天津市和平區(qū)小白樓街社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心(300040)白雪
連花清瘟膠囊是中醫(yī)溫病學(xué)范疇內(nèi)針對防治“瘟疫”理論而研制成的中藥制劑,其性狀為黃褐色顆粒或者粉末[1],臨床上主要單獨(dú)使用或者聯(lián)合抗生素治療流行性感冒。臨床證明連花清瘟膠囊可顯著抑制多種病毒,同時(shí)具有緩解感染癥狀,增強(qiáng)機(jī)體免疫力等作用。其不僅可有效緩解感冒誘發(fā)的鼻塞、發(fā)燒、咳嗽、流鼻涕以及打噴嚏等相關(guān)常規(guī)癥狀,對于咽喉干痛、肌肉的酸痛癥狀亦具有明顯的緩解效果。我科對連花清瘟膠囊進(jìn)行了基礎(chǔ)的化學(xué)成分測定及含量研究,并進(jìn)一步對連花清瘟膠囊的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的分離、提純、鑒定。
1.1儀器與材料 Bruker AV-III-400核磁共振波譜儀;Synapt G2 Mass質(zhì)譜儀;Agilent 1260高效液相色譜儀;Waters 2489制備液相色譜儀;薄層層析硅膠;RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器;反相C18柱層析硅膠;Milli-Q純水凈化器。柱層析硅膠;試劑乙醇,石油醚,甲醇,二氯甲烷,乙酸乙酯,均為分析醇。
1.2提取分離 連花清瘟膠囊原料藥粉末(10kg),混合5倍量70%乙醇,加熱回流提取,共提取三次,將提取液減壓濃縮至流浸膏狀,分別經(jīng)石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水萃取,得到物質(zhì)再次減壓濃縮至流浸膏狀,得到石油醚層浸膏(165g)、乙酸乙酯層浸膏(1445g)、正丁醇層浸膏(1745g)和水層浸膏(2760g)。其中乙酸乙酯層浸膏經(jīng)硅膠柱層析,并以石油醚-乙酸乙酯按一定比例進(jìn)行梯度洗脫,再經(jīng)凝膠柱分離純化,得到系列化合物。
1.3結(jié)構(gòu)鑒定 化合物①:淡黃色粉末,分子式為C25H30O12。化合物②:黃色粉末,分子式為C21H20O10。化合物③:白色粉末,分子式C26H32O11?;衔铫埽簾o色粉末,分子式C16H12O4?;衔铫荩簾o色粉末。分子式C26H30O13。化合物⑥:白色粉末,分子式C17H24O10?;衔铫撸篊20H36O2?;衔铫啵簾o色粉末C11H12O4。化合物⑨:深黃色粉末,分子式:C15H10O5。化合物⑩:無色粉末,分子式C22H26O6?;衔铮喊咨勰?,分子式C26H30O13?;衔铮狐S色粉末,分子式C15H12O4?;衔铮狐S色粉末分子式C15H12O5?;衔铮狐S色粉末,分子式C15H8O6?;衔铮簾o色粉末,分子式C18H15O4。
本次實(shí)驗(yàn)共分離出15中化合物,10-O-(p-hydroxycinnamoyl)-adoxosidic acid①、松脂醇②、槲皮苷③、matairesinol-4′-O-β-D-glucoside④、刺芒柄花素⑤、表松脂醇epi-vogeloside⑥、vogeloside⑦、咖啡酸乙酯⑧、蘆薈大黃素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷⑨、松脂素單甲醚⑩、芹糖甘草苷、異甘草素、柚皮素、大黃酸、胡椒內(nèi)酰胺。
連花清瘟膠囊以以嶺藥業(yè)的在售藥品最為著名,其以銀翹以及大黃等中藥材配伍研制。連花清瘟膠囊具有清熱降火、解毒止痛、宣肺通絡(luò)的顯著療效。其應(yīng)用可有效阻遏疾病病理過程的惡性循環(huán),強(qiáng)化機(jī)體免疫力,加速疾病康復(fù)進(jìn)程。臨床證據(jù)表明,該藥能抗流感病毒等呼吸道常見病毒,具有解熱、抗炎、調(diào)節(jié)免疫的作用[2][3]。對該藥的成分進(jìn)行進(jìn)一步分析,可以指導(dǎo)臨床安全合理用藥,規(guī)避不良反應(yīng)。故本研究取連花清瘟膠囊原料藥粉末,進(jìn)行主要化學(xué)成分的分離以及鑒定,旨在進(jìn)一步明確藥物的有效成分,為藥物臨床推廣應(yīng)用提供理論證據(jù)支持。
本研究采用液相色譜法、凝膠柱色譜法以及硅膠法等多種方法對連花清瘟膠囊原料進(jìn)行分離和純化,從孔樹脂70%乙醇部位分離得到15種化合物,并對以上分離15種化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。其中松脂醇、松脂素單甲醚、刺芒柄花素、異甘草素、柚皮素、大黃酸等6種化合物結(jié)構(gòu)為首次在連花清瘟膠囊原料藥粉末中分離提取獲得,為分析連花清瘟膠囊的藥效物質(zhì)提供了支撐依據(jù)。