張?jiān)马? 南錫浩 蘆相玉 呂曉紅 張艷麗 周旋

[摘要] 目的 探討分析依托咪酯對(duì)LPS誘導(dǎo)的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中（IL）-1β表達(dá)的影響。 方法 該次實(shí)驗(yàn)探究將選取該院自2016年3—11月之間培養(yǎng)好的原代大鼠皮層中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞作為研究對(duì)象，實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象為60只并將研究對(duì)象隨機(jī)平均分成兩組。其中一組為研究組，另一組為對(duì)照組。研究組將對(duì)研究對(duì)象采取使用依托咪脂進(jìn)行處理的方案;對(duì)照組將對(duì)研究對(duì)象采取使用甲氨蝶呤進(jìn)行處理的方案。然后對(duì)研究對(duì)象使用應(yīng)用免疫法來(lái)測(cè)定兩組的（IL）-1β的含量。 結(jié)果 實(shí)驗(yàn)后研究組大鼠各項(xiàng)數(shù)據(jù)均顯著高于對(duì)照組（t=12.943，15.086，12.193，16.843，P<0.05）;該研究中兩組大鼠IL-1β水平方面，對(duì)照組治療前后分別為（18.4±3.9）mg/L、（15.6±3.1）mg/L，研究組治療前后分別為（18.6±3.3）mg/L、（9.8±3）mg/L（t=15.943，P<0.05）;6研究組大鼠不良反應(yīng)顯著低于對(duì)照組（χ2=5.643，P<0.05）。 結(jié)論 與采取使用甲氨蝶呤進(jìn)行處理的方案相比采取使用依托咪酯進(jìn)行處理的方案對(duì)LPS誘導(dǎo)的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中（IL）-1β表達(dá)的影響效果較好，有著更加顯效的抑制效果。值得在臨床上進(jìn)一步推廣使用。

[關(guān)鍵詞] 依托咪酯;LPS;神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞;（IL）-1β;表達(dá);影響

[中圖分類號(hào)] R5? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1674-0742（2019）01（a）-0007-03

膠質(zhì)細(xì)胞是巨噬細(xì)胞的一種，承擔(dān)著中樞神經(jīng)系統(tǒng)的免疫監(jiān)視的功能作用[1]。因其神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞在神經(jīng)中樞周圍廣泛性，一些基本的行為體征都與神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的分布有關(guān)[2]。依托咪酯對(duì)LPS也就是脂多糖有著明顯的抑制作用，進(jìn)而能使（IL）-1β的形成減少的影響。該次實(shí)驗(yàn)探究將選取該院自2016年3—11月之間培養(yǎng)好的原代大鼠皮層中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞作為研究對(duì)象，實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象為60例，現(xiàn)報(bào)道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

該次實(shí)驗(yàn)探討的研究對(duì)象為培養(yǎng)好的原代大鼠皮層中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，將選擇清潔級(jí)的大鼠60只。其中雌性大鼠為30只，雄性大鼠為30只，包括全部大鼠在內(nèi)的體質(zhì)量均在145～150 g之間，并且大鼠來(lái)源均來(lái)自于省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供。大鼠的基本特征以及性別等均不影響該次的實(shí)驗(yàn)探究，具有可比性（P>0.05），實(shí)驗(yàn)將采取相同規(guī)格的藥物試劑。在操作中所使用的儀器也均相同，最大程度上減少實(shí)驗(yàn)的不準(zhǔn)確性，同時(shí)此次實(shí)驗(yàn)探究具體情況均經(jīng)過(guò)省級(jí)動(dòng)物研究實(shí)驗(yàn)中心倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2? 方法

1.2.1? 對(duì)照組的實(shí)驗(yàn)方法? 對(duì)照組還是研究組都將先對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。首先需要對(duì)參與實(shí)驗(yàn)探究的大鼠們進(jìn)行脫臼處死并將其置于消毒酒精（75%）中浸泡5～8 min[3]。然后取處死大鼠的腰段脊髓組織并處理。然后對(duì)二次漂洗后的細(xì)胞進(jìn)行使用注射甲氨蝶呤試劑（國(guó)藥準(zhǔn)字HI19983205）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)處理，然后加入LPS繼續(xù)培養(yǎng)大約50～60 min左右備用觀察。

1.2.2? 研究組的實(shí)驗(yàn)方法? 準(zhǔn)備工作以及對(duì)所要的觀察細(xì)胞的制作和培養(yǎng)方法時(shí)間等還有使用器械儀器等均同上對(duì)照組的操作與方法[4]。對(duì)研究細(xì)胞進(jìn)行抗體二的藥物注射，然后再進(jìn)行漂洗處理，在對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行注射依托咪酯（國(guó)藥準(zhǔn)字H20020511）的藥物注射，然后同對(duì)照組后期處理方法，繼續(xù)將研究細(xì)胞放入培養(yǎng)基中繼續(xù)觀察備用[5]。

1.3? 觀察指標(biāo)

通過(guò)觀察兩組中培養(yǎng)基內(nèi)的不同狀況以及兩組中膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液的狀況，凝集狀態(tài)以及渾濁狀態(tài)等幾個(gè)評(píng)判類型。還包括有LPS培養(yǎng)基的最終的濃度差距對(duì)比等一些相關(guān)的基本的對(duì)比指標(biāo)來(lái)比對(duì)兩組不同實(shí)驗(yàn)方案所造成的影響效果[6]。

1.4? 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，其中計(jì)數(shù)資料采用[n（%）]表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（x±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)， P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1? 兩組實(shí)驗(yàn)大鼠心率以及IL-1β對(duì)比

實(shí)驗(yàn)前兩組大鼠后的SV、CO、CI、EF，IL-1β對(duì)無(wú)明顯區(qū)別（P>0.05），試驗(yàn)后研究組大鼠各項(xiàng)數(shù)據(jù)均顯著高于對(duì)照組同時(shí)IL-1β對(duì)低于對(duì)照組（P<0.05）。

2.2? 兩組實(shí)驗(yàn)大鼠不良反應(yīng)對(duì)比

研究組大鼠不良反應(yīng)顯著低于對(duì)照組（χ2=4.602， 4.591，4.591，5.016，P<0.05）。

3? 討論

大鼠的脊髓細(xì)胞中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中存在著大量的炎癥因子[7-8]。當(dāng)對(duì)大鼠的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行相應(yīng)的操作時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明實(shí)驗(yàn)觀察對(duì)象會(huì)給出相應(yīng)的影響反應(yīng)[9]?，F(xiàn)如今，有研究表明如果用藥物試劑對(duì)LPS誘導(dǎo)的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行激活刺激時(shí)，會(huì)誘導(dǎo)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生一種能與細(xì)胞間質(zhì)共存并不存在任何的活性因子并且能將其散在的分布在細(xì)胞的胞質(zhì)中，能起到有效的對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)起到抑制作用[10]。經(jīng)研究表明，當(dāng)對(duì)大鼠采取使用依托咪酯時(shí)觀察神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)所產(chǎn)生的影響時(shí)，心率始終處在正常值的范圍內(nèi)，大都在70～80次/min之間，正常的心率為60～100次/min，研究組在進(jìn)行試驗(yàn)研究后的心率處在正常值范圍內(nèi)，心率大都在70～80次/min對(duì)照組的心率并不在范圍內(nèi)，在以往他人對(duì)大鼠采取其他方法進(jìn)行表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究中，最終結(jié)果都表明了大鼠在試驗(yàn)中有些表現(xiàn)為心率較低，有些表現(xiàn)為心率較高[11]。另外，對(duì)于大鼠在應(yīng)用兩種不同的操作后，其表現(xiàn)出來(lái)的不良反應(yīng)情況中可以看出，研究組的大鼠發(fā)生的不良反應(yīng)明顯比對(duì)照組的大鼠發(fā)生的不良反應(yīng)情況較輕。而為注射藥物試劑提供了更加準(zhǔn)確注射機(jī)制和操作原理[12]。通過(guò)利用大鼠的脊髓神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)探究[13]。隋海娟等人[14]的研究結(jié)果顯示，大鼠的不良反應(yīng)等指標(biāo)在加入LPS作用后星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液中IL-1β、IL-6及TNF-α含量開(kāi)始增加，24 h達(dá)高峰分別為（163.46±7.81）ng/L、（13.46±1.59）μg/L、（14.53±1.16）ng/L，48 h后開(kāi)始降低[14]，同該研究的結(jié)果較為一致，該研究中大鼠IL-1β水平方面，研究組治療前后分別為（18.6±3.3）mg/L、（9.8±3.6）mg/L，治療后，IL-1β水平顯著降低。

甲氨蝶呤在臨床上尤其是對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞所造成影響的機(jī)制并不健全。而最新推出的依托咪酯藥劑安全性較大，有效的解決了以前的安全性不穩(wěn)定的問(wèn)題，屬于非巴比妥類的藥物，使用后不會(huì)出現(xiàn)停藥反射的現(xiàn)象也不會(huì)使使用者產(chǎn)生依賴性。

綜上所述，與采取使用甲氨蝶呤進(jìn)行處理的方案相比采取使用依托咪酯進(jìn)行處理的方案對(duì)LPS誘導(dǎo)的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中（IL）-1β表達(dá)的影響效果較好，有著更加顯效的抑制效果。值得在臨床上進(jìn)一步推廣使用。

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（收稿日期：2018-10-15）