高攀 吳桐忠 劉鵬 路宗緯 景亞平

摘要：對(duì)塔額墾區(qū)6個(gè)團(tuán)場(chǎng)的15個(gè)羊養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）采樣并分離大腸桿菌，用紙片擴(kuò)散法進(jìn)行抗菌藥物敏感性檢測(cè)。結(jié)果共分離76株大腸桿菌，臨床藥敏試驗(yàn)顯示，67.1%的菌株對(duì)5～10種的抗菌藥耐藥，32.9%的菌株對(duì)10種以上的抗菌藥物耐藥，無(wú)完全耐藥菌株，其中，164團(tuán)分離株的耐藥情況較嚴(yán)重，61.5%的菌株對(duì)10種以上的抗菌藥物耐藥，161、165、168與170的情況稍好。塔額墾區(qū)規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)中的羊源大腸桿菌對(duì)當(dāng)前臨床上允許使用的多種類型抗菌藥物呈現(xiàn)一定程度的耐藥，尤其是對(duì)臨床中使用較多的青霉素、阿莫西林等耐藥，這種耐藥性的產(chǎn)生將對(duì)大腸桿菌病的抗菌藥物治療形成嚴(yán)重挑戰(zhàn)，應(yīng)選擇性地使用抗菌藥物，避免亂用、濫用抗菌藥物，建議以流行菌株的耐藥性為依據(jù)開(kāi)展臨床治療。

關(guān)鍵詞：羊規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng);大腸桿菌;臨床藥敏試驗(yàn)

中圖分類號(hào)：S859 ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A ? ? ? ?文章編號(hào)：1007-273X（2019）12-0005-03

畜牧業(yè)一直是新疆塔額墾區(qū)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的支柱產(chǎn)業(yè)之一，養(yǎng)羊業(yè)在畜牧業(yè)生產(chǎn)中始終處于重要不可替代的位置。大腸桿菌是腸道菌群的共生菌，可作為耐藥基因貯藏庫(kù)[1]。羊大腸桿菌病由致病性大腸桿菌（Escherichia coli）感染羊腸道或全身組織而引起，臨床主要分為敗血型和腸道型2種[2]。敗血型主要表現(xiàn)全身癥狀，是由大腸桿菌侵入機(jī)體血液和組織液引起，體溫升高可達(dá)42 ℃，以15日齡到2月齡間的羔羊發(fā)病最嚴(yán)重;腸道型以腸炎表現(xiàn)為主，主要發(fā)生于1周內(nèi)的羔羊，病羊體溫可升高到40～41 ℃，不及時(shí)治療可在24 h內(nèi)死亡，病死率達(dá)80%，給養(yǎng)羊業(yè)造成的經(jīng)濟(jì)損失較大[3]?？咕幬锸撬~墾區(qū)治療該病的常用藥物，主要有慶大霉素、安普霉素、恩諾沙星、氟苯尼考、多西環(huán)素、阿莫西林以及磺胺類藥物等[4]。隨著規(guī)模化水平提高和抗菌藥物廣范使用，對(duì)抗菌藥物已呈現(xiàn)出越來(lái)越普遍的耐藥性[5]，給臨床治療帶來(lái)很大困難，了解塔額墾區(qū)各地養(yǎng)殖場(chǎng)羊大腸桿菌的耐藥譜，篩選出高敏抗菌藥物或組合進(jìn)行治療，能有效提高治療效率，并延緩抗藥性的快速蔓延。研究從多個(gè)團(tuán)場(chǎng)的不同養(yǎng)殖場(chǎng)中隨機(jī)采取樣品，分離、鑒別出大腸桿菌，并參考抗菌藥物敏感性試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)及第23版資料增刊[6]，進(jìn)行分離菌株的臨床藥敏試驗(yàn)，分析羊大腸桿菌的耐藥現(xiàn)狀，為基層臨床獸醫(yī)合理用藥提供參考。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

2018—2019年，在新疆塔額墾區(qū)161、164、165、167、168、170團(tuán)6個(gè)團(tuán)場(chǎng)選取2～3個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)（戶），肛子拭隨機(jī)采集羊糞樣。

1.2 ?方法

肛拭子接種于大腸桿菌特異性培養(yǎng)基，即伊紅美藍(lán)和麥康凱瓊脂，37 ℃培養(yǎng)12～18h，觀察菌落形態(tài)。大腸桿菌在麥康凱培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)特征為桃紅色或微紅色，菌落中心呈深桃紅色，圓形，扁平，邊緣整齊，表面光滑，濕潤(rùn);在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上形成紫黑色菌落，并帶有綠色金屬光澤。將純化后的單個(gè)菌落接種于全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)（VITEK 2 Compact System）進(jìn)行生化鑒定，確定其菌種。

1.3 ?臨床藥敏試驗(yàn)

臨床藥敏試驗(yàn)使用紙片法，抗菌藥物藥敏紙片選取臨床常用抗菌藥物并參考“抗菌藥物敏感性試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)”中“美國(guó)臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室非苛養(yǎng)菌常規(guī)藥敏試驗(yàn)和報(bào)告抗菌藥物的建議分組”，共選取20種藥物進(jìn)行敏感性檢測(cè)，分別為青霉素、阿莫西林、頭孢唑啉（先鋒Ⅴ）、頭孢他啶（復(fù)達(dá)欣）、頭孢拉定（先鋒Ⅵ）、頭孢哌酮（先鋒必）、鏈霉素、慶大霉素、阿米卡星（丁胺卡那霉素）、麥迪霉素、阿奇霉素、強(qiáng)力霉素（多西環(huán)素）、氟苯尼考、多粘菌素B、諾氟沙星（氟哌酸）、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明、克林霉素（氯潔霉素）。量取抑菌圈直徑大小，反映分離病原對(duì)藥物的敏感程度。藥敏試驗(yàn)中使用的培養(yǎng)基、培養(yǎng)時(shí)間、試驗(yàn)操作、質(zhì)控菌株等均按照抗菌藥物敏感試驗(yàn)的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行[7]。

2 ?結(jié)果與分析

2.1 ?161團(tuán)分離菌株臨床藥敏試驗(yàn)結(jié)果

161團(tuán)15株大腸桿菌的抗菌藥物臨床藥敏試驗(yàn)顯示，所有的菌株對(duì)強(qiáng)力霉素、克林霉素耐藥;90%以上的菌株對(duì)青霉素、麥迪霉素耐藥;80%以上的菌株對(duì)阿莫西林、頭孢拉定耐藥;60%以上的菌株對(duì)鏈霉素、慶大霉素、氟苯尼考耐藥;40%以上的菌株對(duì)阿米卡星、阿奇霉素、諾氟沙星耐藥;對(duì)頭孢唑啉、頭孢他啶、頭孢哌酮、多粘菌素B、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明表現(xiàn)敏感，耐藥株不超過(guò)40%。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2 ?164團(tuán)分離菌株的臨床藥敏試驗(yàn)結(jié)果

164團(tuán)13株大腸桿菌的抗菌藥物臨床藥敏試驗(yàn)顯示，所有的菌株對(duì)青霉素、阿莫西林、麥迪霉素、強(qiáng)力霉素、克林霉素耐藥;90%以上的菌株對(duì)氟苯尼考耐藥;80%以上的菌株對(duì)頭孢拉定耐藥;60%以上的菌株對(duì)鏈霉素、慶大霉素、阿米卡星、阿奇霉素、諾氟沙星耐藥;對(duì)頭孢唑啉、頭孢他啶、頭孢哌酮、多粘菌素B、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明表現(xiàn)敏感，耐藥株均不超過(guò)40%。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3 ?165、167、168團(tuán)分離菌株臨床藥敏試驗(yàn)結(jié)果

165、167、168團(tuán)36株大腸桿菌的抗菌藥物臨床藥敏試驗(yàn)顯示，所有的菌株對(duì)克林霉素耐藥;90%以上的菌株對(duì)青霉素、麥迪霉素、強(qiáng)力霉素耐藥;80%以上的菌株對(duì)阿莫西林、頭孢拉定耐藥;60%以上的菌株對(duì)鏈霉素、慶大霉素、氟苯尼考耐藥;40%以上的菌株對(duì)阿米卡星、阿奇霉素、諾氟沙星耐藥;對(duì)頭孢唑啉、頭孢他啶、頭孢哌酮、多粘菌素B、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明表現(xiàn)敏感，耐藥株均不超過(guò)40%。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。