劉文光 劉惠芬 衣葵花 婁齊年 王照紅 李云芝

(山東省蠶業(yè)研究所，山東煙臺 264002)

由于小蠶單位體重的體表面積大，皮膚膜質(zhì)層薄，水分和熱量容易散失，出于保濕的需要，生產(chǎn)中小蠶的飼養(yǎng)環(huán)境相對密閉[1]。這種密閉的保溫保濕環(huán)境滿足了稚蠶生長發(fā)育對溫濕度的要求，但也造成了飼養(yǎng)環(huán)境中O2濃度過低，對稚蠶的發(fā)育會產(chǎn)生影響，生產(chǎn)上經(jīng)常采用小蠶穿孔薄膜上蓋下墊飼育[2-4]解決，劉文光等[5-6]采用密閉環(huán)境下增設(shè)飼養(yǎng)臺、在飼養(yǎng)臺下撒新鮮石灰粉的方法可以有效改善小蠶的飼養(yǎng)環(huán)境，促進了稚蠶的生長發(fā)育，但未曾對稚蠶環(huán)境中O2濃度的變化情況及對家蠶的生長發(fā)育影響進行研究。本文通過設(shè)定氣泵不同的開閉時間研究了不同O2含量對家蠶生長發(fā)育的影響并測定了稚蠶飼養(yǎng)過程中O2含量變化情況。

1 材料與方法

1.1 器材、供試家蠶及病毒

1.1.1 器材

科爾諾GT-1000復(fù)合氣體檢測儀；卡默爾KVP04真空泵(換氣量1.1L/min)；帶蓋飼養(yǎng)筐長寬高分別為89 cm、58 cm、12 cm，框內(nèi)置尺寸為88 cm×57 cm的鋁塑板飼養(yǎng)臺面，下墊4 cm的木塊將飼養(yǎng)臺面架空，飼養(yǎng)臺面四周與筐壁留有約5 mm空隙，便于氣體上下交換，均加蓋飼育；筐長邊側(cè)面一端鉆3個直徑0.5 cm的孔便于氣泵抽氣及測定O2含量。

1.1.2 供試家蠶

家蠶品種為菁松×皓月，由山東廣通蠶種集團有限公司提供。蠶卵正常環(huán)境下催青孵化，桑葉飼育，幼蟲飼養(yǎng)溫度24～28 ℃，1—2齡分別在1.1.1所述的小蠶飼養(yǎng)器材內(nèi)飼育，3齡以后在相對濕度60%～75%的環(huán)境中飼育至結(jié)繭。

1.1.3 病毒

家蠶核型多角體病毒(BmCPV)以家蠶繼代制取，病毒多角體精制后配成濃度為1.0×105PIB·mL-1、1.0×106PIB·mL-1、1.0×107PIB·mL-1的懸液放置4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗方法

1.2.1 O2含量變化及對2齡眠蠶體重、繭質(zhì)的影響試驗

1—2齡小蠶用1.1.1所述的飼養(yǎng)筐飼養(yǎng)，通過氣泵將稚蠶飼養(yǎng)環(huán)境中空氣抽出，外界的新鮮空氣進入，間接達到改變O2含量的目的。試驗設(shè)置氣泵開閉時間來調(diào)節(jié)稚蠶飼養(yǎng)環(huán)境中O2的含量，開閉時間設(shè)常開A、1∶2開閉(開6s，閉12s)B、1∶8開閉(開6s，閉48s)C；常閉D共4種。收蟻時每區(qū)卵量14 g，收蟻蠶座面積50 cm×50 cm，1齡第3天擴滿座，2齡餉食每區(qū)擴分為3個重復(fù)，3—5齡用普通淺敞口塑料筐飼養(yǎng)，及時淘汰多余的家蠶，保持每區(qū)3個重復(fù)。1—2齡每天6：00、18：00飼喂，每次開蓋飼喂前測量飼養(yǎng)筐內(nèi)O2濃度。測定1次喂食后氣泵常閉狀態(tài)下O2濃度連續(xù)變化數(shù)據(jù)，調(diào)查2齡眠蠶體重、全繭量、繭層量、繭層率。

1.2.2 對BmCPV的抗病性試驗

選用按1.2.1方法飼養(yǎng)的3齡起蠶，設(shè)A、B、C、D共4個處理，每個處理3個重復(fù)，每個重復(fù)30頭蠶，選取葉質(zhì)相同、無大葉脈、無蟲眼的桑葉，切成4.0 cm×7.5 cm，用移液槍吸取300 μL(10μL/cm2)的病毒液均勻涂抹于葉片上，每區(qū)喂2片添毒葉，待蠶完全吃完后改用普通桑葉飼養(yǎng)，5齡起蠶調(diào)查CPV病蠶數(shù)。

1.3 數(shù)據(jù)計算和統(tǒng)計

試驗數(shù)據(jù)用SPSS 20.0統(tǒng)計分析軟件進行處理，計算2齡蠶體重、全繭量、繭層量、繭層率的差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 氣泵常閉狀態(tài)下O2含量變化

圖1是氣泵常閉狀態(tài)下飼養(yǎng)箱內(nèi)的O2含量變化曲線。測量時間為2齡餉食當(dāng)天18:00飼喂完畢加蓋到次日6：00，測量間隔10 min。O2的含量隨時間的推移明顯下降，由最開始的20.46%下降到15.28%，下降幅度達25.32%。

圖1 氣泵常閉狀態(tài)O2含量變化曲線

圖2 1齡期O2含量變化曲線

圖2、圖3分別是1齡、2齡在每天6：00、18 ：00開蓋飼喂前測量的飼養(yǎng)筐內(nèi)O2含量，反映了稚蠶密閉飼養(yǎng)12 h后的O2變化情況。1齡稚蠶進行了5次測量， A、B、C、D區(qū)的最后一次O2含量較第1次測量分別下降了2.71%、8.01%、12.67%、26.73%，4區(qū)比較O2含量指數(shù)分別為1.36、1.27、1.20、1.00。2齡期進行了4次測量，變化規(guī)律與1齡期相同，其消耗的O2比1齡期更多，A、B、C、D區(qū)的最后一次O2含量較第1次測量分別下降了6.31%、11.46%、24.62%、46.89%，4區(qū)比較O2含量指數(shù)分別為1.84、1.80、1.43、1.00。可以看出，隨著生長發(fā)育，家蠶及桑葉等消耗的O2越來越多，同樣的處理，時間越往后，O2下降的幅度越大。

圖3 2齡期O2含量變化曲線

2.2 對2齡眠蠶體重的影響

由于試驗條件的限制無法控制O2含量，只能以氣泵的不同開閉時間來間接控制O2含量走勢，因此這種條件下的O2含量只能低于環(huán)境中的O2含量。因為不同處理的O2含量曲線趨勢相同，因此選取2齡最后一次的O2含量與2齡眠蠶體重的相關(guān)性進行了分析，見圖4。從圖4可以看出，O2含量與體重成強相關(guān)性，O2含量的降低影響了家蠶的生長發(fā)育。

圖4 O2含量與體重的相關(guān)性

2.3 對全繭量和繭層量的影響

不同含氧量對全繭量和繭層量的影響見表1。從表中看出4種處理方式的全繭量和繭層量無顯著差異，而只有C、D區(qū)繭層率有差異，O2含量差距最大的A與D反倒無差異，推測可能是試驗誤差造成的，說明正常年份4種飼育方式對蠶繭產(chǎn)量和蠶農(nóng)的經(jīng)濟收入無明顯影響。

表1 不同O2含量對全繭量和繭層量影響結(jié)果

注：同一項目進行比較，相同字母表示組間差異不顯著(p>0.05)，不同字母表示組間差異顯著(p<0.05)。

2.4 不同O2含量與對BmCPV抗病性關(guān)系試驗

不同處理的家蠶對BmCPV的抗病性試驗結(jié)果見表2。

表2 不同O2含量飼養(yǎng)的蠶對BmCPV抗病性試驗結(jié)果

從表2可以看出，A、B、C、D 4區(qū)對BmCPV的抵抗力依此遞減，說明家蠶對BmCPV的抵抗力與O2含量有很大關(guān)系，O2含量高抵抗力強，反之則弱。

3 討 論

由以上試驗結(jié)果可以看出，在實驗條件下，飼養(yǎng)框內(nèi)的O2含量隨家蠶的生長和時間的延長而減少，2齡眠蠶體重與O2含量有強相關(guān)性，但由于家蠶具有補償生長機制，最后全繭量、繭層量等指標(biāo)并無顯著差異，說明試驗條件下的O2含量未能影響蠶繭的產(chǎn)量。由于2齡眠蠶體重與O2含量呈正相關(guān)，說明越接近自然環(huán)境的O2含量越適合小蠶的生長，理論上會增強抵抗與體質(zhì)有關(guān)的病害的能力。從添食BmCPV試驗結(jié)果看出，隨著O2含量的降低，家蠶對BmCPV的抵抗力也隨之降低，說明保持飼養(yǎng)環(huán)境的O2含量對增強家蠶體質(zhì)具有重要意義。