范得躍 ，李曉菁，宋磊肖，彭 飛 ，解 瑩

（河北科技師范學院園藝科技學院，河北秦皇島 066600；2河北科技師范學院化學工程學院；3河北科技師范學院分析測試中心）

栗樹為殼斗科（Fagaceae）栗屬（Castanea Mill）植物，同株異花。板栗花期雄花數量過多，遠遠超出授粉需要，同時消耗大量養(yǎng)分影響板栗產量。板栗雄花序作為板栗種植過程中的過盛產物，在生產中被隨意丟棄，造成資源浪費。深入挖掘栗花潛在價值，將廉價的栗花資源轉化為高附加值的產品原料，具有重要的現實意義。

中醫(yī)認為，栗花具有清熱燥濕，止血、散結的功能，主治泄瀉，痢疾等疾病，具有一定的食用及藥用價值。《河北中草藥》記載，栗花具有“散氣消癭，止瀉”的功能?！兜崮媳静荨酚涊d栗花可“治日久赤白痢疾，大腸下血”。民間將栗花用水煎服，治療小兒嘔吐，痢疾等《湖南藥物志》?，F代復方板栗花片，具有清熱解毒，健脾止瀉，用于治療菌痢。研究表明，板栗雄花序不僅含有脂肪酸、蛋白質、雌二醇[1]等營養(yǎng)成分，還含有犬尿喹啉酸[2]、黃酮[3,4]、多酚[5]等生物活性物質。隨著栗花資源深入挖掘，發(fā)現板栗雄花序提取物具有抑菌、抗氧化、抗腫瘤細胞[6-11]、抑制肥胖[12]等功效。目前，板栗花提取物研究主要集中在生物活性成分方面，營養(yǎng)成分研究較少。測定栗花水提取物營養(yǎng)物質含量，可以為板栗花深加工制作中藥顆粒制劑、花卉飲品等提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

所用材料均采自科研基地，儀器來自河北省板栗工程技術研究中心實驗室和河北科技師范學院分析測試中心。

1.1.1 試驗材料。材料分別取自遵化、撫寧、青龍的科研基地，科研基地光照良好，褐色土壤，土層深厚，肥力良好，管理科學。供試品種均為燕山地區(qū)常見或優(yōu)良板栗品種（系）雄性花序，選擇樹冠外圍長勢良好且大小相近的雄性花序，帶回實驗室進行陰干處理，得到干花。材料經河北科技師范學院張京政副教授鑒定分別為‘紫珀’、‘燕山短枝’、‘燕龍’板栗品種雄性花序。

1.1.2 主要儀器。JA2003N電子分析天平（上海精密科學有限公司）；SX2-2.5-10A箱式電阻爐，紹興市上虞道墟科析儀器廠；Optima 2100DV等離子發(fā)射光譜儀[鉑金埃爾默有限公司（美國）]；ALPHA 1-2 LD plus真空冷凍干燥器 (北京五洲東方科技發(fā)展有限公司)；YLA-2000電熱恒溫鼓風干燥箱，黃石市恒豐醫(yī)療器械有限公司；HH-6數顯恒溫水浴鍋（江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司）、JSP-200金穗高速多功能粉碎機（浙江省永康市金穗機制造廠）；EYELA N-1100旋轉蒸發(fā)儀（日本東京理化）。

1.2 試驗方法

1.2.1 水提取物制備。熱水法制備提取物：取板栗雄性干花，按料液比1︰20，在100℃條件下，加熱提取1h，過濾分離出提取液，加入與提取液等體積水，繼續(xù)提取1h，過濾后合并提取液，再經旋轉蒸發(fā)儀濃縮，冷凍干燥機凍干得到水提取物，將所得水提取物研磨成粉過二號篩，待測。

1.2.2 灰分含量測定。熾熱燃燒法測定樣品灰分含量：利用分析天平稱取樣品約2g（準確至0.0001g），置于灼燒至恒重的坩堝中，緩慢調高電阻箱溫度，避免燃燒，至完全炭化后，逐漸升高溫度至600℃，使樣品完全灰化（呈灰白色）至恒重。取上項所得灰分，在坩堝中加入6mol/L稀鹽酸約10mL，置水浴鍋加熱10min后，用無灰濾紙過濾，坩堝內的殘渣用去離子水沖洗于濾紙上，并洗滌至洗液不顯氯化物反應為止，濾渣連同濾紙經干燥，熾灼至恒重。根據殘渣重量，分別計算樣品中總灰分和酸不溶灰分的含量。

1.2.3 礦質元素含量測定。電感耦合等離子發(fā)射光譜儀測定礦質元素含量：利用分析天平準確稱取樣品粉末1g（精確至0.0001g），用去離子水完全溶解，將溶解后的溶液定容至50mL。將所得溶液用定性濾紙過濾，待測。利用Optima 21000V等離子發(fā)射光譜儀，調試儀器達到工作狀態(tài)，取樣液直接測定指標含量。

表1 測定元素分析線

1.2.4 粗蛋白含量測定。凱氏定氮法測粗蛋白含量：將栗花水提取物研細過篩，混和均勻，稱取樣品約1g，精確至0.0001g，移入干燥的100ml定氮瓶中，加入0.2g硫酸銅，3g硫酸鉀及20mL硫酸，搖勻后于瓶口放一漏斗，將瓶以45°角斜支于石棉網上。緩慢加熱，至完全碳化，控制溫度，保持瓶內液體微沸，至液體呈藍綠色澄清透明后，繼續(xù)加熱0.5h。取下放冷，加20mL水，放冷后，移入100mL容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混勻備用。在凱氏定氮器中與NaOH作用，通過蒸餾釋放出NH3，收集于H3BO3溶液中用2%的HCl標準溶液滴定，根據消耗的量計算出氮的含量，然后乘以換算因子（K-6.25）。

1.2.5 數據處理。利用SPSS22.0軟件進行差異性分析，不同品種物質含量比較采用單因素方差分析，差異顯著水平均為0.05，結果以均值±標準差（mean±SD）表示。

2 結果與分析

2.1 不同板栗品種（系）雄花序水提取物中灰分、粗蛋白含量

由表2可知，3個板栗品種（系）雄花序提取物中總灰分含量為5.03%～7.62%。3個品種總灰分含量差異顯著，順序為‘燕山短枝’（7.62%）＞‘紫珀’（6.14%）＞‘燕龍’（5.03%）。3個板栗品種（系）雄花序提取物中酸不溶灰分含量為0.43%～1.68%。3個品種酸不溶灰分含量差異顯著，‘燕龍’、‘紫珀’中酸不溶灰分含量較高，均超過1.3%；‘燕山短枝’中酸不溶灰分含量最低，為0.43%。3個板栗品種（系）雄花序提取物中粗蛋白含量在15.94%～22.55%之間。3個品種粗蛋白含量差異顯著，‘紫珀’粗蛋白含量最高，為22.55%；‘燕山短枝’、‘燕龍’粗蛋白含量較低，分別為16.53%、15.94%。

表2 不同板栗品種（系）雄花序水提取物中灰分、粗蛋白含量

表3 不同板栗品種（系）雄花序水提取物礦質元素含量

2.2 不同板栗品種（系）雄花序水提取物礦質元素含量

礦質元素檢測結果（表3）表明，測定3個品種板栗雄花序水提取物中均含有所檢測8種礦質元素，常量元素中K的含量最高，為26134.10～38491.80mg/kg；其次是 Mg，含量為 11178.30～13982.30 mg/kg；Ca 的含量最低，為230.17～451.99mg/kg。微量元素中，Mn的含量最高，含量為 403.97～771.45 mg/kg；其次為 Zn，含量為 25.91～34.30mg/kg； 再次為 Fe，含量為6.07～21.98mg/kg；Cu 含量低于Fe，為 0.39～0.92mg/kg；Cr的含量最低，為 0.30～0.48mg/kg。

品種（系）間K元素含量差異顯著，其中‘燕龍’的K含量最高，含量為36717.20mg/kg；‘紫珀’次之，為31975.30mg/kg；‘燕山短枝’最低，為 28268.40mg/kg。品種（系）間Ca元素含量差異顯著，其中‘紫珀’、‘燕龍’的Ca含量較高，分別為422.25mg/kg、417.08mg/kg；燕山短枝’最低，為244.00 mg/kg。品種（系）間Mg元素含量差異顯著，其中‘燕山短枝’Mg含量最高，為13558.20 mg/kg；‘紫珀’、‘燕龍’Mg 含量較低，分別為11736.80mg/kg、11481.60mg/kg。

品種（系）間Mn元素含量差異顯著?！嗌蕉讨Α疢n含量最高，為 766.43mg/kg；‘燕龍’次之，為459.30mg/kg；‘紫珀’最低，為 411.08mg/kg。品種（系）間Fe元素含量差異顯著?？谱乡辍疐e含量最高，為21.09mg/kg；‘燕山短枝’次之，為 15.35 mg/kg，‘燕龍’最低，為6.47mg/kg。品種（系）間Cu元素含量差異顯著?！乡辍疌u 含量最高，為 0.87mg/kg；‘燕龍’次之，為0.59mg/kg；‘燕山短枝’最低，為 0.46mg/kg；品種（系）間Zn元素含量差異顯著?！嗌蕉讨Α痁n含量最高，為33.57mg/kg；‘紫珀’、‘燕龍’較低，分別為 28.32mg/kg、26.90mg/kg。品種（系）間Cr元素含量差異顯著?！乡辍ⅰ嗌蕉讨Α疌r含量較高，分別為0.42mg/kg、0.41mg/kg；‘燕龍’含量最低，為 0.31mg/kg。

3 結論與討論

3個板栗品種提取物中均含有所檢測營養(yǎng)成分。其中，錳含量為411.08～766.43mg/kg，遠高于朱艷霞[13]測定的肉蓯蓉水提取物中3.68～14.13mg/kg；蛋白質含量為14.99%～23.31%，遠高于董潔[14]測定的9種中藥水提取物中0.011%～0.184%；板栗花水提取物中營養(yǎng)物質豐富，其中錳元素及蛋白質含量突出，為板栗雄花提取物中的特征營養(yǎng)成分，具有作為營養(yǎng)補充劑的潛在價值。

不同品種（系）板栗雄花序水提取物中營養(yǎng)成分存在差異，其中‘紫珀’鈣、鐵、鎂、銅、鉻、粗蛋白含量高于其它2個品種，‘紫珀’品種在板栗雄花營養(yǎng)保健開發(fā)方面具有優(yōu)勢。測定不同板栗品種雄花序水提取物營養(yǎng)成分，為栗花價值開發(fā)及其種質資源利用提供參考依據。

深入挖掘板栗雄花潛在價值，能夠有效利用栗花資源，從而拓寬栗農創(chuàng)收渠道，增加栗農收入。測定板栗雄花序水提取物中礦質元素含量，為板栗花營養(yǎng)成分提供參考。但是，板栗雄花序水提取物成分復雜，盡管已經檢測出多種有益成分，但研究不夠全面，對其它成分了解不夠，需要科研單位與企業(yè)多方合作，做全面深入研究。