，，

(1.威海海洋職業(yè)學(xué)院，山東 威海 264300；2.黃海水產(chǎn)研究所，山東 青島 266071)

豆粕營養(yǎng)價值較高，其營養(yǎng)成分相對較齊全且均衡，符合多數(shù)動物的營養(yǎng)需求[1-2]，但其含有多種抗?fàn)I養(yǎng)因子，在一定程度上影響了水產(chǎn)動物對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，最終限制了動物的生長[3-6]。而豆粕經(jīng)發(fā)酵后，去除了多種抗?fàn)I養(yǎng)因子，同時，蛋白質(zhì)分解產(chǎn)生的多種小肽和游離氨基酸更易被動物吸收，能夠改善豆粕的營養(yǎng)品質(zhì)，提高豆粕的利用率，對綠色健康高效的養(yǎng)殖具有重要意義[7]。

本試驗(yàn)用發(fā)酵豆粕替代飼料中的魚粉，探討發(fā)酵豆粕替代魚粉對圓斑星鰈(Veraspervariegatus)生長及表觀消化率的影響，旨在了解圓斑星鰈飼料中發(fā)酵豆粕含量同營養(yǎng)物質(zhì)吸收利用的關(guān)系，以及發(fā)酵豆粕在圓斑星鰈飼料中的適宜用量，為發(fā)酵豆粕的合理利用和圓斑星鰈飼料的配方優(yōu)化提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

本試驗(yàn)分別用0%、10%、20%、30%、40%的發(fā)酵豆粕添加在五組等蛋等脂的飼料中，分別替代魚粉蛋白的0%，9.81%，19.63%，29.44%，39.26%，標(biāo)記為A、B、C、D、E組。試驗(yàn)飼料配方及營養(yǎng)水平見表1。魚粉、發(fā)酵豆粕粉碎后60目過篩，按各種原料配比進(jìn)行配料、混勻，擠壓成直徑為2.5 mm的顆粒飼料，于55 ℃恒溫下干燥，干燥后的顆粒飼料放-20 ℃冰箱中保存。

表1 飼料配方及營養(yǎng)水平(%干物質(zhì))

注1：預(yù)混料：VA1 200 000 IU；VC20 000 mg；VE5 000 mg；VD300 000 IU； VB13 000 mg；VB22 000 mg；VB6800 mg；VB125 mg； VK33 000 mg；煙酸3 000 mg；葉酸300 mg；生物素30 mg；泛酸鈣3 000 mg；肌醇10 000 mg；鐵5 000 mg；鋅2 000 mg；銅1 500 mg；鈷500 mg；硒25 mg；碘150 mg；免疫抗病素適量；基因促長劑適量； TR消化劑適量；抗氧化劑適量；輔料適量

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)魚購自山東科合海洋高技術(shù)有限公司，本試驗(yàn)共5個試驗(yàn)組，每組設(shè)3個重復(fù)，將規(guī)格一致的圓斑星鰈(49.0±1.0 g)隨機(jī)分配到15個塑料桶中，每桶15尾，試驗(yàn)前，先用不含三氧化二鉻的飼料暫養(yǎng)兩周，使其適應(yīng)環(huán)境后再投喂含有三氧化二鉻的飼料，每天早晚投喂兩次(08：00；16：00)，投喂結(jié)束后1 h，記錄殘餌量并清理，試驗(yàn)采用的塑料桶為直徑100 cm,高80 cm的玻璃纖維桶，流水養(yǎng)殖，養(yǎng)殖周期為10周，期間水深、水溫、溶解氧、鹽度分別控制在50 cm、18.5 ℃、5.5 mg/L、35‰左右，如有死亡，記錄并稱重。

1.3 樣品收集與分析

每天上午投喂完2 h后，采用擠壓法收集糞便，于70 ℃的恒溫干燥箱中烘干，4 ℃保存，糞便的收集每隔一周收集一次，使魚體能夠恢復(fù)到正常的生理狀態(tài)。試驗(yàn)?zāi)?，將各組魚饑餓24 h后，對其計(jì)數(shù)、測重，計(jì)算成活率、特定生長率等。飼料和糞便中的三氧化二鉻、粗蛋白、粗脂肪的測定分別采用分光光度法(GB/T 13088-2006)、凱氏定氮法(VELP,UDK142 automatic distillation unit意大利)、索氏抽提法(FOSS脂肪測定儀SOXTEC 2050 瑞典)。

1.4 計(jì)算公式

成活率=試驗(yàn)?zāi)~體的個數(shù)∕試驗(yàn)初魚體的個數(shù)×100%

特定生長率=(ln試驗(yàn)?zāi)└鹘M魚平均體重-ln試驗(yàn)初各組魚平均體重)∕養(yǎng)殖天數(shù)×100

飼料系數(shù)=試驗(yàn)期間投飼總量∕(試驗(yàn)?zāi)└鹘M魚總重+總死魚重-試驗(yàn)初各組魚總重)

飼料干物質(zhì)表觀消化率=(1-飼料中 Cr203%/糞便中Cr203%)×100%

飼料營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率=[1-(飼料中 Cr203%/糞便中Cr203%)×(糞便中營養(yǎng)物質(zhì)含量/飼料中營養(yǎng)物質(zhì)含量)]×100%

1.5 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS(17.0)進(jìn)行單因素方差分析和Duncan's多重比較，顯著水平為P<0.05，標(biāo)注各組的差異性,數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果

2.1 發(fā)酵豆粕對圓斑星鰈生長性能的影響

發(fā)酵豆粕對圓斑星鰈生長性能的影響見表2，其中，A、B、C和D組的成活率無顯著性差異(P>0.05)，但均顯著高于E組(P<0.05)。隨飼料中發(fā)酵豆粕水平的升高，特定生長率逐漸降低，A、B組顯著高于其他各組(P<0.05)，飼料系數(shù)則逐漸升高，A、B和C組顯著低于D、E組(P<0.05)。

表2 發(fā)酵豆粕對圓斑星鰈生長性能的影響

注：同一列數(shù)據(jù)右上角不同字母上標(biāo)表示差異顯著(P<0.05)

2.2 發(fā)酵豆粕對圓斑星鰈表觀消化率的影響

圓斑星鰈營養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率受飼料中發(fā)酵豆粕的影響較大(見表3)，其中，干物質(zhì)表觀消化率以B組最高，A和E組最低，顯著低于其他各組(P<0.05)，蛋白質(zhì)表觀消化率和脂肪表觀消化率均隨飼料中發(fā)酵豆粕水平的升高先升高后降低，以B組最高，顯著高于其他各組(P<0.05)，E組最低。

表3 發(fā)酵豆粕對圓斑星鰈表觀消化率的影響

注：同一列數(shù)據(jù)右上角不同字母上標(biāo)表示差異顯著(P<0.05)

3 討論

3.1 發(fā)酵豆粕對圓斑星鰈生長性能的影響

發(fā)酵豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子含量少，營養(yǎng)價值高，屬優(yōu)質(zhì)的植物性蛋白源。在本試驗(yàn)中，隨飼料中發(fā)酵豆粕水平的升高，魚體特定生長率逐漸降低，飼料中添加20%的發(fā)酵豆粕會顯著降低魚體的特定生長率(P<0.05)，發(fā)酵豆粕水平達(dá)30%時，會顯著降低魚體的飼料系數(shù)(P<0.05)，該結(jié)論與Luo等[8]的研究結(jié)果相似，即在斜帶石斑魚(Epinepheluscoioides)飼料中，用發(fā)酵豆粕替代14%的魚粉，對其特定生長率并未產(chǎn)生顯著性影響，過高則魚體生長性能下降。因此，飼料中發(fā)酵豆粕的添加量應(yīng)在適宜的范圍之內(nèi)，添加過量則會影響魚體的生長。其原因可能是：1、發(fā)酵豆粕中的風(fēng)味氨基酸含量(20.22 g/100 g)較魚粉(23.18 g/100 g)低，較高的替代量，會使飼料中的風(fēng)味氨基酸含量降低，降低飼料的適口性，魚體攝食下降，不利于其生長[9]。2、發(fā)酵豆粕中的必需氨基酸的含量(21.74 g/100 g)較魚粉(32.00 g/100 g)低，同時，作為第一限制性氨基酸的蛋氨酸含量(0.41 g/100 g)明顯低于魚粉中的含量(1.54 g/100 g)，因此，發(fā)酵豆粕不同比例的添加在飼料中會導(dǎo)致各組飼料的氨基酸含量差異越來越大，對魚體也會造成不利的影響。

3.2 發(fā)酵豆粕對圓斑星鰈表觀消化率的影響

飼料消化率是評價飼料質(zhì)量的一個重要指標(biāo)[10]。在本試驗(yàn)中，表觀消化率均以B組最高，這表明豆粕經(jīng)發(fā)酵后分解為易被魚體消化吸收的小分子蛋白、小肽和游離氨基酸等，有利于提高魚體對飼料養(yǎng)分的消化利用[11]；同時，發(fā)酵豆粕中大部分抗?fàn)I養(yǎng)因子被降解，從而使抗?fàn)I養(yǎng)因子對魚體消化酶活性的抑制作用大大降低；并且，在發(fā)酵過程中能夠產(chǎn)生少量的消化酶，皆對魚體消化有利[12]。但過高的替代量，會降低圓斑星鰈對營養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率，其原因可能是替代量過高，飼料適口性降低，魚體攝食率降低，導(dǎo)致魚體腸道絨毛萎縮，抑或是發(fā)酵豆粕中可能仍存在少量抗?fàn)I養(yǎng)因子，損傷魚體消化道結(jié)構(gòu)[13]，造成魚體對營養(yǎng)物質(zhì)的消化率降低。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，飼料中添加10%的發(fā)酵豆粕在一定程度上能提高魚體對營養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率，且不會對魚體生長造成不利的影響，過量則影響魚體的生長性能。該結(jié)果可以為發(fā)酵豆粕的合理利用和圓斑星鰈飼料的配方優(yōu)化提供理論依據(jù)，促進(jìn)圓斑星鰈養(yǎng)殖業(yè)健康高效發(fā)展。