姚少玲 南安市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 福建南安 362300
豬瘟是嚴(yán)重危害全球養(yǎng)豬業(yè)的重要傳染病之一,給養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前,雖然很多豬場已經(jīng)認(rèn)識(shí)到了CSF的危害,而且很多豬場也免疫了豬瘟疫苗,但是據(jù)豬場人員反映還是會(huì)有豬瘟的發(fā)生。從豬場中了解到大部分豬場對(duì)于豬瘟的免疫都是照搬資料上的或者是憑自己感覺來制定免疫程序,這就可能存在豬瘟免疫的漏洞,因此,科學(xué)的免疫程序?qū)τ诜烙i瘟的發(fā)生具有重要的作用。目前,常見的豬瘟診斷方法包括臨床診斷和實(shí)驗(yàn)室診斷。實(shí)驗(yàn)室診斷又包括病毒分離和血清學(xué)方法診斷。本試驗(yàn)則采用的是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)方法來檢測某規(guī)?;i場的豬瘟抗體水平。
1.1 血清樣品 由福建省某規(guī)?;i場提供;采集60頭仔豬血液樣品(20日齡仔豬血液樣品30份,50日齡仔豬血液樣品30份);15頭母豬血液樣品。
1.2 試劑盒 IDEXX豬瘟Ab抗體檢測試劑盒,購自北京愛德士元亨生物科技有限公司。
1.3 儀器 離心機(jī)、移液槍、一次性移液器吸頭、500 mL量筒(配制洗滌液用)、96孔板酶標(biāo)儀。
2.1 血清制備 采集豬場60頭仔豬、15頭母豬的血液樣品,其中20日齡仔豬血液樣品30份、50日齡仔豬血液樣品30份。3 000 r/min離心5 min,分離血清,置于-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>
2.2 檢測方法 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。
對(duì)樣本的豬瘟抗體進(jìn)行ELISA檢測,結(jié)果見表1、圖1-圖2。20日齡仔豬群豬瘟抗體合格率為20.00%、變異系數(shù)52.38%;50日齡仔豬抗體合格率為63.33%、變異系數(shù)29.42%;母豬的抗體合格率為80.00%、變異系數(shù)19.64%。
從檢測結(jié)果可以看出,送檢的20日齡小豬群體豬瘟抗體未能達(dá)到合格水平,而且非常不穩(wěn)定。可能原因有:(1)仔豬沒有吃足初乳;(2)母豬本身的豬瘟抗體水平不高;(3)個(gè)別母豬免疫失誤;(4)部分母豬和乳豬有可能感染了免疫抑制病,由此干擾導(dǎo)致豬群免疫反應(yīng)。建議除了注意以上幾點(diǎn),找出針對(duì)性措施外,還要注意以下幾點(diǎn):(1)加強(qiáng)母豬的豬瘟疫苗免疫(加強(qiáng)免疫同時(shí)特別注意免疫注射操作);(2)檢測陰性仔豬其母豬血液中的豬瘟抗體水平是否合格;(3)必要時(shí)在小范圍試驗(yàn)仔豬的豬瘟疫苗超免。但由于該豬場提供的樣品數(shù)目有限,并不能全面反映該豬群小豬的抗體水平。
送檢的50日齡小豬群體豬瘟抗體基本達(dá)到合格水平,同時(shí)建議仔豬豬瘟二免時(shí)間為60日齡左右。最好在仔豬做了豬瘟疫苗二免后的1個(gè)月(90日齡左右),再采集15~20頭有代表性的小豬血樣,進(jìn)行肉豬豬瘟疫苗二免后的免疫效果調(diào)查與評(píng)價(jià)。
送檢的母豬群體豬瘟抗體基本達(dá)到合格水平,但有部分豬只的抗體水平不合格,可能的原因有:(1)部分豬免疫失誤(疫苗注射操作失誤、不規(guī)范、疫苗失效等存在一些問題);(2)部分豬免疫抑制病(藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒等)的干擾導(dǎo)致豬群免疫抑制;(3)注射疫苗時(shí)部分豬正在患病或使用了免疫抑制性藥物,如地塞米松、四環(huán)素等;(4)原來母豬群的豬瘟抗體水平太低或有部分豬豬瘟帶毒。從目前檢測的15頭母豬的豬瘟抗體來看,基本已經(jīng)合格,但檢測數(shù)量實(shí)在不足,有必要對(duì)母豬群的豬瘟抗體做更多更全面的檢測。
表1 送檢樣品ELISA檢測的合格率和變異系數(shù)
圖1 豬瘟抗體水平檢測情況
圖2 豬瘟抗體水平合格率和變異系數(shù)
通過該次的隨機(jī)抗體檢測發(fā)現(xiàn),20日齡仔豬群豬瘟抗體合格率為20.00%、變異系數(shù)為52.38%;50日齡仔豬群豬瘟抗體合格率為63.33%、變異系數(shù)為29.42%;母豬群豬瘟抗體合格率為80.00%、變異系數(shù)為19.64%(一般情況下,變異系數(shù)≤45%時(shí)豬群較穩(wěn)定)。說明該豬場仔豬的抗體水平很不穩(wěn)定,仔豬群體處于豬瘟抗體保護(hù)不穩(wěn)定狀態(tài),建議注意仔豬群的豬瘟免疫。因此,確定具體的免疫程序成了該場防御豬瘟的最主要措施。
通過對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析,鑒于有許多乳豬的豬瘟抗體(母源抗體)不足,必要時(shí)要給重胎母 豬加強(qiáng)豬瘟疫苗免疫。待豬場疫情穩(wěn)定后,改為標(biāo)準(zhǔn)免疫。