王珮厶 馬 瑛

1 成都醫(yī)學(xué)院，四川省成都市 610000； 2 綿陽市中心醫(yī)院

卵巢癌患者的5年總生存率低于30%。近年來，Livin及PTEN基因均是研究熱點(diǎn)。與卵巢癌有著不可分割的聯(lián)系。大部分研究表明在腫瘤表達(dá)中Livin與PTEN存在相反的關(guān)系。Livin與PTEN雖然作用環(huán)節(jié)一致，但生物學(xué)效應(yīng)相反的明確機(jī)制尚未研究清楚。Livin基因能否通過負(fù)調(diào)節(jié)PTEN的表達(dá)促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的生長(zhǎng)以及兩基因與卵巢癌預(yù)后的關(guān)系也尚未清楚。通過這兩個(gè)基因研究，希望能為卵巢癌的診斷和治療開辟一條新途徑。

1 卵巢癌

卵巢癌是婦科最常見惡性腫瘤之一[2]。卵巢癌四種主要類型：透明細(xì)胞癌、漿液性癌、黏液癌和子宮內(nèi)膜樣癌，漿液性卵巢癌占比例最大[3]。卵巢癌由于缺乏早期生物標(biāo)志物，大約75%的患者被診斷為晚期或已經(jīng)轉(zhuǎn)移。卵巢癌患者的5年總生存率低于30%[4]。因此，了解卵巢癌基因調(diào)控和發(fā)育的機(jī)制可能成為卵巢癌診斷和治療的新思路。

2 Livin基因

2.1 Livin基因的介紹 迄今為止，確定了IAP在人類細(xì)胞中包含8個(gè)成員，即HIAP-1、HIAP-2、NIAP、XIAP、ILP-2、Bruce、Survivin和Livin。Livin是凋亡抑制劑家族的成員，是最初在黑素瘤中鑒定并在幾種惡性腫瘤中表達(dá)的基因，包括膀胱癌、肺癌、乳腺癌、急性淋巴細(xì)胞白血病和肝癌、胃癌，有學(xué)者[5]將其稱為腎臟凋亡抑制蛋白(KidneyIAP，rJAP)。Livin基因[6]位于20號(hào)染色體q13.3，總長(zhǎng)度為4.6kb，含有6個(gè)內(nèi)含子和7個(gè)外顯子。Livin蛋白在N-末端僅含有一個(gè)桿狀病毒IAP(BIR)重復(fù)區(qū)，在C-末端含有RING鋅指結(jié)構(gòu)域。由于轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物和剪接方法不同，它們分為兩種亞型：Livin a和Livin B，但兩者差異不大，有研究證實(shí)Livin B比Livin a缺少54bp，因此Livin a比Livin B多編碼18個(gè)氨基酸, 將其統(tǒng)稱為 Livin[7]。

2.2 Livin基因在卵巢癌中的表達(dá)及預(yù)后 研究使用逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應(yīng)和免疫印跡來發(fā)現(xiàn)卵巢癌組織中的Livin基因，表達(dá)顯著高于正常卵巢組織(P<0.05)[8]。發(fā)現(xiàn)Livin的表達(dá)與卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，Livin基因表達(dá)可能對(duì)判斷卵巢癌預(yù)后有一定意義[9]。一些研究使用半定量RT-PCR和Western印跡檢測(cè)Livin亞型在人卵巢上皮癌組織中的表達(dá)[10]，結(jié)果顯示，Livin表達(dá)陽性率明顯高于良性卵巢腫瘤和正常卵巢組織。Livin的抑制導(dǎo)致促凋亡和抗增殖作用，并且與胱天蛋白酶信號(hào)傳導(dǎo)的激活有關(guān)。上述研究表明，人類在惡性腫瘤和腫瘤組織細(xì)胞中表現(xiàn)出異常的Livin表達(dá)[11]。在大多數(shù)腫瘤中，Livin的存在或表達(dá)水平與腫瘤晚期和不良預(yù)后相關(guān)[12]，可能為卵巢癌的診治提供新的思路。

3 PTEN基因

3.1 PTEN的介紹 PTEN基因位于10號(hào)染色體的10q23.3區(qū)域，編碼403個(gè)氨基酸，具有雙重特異性：酪氨酸/絲氨酸/蘇氨酸磷蛋白和脂質(zhì)磷酸肌醇的去磷酸化。PTEN蛋白因其在催化磷脂酰肌醇的去磷酸化中的作用而被充分知曉。在染色體10上缺失的磷酸酶和張力蛋白同源物(PTEN)是磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的重要調(diào)節(jié)因子[13]。PTEN促進(jìn)細(xì)胞凋亡并誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯。它在細(xì)胞增殖、分化和調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵作用[14]。有研究觀察在30種不同的癌組織中有超過3 000個(gè)PTEN突變，這使得PTEN作為人p53基因后第二突變的抑癌基因[15]。最近，在許多類型的腫瘤中報(bào)道了體細(xì)胞中PTEN的突變和缺失，包括子宮內(nèi)膜異位癥、子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、前列腺癌[16]。

3.2 PTEN在卵巢癌中的表達(dá)及預(yù)后關(guān)系 有研究證實(shí)，雜合性PTEN的缺失在輸卵管上皮導(dǎo)致的增生，提供了一個(gè)模型來研究人類卵巢發(fā)病的早期事件，揭開子宮輸卵管上皮癌細(xì)胞侵襲卵巢的機(jī)制。PTEN的丟失增加了細(xì)胞遷移、侵襲和上調(diào)。Wnt4是胚胎發(fā)育過程中苗勒管發(fā)育的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。進(jìn)一步研究顯示W(wǎng)NT4β-連環(huán)蛋白對(duì)PTEN缺失、輸卵管上皮細(xì)胞遷移和定居有影響。卵巢癌細(xì)胞系證明了Wnt4在腫瘤表達(dá)和遷移中的作用。PTEN丟失對(duì)卵巢的發(fā)生，有助于確定卵巢早期癌變[17]。Angela Russo等人發(fā)現(xiàn)PTEN基因丟失對(duì)卵巢的侵襲作用可能有助于確定人類卵巢的癌變?cè)缙谑录18]。其他研究表明，PTEN在正常組織中的表達(dá)顯著高于卵巢癌組織[19]。PTEN在卵巢癌中的陽性率與卵巢癌的分化程度和臨床分期呈負(fù)相關(guān)，這表明PTEN在卵巢癌中起重要作用。Shen W等研究表明，PTEN陽性患者的總生存期明顯長(zhǎng)于陰性表達(dá)，有助于判斷卵巢癌的惡性程度，轉(zhuǎn)移和預(yù)后[20]。PTEN是PI3K信號(hào)傳導(dǎo)途徑的關(guān)鍵負(fù)調(diào)節(jié)因子。子宮內(nèi)膜癌中PTEN表達(dá)的缺失與子宮內(nèi)膜樣組織學(xué)有關(guān)。子宮內(nèi)膜樣腫瘤患者的預(yù)后優(yōu)于非子宮內(nèi)膜樣腫瘤患者[21]。PTEN的預(yù)后和預(yù)測(cè)價(jià)值尚未在卵巢/腹膜高級(jí)漿液性癌中得到有效的探索。對(duì)126例晚期漿液性卵巢癌/腹膜手術(shù)患者進(jìn)行PTEN免疫組化分析，與PTEN陰性或PTEN減少的腫瘤相比，在58%的腫瘤中檢測(cè)到的PTEN陽性與pS6降低和PTEN mRNA水平增加相關(guān)，PTEN陽性腫瘤與無復(fù)發(fā)生存率顯著降低相關(guān)。上述研究表明，PTEN基因與卵巢癌的臨床分期呈負(fù)相關(guān)，與卵巢癌的分化程度呈正相關(guān)，可能成為卵巢癌的預(yù)后因素。

4 Livin與PTEN基因在卵巢癌中的相關(guān)性研究

4.1 Livin主要通過抑制Caspases-3和Caspases-7抑制程序性細(xì)胞死亡的活性來抑制細(xì)胞凋亡。PTEN基因使PIP3去磷酸化以形成PIP2，阻斷PI3K/Akt途徑，并促進(jìn)細(xì)胞凋亡。

4.2 PTEN和Livin均參與腫瘤細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的調(diào)節(jié)。PTEN和Livin的調(diào)制在多種癌癥模型中得到了廣泛的研究。然而，沒有進(jìn)行研究來評(píng)價(jià)同時(shí)調(diào)節(jié)這兩個(gè)基因?qū)β殉舶┌l(fā)展的聯(lián)合作用。PTEN與Livin基因沉默的過度表達(dá)被證實(shí)是一種可行和有效的體內(nèi)外基因調(diào)控方法，這可能是治療卵巢癌的一種潛在的治療策略[22]。

4.3 Livin在卵巢子宮內(nèi)膜異位癥癌組織中的陽性表達(dá)率(68%)顯著高于卵巢子宮內(nèi)膜異位癥組織(36%)和良性腫瘤組織(13%)(P<0.05)。PTEN在卵巢子宮內(nèi)膜異位癥癌組織中的陽性表達(dá)率(16%)顯著低于卵巢子宮內(nèi)膜異位癥組織(65%)和良性腫瘤組織(80%)(P<0.01)。Livin陽性表達(dá)與卵巢子宮內(nèi)膜異位癥的年齡、臨床分期、分級(jí)、組織學(xué)類型和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)。Livin和PTEN蛋白表達(dá)在卵巢子宮內(nèi)膜異位癥中呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.55，P=0.001)?？傊?，Livin表達(dá)的上調(diào)和PTEN的下調(diào)可能參與了卵巢子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)展和進(jìn)展[23]。

4.4 與正常卵巢和良性卵巢腫瘤相比，PTEN的表達(dá)在前者中明顯低于后者，隨著組織學(xué)分化的減少而降低，Livin基因的表達(dá)強(qiáng)度與卵巢癌組織學(xué)分級(jí)呈正比，在腫瘤中的表達(dá)中Livin與PTEN存在相反的關(guān)系。

5 小結(jié)與展望

總之，Livin基因是凋亡抑制家族的成員，其通過抑制半胱天冬酶途徑Livin抑制卵巢癌中的程序性細(xì)胞死亡。Livin的高表達(dá)與卵巢癌的發(fā)生呈正相關(guān)。PTEN的腫瘤抑制功能通常取決于其磷脂磷酸酶活性和磷酸酶催化結(jié)構(gòu)域功能的喪失，它主要通過促進(jìn)細(xì)胞凋亡和誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯來調(diào)節(jié)細(xì)胞。PTEN的高表達(dá)與卵巢癌的發(fā)生呈負(fù)相關(guān)。Livin與PTEN在腫瘤的發(fā)展中發(fā)揮相反效應(yīng)。Livin基因和 PTEN基因與卵巢癌均有密切的聯(lián)系，還有很多問題尚未研究清楚，如Livin的兩個(gè)亞型之間的功能差異，以及與其他凋亡相關(guān)基因表達(dá)的關(guān)系。Livin與PTEN雖然作用環(huán)節(jié)一致，但生物學(xué)效應(yīng)相反的明確機(jī)制等均未研究清楚。Livin能否通過負(fù)調(diào)節(jié)PTEN的表達(dá)促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，以及兩基因與卵巢癌預(yù)后的關(guān)系也尚未清楚，尤其是Livin基因與卵巢癌預(yù)后關(guān)系研究很少。隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展，卵巢癌的診斷與治療可聯(lián)合這兩個(gè)基因，希望能為卵巢癌的診斷和治療開辟一條新途徑。