鄭愛(ài)娟 陳 將 蔡輝益, 陳志敏 常文環(huán) 張 姝 鄧雪娟 劉國(guó)華*

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室，北京 100081；2.生物飼料開(kāi)發(fā)國(guó)家工程研究中心，北京 100081)

鋅是禽類(lèi)生長(zhǎng)發(fā)育和代謝活動(dòng)所必需的金屬元素之一[1]，鋅是多種酶的組成成分或激活劑，且參與多種激素的合成及作用，不僅影響細(xì)胞分裂、生長(zhǎng)和再生，而且與核酸、脂類(lèi)、蛋白質(zhì)、維生素和其他礦物微量元素合成代謝有關(guān)[2]。因此，鋅對(duì)家禽的生長(zhǎng)發(fā)育、生產(chǎn)性能、繁殖和免疫功能等方面均有重要作用[3]。現(xiàn)代禽業(yè)生產(chǎn)中，通常在家禽飼糧中添加鋅以促進(jìn)家禽的生長(zhǎng)發(fā)育、增強(qiáng)其免疫功能，甚至通過(guò)高劑量添加以生產(chǎn)富含鋅的保健品[4]。蛋雞飼糧中超標(biāo)添加微量元素，使生產(chǎn)性能達(dá)到一定水平之后，微量元素通過(guò)各組織器官的吸收和排泄，最后在雞蛋和排泄物中蓄積。另外，蛋雞長(zhǎng)時(shí)間采食高鋅飼糧會(huì)導(dǎo)致鋅在其肝臟中濃縮蓄積，進(jìn)而造成其生產(chǎn)性能下降，在其體內(nèi)蓄積的鋅會(huì)隨著排泄物排出，造成環(huán)境污染[5]。研究表明，肉仔雞排泄物中鋅含量大約是飼糧中的4倍[6]。后備雞飼糧中微量元素含量和家禽日齡是影響微量元素在排泄物中含量的重要因素[7]。蛋雞飼糧中適宜的鋅添加水平可以緩解鋅過(guò)量添加造成的排泄量增加。微量元素的高劑量使用不僅會(huì)增加家禽生產(chǎn)成本，浪費(fèi)資源，造成環(huán)境污染，而且會(huì)引起蛋雞代謝紊亂，進(jìn)而影響其產(chǎn)蛋性能和雞蛋品質(zhì)。因此，研究蛋雞飼糧中鋅的適宜添加水平，使其既能滿(mǎn)足蛋雞的產(chǎn)蛋性能、免疫功能的需要又能保證生態(tài)養(yǎng)殖已然迫在眉睫。有研究表明，衡量鋅利用狀況的最敏感指標(biāo)是骨鋅含量[8]。肉雞試驗(yàn)顯示，骨骼、肝臟、腎臟鋅含量是最敏感指標(biāo)[9]。肉雞脛骨鋅含量不僅對(duì)飼糧鋅添加水平反映敏感，而且與肝臟、胰臟、肌肉鋅含量顯著相關(guān)[10]。已有研究表明，飼糧中添加20～40 mg/kg鋅可顯著改善肉雞肝臟、胰臟和脛骨中鋅含量[11-13]。Dewar等[12]對(duì)火雞的研究顯示，脛骨鋅含量在飼糧鋅含量為30 mg/kg時(shí)達(dá)到飽和值。但是關(guān)于京紅1號(hào)蛋雞產(chǎn)蛋高峰期飼糧中鋅的適宜添加水平和組織鋅代謝的研究較少。本試驗(yàn)以一水硫酸鋅為鋅源，擬研究實(shí)用飼糧條件下鋅添加水平對(duì)京紅1號(hào)蛋雞產(chǎn)蛋高峰期組織器官鋅沉積和脛骨指標(biāo)的影響，為蛋雞生產(chǎn)合理添加鋅提供科學(xué)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 鋅來(lái)源

試驗(yàn)用鋅源為一水硫酸鋅(飼料級(jí))，含鋅量35.5%，購(gòu)自北京精準(zhǔn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究中心。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

將540只20周齡的京紅1號(hào)蛋雞隨機(jī)分為6組，每組6個(gè)重復(fù)，每重復(fù)15只。對(duì)照組采用含鋅量為25 mg/kg的玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧(T1，未添加鋅)，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。在基礎(chǔ)飼糧中添加不同水平的鋅配成5種試驗(yàn)飼糧，飼喂5個(gè)試驗(yàn)組蛋雞，具體試驗(yàn)設(shè)計(jì)見(jiàn)表2。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)于2017年1—8月在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所通州試驗(yàn)基地進(jìn)行。蛋雞采用立體雙面3層全層疊雞籠籠養(yǎng)，16 h光照，光照強(qiáng)度10 lx。乳頭式飲水器供水，自由采食飼糧。試驗(yàn)期間蛋雞接種1次禽流感疫苗。雞舍衛(wèi)生管理按常規(guī)進(jìn)行。試驗(yàn)預(yù)試期2周，進(jìn)行健康觀察，各組平均產(chǎn)蛋率為94%時(shí)，預(yù)試期結(jié)束，進(jìn)入正式試驗(yàn)，正試期24周。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供The premix provided the following per kg of the diet：VA 10 000 IU，VD33 000 IU，VE 30 mg，VK31 mg，VB11 mg，VB26 mg，VB310 mg，VB540 mg，VB63 mg，VB110.3 mg，VB120.01 mg，生物素 biotin 0.1 mg，Cu (as copper sulfate) 8 mg，F(xiàn)e (as ferrous sulfate) 60 mg，Mn (as manganese sulfate) 60 mg，Se (as sodium selenite) 0.3 mg，I (as potassium iodide) 0.7 mg。2)水分、鋅和粗蛋白質(zhì)為實(shí)測(cè)值，其余為計(jì)算值。Moisture, Zn and CP were measured values, while the others were calculated values.

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 血清鋅含量測(cè)定

試驗(yàn)中期(33周齡末)和試驗(yàn)?zāi)┢?46周齡末)，每個(gè)重復(fù)取1只蛋雞，翅下靜脈采血，置于干燥真空采血管，制備血清，測(cè)定血清鋅含量。血清鋅含量采用PAPS顯色劑法測(cè)定，所用試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

表2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.4.2 組織器官鋅含量測(cè)定

于46周齡末每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取3只蛋雞，取骨骼肌(胸肌)、肝臟、胰腺和脛骨，測(cè)定肝臟、骨骼肌、胰腺和脛骨鋅含量。骨骼肌、胰腺和肝臟用1∶10(質(zhì)量體積比)的磷酸鹽緩沖溶液研磨勻漿后，用日立7600全自動(dòng)分析儀，采用PAPS顯色劑法測(cè)定。脛骨經(jīng)105 ℃烘干24 h，用無(wú)水乙醇浸泡48 h，在Soxhlet裝置中用無(wú)水乙醚抽提48 h后再烘干(105 ℃，10 h)，制成絕干樣，稱(chēng)為無(wú)脂干重；再在550 ℃馬福爐中灰化18 h，冷卻后溶解于1∶60(體積比)稀鹽酸中，采用定量濾紙過(guò)濾，用稀鹽酸定容至50 mL，然后用稀鹽酸稀釋成適當(dāng)濃度，用火焰原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定脛骨灰鋅含量，并換算為脛骨鋅含量。

1.4.3 鋅表觀利用率

飼糧和糞便樣品中酸不溶性灰分含量的測(cè)定：稱(chēng)取約3 g飼糧或糞便樣品置于500 mL高腳燒杯中，注入50 mL 4 mol/L鹽酸溶液，靜置至泡沫消失后，將盛樣品的高腳燒杯放在電熱板上，慢慢煮沸30 min，用定量濾紙過(guò)濾，并用熱蒸餾水沖洗至無(wú)酸性為止。把殘?jiān)蜑V紙一塊轉(zhuǎn)移至已知恒重的坩堝內(nèi)，105 ℃烘干后于電爐上炭化至無(wú)煙，然后于馬福爐中燒至灰白色，干燥器中冷卻30 min后稱(chēng)重，再于馬福爐中燒30 min至恒重，減去空坩堝重即得酸不溶灰分重，計(jì)算酸不溶性灰分含量。飼糧和糞便樣品中鋅含量的測(cè)定：準(zhǔn)確稱(chēng)取一定量飼糧或糞便樣品后，于電爐上炭化至無(wú)煙，然后在馬福爐中燒至恒重后，溶解于稀鹽酸中，然后參照脛骨灰鋅含量測(cè)定的后續(xù)步驟測(cè)定。

鋅表觀利用率(%)=[1-(飼糧中酸不溶性灰分含量/糞便中酸不溶性灰分含量)×(糞便中鋅含量/飼糧中鋅含量)]×100。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 17.0軟件的單因子方差分析程序進(jìn)行分析，因子顯著性用P值表示。對(duì)主效應(yīng)顯著的指標(biāo)進(jìn)行LSD多重比較。采用曲線估計(jì)(curve estimate)模塊對(duì)鋅添加水平(X)與組織器官和糞便鋅含量以及鋅表觀利用率進(jìn)行線性和二次模型回歸分析，P<0.05為顯著差異，P<0.01為極顯著差異。用二次曲線的拐點(diǎn)估測(cè)最適鋅添加水平。

2 結(jié) 果

2.1 鋅添加水平對(duì)京紅1號(hào)蛋雞產(chǎn)蛋高峰期血清鋅含量的影響

由表3可知，飼糧中添加25 mg/kg以上的鋅顯著提高了33周齡末京紅1號(hào)蛋雞血清鋅含量，其中添加125 mg/kg鋅組(T6組)血清鋅含量最高，極顯著高于對(duì)照組(T1組)和添加25 mg/kg鋅組(T2組)(P<0.01)，但與添加50(T3組)、75(T4組)和100 mg/kg鋅組(T5組)無(wú)顯著差異(P>0.05)。飼糧中添加不同水平的鋅對(duì)46周齡末京紅1號(hào)蛋雞血清鋅含量無(wú)顯著影響(P>0.05)。

鋅添加水平(x)和京紅1號(hào)蛋雞33周齡末血清鋅含量(y)有極顯著的線性或二次回歸關(guān)系(P<0.01)，其回歸方程分別為：y=0.151x+52.715(R2=0.332)，y=-0.001x2+0.287x+50.452 (R2=0.355)。二次回歸預(yù)測(cè)，當(dāng)鋅添加水平為143.5 mg/kg時(shí)，33周齡末京紅1號(hào)蛋雞血清鋅含量達(dá)到最大值。鋅添加水平和46周齡末京紅1號(hào)蛋雞血清鋅含量無(wú)顯著的線性或二次回歸關(guān)系(P>0.05)。

表3 鋅添加水平對(duì)京紅1號(hào)蛋雞產(chǎn)蛋高峰期血清鋅含量的影響

同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)無(wú)字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)。下表同。In the same column, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01). The same as below.

2.2 鋅添加水平對(duì)京紅1號(hào)蛋雞產(chǎn)蛋高峰期組織器官鋅含量的影響

由表4可知，飼糧中添加不同水平鋅對(duì)京紅1號(hào)蛋雞46周齡末骨骼肌和胰腺鋅含量無(wú)顯著影響(P>0.05)，但對(duì)肝臟鋅含量有極顯著影響(P<0.01)。與對(duì)照組相比，飼糧中添加25～125 mg/kg鋅極顯著提高了肝臟鋅含量(P<0.01)，添加25、50、75和100 mg/kg鋅組之間差異不顯著(P>0.05)，但添加125 mg/kg鋅組肝臟鋅含量顯著高于其他添加水平組(P<0.05)。

表4 鋅添加水平對(duì)京紅1號(hào)蛋雞產(chǎn)蛋高峰期組織鋅含量的影響

鋅添加水平(x)和京紅1號(hào)蛋雞46周齡末肝臟鋅含量(y)有極顯著的線性或二次回歸關(guān)系(P<0.01)，其回歸方程分別為：y=0.038x+4.056(R2=0.318)，y=0.000 1x2+0.024x+4.279 (R2=0.322)。線性回歸預(yù)測(cè)，隨著飼糧中鋅添加水平的升高，肝臟鋅含量逐漸增加。鋅添加水平(x)和京紅1號(hào)蛋雞46周齡末骨骼肌鋅含量(y)有顯著的二次回歸關(guān)系(P<0.05)，其回歸方程為：y=0.000 3x2-0.048x+4.772 (R2=0.207)。二次回歸預(yù)測(cè)，當(dāng)鋅添加水平為80.0 mg/kg時(shí)，京紅1號(hào)蛋雞46周齡末骨骼肌鋅含量最低。

2.3 鋅添加水平對(duì)京紅1號(hào)蛋雞產(chǎn)蛋高峰期脛骨指標(biāo)的影響

由表5可知，飼糧中鋅添加水平對(duì)京紅1號(hào)蛋雞46周齡末脛骨重、無(wú)脂脛骨重、脛骨灰分重及脛骨鋅和脛骨灰鋅含量均無(wú)顯著影響(P>0.05)。鋅添加水平和京紅1號(hào)蛋雞46周齡末脛骨重、無(wú)脂脛骨重、脛骨灰分重及脛骨鋅和脛骨灰鋅含量均無(wú)顯著的線性或二次回歸關(guān)系(P>0.05)。

表5 鋅添加水平對(duì)京紅1號(hào)蛋雞產(chǎn)蛋高峰期脛骨指標(biāo)的影響

2.4 鋅添加水平對(duì)京紅1號(hào)蛋雞產(chǎn)蛋高峰期鋅表觀利用率的影響

由表6可知，添加125 mg/kg鋅組蛋雞糞便鋅含量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，顯著高于添加25、50和75 mg/kg鋅組(P<0.05)，但與添加100 mg/kg鋅組無(wú)顯著差異(P>0.05)。飼糧添加不同水平的鋅不同程度地降低了京紅1號(hào)蛋雞46周齡末鋅表觀利用率，其中添加100和125 mg/kg鋅組極顯著低于對(duì)照組和添加25 mg/kg鋅組(P<0.01)，而添加100和125 mg/kg鋅組之間無(wú)顯著差異(P>0.05)。

鋅添加水平(x)和京紅1號(hào)蛋雞46周齡末糞便鋅含量(y)和鋅表觀利用率(y)有顯著的線性或二次回歸關(guān)系(P<0.05)，其回歸方程分別為：y=0.000 014x2-0.000 2x+0.015 (R2=0.449)，y=0.000 49x+0.026(R2=0.385)；y=-0.000 34x2-0.149x+45.733 (R2=0.814)，y=-0.192x+46.44(R2=0.810)。線性回歸預(yù)測(cè)，隨著飼糧中鋅添加水平的升高，糞便鋅含量逐漸增加，而鋅表觀利用率逐漸降低。

3 討 論

3.1 鋅添加水平對(duì)京紅1號(hào)蛋雞產(chǎn)蛋高峰期血清鋅含量的影響

飼糧中的鋅被吸收后進(jìn)入血液后，與血液中的蛋白質(zhì)絡(luò)合，而后轉(zhuǎn)運(yùn)至全身的各個(gè)組織器官中。家禽對(duì)鋅的吸收量受到小腸黏膜細(xì)胞的調(diào)節(jié)和控制[10]。有研究表明，隨著飼糧中鋅的添加水平的升高，蛋雞血清鋅含量也隨之上升，但是不宜達(dá)到穩(wěn)定水平，同時(shí)建議用血清鋅含量作為蛋雞體內(nèi)鋅的營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)指標(biāo)[14]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，在33周齡末，隨著飼糧中鋅添加水平的升高，京紅1號(hào)蛋雞血清鋅含量總體呈升高趨勢(shì)；但是在46周齡末，不同添加水平的鋅未顯著影響血清鋅含量。這可能與隨著飼喂時(shí)間的增加，鋅對(duì)蛋雞的影響效果降低有關(guān)。46周齡末血清鋅含量結(jié)果與張軍霞等[15]在18周齡商品代伊莎褐育成母雞上和虞澤鵬等[16]在肉仔雞上得出的飼糧中添加鋅并未顯著提高血清鋅含量的結(jié)果一致。

表6 鋅添加水平對(duì)京紅1號(hào)蛋雞產(chǎn)蛋高峰期糞便鋅含量和鋅表觀利用率的影響

3.2 鋅添加水平對(duì)京紅1號(hào)蛋雞產(chǎn)蛋高峰期組織器官鋅沉積和脛骨指標(biāo)的影響

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧中添加不同水平的鋅對(duì)京紅1號(hào)蛋雞46周齡末肝臟鋅含量有極顯著影響，肝臟鋅含量隨著鋅添加水平的升高而增加。這一結(jié)果與張軍霞等[15]在商品代伊莎褐育成母雞飼糧中添加60和180 mg/kg鋅后得出的肝臟鋅含量增加的結(jié)果一致。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加不同水平的鋅對(duì)京紅1號(hào)蛋雞46周齡末脛骨鋅、脛骨灰鋅、骨骼肌鋅和胰腺鋅含量均無(wú)顯著影響。但是，張軍霞等[15]在育成母雞飼糧中添加180 mg/kg鋅后顯著提高了脛骨鋅含量。上述研究結(jié)果不一致的原因可能是育成階段蛋雞脛骨沉積鋅的能力強(qiáng)于產(chǎn)蛋階段。此外，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧添加不同水平的鋅對(duì)脛骨重、無(wú)脂脛骨重和脛骨灰分重均無(wú)顯著影響。他人報(bào)道也顯示，在低鋅基礎(chǔ)飼糧(含鋅10.5 mg/kg)中分別添加10、30、50、70和90 mg/kg鋅對(duì)肉仔雞脛骨重?zé)o顯著影響[10]。本試驗(yàn)回歸分析結(jié)果顯示，肝臟鋅含量隨飼糧鋅添加水平的升高呈線性或二次曲線增加。

3.3 鋅添加水平對(duì)京紅1號(hào)蛋雞產(chǎn)蛋高峰期鋅表觀利用率的影響

飼糧鋅主要在十二指腸吸收，空腸也能吸收一部分。動(dòng)物體內(nèi)的鋅主要是由糞便排出，經(jīng)由尿液排出的鋅極少。糞便中的鋅大部分是未經(jīng)吸收的飼糧鋅，內(nèi)源性鋅所占的比例極少。內(nèi)源性鋅主要隨著胰液排出，其次隨膽汁排出。鋅的表觀利用率受多種因素的影響，如礦物元素錳[4]和鐵，維生素A[17]等以及內(nèi)源鋅。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧中添加不同水平的鋅極顯著影響了京紅1號(hào)蛋雞46周齡末糞便鋅含量和鋅表觀利用率。經(jīng)線性回歸預(yù)測(cè)，隨著飼糧中鋅添加水平的升高，糞便鋅含量逐漸增加，而鋅表觀利用率逐漸降低。

4 結(jié) 論

綜合考慮組織器官鋅沉積和脛骨指標(biāo)，以一水硫酸鋅為鋅源，產(chǎn)蛋高峰期京紅1號(hào)蛋雞基礎(chǔ)飼糧(含鋅25 mg/kg)中鋅適宜添加水平為75 mg/kg。