溫承坤,陳 孝,王奕芳,方尚玲,夏運(yùn)峰,李 琴,李小強(qiáng),陳茂彬*
(1.湖北工業(yè)大學(xué) 生物工程與食品學(xué)院,湖北 武漢 430068;2.湖北省釀造工藝與裝備工程技術(shù)中心,湖北 武漢 430068;3.湖北金盤(pán)酒業(yè)有限公司,湖北 麻城 438300)
隨著人們生活水平的提高,無(wú)論是餐桌禮儀或逢年過(guò)節(jié)禮尚往來(lái)的贈(zèng)品,酒作為一類大眾飲品成為人們的不二選擇。追溯我國(guó)酒的發(fā)展史,幾千年前便有大量文獻(xiàn)記載,故中國(guó)被稱為酒的故鄉(xiāng)。按照現(xiàn)有不同的發(fā)酵工藝劃分,分為啤酒、白酒、黃酒、葡萄酒、米酒等。其中,米酒因低度保健功能而得到關(guān)注,在酒類飲品中所占分量越來(lái)越重。
米酒又名酒釀、甜酒,常以糯米為原料,經(jīng)過(guò)浸泡、蒸煮、沖淋、加曲、糖化發(fā)酵等發(fā)酵工藝所得的一類低度酒類飲品[1-2]。在我國(guó),米酒是漢族及其他少數(shù)民族的傳統(tǒng)特產(chǎn)酒,因此目前市售的米酒種類繁多,常見(jiàn)有孝感米酒、麻城老米酒、陜西朱鹮黑米酒、廣東紅米酒等。其中,以湖北孝感米酒多為大眾熟知,它是一種具有近千年歷史的地方小吃,發(fā)展可追溯至光緒年間。孝感米酒作為湖北省名牌產(chǎn)品之一,曾獲得國(guó)家銀質(zhì)獎(jiǎng)[3]。
縱觀米酒發(fā)展,其發(fā)酵工藝不斷在改進(jìn),演變至今,市售米酒基本發(fā)酵工藝及原理相同。以孝感米酒為例,所選用的原料多為孝感優(yōu)質(zhì)糯米,拌入具有孝感特色的酒曲(鳳窩酒曲)經(jīng)過(guò)根霉菌(還有少量的毛霉和酵母)等發(fā)酵得來(lái)的產(chǎn)品[4]。發(fā)酵一段時(shí)間后,其理化性質(zhì)發(fā)生了對(duì)應(yīng)的改變。在微生物及其他酶的作用下,糯米中蛋白質(zhì)、淀粉、脂肪等大分子物質(zhì)被轉(zhuǎn)化為葡萄糖等單糖、低聚糖、肽類、氨基酸、有機(jī)酸等小分子物質(zhì)[5-6]。
米酒作為一種低度酒精飲料,深受眾多人的喜愛(ài),而早餐飲用米酒,則已經(jīng)成為眾多湖北人的日常飲食習(xí)慣。歷史所傳承下來(lái)的米酒只有甜型低醇米酒,酒精度為1%vol~2%vol,隨著米酒產(chǎn)業(yè)發(fā)展,目前又多出飲料型無(wú)醇米酒,酒精度含量1%vol;飲料型干醇米酒,酒精度為2%vol~4%vol兩種不同類型米酒[7]。盡管米酒乙醇含量不高、但其所含的功能性成分不容忽視,主要有機(jī)成分有蛋白質(zhì)、氨基酸、乳酸、維生素、鈣、鎂、鐵等礦物質(zhì)元素,而這些特殊功能性成分,吸引著眾多研究學(xué)者的目光[8-10]。研究發(fā)現(xiàn),米酒中糖類物質(zhì)極易被分解,能夠有效幫助人體補(bǔ)充能量,增強(qiáng)體魄,有利于脾胃等器官[11]。孟志卿等[12]證實(shí),適量飲用米酒,對(duì)預(yù)防老年癡呆具有顯著的作用。
文章就米酒基本釀造工藝中微生物作用,米酒中5種功能性成分定量定性分析進(jìn)行綜述,旨在探究米酒中功能性成分對(duì)人體健康的影響,為今后米酒釀造研究提供有效的理論科學(xué)依據(jù)。
作為一種傳統(tǒng)的發(fā)酵食品,米酒主要經(jīng)過(guò)糯米浸泡、淘洗蒸飯、淋飯拌曲、糖化發(fā)酵、沖缸過(guò)濾、調(diào)配封罐、冷卻包裝等若干個(gè)工藝過(guò)程,才能夠釀造出風(fēng)味,口感適宜的米酒。
在傳統(tǒng)米酒發(fā)酵過(guò)程中,之所以米酒能夠保持一定的酒精度,并產(chǎn)生適宜的風(fēng)味口感,是因?yàn)樵诿拙瓢l(fā)酵的整個(gè)工藝中,大量微生物的生理作用,其中主要的微生物種類為霉菌、酵母菌、乳酸菌及醋酸菌等。
霉菌以根霉菌為主,其能夠分泌產(chǎn)生大量的糖化酶,如α-淀粉酶、β-淀粉酶、糖化酶等。這一類酶類物質(zhì)參與米酒的糖化階段,能夠有效的將經(jīng)過(guò)液化后的淀粉直接轉(zhuǎn)化為葡萄糖供酵母菌使用。酵母菌作為整個(gè)米酒發(fā)酵過(guò)程中關(guān)鍵性微生物,屬于兼性厭氧微生物,通過(guò)無(wú)氧呼吸,能夠?qū)⑵咸烟寝D(zhuǎn)化為乙醇和二氧化碳,因此酵母菌是米酒生產(chǎn)中最主要的產(chǎn)酒微生物。另外米酒發(fā)酵是一種開(kāi)放式發(fā)酵方法,故在酒醪中存在著大量的乳酸菌,乳酸菌通過(guò)生化作用利用己糖、戊糖產(chǎn)生出乳酸,并在酯化酶的催化下,將乳酸轉(zhuǎn)為乳酸乙酯,成為米酒中主要香味成分。與乳酸菌作用相似,酒醪中大量的醋酸菌在生化作用機(jī)理下轉(zhuǎn)化為醋酸乙酯,與乳酸乙酯共同形成米酒香氣成分,使得米酒香味成分更加飽滿誘人。
在米酒的發(fā)酵過(guò)程中離不開(kāi)有機(jī)酸類物質(zhì),這類物質(zhì)對(duì)米酒的發(fā)酵過(guò)程,風(fēng)味形成及口味存在著較大的影響。據(jù)研究表明,米酒中含有大量的蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)是人體一切細(xì)胞、組織組成的重要部分,人體的各種生命活動(dòng)都離不開(kāi)蛋白質(zhì)的參與,而蛋白質(zhì)主要組成物質(zhì)為氨基酸,其具有抗菌[13]、保護(hù)肝腎功能[14]、降低血壓及血脂[15]等功能,可分為水解氨基酸和游離氨基酸[16],對(duì)人體生長(zhǎng)發(fā)育起著重要的作用。
李小麗等[17]在通過(guò)對(duì)海南甜米酒中氨基酸成分的研究發(fā)現(xiàn),山蘭甜米酒中含有15~17種氨基酸,總量大于130 mg/L,其中必需氨基酸占所有氨基酸含量的30.7%~61.8%,隨著米酒保存時(shí)間的延長(zhǎng),所含氨基酸總量也不斷提升。劉曉庚等[18]使用相同的酒曲釀造不同的米酒,檢測(cè)米酒中氨基酸的含量發(fā)現(xiàn),在這些酒中均有氨基酸的存在,數(shù)據(jù)分析得出黑糯米酒氨基酸含量明顯高于糯米老酒和秈米酒,其氨基酸含量為30.92 mg/mL,其次是糯米老酒26.38 mg/mL,最后是秈米酒16.92 mg/mL;周寶龍等[19]通過(guò)對(duì)陜西朱鹮黑米酒中氨基酸成分分析發(fā)現(xiàn),在該類酒中含有18種氨基酸和γ-氨基丁酸且氨基酸總質(zhì)量濃度為9 133.5 mg/L,必需氨基酸占總氨基酸的51.7%。證實(shí)了米酒中存在豐富的氨基酸,故適當(dāng)?shù)娘嬘妹拙颇軌驇椭梭w及時(shí)補(bǔ)充氨基酸,有效的促進(jìn)人體新陳代謝和肌體的正常生長(zhǎng)發(fā)育,同時(shí)還能幫助調(diào)節(jié)膳食平衡,增強(qiáng)人體的免疫調(diào)節(jié)能力等[20-21],對(duì)人體健康起著重要的作用。
除氨基酸以外,大量其他有機(jī)酸不容忽視,這些有機(jī)酸在促進(jìn)腸道消化吸收、緩解疲勞等保健功能方面有重大的意義。如檸檬酸、乳酸、乙酸等均屬于有機(jī)酸的一種。L-蘋(píng)果酸是一種重要有機(jī)酸,參與生物體的代謝過(guò)程,具有增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)能力、舒緩疲勞、保護(hù)心臟、促進(jìn)記憶力及降低抗癌藥物毒副作用的生理功能[22]。與此同時(shí),F(xiàn)RANCONI F等[23]發(fā)現(xiàn),蘋(píng)果酸能夠緩沖蛙骨骼肌纖維細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的改變。蘋(píng)果酸還能通過(guò)降低血氨濃度,從而來(lái)保護(hù)肝臟[24]。為了檢測(cè)江米酒中有機(jī)酸的種類以及含量,張海波等[25]通過(guò)高效液相色譜(high performance liquid chromatography,HPLC)對(duì)成熟米酒中有機(jī)酸的含量進(jìn)行了測(cè)定,發(fā)現(xiàn)米酒中有機(jī)酸多以乙酸、檸檬酸、琥珀酸為主要成分,同時(shí)檢測(cè)出部分乳酸、蘋(píng)果酸和烏頭酸,然后兩種不同曲制作的米酒中有機(jī)酸含量進(jìn)行比對(duì),發(fā)現(xiàn)乙酸的含量最高,分別為5.34 mg/L和6.90 mg/L,其次為琥珀酸和果酸,烏頭酸的含量最低。楊成聰?shù)萚26]對(duì)米酒中的有機(jī)酸成分及含量測(cè)定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示出在10種米酒中均能檢測(cè)出草酸、酒石酸、蘋(píng)果酸、乙酸、乳酸、檸檬酸和琥珀酸7種有機(jī)酸。
維生素作為重要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),是一種微量有機(jī)物質(zhì),維持著人體的重要生理功能,對(duì)人體的生長(zhǎng)、發(fā)育、代謝等過(guò)程發(fā)揮著重要作用,但是人體對(duì)維生素的攝取必須從食物中獲得。大量研究表明,在米酒中富含許多維生素,這是因?yàn)槊拙浦芯S生素大多來(lái)自原料以及酵母,酵母被認(rèn)為是維生素的寶庫(kù),發(fā)酵過(guò)程中酵母細(xì)胞不斷自溶從而產(chǎn)生大量的維生素[27]??茖W(xué)家認(rèn)為米酒中維生素多為B族維生素,維生素B1(vitamin B1,VB1)可以幫助體內(nèi)碳水化合物進(jìn)行氧化,保證了人體神經(jīng)系統(tǒng),循環(huán)系統(tǒng)及消化系統(tǒng)功能的正常運(yùn)作。VB2參與體內(nèi)生物氧化以及能量代謝,幫助人體充分利用蛋白質(zhì),從而促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育,維護(hù)皮膚和細(xì)胞膜的完整性。同時(shí),VB2與細(xì)胞的生長(zhǎng)代謝相關(guān),可加強(qiáng)肝功能,調(diào)節(jié)腎上腺激素的分泌。維生素PP也能幫助維護(hù)神經(jīng)系統(tǒng),消化系統(tǒng)和皮膚的正常功能,適當(dāng)飲用米酒可以起到美容的作用。VC具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力,防止壞血病,促進(jìn)膠原蛋白合成的作用。
謝廣發(fā)[28]研究發(fā)現(xiàn),古越龍山加飯酒中VB1含量為0.49~0.69 mg/L,VB2為1.50~1.64 mg/L,VPP為0.83~0.86 mg/L,VB6為2.0~4.2 mg/L,此外還含有5.71~43.20 mg/L的VC。周寶龍等[29]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn),黑米酒中含有多種維生素,如VE、VB1、VB2、VB5(煙酸)、VB6等,以VE含量居高,為21.47 μg/100 mL。
多酚類化合物又稱黃酮類化合物,是一種植物次生代謝產(chǎn)物。這類黃酮類化合物中,大多具有藥用價(jià)值,可以治療心腦血管疾病,如改善血管的通透性,降低血管的脆性以及降低血脂和膽固醇等,此外,在一定程度上還可以防治老年高血壓、腦溢血、冠心病、心絞痛等疾病。與此同時(shí),部分黃酮類化合物還具有護(hù)肝解毒、治療肝臟相關(guān)疾病、抗自由基及抗氧化等作用[30]。
謝黎虹等[31]發(fā)現(xiàn),紅米作為我國(guó)一種傳統(tǒng)的稻種,具有抗氧化能力,從而減少動(dòng)脈壁細(xì)胞及其成分的氧化損傷。與此同時(shí),在目前國(guó)內(nèi)眾多研究工作者已經(jīng)將紅米作為米酒的釀造原料,采用不同檢測(cè)方法,通過(guò)各項(xiàng)數(shù)據(jù)結(jié)果證實(shí)在紅米酒中的確存在著許多多酚類化合物,即黃酮類化合物。酚酸、黃酮兩種物質(zhì)均屬于黃酮類化合物。姜麗等[32]通過(guò)高效液相色譜法對(duì)紅米酒中的多酚類物質(zhì)進(jìn)行定量分析,分別建立了8種酚酸(沒(méi)食子酸、原兒茶酸、對(duì)羥基苯甲酸、4-香草酸、咖啡酸、丁香酸、對(duì)香豆酸、蘆?。┘叭N黃酮類物質(zhì)(阿魏酸、異槲皮素、槲皮素)的檢測(cè)方法,結(jié)果發(fā)現(xiàn)咖啡酸的含量最多,為0.676 mg/L。
無(wú)機(jī)鹽即無(wú)機(jī)化合物中的鹽類,是一類存在于人體和食物中礦物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素,無(wú)機(jī)鹽又根據(jù)其在人體內(nèi)含量又分為常量元素和微量元素。常量元素多為鈣、磷、鉀、鈉、氯、鎂、硫等在人體中大量存在的元素,微量元素則為其他含量較低,但影響著機(jī)體穩(wěn)定的一類元素。常見(jiàn)重要的微量元素有:鈷、銅、氟、碘、鐵、錳、鉬、硒、鋅等。
作為一類現(xiàn)流行的健康飲品,米酒中存在種類豐富的微量元素,如錳、銅、鐵等元素。李來(lái)丙等[34]采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法對(duì)米酒進(jìn)行檢測(cè)分析,在樣品中有測(cè)出錳、鉛、銅、鐵四種微量元素,其中錳的含量為0.065 0~0.213 mg/kg、鉛的含量最多為6.18×10-3mg/kg、銅的含量為0.080 8~2.94 mg/kg、鐵的含量為6.88×10-3~0.527 mg/kg,這4種微量元素含量均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。楊?yuàn)櫟萚35]電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法(inductive coupled plasma-atomic emission spectrometer,ICP-AES)[36]對(duì)黔東南侗族四種代表性米酒(黨義、孖生、樂(lè)里和清水河米酒)的微量元素含量測(cè)定,即Fe、Ca、Mg、Zn、Mn、Se及Pb 6種礦物質(zhì)元素,結(jié)果顯示,這四類米酒中均含有豐富的Fe、Ca、Mg元素、尤以Ca元素含量最高、Zn、Se、Pb含量極少,且6種元素的含量均在人體健康允許范圍之內(nèi)。據(jù)相關(guān)研究表明,成年人每天應(yīng)攝入的鈣含量為800~1 000 mg,鎂為300 mg,鐵為15 mg,鋅為15 mg,而米酒中豐富的微量元素能夠有效補(bǔ)充人體內(nèi)所缺乏的微量元素。
隨著時(shí)代科技不斷底進(jìn)步,人類對(duì)食品中的健康物質(zhì)越發(fā)重視,近年來(lái),活性肽成為許多研究工作者研究的熱點(diǎn)?;钚噪氖且磺Ф喾N多肽的總稱,多肽則是由兩種或兩種以上的氨基酸通過(guò)肽鍵相連一類化合物,而具有活性的多肽則稱之為活性肽,或生物活性肽等。這一類生物活性肽,對(duì)人體健康發(fā)育有著重大的影響,一方面能夠幫助人體免疫調(diào)節(jié),抑制病毒和細(xì)菌,抵抗癌癥,另一方面還能促進(jìn)人體對(duì)元素的有效吸收,加快礦物質(zhì)運(yùn)輸以及促進(jìn)生長(zhǎng)等生理功能。
米酒富含多種生物活性肽。KIYONO T等[38]以日本米酒作為原料進(jìn)行研究,通過(guò)小劑量口服和體內(nèi)活性引導(dǎo)分餾,鑒定出了兩種具有抗結(jié)腸炎活性的焦谷氨?;嚯摹M瑫r(shí),經(jīng)過(guò)制備等電聚焦法和制備反相液相色譜法對(duì)米酒中的化合物進(jìn)行分離、對(duì)小鼠進(jìn)行試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)最終活性部分包含三種焦谷氨酸肽:焦谷氨酸-酪氨酸(焦谷氨酸-酪氨酸)、焦谷氨酸-天門(mén)冬酰胺-異亮氨酸(焦谷氨酸-天門(mén)冬酰胺-異亮氨酸)和焦谷氨酸-天門(mén)冬酰胺-天門(mén)冬酰胺-脯氨酸(焦谷氨酸-天門(mén)冬酰胺-天門(mén)冬酰胺-脯氨酸)。這些結(jié)果表明,經(jīng)鑒定的焦谷氨?;嚯耐ㄟ^(guò)不同的機(jī)制表現(xiàn)出抗大腸桿菌活性。
米酒是屬于酒類的一種,具有酒精度數(shù)較低,口味偏甜,風(fēng)味較好等特點(diǎn),深得越來(lái)越多人的喜愛(ài)。根據(jù)不同人對(duì)米酒的喜好要求,研發(fā)人員開(kāi)發(fā)出了許多不同類型米酒,如槐花米酒、黑豆米酒、玫瑰米酒等。而米酒中存在的功能性成分的研究,仍是當(dāng)前研究熱點(diǎn)。目前已證實(shí)米酒中存在著大量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),其一是蛋白質(zhì),米酒中蛋白質(zhì),多以肽和氨基酸的形式存在于米酒中,另外豐富的維生素、無(wú)機(jī)鹽及微量元素促進(jìn)人體成長(zhǎng)發(fā)育,預(yù)防疾病等,同時(shí)米酒中大量的酚類物質(zhì)、活性肽、多糖等也是不容忽視的營(yíng)養(yǎng)成分。故適量的飲用米酒,能夠幫助增強(qiáng)免疫能力、延緩衰老、增強(qiáng)抗氧化能力、預(yù)防骨質(zhì)疏松、冠心病等。所以米酒適用于大部分人群,是一類大眾化的保健飲品。米酒的功能性價(jià)值雖然很大,但是由于目前米酒的原料及釀造工藝存在差異,無(wú)論是家庭作坊,還是大中型企業(yè),不同原料與釀造工藝所生產(chǎn)的米酒,其功能性成分含量與種類也大不相同,未能達(dá)成一致的標(biāo)準(zhǔn),仍然還有許多功能性物質(zhì)尚未被檢測(cè)出,這類物質(zhì)的功能也尚未確定,因此研究米酒功能性成分的工作尚未結(jié)束,還需不斷探究。