林繼輝,郭秀玲

(福建師范大學(xué) 閩南科技學(xué)院，福建 南安 362332)

目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上洗面奶按其主要成分可以分為表面型、皂基型和氨基酸型.皂基型的洗面奶一般由脂肪酸經(jīng)KOH中和皂化而成；表面型洗面奶一般則由AES、AESA等陰離子表面活性劑加以CAB等溫和兩性表面活性劑所制得；而氨基酸表面活性劑一般則以椰油?；彼徕c等氨基酸表面活性劑加以CAB等溫和兩性表面活性劑制得[1].按品種來(lái)分，可以分為普通型、磨砂型、泡沫型和凝膠型等[2].洗面奶配方中的主要成分有主表面活性劑、增稠劑、保濕劑、防腐劑、珠光劑、香精和功能性添加劑等[3].

魚(yú)腥草是中國(guó)藥典收錄的一種可藥可食的兩用植物[4～5]，其含有大量的由槲皮素和以槲皮素為甙元黃酮類化合物[6].相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究表明魚(yú)腥草中的黃酮類化合物具有抗氧化、抗衰老和抗病毒等作用，且被廣泛應(yīng)用在食品、醫(yī)藥和保健等行業(yè)[7～8].目前對(duì)魚(yú)腥草中黃酮類化合物的提取方法有水提法、有機(jī)溶劑提取法和超聲波提取法等[6].本文采用了超聲波熱回流法，將提取到的黃酮類化合物提取液進(jìn)行濃縮，再將濃縮后的魚(yú)腥草黃酮類化合物提取液添加到基礎(chǔ)潔面霜配方中，從而設(shè)計(jì)出一款具有抗氧化抑菌等功能作用的潔面霜.

1 實(shí)驗(yàn)儀器及藥品

集熱式恒溫加熱磁力攪拌器(鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司)，DGX-9053鼓風(fēng)干燥箱(上海南榮實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司)，KQ5200E超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，2152型羅氏泡沫儀(上海榮拓儀器設(shè)備股份有限公司)，JP-100A-2型多功能粉碎機(jī)(上海久品工貿(mào)有限公司)，HB10旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海研域儀器設(shè)備股份有限公司)，HPX-9082M數(shù)顯電熱培養(yǎng)箱(上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)等.

脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸鈉AES、脂肪醇聚氧乙烯醚9 AEO9、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺6501、椰油酰胺丙基甜菜堿CAB-35、十二烷基二甲基甜菜堿BS-12、卡波姆SF-1、硬脂酸甘油酯、珠光劑、蛋白胨、牛肉膏以上均為化學(xué)純，丙二醇、丙三醇、低分子透明質(zhì)酸鈉、2,2-聯(lián)苯基-1-苦基肼基DPPH等，(均為分析純).

2 實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果分析

2.1 潔面霜的制備

根據(jù)表1與表2的配方列表選取不同量的藥品放置于燒杯A，再將一定量去離子水于燒杯B中，分別于90 ℃中殺菌20 min，待燒杯A中藥品完全溶解后，緩慢攪拌下將滅菌后的去離子水加入燒杯A中，皂化60 min后，于60～70 ℃中加入珠光劑和少量透明質(zhì)酸鈉[9]，完全溶解后降溫至40～45 ℃，加入EDTA-2Na，攪拌溶解均勻后于超聲波清洗器中超聲10 min，降至40 ℃以下，測(cè)量其pH值，調(diào)節(jié)pH值，使pH于4.0～8.0之間，最后取出，冷卻至室溫.

表1 配方列表

表2 潔面霜配方列表

2.2 潔面霜表面活性劑的篩選及結(jié)果分析

將制備好的各個(gè)潔面霜樣品，進(jìn)行冷熱穩(wěn)定性的實(shí)驗(yàn)，若樣品在冷熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)中不分層的則可認(rèn)為是初步可行的配方，反之則是不可行的配方.由表3的試驗(yàn)結(jié)果可知：經(jīng)初步篩選，配方①、②、③、④、⑥、⑦經(jīng)過(guò)冷熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)是可行的配方，而配方⑤的熱穩(wěn)定出現(xiàn)分層[10]，所以配方⑤是不可行的.此后通過(guò)觀察產(chǎn)品外觀及其泡沫高度，可知配方⑥為最佳可行配方.

表3 表面活性劑篩選結(jié)果

2.3 潔面霜表面活性劑的正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果分析

選擇以甘油、CAB-35、6501及AES作為考察因素，采用L9(34)正交表進(jìn)行設(shè)計(jì)，并以樣品泡沫高度和冷熱穩(wěn)定性作為實(shí)驗(yàn)測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)，以此確定各考察因素的最佳配比.

表4 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

表5 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

表6 極差分析

表7 方差分析表

表6可知：由R值大小可知潔面霜配方中影響其發(fā)泡性能的主次關(guān)系為C>B>D>A，即6501>CAB-35>AES>甘油，同時(shí)根據(jù)表7中的F比值大小進(jìn)一步證明了該配方中各表面活性劑影響值的大小關(guān)系為6501>CAB-35>AES>甘油；由泡沫高度來(lái)評(píng)價(jià)正交試驗(yàn)結(jié)果可知最優(yōu)配方為A1B1C1D3，即甘油為3 g、CAB-35為8 g、6501為2 g、AES為12 g.

2.4 魚(yú)腥草黃酮類化合物的提取及其在潔面霜中用量的確定

2.4.1 魚(yú)腥草原料預(yù)處理

將新鮮的魚(yú)腥草洗凈、切碎、自然涼干，并用高速粉碎機(jī)粉碎、過(guò)篩網(wǎng)得到一定目數(shù)的魚(yú)腥草粉末，密封保存于干燥處.

2.4.2 魚(yú)腥草黃酮類化合物的提取方法

利用超聲波熱提取法，分別量取175 mL體積分?jǐn)?shù) 40%乙醇和稱取5 g粉碎好的魚(yú)腥草加入1 000 mL容量瓶中，然后于50 ℃水溫中超聲7.5 min，待超聲完成后抽濾，再將濾渣放入1 000 mL容量瓶中按上述同樣方法進(jìn)行超聲波熱提取，合并兩次濾液，最后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行濃縮，得到黃酮類化合物粗提液.

2.5 魚(yú)腥草黃酮類化合物添加量的確定及結(jié)果分析

以正交試驗(yàn)中得到的最佳配方(甘油3 g、CAB-35 8 g、6501 2 g和AES 12 g)為空白對(duì)照，并以此配方為基礎(chǔ)制備出含有各添加2%、4%、6%、8%、10%的魚(yú)腥草提取物潔面霜.來(lái)探究魚(yú)腥草的提取液用量不同對(duì)潔面霜的配伍性能及其它方面的性能產(chǎn)生的影響，結(jié)果如表8.

表8 添加不同量魚(yú)腥提取物的潔面霜結(jié)果分析

從上表可知，添加6%魚(yú)腥草提取物后的潔面霜冷熱性穩(wěn)定且泡沫高度最佳.因此魚(yú)腥草提取物最佳添加量應(yīng)為6%.

3 樣品的檢測(cè)

3.1 感官的檢測(cè)

置樣品于非陽(yáng)光直射下進(jìn)行目測(cè)觀察，樣品的體系穩(wěn)定且無(wú)其他異物，顏色為淺棕色.無(wú)明顯氣味，外觀、香氣和色澤等各項(xiàng)均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[11].

3.2 理化性質(zhì)的檢測(cè)

1) 冷熱穩(wěn)定性測(cè)試 根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)將潔面霜樣品分別置于溫度為40±1 ℃下的恒溫烘箱中以及溫度為-5～-10 ℃的冰箱中各恒溫24 h，進(jìn)行冷、熱穩(wěn)定實(shí)驗(yàn).24 h后再取出，待恢復(fù)至室溫后觀察樣品，均無(wú)變色或分層，符合國(guó)家輕工業(yè)標(biāo)準(zhǔn).

2) 泡沫高度測(cè)定 按照泡沫檢測(cè)方法測(cè)得樣品在0.5 min時(shí)泡沫高度為1 045 mm，3 min后泡沫高度為1 025 mm，5 min 后泡沫高度為1 010 mm，10 min后泡沫高度為960 mm.樣品試液的泡沫高度皆符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，且穩(wěn)定性良好.

3) pH值測(cè)定 在潔面霜試樣體系溫度為25 ℃時(shí)，測(cè)定其pH值，測(cè)量的pH值均在4.0～8.5間，符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn).

4) 有效物測(cè)定 根據(jù)參考文獻(xiàn)[11]《中國(guó)輕工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)匯編化妝品卷》中潔面霜理化指標(biāo)中有效物含量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)方法可計(jì)算得：總固體含量為35.1%；無(wú)機(jī)鹽(乙醇不溶物)含量為0.38%；氯化物含量為0.45% .

根據(jù)有效物(%)=總固體(%)-無(wú)機(jī)鹽(%)-氯化物(%)=

35.1%-0.38%-0.45% =34.27%>10%

符合國(guó)家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求.

3.3 魚(yú)腥草潔面霜抗氧化性檢測(cè)

根據(jù)參考文獻(xiàn)[12]通過(guò)測(cè)定吸光度檢測(cè)DPPH對(duì)自由基清除程度來(lái)間接的評(píng)價(jià)潔面霜中活性物質(zhì)抗氧化能力.以抑制率表示，抑制率越高表示抗氧化能力越強(qiáng).具體過(guò)程如下：用無(wú)水乙醇配制成濃度為120 μmol/L的DPPH溶液，避光保存(0～4 ℃).將120 μmol/L的DPPH溶液稀釋十倍并把稀釋好的DPPH溶液于暗處放置30 min備用[13～15].將各個(gè)樣品配制成2.5 g/L的溶液并從中各取10 0mL備用.將紫外分光光度計(jì)波長(zhǎng)調(diào)為517 nm,并開(kāi)始進(jìn)行實(shí)驗(yàn).首先先以乙醇為空白對(duì)照，將樣品溶液與DPPH溶液以4∶1的體積比在10 mL試管中混勻，置于暗處30 min后，反復(fù)測(cè)3次吸光度并求出平均值(A0)；接著依然以乙醇為空白對(duì)照，將樣品溶液與無(wú)水乙醇以4∶1的體積比在10 mL試管中混勻，置于暗處30 min后，仍然反復(fù)測(cè)3次吸光度并求出平均值(Aj)；最后用樣品溶液為空白對(duì)照，將DPPH溶液與樣品溶液以4∶1的體積比在10 mL試管中混勻，置于暗處30 min后，反復(fù)測(cè)3次吸光度并求出平均值(Ai)；并按照下列公式計(jì)算.

其中Ai為樣品溶液與DPPH溶液混合液的吸光度;Aj為樣品溶液與乙醇混合液的吸光度;A0為DPPH溶液與乙醇混合液的吸光度.

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，添加6%的魚(yú)腥草提取物的潔面霜抗氧化性效果最佳,最佳值為25.1%.

3.4 魚(yú)腥草潔面霜抑菌性檢測(cè)

根據(jù)表9原料和用量制成牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基，然后用稀釋平板菌落計(jì)數(shù)法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)及觀察.首先將添加6%的黃酮類化合物的潔面霜用無(wú)菌水稀釋至100、1 000、10 000倍備用.再用1 mL的移液槍吸取試樣的稀釋液均勻涂抹到培養(yǎng)基上，并做好標(biāo)記，蓋上蓋子后靜置20～30 min.最后在恒溫28 ℃的培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)并觀察3 d的時(shí)間,每隔24 h觀察一次并記錄結(jié)果，最后將其取出，然后對(duì)平板上的菌落數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì).

表9 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基

表10 黃酮類化合物潔面霜抑菌實(shí)驗(yàn)

注：“-”表示無(wú)菌生長(zhǎng)，“+”表示有較少細(xì)菌，“++”表示有較多細(xì)菌.

經(jīng)24 h至72 h后對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)基均無(wú)觀察到糞大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌及其他霉菌，48 h后在純培養(yǎng)基上觀察到極少量霉菌，72 h后，在純培養(yǎng)基上觀察到較多霉菌，而100倍、1 000 倍及 10 000 倍則觀察到極少量霉菌，符合國(guó)家化妝品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)[16～19].

4 結(jié)語(yǔ)

通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)得到潔面霜最佳配方，并于最優(yōu)配方中當(dāng)魚(yú)腥草黃酮類化合物添加量為6%時(shí)，綜合泡沫高度、抑菌性以及抗氧化性為宜;通過(guò)冷熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)24 h后觀察試樣，均未出現(xiàn)分層或變色情況.潔面霜泡沫高度為 462 mm；無(wú)細(xì)菌及真菌生長(zhǎng)；且試樣pH為7.67；有效物含量為34.27；各項(xiàng)指標(biāo)均符合國(guó)家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定;魚(yú)腥草黃酮類化合物添加到潔面霜中，有效實(shí)現(xiàn)了良好的抑菌性及抗氧化性效果，適合于在日后的化妝品行業(yè)中作為參考，為魚(yú)腥草黃酮類化合物提升了更大的實(shí)用價(jià)值.