乳腺癌是女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤［1］。人類基因組8號染色體長臂2區(qū)4帶（8q24）位于該染色體末端128～142 Mb處并鄰近端粒，該區(qū)域包含蛋白編碼基因MYC、PSCA等癌基因及非編碼RNA PVT1等約900個(gè)基因。染色體8q24區(qū)是腫瘤中常見的遺傳畸變區(qū)域，常見變異有染色體擴(kuò)增、缺失、易位、基因突變等，且該區(qū)域存在多個(gè)腫瘤相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)位點(diǎn)或單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP），與調(diào)節(jié)遠(yuǎn)處基因的轉(zhuǎn)錄活性有關(guān)。乳腺癌中8q24區(qū)域擴(kuò)增及相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)位點(diǎn)是近年來的研究熱點(diǎn)，在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后中具有重要作用。本文主要結(jié)合相關(guān)基因就乳腺癌中8q24區(qū)域擴(kuò)增及相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)位點(diǎn)的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 8q24區(qū)域擴(kuò)增和乳腺癌的相關(guān)性

基因組8q24區(qū)域擴(kuò)增現(xiàn)象在乳腺癌中較為普遍，包括男性乳腺癌［2］，所占比例為27%～79%。基因的擴(kuò)增水平是評價(jià)乳腺癌預(yù)后的重要指標(biāo)之一，8q24區(qū)域擴(kuò)增亦在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移和不良預(yù)后中具有關(guān)鍵作用。

1.1 8q24區(qū)域擴(kuò)增與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展

Afghahi等［3］通過比較271例乳腺導(dǎo)管原位癌（ductal carcinomain situ，DCIS）患者中染色體拷貝數(shù)改變，包括151例浸潤性癌和120例非浸潤性癌，發(fā)現(xiàn)浸潤性癌的DCIS成分中8q24區(qū)域擴(kuò)增頻率顯著高于非浸潤性癌中的DCIS，雖然80%均是增加1～2個(gè)額外拷貝數(shù)。此外，Horlings等［4］發(fā)現(xiàn)8q24.13～q3區(qū)域擴(kuò)增僅在高級別浸潤性癌中出現(xiàn)。這些證據(jù)提示8q24區(qū)域擴(kuò)增或是原位癌進(jìn)展至高級別浸潤性癌的驅(qū)動(dòng)因素。MYC是位于8q24.21的癌基因，其編碼蛋白具有轉(zhuǎn)錄因子活性。MYC基因擴(kuò)增可能始于良性腫瘤狀態(tài)［5］并在30%～50%的高級別乳腺癌中顯著擴(kuò)增，過表達(dá)的MYC蛋白可促進(jìn)下游的葡萄糖和谷氨酰胺代謝相關(guān)的靶基因表達(dá)，以維持癌細(xì)胞生長能量需求、促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。長鏈非編碼RNA（long noncoding RNA，lncRNA）PVT1基因位于MYC基因下游約50 kb處常與MYC共擴(kuò)增［6］，PVT1基因可通過上調(diào)β-catenin信號通路引起乳腺癌發(fā)生。

1.2 8q24區(qū)域擴(kuò)增與乳腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移

乳腺癌主要的轉(zhuǎn)移途徑是淋巴轉(zhuǎn)移，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是乳腺癌患者死亡的主要原因?；蚪M改變與轉(zhuǎn)移的關(guān)系，大多通過基因組譜分析對原發(fā)病灶和轉(zhuǎn)移病灶進(jìn)行比較，或通過原發(fā)病灶的拷貝數(shù)改變與轉(zhuǎn)移預(yù)后的比較進(jìn)行分析。Ellsworth等［7］比較229例淋巴結(jié)陽性和陰性乳腺癌患者原發(fā)病灶的基因組發(fā)現(xiàn)，8q24區(qū)域擴(kuò)增是唯一的顯著改變，其中MYC基因擴(kuò)增與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。PSCA基因位于8q24.3，最早發(fā)現(xiàn)于前列腺組織并在前列腺癌中過表達(dá)。浸潤性微乳頭狀癌（invasive micropapillary carcinoma，IM?PC）具有高淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移特性，本課題組Meng等［8］研究發(fā)現(xiàn)，PSCA在IMPC中顯著擴(kuò)增且過表達(dá)，其表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。以上提示8q24區(qū)域的MYC、PSCA基因擴(kuò)增或可促進(jìn)乳腺癌發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

乳腺癌原發(fā)病灶與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移病灶之間的8q24區(qū)域擴(kuò)增具有高度的一致性［9］，其在轉(zhuǎn)移病灶中擴(kuò)增頻率更顯著。Magbanua等［10］對乳腺癌原發(fā)病灶與循環(huán)腫瘤細(xì)胞（circulating tumor cells，CTCs）的基因組進(jìn)行拷貝數(shù)分析時(shí)發(fā)現(xiàn)，CTCs中8q24區(qū)域（包含MYC）高度擴(kuò)增。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌中超過90%的腦脊液腫瘤細(xì)胞中存在8q24.13～q24.21區(qū)域高水平擴(kuò)增，頻率顯著高于CTCs［11］。此外，Bilal等［12］對268例早期乳腺癌僅使用他莫昔芬治療患者的8q24.3位點(diǎn)擴(kuò)增情況檢測時(shí)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)該位點(diǎn)擴(kuò)增時(shí)其遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率顯著增加，從另一方面說明8q24區(qū)域擴(kuò)增或可促進(jìn)乳腺癌發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。

1.3 不同乳腺癌亞型中8q24區(qū)域的擴(kuò)增情況

乳腺癌不同組織學(xué)亞型中8q24區(qū)域擴(kuò)增情況也不盡相同。8q24區(qū)域擴(kuò)增在高級別非特殊型浸潤性導(dǎo)管癌（invasive ductal carcinoma of no special type，IDC-NST）基因組中常見。研究發(fā)現(xiàn)，級別越高、侵襲性越強(qiáng)的多形性小葉癌的基因組改變與8q24區(qū)域顯著擴(kuò)增的高級別IDC-NST越類似［13］，且8q24.11區(qū)域擴(kuò)增是IDC-NST與經(jīng)典型浸潤性小葉癌在基因組上最顯著的區(qū)別［14］。此外，全外顯子測序發(fā)現(xiàn)，IMPC中8q24區(qū)域擴(kuò)增頻率最高且8q擴(kuò)增與IMPC顯著相關(guān)［15］，提示8q24區(qū)域異常也許是IMPC特殊病理組織學(xué)形態(tài)及其高侵襲、轉(zhuǎn)移特性形成的關(guān)鍵。

8q24區(qū)域擴(kuò)增也與乳腺癌分子分型相關(guān)。Loo等［16］研究發(fā)現(xiàn)，8q24區(qū)域在乳腺癌ER陰性中顯著擴(kuò)增，而在ER陽性中擴(kuò)增不明顯。乳腺癌基因組數(shù)據(jù)庫資料也顯示，MYC在三陰性乳腺癌（triple negative breast cancer，TNBC）中擴(kuò)增也顯著高于激素受體陽性乳腺癌。MYC蛋白可通過直接驅(qū)動(dòng)糖酵解途徑而促進(jìn)TNBC細(xì)胞生長增殖［17］。

2 8q24區(qū)域的乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)位點(diǎn)與乳腺癌的相關(guān)性

2.1 8q24區(qū)域的乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)SNP

SNP指基因組水平上單個(gè)核苷酸變異引起的DNA序列多態(tài)性。SNP在人群中變異頻率高于點(diǎn)突變，也與乳腺癌發(fā)生和預(yù)后存在一定的相關(guān)性。通過全基因組學(xué)關(guān)聯(lián)分析（genome-wide association study，GWAS）的方法已在8q24區(qū)域鑒定出一系列乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)SNPs。研究表明，位于8q24基因沙漠區(qū)的SNP位點(diǎn)rs13281615與乳腺癌PR（progestogen receptor）狀態(tài)、腫瘤級別及預(yù)后存在相關(guān)性［18］。而rs13281615與ER表達(dá)狀態(tài)的相關(guān)性存在不同的結(jié)論，Garcia-Closas等［18］發(fā)現(xiàn)，rs13281615作為乳腺癌獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)位點(diǎn)其GG基因型與ER陽性乳腺癌顯著相關(guān)，Long等［19］卻發(fā)現(xiàn)該SNP與ER陰性乳腺癌顯著相關(guān)，而Campa等［20］則認(rèn)為該風(fēng)險(xiǎn)位點(diǎn)與乳腺癌ER表達(dá)狀態(tài)無關(guān)。rs13281615的基因型改變也會影響乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)發(fā)生改變，其GG基因型增加乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)或是通過影響PVT1轉(zhuǎn)錄而產(chǎn)生［21］。研究發(fā)現(xiàn)，rs35961414、rs7815245、rs2033101、rs11780156 等與ER陽性乳腺癌相關(guān)［22］，8q24.21區(qū)域還存在男性乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)［23］和乳腺癌各分期相關(guān)的多個(gè) SNPs［19］。另外，Li等［24］通過GWAS方法，在乳腺癌基因組8q24區(qū)域發(fā)現(xiàn)新風(fēng)險(xiǎn)位點(diǎn)的靶基因顯著富集MYC轉(zhuǎn)錄因子基序，且該風(fēng)險(xiǎn)位點(diǎn)與MYC基因表達(dá)增加顯著相關(guān)，提示該新風(fēng)險(xiǎn)位點(diǎn)可通過影響MYC基因表達(dá)而影響患者預(yù)后。

2.2 8q24區(qū)域風(fēng)險(xiǎn)位點(diǎn)介導(dǎo)的染色質(zhì)相互作用

在表觀遺傳學(xué)中，基因表達(dá)的調(diào)控除了受組蛋白修飾以及DNA甲基化狀態(tài)影響之外，還受染色質(zhì)相互作用的影響（包括染色質(zhì)內(nèi)和染色質(zhì)間），而8q24區(qū)域也可通過此種染色體相互作用來調(diào)控基因的表達(dá)。隨著3C（chromosome conformation capture，3C）、Hi-C（high-throughput chromosome conformation capture）等技術(shù)的發(fā)展，可獲得（不同生理、病理狀態(tài)下）高分辨率染色質(zhì)間相互作用圖譜。Baxter等［25］利用Hi-C技術(shù)發(fā)現(xiàn)，位于8q24.21區(qū)域的rs13281615和rs11780156可與 MYC、lncRNA CASC11（cancer sus?ceptibility 11）、lncRNA CCDC26（CCDC26 long noncoding RNA）的基因序列結(jié)合。在乳腺癌中CASC11可激活 Wnt/β-catenin 信號通路［26］引起腫瘤發(fā)生，CCDC26則可通過上調(diào)癌基因c-Kit表達(dá)產(chǎn)生化療耐藥性［27］。此外，Ahmadiyeh等［28］發(fā)現(xiàn)8q24區(qū)域上存在前列腺癌風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域1、3（亦為結(jié)腸癌風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域）及位于128.35～128.51 Mb處的乳腺癌獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)位點(diǎn)，其均可與MYC基因形成組織特異性的遠(yuǎn)距離染色體環(huán)，雖然在乳腺癌中此染色體環(huán)并不影響MYC蛋白的表達(dá)量。8q24是染色體上高密度的腫瘤相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)位點(diǎn)區(qū)域，但該區(qū)域SNP在乳腺癌中的功能分析研究較少，而在前列腺癌和腎癌中均有相關(guān)報(bào)道。Du等［29］在前列腺癌中采用3C-MTS（3C-based multi-tar?get sequencing）技術(shù)捕獲與8q24相互作用的區(qū)域，其顯著富集Wnt/β-catenin信號通路轉(zhuǎn)錄因子的啟動(dòng)子基序，提示8q24風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域或許可以通過此種物理性空間相互作用調(diào)控腫瘤的多種信號通路。該研究還發(fā)現(xiàn)8q24區(qū)域的前列腺癌風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域1、3主要與MYC基因啟動(dòng)子和增強(qiáng)子區(qū)域序列相互作用，且該區(qū)域還與3q13存在相互作用。HIF（hypoxia inducible fac?tor）是調(diào)控內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵基因，8q24區(qū)域的腎癌風(fēng)險(xiǎn)SNP rs35252396通過調(diào)控染色質(zhì)的易接近性，改變位于MYC和PVT1基因之間的增強(qiáng)子（HIF結(jié)合位點(diǎn)）活性，達(dá)到調(diào)控MYC和PVT1轉(zhuǎn)錄的作用［30］。因此，8q24區(qū)域乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)位點(diǎn)的功能還有進(jìn)一步探索的空間。

3 結(jié)語

乳腺癌的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)多步驟侵襲性過程，惡性程度及侵襲能力的改變并非來自單一基因的作用，而是多基因變異的綜合效應(yīng)。乳腺癌8q24區(qū)域擴(kuò)增可能導(dǎo)致該區(qū)域的基因過表達(dá)，進(jìn)而引起腫瘤表型變化；8q24區(qū)域內(nèi)的DNA位點(diǎn)也可通過染色質(zhì)相互作用影響腫瘤進(jìn)展。8q24區(qū)域在乳腺癌擴(kuò)增的機(jī)制及染色質(zhì)相互作用的功能分析仍需進(jìn)一步探索和研究。