張芮初 胡 雷
(清華大學(xué)附屬中學(xué) 北京 100084)
河蚌,又稱無齒蚌(Anodonta),是軟體動物門(Mollusca)雙殼綱(Bivalvia)的代表動物。 河蚌的排泄系統(tǒng)由腎和圍心腔腺組成。圍心腔腺收集血液中的代謝廢物,排入到圍心腔。代謝廢物從腎口進(jìn)入海綿狀的腎體內(nèi)進(jìn)行過濾,最后經(jīng)過薄壁的膀胱通過腎孔排出。這種通過后腎管和圍心腔共同完成代謝廢物的收集和排泄的結(jié)構(gòu)也稱為心-腎復(fù)合體(heart-kidney complex)[1]。
由于亞甲藍(lán)(化學(xué)式:C16H18ClN3S)進(jìn)入人體后會從尿液排出,醫(yī)學(xué)上用于排泄試驗[4]。受此啟發(fā),猜想亞甲藍(lán)也可以通過河蚌的腎臟排出。
在普通動物學(xué)實驗中,河蚌的解剖實驗包括了對排泄系統(tǒng)的觀察,但僅僅是對其靜態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察。做完實驗后,很多學(xué)生依然無法理解河蚌的排泄系統(tǒng)的工作原理,甚至混淆腎口和腎孔的功能。本研究對該實驗進(jìn)行了改進(jìn),增加了對活體河蚌的排泄系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的觀察實驗。采用亞甲藍(lán)做示蹤劑,跟蹤液體經(jīng)過河蚌排泄系統(tǒng)的過程。
新鮮的重約500 g的活體河蚌,2%亞甲藍(lán)溶液,解剖盤,解剖剪,鑷子,解剖刀,5 mL注射器,吸水紙。
將解剖剪尖端從前閉殼肌附近插入,邊插入邊旋轉(zhuǎn)解剖剪將兩殼撐開。然后將解剖刀伸入到河蚌左殼與外套膜之間,刀鋒緊貼貝殼前后移動,將前、后閉殼肌分離后,揭開左側(cè)蚌殼[3]。
1)剪開外套膜,可以觀察到圍心腔內(nèi)搏動的心室[2],判斷河蚌依然存活。保持河蚌存活是進(jìn)行本實驗的基礎(chǔ)。一般地,健康的活體河蚌在本實驗過程中及結(jié)束后數(shù)小時,可以一直保持心室搏動。
2)將外鰓瓣剪除,可以觀察到圍心腔側(cè)下方的一對黑褐色的腎體[2]。用注射器將1 mL左右的亞甲藍(lán)溶液注入到圍心腔內(nèi)。從注射完后開始計時。為防止亞甲藍(lán)溶液溢出,需要慢慢推入并及時調(diào)整蚌殼的角度。若有少量溢出,用濾紙吸去溢出的藍(lán)色液體。
3)將內(nèi)鰓瓣的前部剪下一部分,用鑷子提拉起內(nèi)鰓瓣連接處,暴露出內(nèi)鰓瓣的鰓上腔,找到腎孔。每隔5 min,將細(xì)條狀吸水紙置于腎孔處取樣,取出并擺放在白紙上,直到吸水紙出現(xiàn)藍(lán)色,在紙上記錄時間。
4)重復(fù)該實驗5次并記錄時間。
5)最后,剪開圍心腔膜,將圍心腔內(nèi)的亞甲藍(lán)溶液用自來水沖洗干凈,先觀察腎口,再用鑷子翻開腎體,觀察腎體及其背面的膀胱(透明不太容易辨識)。
正如在設(shè)計實驗之初所猜想的,亞甲藍(lán)注射到河蚌圍心腔后,經(jīng)過一段時間后從腎孔排出。
在5例實驗中,吸水紙首次出現(xiàn)淡藍(lán)色的時間分別如下,見表1。
表1 腎孔處吸水紙首次出現(xiàn)藍(lán)色的時間
洗凈圍心腔后,觀察到腎口內(nèi)有少量藍(lán)色液體,腎體和膀胱的組織內(nèi)有藍(lán)色液體。
根據(jù)以上實驗,實驗者可以觀察到,亞甲藍(lán)從圍心腔中經(jīng)由腎口進(jìn)入腎體,然后經(jīng)膀胱通過腎孔排出。通過本實驗,可以很好地體會到圍心腔在收集代謝廢物中起到的重要作用,同時也對軟體動物由后腎管和圍心腔構(gòu)成的心-腎復(fù)合體的結(jié)構(gòu)和功能加深了印象。
在本實驗中,亞甲藍(lán)從進(jìn)入河蚌的腎口到從腎孔排出的平均時間為33 min,可視為河蚌排泄系統(tǒng)大致的工作周期。由于本實驗重復(fù)次數(shù)有限,采用的標(biāo)本大小比較相近,采樣間隔較大,而且沒有考慮解剖的刺激對正常代謝的影響,因此該實驗的定量結(jié)論并不一定精確,但是并不影響定性的結(jié)論。