陳旭梅綜述，羅 清審校

0 引 言

腫瘤多藥耐藥（multi-drug resistane，MDR）是阻礙腫瘤治療成功的主要原因之一，也是導致腫瘤治療復發(fā)和棘手的重要因素。MDR發(fā)生機制復雜，主要有膜蛋白過度表達、DNA修復功能異常、上皮-間質(zhì) 細 胞 轉(zhuǎn) 化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）、抗凋亡等［1-3］。近年來，研究者發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞逃脫免疫系統(tǒng)監(jiān)視和殺傷也是耐藥形成的一個至關重要的因素，發(fā)現(xiàn)耐藥細胞較敏感細胞更易逃避免疫系統(tǒng)識別和攻擊。

機體抗腫瘤免疫反應主要通過活化T淋巴細胞介導，此活化需兩個信號共同刺激：第一刺激信號是靶細胞表面人類白細胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）分子與抗原結(jié)合形成“HLA-抗原肽”復合物，此復合物提供給T細胞表面受體（T cell receptor，TCR）識別，形成HLA-抗原肽-TCR三元體結(jié)構(gòu)；第二刺激信號由靶細胞上輔助分子或協(xié)同刺激信號B7分子與相應配體CD28分子結(jié)合，形成活化信號；在第二信號活化過程中，腫瘤細胞表面缺乏或低表達B7分子導致T細胞無能或凋亡［4］。其中，B7同源物1（B7 homolog 1，B7-H1）是表達在腫瘤和免疫細胞膜上的B7家族分子，已被發(fā)現(xiàn)是導致免疫逃逸的重要機制，B7-H1作為免疫共刺激分子，能使T淋巴細胞在抗腫瘤免疫初始階段及效應階段鈍化，然而MDR細胞對B7-H1分子表達與敏感細胞有顯著區(qū)別，主要表現(xiàn)在耐藥細胞較敏感細胞高表達B7-H1分子，表明MDR存在B7-H1相關的免疫逃逸機制。本文主要從B7-H1參與免疫逃逸影響腫瘤耐藥方面的研究作一綜述。

1 B7-H1分子結(jié)構(gòu)及惡性腫瘤中表達特點

B7-H1又稱為程序性死亡配體（programmed death ligand-1，PD-L1），其基因位于9p24.2，由290個氨基酸組成I型跨膜蛋白，此跨膜蛋白具有典型的細胞間信號傳導IgC和IgV結(jié)構(gòu)域［5］；B7-H1廣泛的表達于造血細胞表面，包括樹突細胞、巨噬細胞、間充質(zhì)干細胞和骨髓衍生的肥大細胞；除此之外，在其他類型的腫瘤細胞表面上也表達B7-H1，如乳腺癌、肺癌、卵巢癌、膀胱癌、黑色素瘤、胃癌、食管癌等［6-7］；多種細胞因子也可調(diào)節(jié)PD-L1，如腫瘤浸潤的T淋巴細胞釋放腫瘤壞死因子、γ-干擾素可增加T細胞和腫瘤細胞PD-L1表達［5］，此外，B7-H1過表達與腫瘤發(fā)生發(fā)展、病理惡性程度及預后不良均有密切關系［8-10］。

程序性死亡受體1（programmed cell death protein 1，PD-1）是PD-L1和PD-L2的共同受體，也是一種重要免疫抑制分子。結(jié)構(gòu)上，PD-1的胞外域和短的胞質(zhì)尾部具有免疫球蛋白V樣結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)與CD28及家族其他分子相似［11］。PD-1廣泛表達于激活T細胞、B細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞表面，B7-H1作為其配體，可與T淋巴細胞表面的PD-1結(jié)合促進腫瘤浸潤T淋巴細胞向調(diào)節(jié)性T細胞分化以及導致“T-細胞耗盡”，促使腫瘤細胞逃避免疫系統(tǒng)監(jiān)視和殺傷［12-13］。這是一種暫時可逆的抑制T細胞活化，提示封鎖PD-L1/PD-1信號通路可逆轉(zhuǎn)腫瘤免疫微環(huán)境的免疫抑制狀態(tài)，增強機體抗腫瘤免疫效應。

2 B7-H1參與免疫逃逸影響惡性MDR

MDR是多因素、復雜機制共同作用的結(jié)果，涉及多種耐藥蛋白及通路的改變等，目前，已有研究報道B7-H1分子激活腫瘤細胞磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3 kinase，PI3K）/蛋 白 激 酶 B（protein kinase B，PKB）和絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）/細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases，ERK）信號通路，上調(diào)P糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）表達，使腫瘤細胞內(nèi)藥物泵出細胞外，減低了腫瘤細胞內(nèi)的藥物濃度使細胞產(chǎn)生耐藥性。除此之外，B7-H1促進腫瘤EMT發(fā)生，而具有EMT特征腫瘤細胞具有原發(fā)性耐藥特點。

2.1B7-H1誘導EMT與MDREMT是上皮細胞失去細胞極性和細胞間黏附能力而獲取較高遷移、侵襲、抵抗藥物誘導凋亡和降解細胞外基質(zhì)的能力從而獲得間充質(zhì)表型，此表型變化包括腫瘤細胞形態(tài)，細胞極性，表面標記物和相關的轉(zhuǎn)錄因子。近年來研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤細胞膜上高表達B7-H1同時還伴隨EMT相關通路、黏蛋白、轉(zhuǎn)錄因子、生長因子改變，使腫瘤細胞出現(xiàn)了EMT特征［14-16］。Wang等［17］研究發(fā)現(xiàn)在轉(zhuǎn)移的腎癌細胞中B7-H1表達上調(diào)，且B7-H1還上調(diào)腎癌固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c（Sterol-regulatory element binding proteins，SREBP-1c）基因表達誘導EMT發(fā)生，這些結(jié)果同時證明了腎癌免疫逃逸B7-H1信號途徑與EMT之間存在密切關系。Tsutsumi等［18］在食管鱗癌中發(fā)現(xiàn)E盒結(jié)合鋅指蛋白1（zinc-finger-enhancer binding protein 1 ZEB1）/PDL1調(diào)節(jié)途徑與EMT也密切相關，PD-L1啟動子區(qū)域含有ZEB1結(jié)合位點，推測ZEB1可能影響PD-L1表達，然而ZEB1轉(zhuǎn)錄因子能抑制E-鈣粘蛋白表達而誘導EMT發(fā)生；研究者為證實PD-L1與EMT之間關系，選擇食管癌鱗癌TE8細胞，轉(zhuǎn)染siZEB1抑制了PD-L1表達同時也促進E-鈣黏蛋白mRNA和蛋白質(zhì)高表達，有效逆轉(zhuǎn)了食管鱗癌細胞EMT表型，此實驗暗示促進EMT進程的ZEB1轉(zhuǎn)錄因子是在PD-L1信號通路的上游并調(diào)節(jié)PD-L1表達。此外B7-H1高表達誘導EMT發(fā)生在多種類型腫瘤中也存在，如乳腺癌 、肺癌、皮膚癌、頭頸部癌等［19-21］。

EMT不僅使腫瘤細胞獲得更強侵襲遷移能力，還是MDR機制之一。腫瘤細胞化療產(chǎn)生獲得性耐藥具有細胞間質(zhì)化趨勢，而本身具有間質(zhì)化狀態(tài)腫瘤細胞也具有原發(fā)性耐藥特點。而眾多研究也證實發(fā)生EMT的腫瘤細胞更易發(fā)生MDR：Asiedu等［22］通過用轉(zhuǎn)化生長因子-β（transforming growth factorβ，TGF-β）誘導乳腺癌細胞發(fā)生EMT同時還產(chǎn)生MDR，導致乳腺癌細胞具有更強遷移侵襲能力以及對紫杉醇、奧沙利鉑更強抵抗能力；Li等［23］用阿霉素誘導乳腺癌MCF-7細胞凋亡和EMT特征時，而只有發(fā)生EMT的MCF-7細胞才具有MDR和更強侵襲轉(zhuǎn)移能力；此外，研究還發(fā)現(xiàn)具有EMT特征腫瘤細胞還調(diào)控耐藥相關藥物外排泵、DNA修復系統(tǒng)、轉(zhuǎn)錄因子以及細胞信號通路；Dong等［24］研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞膜P-gp表達上調(diào)與EMT之間可能存在共同激活的機制，如PI3K/AKT、轉(zhuǎn)錄因子Snail表達增強；使用siRNA阻斷EMT和部分抑制Snail能逆轉(zhuǎn)由P-gp介導MDR，從而顯著降低耐索拉非尼肝癌細胞的侵襲和遷移，但沉默多藥耐藥基因1（multidrug resistance 1，MDR1）下調(diào)P-gp表達對EMT表型逆轉(zhuǎn)并無影響。這些研究均進一步說明EMT特征的惡性腫瘤細胞具有原發(fā)性耐藥特點。推測惡性腫瘤過表達B7-H1促進腫瘤EMT發(fā)生，一般發(fā)生EMT腫瘤細胞可獲得化療抵抗。由于B7-H1在EMT和耐藥過程中涉及信號通路及分子機制較復雜，各通路之間又相互影響，且目前研究EMT方法的局限性及信號網(wǎng)絡復雜性，所以三者之間詳細調(diào)控機制有待深入研究。

2.2B7-H1與耐藥相關蛋白及抗凋亡化療能上調(diào)腫瘤細胞表面B7-H1分子的表達，并可能通過耐藥相關蛋白及抗凋亡因子增強腫瘤細胞對化療藥物抵抗性［25-26］。有學者就此問題以B7-H1為切入點開展研究，下調(diào)了骨髓瘤MOSTI-1細胞表面B7-H1表達，分析其增殖和藥物敏感性變化，研究同時證明了表達陽性B7-H1分子骨髓瘤細胞比表達B7-H1陰性骨髓瘤細胞具有增殖及抵抗化療藥能力［25，27］；相反，劉鴻飛等［28］上調(diào)乳腺癌腫瘤細胞表面B7-H1分子表達后，多西他賽和表柔比星這些一線化療藥物誘導乳腺癌細胞凋亡明顯受抑制。此外，研究者還發(fā)現(xiàn)PD-L1與PD-1結(jié)合激活PI3K/AKT和MAPK/ERK途徑增加MDR1/P-gp在乳腺癌細胞中的表達，并增強了乳腺癌細胞對多柔比星抵抗性［29-30］。這些研究均對B7-H1介導免疫逃逸促進腫瘤細胞多藥耐藥做了有力的補充。

3 結(jié) 語

綜上所述，明確腫瘤細胞異常表達B7-H1與化療耐藥的關系以及化療能誘導腫瘤細胞上調(diào)B7-H1的事實，推斷腫瘤細胞通過B7-H1途徑能增加其對化療抵抗性，此推斷可為腫瘤耐藥逆轉(zhuǎn)治療領域研究提供新的思路。目前腫瘤免疫治療領域針對B7-H1卡控點的抗PD-1/PD-L1藥物在非小細胞肺癌、黑色素瘤、腎細胞癌等多種惡性腫瘤的治療中取得了顯著療效［31-32］，但是并非所有類型腫瘤細胞在抗PD-1/PD-L1藥物免疫治療中獲益，有的患者存在原發(fā)性耐藥，有的患者出現(xiàn)繼發(fā)性耐藥。目前，腫瘤治療領域越來越重視聯(lián)合用藥，其提高治療的原理是多種化療藥物不僅作用于腫瘤細胞，還作用于其所處免疫微環(huán)境，以抑制B7-H1、逆轉(zhuǎn)EMT從而減弱腫瘤細胞對化療藥物抵抗的能力。因此，臨床上除了改用敏感化療藥物、耐藥逆轉(zhuǎn)劑以外，還聯(lián)合用藥糾正腫瘤微環(huán)境的免疫缺陷，促使間質(zhì)細胞-上皮細胞轉(zhuǎn)化，提高耐藥細胞的免疫原性等治療手段，綜合治療可有效治療腫瘤因免疫逃逸產(chǎn)生化療抵抗。