侯明生，王 寧，詹 瑩，沈曉斌，羅玲玲

(紹興市中醫(yī)院病理科，浙江 紹興 312000)

乳腺癌是女性常見的一種惡性腫瘤，雖然隨著近年來醫(yī)療技術(shù)的不斷提高，多種綜合療法的應(yīng)用，使乳腺癌患者的病死率有所降低，但其死亡率仍居于惡性腫瘤中的第6位[1]。隨著基因測序技術(shù)的進(jìn)一步開展，可檢測出諸多有關(guān)乳腺癌發(fā)病的相關(guān)基因預(yù)后評估模型，如SALL4和MTHFRrs1801133等，但是目前仍無確切有效的療效與預(yù)后評估模型。在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中，免疫功能與炎癥反應(yīng)起到重要的作用，而人體外周血中血小板(platelet，PLT)與淋巴細(xì)胞的含量可反映炎癥免疫反應(yīng)的外周血象狀況。有研究指出，胰腺癌與腸癌等多種實體瘤患者中存在PLT與淋巴細(xì)胞水平異常的特點(diǎn)，且可能與患者的預(yù)后狀況有一定關(guān)系[2]，而乳腺癌患者是否存在類似情況，目前仍未定論。故此，本研究通過檢測乳腺癌患者與健康志愿者外周血PLT和CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞的水平，分析外周血中PLT和CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞水平與乳腺癌臨床病理特征的相關(guān)性，并進(jìn)一步分析外周血中PLT與淋巴細(xì)胞亞型的相關(guān)性。

1資料與方法

1.1一般資料

將2016年1月至2018年3月紹興市中醫(yī)院85例接受手術(shù)和輔助治療的女性原發(fā)浸潤性乳腺癌患者為病例組，另同期選取30例體檢健康女性志愿者為對照組。其中，病例組年齡為40～66歲，平均為(53.95±5.85)歲。對照組年齡為37～64歲，平均為(52.85±6.04)歲。兩組年齡的比較，并無明顯差異(P>0.05)。

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：病例組均符合《乳腺腫瘤學(xué)》[3]的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且結(jié)合組織病理學(xué)檢查證實；對照組一般情況良好，無任何嚴(yán)重內(nèi)外科疾病，無激素或藥物濫用史，具備基本的語言溝通能力。排除標(biāo)準(zhǔn)：年齡≥70歲；伴有嚴(yán)重心、腦、肝、腎等重要臟器功能不全；伴有乳腺癌病史；伴有其它乳腺疾病，如導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤等；晚期腫瘤轉(zhuǎn)移；伴有精神性疾病。所有研究對象均知情同意。

1.3方法

病例組于術(shù)前1周內(nèi)、對照組于入院后次日，采集外周血3mL，采血當(dāng)日均無臨床感染征象，如發(fā)熱等。通過全自動血液分析儀(產(chǎn)自美國Beckman-Coulter公司，型號為LH755)對兩組外周血PLT的水平進(jìn)行測定，并用流式細(xì)胞分析儀(美國Becton Dicknson公司，型號為FACSCalibur)對兩組外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞的水平進(jìn)行測定，試劑盒購自上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司，嚴(yán)格按照試劑盒說明書指示完成檢測操作。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2結(jié)果

2.1兩組外周血PLT和CD3+、CD4+、CD8+ T淋巴細(xì)胞水平的比較

病例組外周血PLT和CD8+的水平較對照組均顯著上升，CD3+、CD4+的水平較對照組均顯著下降(t值分別為7.37、6.07、7.62、8.01，均P<0.01)，見表1。

組別例數(shù)(n)PLT(×109/L)CD3+(%)CD4+(%)CD8+(%)對照組30118.97±16.3565.77±7.3531.90±3.2523.05±3.14病例組85247.80±66.8556.70±6.9324.64±4.8430.85±4.99t7.376.077.628.01P<0.01<0.01<0.01<0.01

2.2乳腺癌不同臨床病理特征間外周血PLT和T淋巴細(xì)胞亞型水平的比較

病例組患者不同年齡、病理類型及腫瘤大小之間PLT和CD4+水平的比較，均無明顯差異(均P>0.05)。伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者外周血PLT水平較無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者明顯升高(t=6.10，P<0.01)。病例組患者不同年齡、病理類型、腫瘤大小及淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移之間外周血CD3+和CD8+水平的比較，均無明顯差異(均P>0.05)，見表2。

項目例數(shù)(n)PLT(×109/L)CD3+(%)CD4+(%)CD8+(%)年齡(歲) <6047249.80±59.3555.79±8.4623.84±7.6930.78±9.25 ≥6038241.95±60.3753.98±9.3224.71±7.9331.94±9.36t0.600.940.510.57P0.550.350.610.57病理類型 小葉癌13251.05±61.4454.60±10.1424.54±8.7530.86±8.32 導(dǎo)管癌72246.79±64.2655.98±9.4623.46±9.2631.98±9.84t0.220.480.390.38P0.830.630.700.70腫瘤大小(cm) <350250.78±64.3155.88±8.7424.35±7.6031.08±9.42 ≥335245.87±59.7054.38±9.2423.89±8.2530.79±8.11t0.360.760.270.15P0.720.450.790.88淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 是28284.57±50.3354.58±9.5320.14±4.9630.78±9.22 否57219.87±43.7555.80±10.6527.68±5.1431.98±8.54t6.100.516.430.59P<0.010.61<0.010.55

2.3乳腺癌外周血PLT與CD3+、CD4+、CD8+水平的相關(guān)性

經(jīng)Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，乳腺癌外周血中PLT與CD4+的水平存在負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.52，P<0.01)，而與CD3+、CD8+水平并無顯著關(guān)系(r值分別為-0.11、0.09，均P>0.05)。

3討論

3.1 PLT的作用及其與乳腺癌病理過程的關(guān)系

PLT作為止凝血的主要成分，在腫瘤細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移中具有重要的調(diào)節(jié)作用。此外，PLT可促進(jìn)新生血管的生成，亦能誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖，為腫瘤細(xì)胞的生長提供良好的基礎(chǔ)。其次，PLT可通過集聚于腫瘤細(xì)胞周圍，防止腫瘤細(xì)胞在循環(huán)過程中為機(jī)體的免疫系統(tǒng)監(jiān)視所清除。PLT在腫瘤微環(huán)境中受激活后可誘導(dǎo)其與間質(zhì)細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的相互作用，促進(jìn)炎癥反應(yīng)和腫瘤組織的侵襲。既往研究表明，在惡性腫瘤患者中，PLT增多癥發(fā)生率為15%～60%[4]。另有研究指出，服用抗血小板藥物，如阿司匹林等不僅可有效減少乳腺癌發(fā)病的風(fēng)險，而且可有效降低乳腺癌患者復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的幾率[5]。有研究表明，乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展與腫瘤大小、臨床分期、患者年齡及心理素質(zhì)等方面均存在顯著關(guān)系，且腫瘤大小及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響乳腺癌患者預(yù)后的重要因素[6]。本研究結(jié)果顯示，病例組外周血PLT的水平較對照組顯著上升。病例組患者不同年齡、病理類型及腫瘤大小之間PLT水平的比較均無明顯差異，而淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移患者PLT水平的比較存在明顯差異。

3.2 T淋巴細(xì)胞的作用及其與乳腺癌病理過程的關(guān)系

淋巴細(xì)胞是人體免疫系統(tǒng)中的重要組成部分，腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞與乳腺癌的病理機(jī)制存在密切關(guān)系，特別是與T淋巴細(xì)胞功能密切相關(guān)，并且諸多實體瘤患者亦存在T淋巴細(xì)胞亞群含量異常的特點(diǎn)。本研究發(fā)現(xiàn)，病例組外周血CD3+、CD4+的水平較對照組均顯著下降，CD8+的水平較對照組顯著上升。此外，本研究結(jié)果顯示，病例組患者不同臨床病理特征間外周血CD3+和CD8+水平的比較，均無明顯差異。其次，病例組患者不同年齡、病理類型及腫瘤大小之間CD4+水平的比較，均無明顯差異；而淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移CD4+水平的比較，存在明顯差異。作為輔助性T淋巴細(xì)胞的主要構(gòu)成部分，CD3+、CD4+細(xì)胞均具有抗腫瘤的顯著作用。而作為抑制性T淋巴細(xì)胞，CD8+則具有阻滯抗體合成和釋放的作用。研究表明，腫瘤細(xì)胞可合成諸多免疫抑制因子，促使CD3+和CD4+細(xì)胞明顯減少，CD8+細(xì)胞明顯增多，而免疫功能減弱為腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移提供一定的條件[7]。本文發(fā)現(xiàn)，CD3+細(xì)胞水平與乳腺癌臨床病理因素并無顯著關(guān)系。究其原因，可能因本研究入組例數(shù)較少，在對象選擇上可能存在偏倚有關(guān)，今后仍需進(jìn)一步驗證。

3.3 PLT與T淋巴細(xì)胞亞型的相關(guān)性

PLT與T淋巴細(xì)胞均為血栓形成與免疫炎癥的重要細(xì)胞成分，其中，PLT可通過誘導(dǎo)諸多促有絲分裂活性介質(zhì)的釋放，可發(fā)揮調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞中CD4+細(xì)胞增殖的作用[8]。此外，PLT的主要磷脂代謝產(chǎn)物血栓素A2具有阻滯T淋巴細(xì)胞中CD4+細(xì)胞增殖的作用[9]。并且PLT因子4可通過抑制白介素-2的合成，繼而起到阻滯CD3/CD28抗體誘導(dǎo)的CD4+細(xì)胞增殖的作用[10]。PLT與T淋巴細(xì)胞間的相互作用較為復(fù)雜，且兩者可借助或直接結(jié)合趨化因子與黏附分子等對彼此的功能造成一定影響。本研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者外周血中存在PLT高水平，而CD4+低水平的特點(diǎn)。此外，本研究經(jīng)Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，乳腺癌外周血中PLT與CD4+的水平存在負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.52，P<0.01)。結(jié)果提示，PLT與CD4+T淋巴細(xì)胞可能參與乳腺癌的病理過程。分析其原因，可能與PLT通過誘導(dǎo)促有絲分裂活性介質(zhì)釋放，對CD4+T淋巴細(xì)胞增殖造成抑制密切相關(guān)。而本文發(fā)現(xiàn)，PLT與CD3+、CD8+水平的比較，并無顯著關(guān)系(r值分別為-0.11、0.09，均P>0.05)。分析其原因，可能因本研究樣本量較少，故此今后仍需擴(kuò)大病例數(shù)以進(jìn)一步分析和總結(jié)。

綜上所述，乳腺癌患者外周血中存在PLT和CD8+高水平、CD3+和CD4+低水平的特點(diǎn)，且PLT與CD4+的水平存在負(fù)相關(guān)關(guān)系，同時PLT與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在一定關(guān)系。但因本研究入組例數(shù)相對較少，且為單中心研究，對PLT與CD4+能否作為檢測乳腺癌的重要指標(biāo)和基因治療靶點(diǎn)，今后仍需進(jìn)一步分析。