王娟娟，閔育娜，劉瑞芳，王哲鵬，劉福柱，牛竹葉

(1.西北農(nóng)林科技大學 動物科技學院，陜西楊凌 712100；2.陜西華秦農(nóng)牧科技有限公司，陜西楊凌 712100)

略陽烏雞是中國重要的地方烏雞品種，主產(chǎn)區(qū)位于陜西省漢中市略陽縣及周邊區(qū)域，因此而得名。略陽烏雞是中國烏雞中體型最大的品種，具有典型的“六烏” 特征，即烏皮、烏喙、烏腿、烏趾、烏舌、烏冠，被譽為“禽中明珠”[1]。因該品種體型較大、產(chǎn)肉性能較高、肉質(zhì)鮮美，所以不僅具有較高的藥用價值，而且具有較高的肉用價值， 開發(fā)潛力很大。前人的研究主要集中在略陽烏雞種質(zhì)特性等方面[2-3]，但有關(guān)飼料營養(yǎng)調(diào)控的研究較少。

蛋白質(zhì)是構(gòu)成一切生命機體細胞和組織結(jié)構(gòu)不可缺少的組分，對動物維持生命活動具有極其重要的作用。有關(guān)日糧蛋白質(zhì)對家禽生長發(fā)育及生理代謝的影響國內(nèi)外已有廣泛研究[4-10]。然而，目前基于略陽烏雞生理遺傳特點的蛋白質(zhì)營養(yǎng)需要研究較少，且7～12周齡略陽烏雞的蛋白質(zhì)需要量尚未見報道。本研究通過分析日糧中不同蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)對7～12周齡略陽烏雞生長性能、主要組織器官發(fā)育及血清生化指標的影響，初步確定其適宜蛋白質(zhì)需要量，為該雞種的精準飼養(yǎng)和高效選育提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

選用600只43日齡體質(zhì)量相近的健康略陽烏雞，公母各半。

1.2 試驗設(shè)計

采用單因子完全隨機試驗設(shè)計，分5個處理組，每處理分別飼喂代謝能相同、粗蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)不同的日糧，每個處理6個重復，每個重復20只雞(公母各半)。試驗日糧參照《NY/T33-2004黃雞飼養(yǎng)標準》中黃羽肉雞營養(yǎng)需要、地方雞種營養(yǎng)需要研究和NRC(1994)蛋雞與肉種雞營養(yǎng)需要量標準，并根據(jù)略陽烏雞生長特性略加調(diào)整(表1)。

1.3 飼養(yǎng)管理

籠養(yǎng)，保持舍內(nèi)溫度為18～21 ℃，濕度為55%～65%。光照時間由每天16～18 h逐漸減至自然光照(每周減少0.5 h)。每天飼喂4 次，嚴格進行定時定量飼喂，嚴控飼料拋灑，每次加料量為料槽的1/4高度。舍內(nèi)每周消毒1次，雞群按常規(guī)免疫程序進行免疫。

表1 試驗日糧配方及營養(yǎng)水平 Table 1 Composition of experimental diets and nutritional level

注：①預混料為每千克飼糧提供維生素A 10 000 IU，維生素D33 000 IU，維生素E 20.15 IU，維生素K36 mg，維生素B16 mg，維生素B212.85 mg，維生素B66 mg，維生素B125 mg，葉酸6 mg，泛酸12 mg，煙酸40 mg，生物素5 mg，銅7.68 mg，鐵74 mg，鋅76 mg，錳80 mg，硒0.068 5 mg，碘0.2 mg，乙氧喹2.8 mg，石粉4.5 g。②括號內(nèi)為實測值，其他為計算值。

Note:① Supplied the following per kilogram of total diet:Vitamin A (retinyl acetate) 10 000 IU,Vitamin D3(cholecalciferol) 3 000 IU,Vitamin E (DL-α-tocopheryl acetate) 20.15 IU,Vitamin K3(menadione sodium bisulfate) 6 mg,Thiamine 6 mg,Riboflavin 12.85 mg,Pyridoxine hydrochloride 6 mg,Cobalamin 5 mg,Folic acid 6 mg,Calcium-D-pantothenate 12 mg,Nicotinic acid 40 mg,Biotin 5 mg,Cu (CuSO4·5H2O) 7.68 mg,Fe (FeSO4·7H2O) 74 mg,Zn (ZnO) 76 mg,Mn (MnSO4·H2O) 80 mg,Se (NaSeO3) 0.068 5 mg,I (KI) 0.2 mg,Ethoxycarbonyl quinoline 2.8 mg,Limestone 4.5 g.② The values in brackets are measured.

1.4 測定指標及方法

1.4.1 生長性能指標測定 飼養(yǎng)期間以重復為單位記錄每周喂料量，每3周以重復為單位記錄試驗雞空腹體質(zhì)量(禁食12 h，自由飲水)，計算平均日增量、日采食量及料質(zhì)量比。

1.4.2 主要組織器官發(fā)育測定 于12 周齡末每處理組各重復隨機抽取與該處理組平均體質(zhì)量相當?shù)碾u2 只(公母各1只)，屠宰后測定主要組織器官發(fā)育指標，并計算組織或器官指數(shù)，計算公式為：某器官指數(shù)或組織的質(zhì)量占活體質(zhì)量的百分率(%)=某器官或組織的質(zhì)量(g)/活體質(zhì)量(g)×100。

1.4.3 血液生化指標測定 在12周齡末每處理組各重復隨機抽取與該處理組平均體質(zhì)量相當?shù)碾u2 只(公母各1 只)，在屠宰前每只翅靜脈采血5 mL，靜置2 h后3 000 r/min離心10 min獲得血清，立即保存于-20 ℃，用于測定血清中總蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮、尿酸、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶和三碘甲腺原氨酸(T3)、四碘甲腺原氨酸(T4)和胰島素的質(zhì)量濃度。血清生化指標采用全自動生化分析儀測定(HATICHI 7180，日本)：總蛋白及白蛋白質(zhì)量濃度采用中生北控生物科技股份有限公司的試劑盒測定；尿素氮及尿酸質(zhì)量濃度采用上海科華生物工程股份有限公司的試劑盒測定。T3、T4和胰島素質(zhì)量濃度采用北京北方生物技術(shù)研究所生產(chǎn)的放免試劑盒及伽瑪計數(shù)器(Packard 8500，USA)測定。

1.5 統(tǒng)計分析

用Excel軟件進行數(shù)據(jù)整理，采用SAS軟件中General linear model 模型的單因子方差分析程序進行數(shù)據(jù)分析，對差異顯著的進行Duncan’s多重比較。結(jié)果以“平均值±標準差”表示。采用SAS軟件中NLIN模型進行線性回歸分析，二次曲線回歸方程模型如下：

y=ax2+bx+c

其中y為平均日增量或料質(zhì)量比，a和b為二次曲線回歸方程回歸系數(shù)，c為截距，x為日糧蛋白質(zhì)水平(g/kg)，-b/2a為日糧最適蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)對7～12周齡略陽烏雞生長性能的影響

由表2可知，日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)對7～12周齡略陽烏雞平均日采食量沒有顯著影響(P>0.05)，而對平均日增質(zhì)量及料質(zhì)量比有顯著影響(P<0.05)。18.06% 蛋白質(zhì)量分數(shù)組平均日增質(zhì)量顯著高于12.39%、14.20%、16.60% 和20.15% 組(P<0.05)。18.06% 蛋白質(zhì)量分數(shù)組料質(zhì)量比顯著高于12.39%、14.20%和20.15%組(P<0.05)，但與16.60%組差異不顯著(P>0.05)。日增量及料質(zhì)量比與日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)存在顯著的二次曲線關(guān)系(P<0.05)，隨著日糧蛋白質(zhì)量分數(shù)的增加，平均日增量呈先上升后下降的趨勢，而料質(zhì)量比呈先下降后上升的趨勢，且經(jīng)回歸分析差異顯著(表3)。

表2 日糧不同蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)的7～12周齡略陽烏雞生長性能Table 2 Dietary CP mass farction on growth performance in Lueyang black-boned chickens from 7 to 12wk of age

注：同列不同字母表示差異顯著(P<0.05)。下同。

Note:Values within a line with difference superscript letters were significantly different(P<0.05).The same bellow.

表3 7～12周齡略陽烏雞日糧蛋白質(zhì)需要量的回歸分析Table 3 Regression analysis of protein requirement in Lueyang black-boned chickens from 7 to 12wk of age

注：y表示日增量(g/d)、料質(zhì)量比，x表示日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)(g/kg)。

Note:y.Daily gain,F/G.x.dietary protein mass farction .

2.2 日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)對12周齡末略陽烏雞部分組織器官生長發(fā)育的影響

2.2.1 組織器官質(zhì)量 由表4可知，日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)對12周齡末略陽烏雞胰腺、胸腺和法氏囊的質(zhì)量影響顯著(P<0.05)，對心臟、肝臟、肌胃和脾臟的質(zhì)量影響不顯著(P>0.05)。20.15%組略陽烏雞胰腺質(zhì)量顯著高于12.39%、14.20% 和18.06% 組(心臟、肝臟、肌胃和脾臟質(zhì)量，P<0.05)，但與16.60% 組差異不顯著 (P>0.05)。20.15% 略陽烏雞胸腺質(zhì)量和法氏囊質(zhì)量均顯著高于12.39% 水平組(P<0.05)，但與14.20%、16.60% 和18.06% 組差異不顯著(P>0.05)。

2.2.2 組織器官質(zhì)量占體質(zhì)量比 由表5可知，日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)對12周齡末略陽烏雞胸肌率影響顯著(P<0.05)，而對腿肌率和腹脂率影響不顯著 (P>0.05)。20.15%組略陽烏雞胸肌率顯著高于12.39% 和14.20% 組(P<0.05)，而與16.60% 和18.06% 組差異不顯著(P>0.05)。

由表6可知，日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)僅對12周齡末略陽烏雞胰腺指數(shù)影響顯著(P<0.05)，對心臟、肝臟、肌胃、胸腺、脾臟和法氏囊指數(shù)影響不顯著(P>0.05)。20.15%組略陽烏雞胰腺指數(shù)顯著高于12.39% 和18.06% 組(P<0.05)，而與14.20% 和16.60% 組差異不顯著 (P>0.05)。

表4 日糧不同蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)組12周齡末略陽烏雞部分器官質(zhì)量Table 4 Dietary CP mass fraction on some tissues and organs in 12-wk-old Lueyang black-boned chickens

表5 日糧不同蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)組12周齡末略陽烏雞部分肉質(zhì)性狀Table 5 Dietary CP mass farction on proportion of some chicken quality of 12-wk-old Lueyang black-boned chickens

表6 日糧不同蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)組12周齡末略陽烏雞部分器官指數(shù)Table 6 Dietary CP mass farction on index of some organs of 12-wk-old Lueyang black-boned chickens

2.3 日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)對12周齡末略陽烏雞血清生化指標的影響

由表7可知，日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)對12周齡末略陽烏雞血清中白蛋白及T3質(zhì)量濃度影響顯著(P<0.05)，而對總蛋白、球蛋白、尿素氮、尿酸、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、胰島素和T4的質(zhì)量濃度影響不顯著(P>0.05)。隨日糧蛋白質(zhì)量分數(shù)的提高，血清中白蛋白質(zhì)量濃度顯著增加，18.06%組顯著高于12.39% 和14.20% 組(P<0.05)，而與16.60% 和20.15% 組差異不顯著(P>0.05)。血清中T3質(zhì)量濃度雖然也受日糧蛋白質(zhì)量分數(shù)的顯著影響(P<0.05)，但未表現(xiàn)規(guī)律性。

3 討 論

3.1 日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)對略陽烏雞生長性能的影響

盡管認為蛋白質(zhì)營養(yǎng)實質(zhì)上是氨基酸營養(yǎng)，然而蛋白質(zhì)作為氮供給的總體營養(yǎng)指標，測定其最適日糧供給質(zhì)量分數(shù)仍然非常重要。研究表明日糧蛋白質(zhì)對生長期雞的生長性能具有顯著影響[4-5]。通常日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)對雞生長性能的影響呈二次曲線變化趨勢，即日糧蛋白質(zhì)缺乏或過量都會顯著降低雞的生長性能，只有適量的日糧蛋白質(zhì)供給才會使雞達到最大生長速度或最佳飼料效率[6-11]。本研究結(jié)果表明，不同蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)顯著影響7～12周齡略陽烏雞平均日增量和料質(zhì)量比。整體上蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)對此階段略陽烏雞生長性能的影響也呈現(xiàn)二次曲線變化的趨勢，表明本研究中日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)梯度處理是基本合理的。這些結(jié)果與前人的報道結(jié)果類似[10-12]。本研究分別以日增質(zhì)量分數(shù)和料質(zhì)量比作為生長性能敏感指標，利用回歸分析確定7～12周齡略陽烏雞適宜蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)為17.52%和17.18%。有證據(jù)表明日糧蛋白質(zhì)可能通過影響一些重要功能基因的表達，進而調(diào)控家禽的生長發(fā)育[11]。然而有關(guān)日糧蛋白質(zhì)調(diào)控家禽生長發(fā)育的分子機制尚需深入探究，這不僅可以加深人們對營養(yǎng)素作用機制的認知，而且也有助于推動建立家禽精準營養(yǎng)調(diào)控的新技術(shù)體系。

表7 日糧不同蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)組12周齡略陽烏雞血清生化指標及激素水平Table 7 Dietary CP mass farction on biochemical indicators and hormone concentrations in serum of 12-wk-old Lueyang black-boned chickens

3.2 日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)對略陽烏雞部分組織和器官生長發(fā)育的影響

有研究報道，飼喂低蛋白質(zhì)量分數(shù)日糧的肉雞相較于飼喂正常蛋白質(zhì)量分數(shù)的肉雞其腹脂率顯著增高，而日糧粗蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)越高則肉雞腹脂率越低[11]，這可能是由于高蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)日糧一方面刺激肌肉組織的發(fā)育，另一方面抑制肝臟脂質(zhì)合成，最終降低脂肪在體內(nèi)的積累。本研究結(jié)果表明，在日糧能量質(zhì)量分數(shù)相同的情況下，不同日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)對12周齡略陽烏雞腹脂率沒有顯著影響，這與Nawaz 等[13]的研究結(jié)果類似。而與Liu等[10]的報道結(jié)果不一致。這可能一方面與略陽烏雞固有的生理遺傳特性有關(guān)，另一方面也可能與不同試驗設(shè)計的蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)、代謝能質(zhì)量分數(shù)及二者比例(能蛋比)有關(guān)，這一問題有待進一步研究。本研究發(fā)現(xiàn)日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)對12周齡略陽烏雞胸肌率有顯著影響，隨著日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)的提高，胸肌率呈線性升高的趨勢，與李炳霞等[14]的研究結(jié)果相似，但不同于曾曉閣等[15]的報道。利用高蛋白日糧促進略陽烏雞胸肌發(fā)育，不僅在生產(chǎn)實踐中具有應(yīng)用價值，可以提高產(chǎn)肉性能，而且在育種中可以實現(xiàn)早期定向選育，從而加快育種進展。

3.3 日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)對略陽烏雞血清生化指標的影響

本研究中當日糧蛋白質(zhì)量分數(shù)為16.60%～18.06% 時，血清蛋白質(zhì)量濃度趨于最大，烏雞的生長也處于最佳狀態(tài)。這可能是由于血清蛋白作為機體蛋白質(zhì)合成和代謝的重要指標，其質(zhì)量濃度高說明蛋白代謝旺盛，從而可以促進機體生長和提高飼料利用。Malheiros等[16]研究發(fā)現(xiàn)，飼喂低蛋白質(zhì)量分數(shù)日糧的肉雞相較于飼喂高蛋白質(zhì)量分數(shù)日糧的肉雞，其血清中T3質(zhì)量濃度顯著升高，而T4質(zhì)量濃度顯著降低。在本研究中，日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)顯著影響略陽烏雞血清中T3質(zhì)量濃度，但未表現(xiàn)出規(guī)律性，而T4質(zhì)量濃度未受到顯著影響，這可能是由于略陽烏雞自身特異性導致的，具體機制有待進一步研究。此外，本研究結(jié)果表明日糧蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)對12周齡略陽烏雞多數(shù)其他血清生化指標沒有顯著影響，包括血清總蛋白、球蛋白、尿素氮、尿酸、胰島素和T4的質(zhì)量濃度以及一些酶的活性，表明試驗雞在本研究處理下生理狀況基本正常，也說明本研究的蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)梯度處理是基本合理的。

4 結(jié) 論

本研究表明日糧蛋白質(zhì)量分數(shù)對7～12周齡略陽烏雞的生長發(fā)育有顯著影響；基于日增量和料質(zhì)量比為評價指標的二次曲線回歸分析得出，7～12 周齡略陽烏雞適宜蛋白質(zhì)需要量分別為17.52%和17.18%。