日，以隨訪截止時間或死亡為隨訪終點，至隨訪終點共隨訪6～32個月，記錄兩組累積生存率。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 18.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)。計數(shù)資料以率(%)表示，組間比較采用χ2檢驗，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用t檢驗；應(yīng)用kaplan-meier法繪制生存曲線，計算累積生存率，Log-rank法檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1NSCLC組和對照組細(xì)胞因子水平比較NSCLC組IL-2、IFN-γ低于對照組，IL-6、IL-10、IL-18高于對照組(P<0.05)，見表1。

表1 NSCLC組和對照組細(xì)胞因子水平比較 (pg/ml)

2.2不同T分期NSCLC患者細(xì)胞因子水平比較

不同T分期NSCLC患者IL-2、IFN-γ、IL-10水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，Ⅰ～Ⅱ分期患者IL-6、IL-18水平低于Ⅲ、Ⅳ期，Ⅲ期低于Ⅳ期(P<0.05)，見表2。

表2 不同T分期NSCLC患者細(xì)胞因子水平比較 (pg/ml)

2.3隨訪結(jié)果截止隨訪終點，120例患者中，累積生存率為55.83%(67/120)，中位生存時間時間為25.7個月。根據(jù)初診時IL-6和IL-18是否正常分為正常組和升高組，IL-6正常組和3年生存率為78.95%，高于IL-6升高組的45.12%(P<0.05)；IL-18正常組生存率為76.0%高于IL-18升高組的50.53%(P<0.05)，見圖1，圖2。

圖1 IL-6正常組和升高組生存曲線

圖2 IL-18正常組和升高組生存曲線

3 討論

Th細(xì)胞在體液免疫和細(xì)胞免疫中均起重要作用，根據(jù)T細(xì)胞功能分為Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞，其中Th1細(xì)胞主要分泌IL-2、TNF-α、INF-γ等，可參與介導(dǎo)細(xì)胞免疫、炎癥反應(yīng)、抗病毒等，Th2細(xì)胞主要分泌IL-4、IL-6、IL-10等細(xì)胞因子，可促使B細(xì)胞增殖[4]。正常生理情況下，Th1/Th2細(xì)胞處于動態(tài)平衡狀態(tài)，共同參與機(jī)體免疫中；當(dāng)機(jī)體處于病理狀態(tài)時，Th1、Th2細(xì)胞分泌的因子也會隨之發(fā)生改變，出現(xiàn)Th1向Th2漂移，造成機(jī)體處于免疫抑制狀態(tài)。侯敏等[5]指出，Th1細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子可調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫，其在清除腫瘤及獲得記憶性細(xì)胞免疫中起關(guān)鍵作用，當(dāng)IL-2、INF-γ等占優(yōu)勢地位時，提示機(jī)體免疫功能正常；而當(dāng)Th2細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子占優(yōu)勢地位時，則提示機(jī)體免疫處于受抑制狀態(tài)。盛磊等[6]指出，宮頸癌患者伴隨Th1/Th2細(xì)胞失衡；賴飛等[7]指出，肺癌患者Th2細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子(IL-6)水平顯著增高；鐘延法等[8]得出相同結(jié)論。IL-18由Okamura等[9]于1989年發(fā)現(xiàn)，主要由活化的巨噬細(xì)胞和Kupffer細(xì)胞產(chǎn)生，可作用于Th1細(xì)胞并促使分泌相關(guān)細(xì)胞因子；促使NK細(xì)胞增殖。近年多項研究指出，IL-18具有抗腫瘤作用，作用機(jī)制包括增加細(xì)胞毒作用抑制腫瘤細(xì)胞增長、抑制腫瘤新生血管生成、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫、誘導(dǎo)Fas與其配體結(jié)合促使細(xì)胞凋亡。Yang等[10]研究中觀察了乳腺癌患者血清IL-18水平，發(fā)現(xiàn)其顯著高于正常對照組。Tas等[11]指出，胃癌患者血清IL-18濃度上升。本研究中，NSCLC患者IL-2、IFN-γ低于對照組，IL-4、IL-10、IL-18水平高于對照組，且IL-6、IL-18水平與腫瘤分期有關(guān)，結(jié)果說明NSCLC患者伴隨Th1、Th2細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子異常，可能與腫瘤發(fā)生、臨床分期有關(guān)；IL-6、IL-18水平隨腫瘤分期增高而增高的原因可能為，分期越高腫瘤負(fù)荷越高，細(xì)胞免疫抑制越嚴(yán)重。張開平等[12]分析前列腺癌組織中IL-6表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)前列腺癌組織中IL-6表達(dá)高于周圍正常組織，且不同臨床分期的患者IL-6水平存在差異。

早期NSCLC患者經(jīng)手術(shù)治療后5年生存達(dá)到80%左右，但多數(shù)患者就診時已處于疾病中晚期，5年生存率較低[13，14]。目前，細(xì)胞因子與NSCLC預(yù)后的關(guān)系的研究報道較少，本研究分析IL-6、IL-18水平與NSCLC患者預(yù)后的影響，研究結(jié)果顯示，IL-6正常組累積生存率高于升高組，IL-18正常組和升高組結(jié)果相似，推斷NSCLC患者入院時IL-6、IL-18可能與預(yù)后有關(guān)。閉肇龍等[15]指出，IL-18水平的肝癌患者生存率顯著高于IL-18水平升高患者，本研究結(jié)果與其一致。

綜上所述，與健康體檢者相比，NSCLC患者伴隨IL-2、IFN-γ水平下降，IL-6、IL-10、IL-18水平升高，Th1/Th2失衡，其中IL-6、IL-18水平隨著T分期的加重隨之升高，且與NSCLC患者預(yù)后也有一定關(guān)系。不足之處：本研究樣本量較少，未來的研究有待擴(kuò)大樣本量、開展多中心合作研究，進(jìn)一步探討細(xì)胞因子與腫瘤的關(guān)系；TNM分期、臨床治療方案等均對患者的預(yù)后有一定影響，可能造成本研究結(jié)果存在偏移，下一步研究有待減少造成結(jié)果出現(xiàn)的偏移的因素，進(jìn)一步探討細(xì)胞因子對NSCLC患者預(yù)后的預(yù)測價值。