邱志琦，王欣悅

(1.廣東省佛山市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 528000；2.南方醫(yī)科大學(xué)，廣州 510515)

原發(fā)性肝癌(PHC)是全世界最常見(jiàn)的腹部癌癥之一，也是肝臟最常見(jiàn)的惡性腫瘤，發(fā)生率高，病死率高，病死率在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中列第3位，我國(guó)每年死于肝癌的約11萬(wàn)人，占全世界肝癌死亡人數(shù)的45%[1-3]。據(jù)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，佛山市第一人民醫(yī)院就診患者中任何年齡段均可發(fā)病，且肝癌患者多見(jiàn)于男性，這可能跟男性患者喜歡抽煙、飲酒、飲茶、喝咖啡、熬夜等飲食生活習(xí)慣有關(guān)，該病發(fā)病較為隱匿，大多數(shù)肝癌被確診時(shí)已處于中晚期。目前臨床上診斷肝癌主要以甲胎蛋白(AFP)結(jié)合影像學(xué)、病理學(xué)檢查，AFP是自20世紀(jì)70年代就開始使用的肝癌標(biāo)志物，也是目前肝癌最常用的腫瘤標(biāo)志物[4]。但AFP診斷早期肝癌的靈敏度和特異度較低，且假陰性率較高，使患者不能盡早發(fā)現(xiàn)疾病而錯(cuò)過(guò)最佳治療時(shí)間。近年來(lái)人類異常凝血酶原作為一種新型的肝癌腫瘤標(biāo)志物出現(xiàn)在臨床，即維生素K缺乏或拮抗劑Ⅱ誘導(dǎo)的蛋白(PIVKA-Ⅱ)，其影響因素較少，只有在缺乏維生素K患者中才引起升高。PIVKA-Ⅱ最早于1984年被發(fā)現(xiàn)在一定比率肝癌患者中升高且具有較高特異性[5-6]。我國(guó)是PHC的高發(fā)區(qū)，肝癌一直是惡性腫瘤防控的重點(diǎn)。為進(jìn)一步研究PIVKA-Ⅱ和AFP在PHC診斷中聯(lián)合應(yīng)用的價(jià)值，本文選取260例在佛山市第一人民醫(yī)院就診的患者血清進(jìn)行比對(duì)分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2016年3月至2018年4月在佛山市第一人民醫(yī)院住院的260例患者血清標(biāo)本，其中男182例，女78例，年齡25～79歲，平均年齡(39.61±7.20)歲。其中肝細(xì)胞癌患者62例(PHC組)，男53例，女9例，年齡25～76歲，平均年齡(49.31±8.32)歲。肝硬化肝炎患者48例(肝硬化肝炎組)，男35例，女13例，年齡43～79歲，平均年齡(61.18±8.71)歲。肝惡性腫瘤40例(肝惡性腫瘤組)，男33例，女7例，年齡32～71歲，平均年齡(55.38±7.93)歲。同期健康體檢者100例(體檢組)，男52例，女48例，年齡31～69歲，平均年齡(50.75±9.01)歲。PHC的診斷標(biāo)準(zhǔn)符合2011年國(guó)家衛(wèi)生部制訂的“原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2011年版)”[7]。所有受檢者均在未接受有效治療前自愿參與本課題研究并簽署知情同意書，受檢者均可配合研究，完成研究整個(gè)過(guò)程。對(duì)照組受檢者均經(jīng)B超排除其他腹部疾病。

1.2方法

1.2.1血清標(biāo)本采集 受檢者空腹 10～12 h后清晨抽血，避免抽煙、飲酒、飲茶、咖啡，禁用維生素K 拮抗劑和抗生素給藥，避免大量體力活動(dòng)，禁止服藥。采集靜脈血3 mL，4 000 r/min 離心5 min 后，取上清液立即檢測(cè)。

1.2.2PIVKA-Ⅱ、AFP 水平檢測(cè) PIVKA-Ⅱ檢測(cè)儀器采用LUMIPULSETM G1200 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)，試劑采用配套的異常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)(富士瑞必歐株式會(huì)社)。AFP 檢測(cè)儀器采用Cobas E602 電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑(Roche)。所有校準(zhǔn)品及質(zhì)控均為配套。檢測(cè)系統(tǒng)所有性能參數(shù)均通過(guò)實(shí)驗(yàn)室性能驗(yàn)證，符合實(shí)驗(yàn)室要求，所有操作嚴(yán)格按照廠家提供的操作說(shuō)明書進(jìn)行。

1.2.3觀察指標(biāo) 本研究觀察指標(biāo)包括血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平，單獨(dú)血清PIVKA-Ⅱ、AFP檢測(cè)確診肝癌，二項(xiàng)均為陽(yáng)性診斷肝癌情況；其中肝癌陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：PIVKA-Ⅱ>40 mAU/mL,AFP>10 ng/mL并對(duì)所有肝癌患者血清檢出物靈敏度與特異度進(jìn)行比較。靈敏度=真陽(yáng)性/(假陰性+真陽(yáng)性)×100%，特異度=真陰性/(假陽(yáng)性+真陰性)×100%。

2 結(jié) 果

2.1各組血清標(biāo)本PIVKA-Ⅱ和AFP水平比較 PHC組血清標(biāo)本PIVKA-Ⅱ和AFP水平均顯著高于肝硬化肝炎組、肝惡性腫瘤組和體檢組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 各組PIVKA-Ⅱ和AFP水平比較

注：-表示無(wú)數(shù)據(jù)

2.2各組PIVKA-Ⅱ和AFP檢測(cè)陽(yáng)性率比較 PHC組患者中，PIVKA-Ⅱ檢出陽(yáng)性55例(陽(yáng)性率88.7%)，AFP檢出陽(yáng)性46例(陽(yáng)性率74.2%)，兩者陽(yáng)性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.32，P<0.05)。在198例非PHC患者中，PIVKA-Ⅱ檢出陽(yáng)性11例(陽(yáng)性率20.2%)，AFP檢出陽(yáng)性26例(陽(yáng)性率36.3%)，在非PHC患者中兩者比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.71，P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 各組PIVKA-Ⅱ和AFP檢測(cè)陽(yáng)性率比較[n(%)]

2.3單獨(dú)檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)靈敏度和特異度比較 在260例患者中，PIVKA-Ⅱ檢出真陽(yáng)性55例，真陰性187例，假陽(yáng)性11例，假陰性7例，靈敏度88.7%為，特異度為94.4%。AFP檢出真陽(yáng)性46例，真陰性172例，假陽(yáng)性26例，假陰性16例，靈敏度為74.2%，特異度為86.9%。PIVKA-Ⅱ和AFP全為陽(yáng)性靈敏度為64.5%，特異度為100.0%。PIVKA-Ⅱ和AFP任意一項(xiàng)陽(yáng)性靈敏度為96.8%，特異度為81.3%。聯(lián)合檢測(cè)PIVKA-Ⅱ和AFP的靈敏度與單獨(dú)檢測(cè)PIVKA-Ⅱ或單獨(dú)檢測(cè)AFP比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.88、20.60，P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 單獨(dú)檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)靈敏度和特異度比較

注：PIVKA-Ⅱ+AFP聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度與單獨(dú)檢測(cè)PIVKA-Ⅱ靈敏度比較，aP<0.05；PIVKA-Ⅱ+AFP聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度與單獨(dú)檢測(cè)AFP靈敏度比較，bP<0.05；-表示無(wú)數(shù)據(jù)

3 討 論

肝癌的發(fā)生伴隨著一個(gè)長(zhǎng)期的病理改變過(guò)程，患者常有多年的肝病史，從慢性肝炎、肝硬化最后轉(zhuǎn)變?yōu)楦伟?。由于肝癌的特點(diǎn)導(dǎo)致手術(shù)切除率低，術(shù)后易發(fā)生轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)，目前肝癌的診斷主要依賴于影像學(xué)檢查和肝組織病理活檢等方法。影像學(xué)檢查不易發(fā)現(xiàn)較小的腫瘤和病變，而病理活檢有創(chuàng)傷性，且存在一定擴(kuò)散癌變組織的風(fēng)險(xiǎn)，臨床實(shí)施較難，且需要檢查人員具有較高的專業(yè)技術(shù)水平，普查不易實(shí)現(xiàn)，為肝癌的篩查和早期診斷帶來(lái)了很大的困難。肝癌在發(fā)展過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物，且這些標(biāo)志物的變化可反映疾病的發(fā)展，若標(biāo)志物檢測(cè)靈敏度和特異度高，診斷及時(shí)均可大大提高患者手術(shù)成功率與存活率，而且對(duì)預(yù)后有著良好的監(jiān)測(cè)作用也更適用于普查。因此，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)對(duì)于肝癌的診斷有著極大的指導(dǎo)意義，精確的篩查方法對(duì)于肝癌的早期診斷并與其他肝病的鑒別診斷顯得尤為重要。能克服影像學(xué)檢查和病理活檢的不足，提供便捷、高效且無(wú)創(chuàng)的腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)，能早期發(fā)現(xiàn)病變，為肝癌的篩查和早期診斷提供重要的依據(jù)。

AFP是PHC特異、靈敏的標(biāo)志物，但是目前發(fā)現(xiàn)病毒性肝炎和肝硬化患者中AFP水平亦見(jiàn)增高[8]。可見(jiàn)AFP目前已不能滿足臨床檢測(cè)早期PHC的需求，有研究顯示，在非肝癌血漿中PIVKA-Ⅱ假陽(yáng)性僅占3.4%，對(duì)AFP陰性PHC檢出率22.6%，提高了PHC診斷率，對(duì)PHC與良性肝病，繼發(fā)性肝癌有鑒別意義[9]。根據(jù)相關(guān)研究，可以聯(lián)合PIVKA-Ⅱ和AFP對(duì)PHC進(jìn)行早期診斷。本研究結(jié)果表明，研究組血清PIVKA-Ⅱ和AFP水平顯著高于對(duì)照組，因此可以說(shuō)明PIVKA-Ⅱ和AFP在PHC診斷中具有相對(duì)高的特異性。而聯(lián)合檢測(cè)PIVKA-Ⅱ和AFP的靈敏度較單獨(dú)檢測(cè)PIVKA-Ⅱ和單獨(dú)檢測(cè)AFP的靈敏度高，且均有顯著性差異。本研究結(jié)果與席強(qiáng)等[10]、周淑燕等[11]研究結(jié)果基本一致，由此可以證明聯(lián)合檢測(cè)PIVKA-Ⅱ和AFP比單獨(dú)檢測(cè)二者對(duì)PHC的診斷更有價(jià)值更有意義。

綜上所述，聯(lián)合檢測(cè)PIVKA-Ⅱ、AFP靈敏度高，能更好地用于臨床PHC的早期診斷與檢測(cè)，從而提高患者手術(shù)成功率與存活率。