丁亞濤，汪之和,2,3，王林林，施文正,2

(1.上海海洋大學(xué) 食品學(xué)院，上海 201306； 2.國(guó)家淡水水產(chǎn)品加工技術(shù)研發(fā)分中心(上海)，上海 201306； 3.上海水產(chǎn)品加工及貯藏工程技術(shù)研究中心，上海 201306 )

我國(guó)漁業(yè)資源豐富，品種繁多。2016年，我國(guó)水產(chǎn)品總產(chǎn)量為6.90×107t，同比增長(zhǎng)3.01%[1]。由于我國(guó)地域遼闊，水產(chǎn)養(yǎng)殖量大，為滿足廣大消費(fèi)者對(duì)不同地區(qū)鮮活水產(chǎn)品的需求，水產(chǎn)品保活運(yùn)輸顯得十分重要。

中國(guó)消費(fèi)者長(zhǎng)期以來(lái)喜食鮮活水產(chǎn)品，在水產(chǎn)品運(yùn)輸中通常采用有水?；钸\(yùn)輸，但效率較低，成本較高，有必要進(jìn)一步改善加強(qiáng)。水產(chǎn)品?；畹哪康氖窃诮档瓦\(yùn)輸成本的基礎(chǔ)上提高其存活率，通過(guò)物理或化學(xué)措施降低其新陳代謝，創(chuàng)造較適宜的生存環(huán)境，從而延長(zhǎng)其存活時(shí)間，提高水產(chǎn)品價(jià)值。目前魚類運(yùn)輸方式各種各樣，大部分運(yùn)輸主要通過(guò)增加水中溶解氧水平、改變水溫、調(diào)整鹽度和麻醉等方式實(shí)現(xiàn)提高運(yùn)輸量和存活率，延長(zhǎng)魚類?；顣r(shí)間[2-3]。國(guó)內(nèi)外現(xiàn)已開(kāi)發(fā)出的保活方法主要有凈水法?；?、增氧保活、低溫保活、麻醉?；?、冰溫?zé)o水?；畹龋煌；罘椒ǖ牟僮髟怼⑻攸c(diǎn)和適用對(duì)象不同[4-5]。其中麻醉保活運(yùn)輸就是通過(guò)抑制神經(jīng)系統(tǒng)的敏感性，降低水產(chǎn)動(dòng)物對(duì)外界環(huán)境的刺激反應(yīng)，使其處于休眠的麻醉狀態(tài)，新陳代謝速率和呼吸強(qiáng)度均有所降低，從而提高運(yùn)輸存活率[6]。應(yīng)用于水產(chǎn)品?；钸\(yùn)輸?shù)幕瘜W(xué)麻醉劑就有30多種，最常用的麻醉劑有MS-222(間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽)、丁香酚和二氧化碳等。MS-222具有易溶于水、見(jiàn)效快、復(fù)蘇時(shí)間短，且對(duì)處理過(guò)的水產(chǎn)品及人體接觸均無(wú)毒害作用等優(yōu)點(diǎn)，是目前唯一被美國(guó)食品藥物管理局批準(zhǔn)能用于食用魚的麻醉劑。缺點(diǎn)是MS-222溶液具有酸性，在麻醉?；顣r(shí)會(huì)對(duì)魚體產(chǎn)生影響[7-9]。丁香酚是一種經(jīng)常使用的植物提取物類麻醉劑，具有較強(qiáng)麻醉效果、廉價(jià)易得、溶解性好及對(duì)環(huán)境無(wú)危害等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于活魚運(yùn)輸[5]，缺點(diǎn)是復(fù)蘇時(shí)間較長(zhǎng)，具有揮發(fā)性，麻醉過(guò)程中藥效會(huì)逐漸下降。一定含量的CO2對(duì)魚類及其他水產(chǎn)動(dòng)物具有麻醉效果，利用CO2作為麻醉劑，不僅可以提高活魚運(yùn)輸效果，還能降低運(yùn)輸成本，與其他麻醉劑相比，優(yōu)點(diǎn)在于不需要休藥期，經(jīng)CO2處理過(guò)的魚可以直接銷往市場(chǎng)[4]，缺點(diǎn)是麻醉時(shí)間和復(fù)蘇時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)，麻醉水溶液的CO2含量范圍很窄，最終的麻醉劑量很難控制，且只對(duì)部分魚有麻醉作用[10]。

鳊魚(Parabramispekinensis)是我國(guó)養(yǎng)殖量比較大的品種之一，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高，含有豐富的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)、不飽和脂肪酸、維生素D等物質(zhì)，此外，還含有大量的磷和煙酸[11]。筆者采用MS-222對(duì)鳊魚進(jìn)行麻醉，研究鳊魚在不同質(zhì)量濃度MS-222麻醉液中的麻醉效果，包括進(jìn)入不同麻醉過(guò)程和蘇醒過(guò)程的行為變化的時(shí)間和呼吸頻率的變化，并研究麻醉后鳊魚在不同水溫及魚水比中的存活率和保活過(guò)程中水質(zhì)指標(biāo)及魚體指標(biāo)的變化，以期為鳊魚的保活運(yùn)輸提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)鳊魚購(gòu)于上海市古棕路農(nóng)工商，體長(zhǎng)30～35 cm，體質(zhì)量500～600 g。

1.2 試驗(yàn)儀器與試劑

5B-3N便攜式氨氮測(cè)定儀(上海連華科技有限公司)、ZC-10智能型超級(jí)恒溫水槽(寧波天恒儀器廠)、UV-1800PC紫外可見(jiàn)分管光度計(jì)(上海美譜達(dá)儀器有限公司)、Siemens KK26E12TI冰箱(青島海爾特種電器有限公司)、JPB-607型便攜式溶解氧測(cè)定儀(上海精密科學(xué)儀器有限公司)、FE20實(shí)驗(yàn)室pH計(jì)[梅特勒—托利儀器(上海)有限公司]、車載速凍冰箱A50(佛山艾凱電器有限公司)；MS-222(上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司)。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 不同質(zhì)量濃度MS-222對(duì)鳊魚麻醉效果的影響

根據(jù)預(yù)試驗(yàn)確定的6個(gè)質(zhì)量濃度梯度，分別為20、40、60、80、100、120 mg/L，將暫養(yǎng)1 d的鳊魚放入盛有以上不同質(zhì)量濃度的麻醉液中，觀察鳊魚的行為特征并記錄鳊魚進(jìn)入不同麻醉階段的時(shí)間、蘇醒時(shí)間和復(fù)蘇率。

在MS-222的作用下，鳊魚在麻醉和復(fù)蘇階段表現(xiàn)出一系列不同的行為變化，本試驗(yàn)參考文獻(xiàn)[12-13]中的分期標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合鳊魚的實(shí)際情況，將鳊魚的麻醉過(guò)程分為6個(gè)時(shí)期(表1)，復(fù)蘇過(guò)程分為3個(gè)時(shí)期(表2)。

復(fù)蘇率/%=n2/n1×100%

式中，n1為試驗(yàn)魚尾數(shù)，n2為試驗(yàn)后處于活體狀態(tài)的魚尾數(shù)。

1.3.2 不同質(zhì)量濃度MS-222對(duì)鳊魚呼吸頻率影響

將MS-222配制成0、20、40、60、80、100和120 mg/L 7個(gè)質(zhì)量濃度梯度，將鳊魚放入溶液開(kāi)始計(jì)時(shí)，分別記錄鳊魚在60、120、180、240、300、360、420 s時(shí)間段內(nèi)的呼吸次數(shù)。呼吸頻率以1 min內(nèi)鳊魚鰓蓋張合次數(shù)來(lái)表達(dá)。

1.3.3 鳊魚臨界溫度的測(cè)定

采用梯度降溫的方式，當(dāng)水溫為10～20 ℃，降溫速率為3 ℃/h；水溫5～10 ℃，降溫速度2 ℃/h；水溫低于5 ℃，降溫速度1 ℃/h；觀察并記錄魚體呼吸規(guī)律，將魚體出現(xiàn)咧鰓現(xiàn)象(未死亡狀態(tài))的水溫作為其臨界溫度[14]。

表1 麻醉程度分期及魚類行為特征

表2 魚體復(fù)蘇過(guò)程分期及行為特征

1.3.4 不同質(zhì)量濃度MS-222對(duì)鳊魚保活存活率的影響

選擇呼吸頻率一致的鳊魚作為試驗(yàn)對(duì)象，在40、60、80、100 mg/L這4個(gè)質(zhì)量濃度梯度進(jìn)行試驗(yàn)，記錄鳊魚的存活率。

1.3.5 不同水溫對(duì)鳊魚?；畲婊盥实挠绊?/p>

選擇呼吸頻率一致的鳊魚作為試驗(yàn)對(duì)象，在2、7、15、20 ℃這4個(gè)溫度梯度進(jìn)行試驗(yàn)，記錄鳊魚的存活率。

1.3.6 不同魚水比對(duì)鳊魚?；顣r(shí)間的影響

在7 ℃和MS-222質(zhì)量濃度60 mg/L條件下，對(duì)照組和麻醉組分別選擇不同魚水比(2∶1、1∶1、1∶3、1∶5)進(jìn)行試驗(yàn)，記錄鳊魚保活時(shí)間。

1.3.7 鳊魚?；钸^(guò)程中水體指標(biāo)的測(cè)定

在保活過(guò)程中的不同時(shí)間段，用離心管分別從?；钕渲腥?5 mL水，用PB-607A便攜式溶解氧測(cè)定儀測(cè)定氧含量；用5B-3N便攜式氨氮測(cè)定儀測(cè)定氨氮含量；用FE20實(shí)驗(yàn)室pH計(jì)測(cè)定pH。

菌落總數(shù)的測(cè)定：在?；钸^(guò)程中的不同時(shí)間段，用離心管從保活箱中取5 mL水，使用國(guó)標(biāo)GB 4789.2—2016方法進(jìn)行測(cè)定。

1.3.8 鳊魚?；钸^(guò)程中魚體指標(biāo)的測(cè)定

麻醉組和對(duì)照組在?；钸^(guò)程中的不同時(shí)間段隨機(jī)采樣，進(jìn)行指標(biāo)測(cè)定。

肌肉中乳酸和糖原的測(cè)定：采用測(cè)試盒(南京建成生物工程研究所)測(cè)定。

肌肉pH測(cè)定方法：準(zhǔn)確稱量2 g魚肉于燒杯中，加0.85%生理鹽水18 mL，均質(zhì)后靜置0.5 h，使用pH計(jì)測(cè)定。

血清生化指標(biāo)的測(cè)定：自魚尾靜脈采血，血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶、葡萄糖、尿素、乳酸脫氫酶和肌酐采用試劑盒(南京建成生物工程研究所)測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)處理

使用Microsoft Excel 2007和SPSS 19.0軟件進(jìn)行分析，在單因素方差分析的基礎(chǔ)上采用Duncan多重比較，統(tǒng)計(jì)值為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，P<0.05表示數(shù)據(jù)之間差異顯著；利用Origin 8.0軟件繪制相關(guān)圖表。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同MS-222質(zhì)量濃度下鳊魚的行為特征及復(fù)蘇率

鳊魚在不同質(zhì)量濃度MS-222下進(jìn)入不同麻醉程度的時(shí)間和復(fù)蘇時(shí)間及復(fù)蘇率見(jiàn)表3、表4。參考文獻(xiàn)[12]對(duì)有效質(zhì)量濃度標(biāo)準(zhǔn)的劃定，本試驗(yàn)將有效質(zhì)量濃度定義為：3 min之內(nèi)鳊魚的麻醉程度達(dá)到Ⅳ期，在清水中5 min內(nèi)達(dá)到蘇醒程度Ⅲ期的質(zhì)量濃度。

表3 鳊魚在不同質(zhì)量濃度MS-222麻醉液中進(jìn)入不同麻醉程度的時(shí)間 s

注：“—”表示試驗(yàn)過(guò)程中沒(méi)有出現(xiàn)該列中所表示的麻醉狀態(tài)；同列平均值間上標(biāo)字母不同者差異顯著(P<0.05).下同.

表4 鳊魚在不同質(zhì)量濃度MS-222麻醉液麻醉后的復(fù)蘇情況

由表3、表4可知，隨著MS-222質(zhì)量濃度的增大，鳊魚進(jìn)入相同麻醉時(shí)期的時(shí)間縮短，而完全復(fù)蘇的時(shí)間延長(zhǎng)。在不同質(zhì)量濃度麻醉下，鳊魚進(jìn)入麻醉和復(fù)蘇的各個(gè)階段差異顯著。在較低的質(zhì)量濃度下(低于20 mg/L)魚體最終會(huì)維持在輕度麻醉期。質(zhì)量濃度為40 mg/L時(shí)，鳊魚達(dá)到麻醉第Ⅳ期時(shí)間約218 s，不能進(jìn)入第Ⅵ期；在質(zhì)量濃度為100 mg/L和120 mg/L時(shí)，魚體復(fù)蘇時(shí)間長(zhǎng)，復(fù)蘇后活力差，復(fù)蘇率分別為75%和50%，且在進(jìn)入麻醉和復(fù)蘇各個(gè)階段的時(shí)間差異顯著。而當(dāng)MS-222質(zhì)量濃度為60 mg/L和80 mg/L時(shí)，魚體達(dá)到麻醉第Ⅳ期的時(shí)間小于180 s，復(fù)蘇率為100%，至復(fù)蘇第Ⅲ期的時(shí)間較長(zhǎng)，可能由于達(dá)到深度麻醉和休克期，需要較長(zhǎng)時(shí)間復(fù)蘇。

2.2 不同質(zhì)量濃度MS-222中鳊魚呼吸頻率的變化

呼吸頻率是反映鳊魚麻醉程度的重要指標(biāo)之一，鳊魚在不同質(zhì)量濃度的MS-222中呼吸頻率的變化見(jiàn)圖1。除在前60 s呼吸頻率略微先上升外，在整個(gè)麻醉過(guò)程中，呼吸頻率呈下降趨勢(shì)，且相同時(shí)間內(nèi)，隨著MS-222質(zhì)量濃度的增加，呼吸頻率逐漸下降，與郭豐紅等[13]的研究結(jié)果相符。對(duì)照組呼吸頻率幾乎不變化，在低質(zhì)量濃度(20～40 mg/L)的MS-222中，鳊魚未出現(xiàn)咧鰓現(xiàn)象，在水中能游動(dòng)，且隨著時(shí)間的延長(zhǎng)其呼吸頻率不斷下降，直至慢慢靜止在水中；在MS-222質(zhì)量濃度60～80 mg/L時(shí)，隨著MS-222質(zhì)量濃度的升高，呼吸頻率下降速率逐漸加快，可見(jiàn)在此質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng)較?。欢贛S-222質(zhì)量濃度100～120 mg/L時(shí)，呼吸頻率在短時(shí)間內(nèi)直線下降，出現(xiàn)咧鰓現(xiàn)象，說(shuō)明魚體在短時(shí)間產(chǎn)生了較大的應(yīng)激反應(yīng)。

圖1 鳊魚在不同質(zhì)量濃度中各個(gè)時(shí)間段呼吸頻率的變化

2.3 鳊魚低溫?；畹呐R界溫度

隨著水溫的降低，鳊魚的呼吸頻率不斷下降，當(dāng)溫度降至10 ℃時(shí)，鳊魚基本上不活動(dòng)，靜止在水中，溫度降至約5 ℃時(shí)，鳊魚逐漸平躺在水中，呼吸次數(shù)減緩，當(dāng)溫度降至2 ℃，鳊魚的呼吸極不規(guī)律，偶爾咧鰓，接近死亡，因此2 ℃可以被認(rèn)為是鳊魚低溫?；畹呐R界溫度。

2.4 不同質(zhì)量濃度MS-222對(duì)鳊魚?；畲婊盥实挠绊?/h3>

不同麻醉劑質(zhì)量濃度對(duì)鳊魚?；畹拇婊盥视绊懸?jiàn)圖2。隨著?；顣r(shí)間的延長(zhǎng)，鳊魚的存活率下降，40 mg/L質(zhì)量濃度下鳊魚存活率16 h前無(wú)變化，16～24 h降低，?；?4 h后鳊魚存活率降至50%，60 mg/L質(zhì)量濃度下鳊魚存活率24 h內(nèi)無(wú)變化，?；?4 h后存活率仍為90%，80 mg/L質(zhì)量濃度下鳊魚存活率12 h后下降，24 h后存活率降至10%，100 mg/L鳊魚存活率12 h全部死亡。

2.5 不同溫度對(duì)鳊魚?；畹拇婊盥视绊?/h3>

溫度對(duì)鳊魚?；盥实挠绊懸?jiàn)圖3、圖4。20 ℃麻醉組和對(duì)照組?；?2 h存活率分別為60%和40%，24 h后均全部死亡；15 ℃麻醉組和對(duì)照組?；?2 h存活率分別為80%和60%，24 h存活率分別降至60%和20%，在7 ℃時(shí)麻醉組和對(duì)照組保活12 h存活率為100%，24 h麻醉組和對(duì)照組存活率分別降至80%和60%，2 ℃麻醉組和對(duì)照組?；? h鳊魚出現(xiàn)死亡，24 h均全部死亡。

圖2 不同質(zhì)量濃度MS-222對(duì)鳊魚保活的存活率影響

圖3 不同溫度對(duì)對(duì)照組鳊魚存活率的影響

圖4 不同溫度對(duì)麻醉組鳊魚存活率的影響

2.6 不同魚水比對(duì)鳊魚?；顣r(shí)間的影響

鳊魚?；钸\(yùn)輸中魚水比與存活時(shí)間的關(guān)系見(jiàn)圖5。鳊魚保活時(shí)間隨著魚水比的增加而延長(zhǎng)，麻醉組在魚水比自2∶1降至1∶1時(shí)，保活時(shí)間延長(zhǎng)9 h，比對(duì)照組延長(zhǎng)2 h，自1∶3降至1∶5的?；顣r(shí)間延長(zhǎng)5 h，比對(duì)照組延長(zhǎng)1 h。在魚水比1∶5時(shí)，麻醉組?；顣r(shí)間比對(duì)照組延長(zhǎng)7 h。

圖5 麻醉組和對(duì)照組魚水比對(duì)鳊魚?；顣r(shí)間的影響

2.7 鳊魚?；钸^(guò)程中水體指標(biāo)的變化

2.7.1 氨氮的變化

?；铋_(kāi)始前，?；钕鋬?nèi)水為經(jīng)過(guò)充分曝氣2 d的自來(lái)水，氨氮含量幾乎為0，隨著保活時(shí)間的延長(zhǎng)，水中氨氮的含量先是快速上升，而后升速減緩，其中對(duì)照組?；?4 h氨氮質(zhì)量濃度升至4.3 mg/L，麻醉組?；?4 h氨氮質(zhì)量濃度升至3.05 mg/L(圖6)。

圖6 鳊魚?；钸^(guò)程水質(zhì)氨氮濃度的變化

2.7.2 溶解氧水平的變化

溶解氧水平在保活中呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)，對(duì)照組和麻醉組開(kāi)始保活時(shí)的溶解氧水平均為6.8 mg/L，12 h后麻醉組和對(duì)照組溶解氧水平分別降至3.5 mg/L和1.8 mg/L，24 h后麻醉組和對(duì)照組溶解氧水平分別降至2.1 mg/L和0.9 mg/L(圖7)。

2.7.3 pH和微生物的變化

在?；钸^(guò)程中pH為6.9～7.8，略有上升(圖8)；在?；钸^(guò)程中對(duì)照組和麻醉組水體中菌落總數(shù)上升速率均呈現(xiàn)先慢后快的現(xiàn)象，麻醉組略低于對(duì)照組；麻醉組和對(duì)照組保活24 h，菌落數(shù)量分別升至2.61 log(cfu/mL)和2.75 log(cfu/mL)(圖9)。

圖7 鳊魚?；钸^(guò)程水質(zhì)溶氧量的變化

圖8 鳊魚?；钸^(guò)程水質(zhì)pH的變化

圖9 鳊魚?；钸^(guò)程水質(zhì)菌落總數(shù)的變化

2.8 鳊魚?；钸^(guò)程中肌肉相關(guān)成分的變化

糖原和乳酸兩者的趨勢(shì)呈負(fù)相關(guān)。糖原含量隨保活時(shí)間延長(zhǎng)而下降，保活24 h后麻醉組糖原含量降低了19.1%；乳酸含量隨?；顣r(shí)間延長(zhǎng)而上升，麻醉組保活24 h后乳酸含量上升了78.1%(圖10)。?；钸^(guò)程中麻醉組和對(duì)照組隨?；顣r(shí)間的延長(zhǎng)魚體肌肉pH呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，麻醉組?；?4 h，pH下降了0.21，下降趨勢(shì)低于對(duì)照組。

圖10 ?；钸^(guò)程肌肉中乳酸、糖原、pH的變化

2.9 鳊魚?；钸^(guò)程中血清生化指標(biāo)的變化

魚體在保活過(guò)程血清生化指標(biāo)的變化見(jiàn)表5。麻醉組鳊魚保活12 h和24 h之后， 乳酸脫氫酶活性分別上升了23.8%和102.2%，麻醉前后變化不顯著，?；?2 h和24 h之后均顯著變化。在麻醉保活中，12 h內(nèi)血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性變化不顯著，24 h時(shí)則增長(zhǎng)了4.4倍，但明顯低于對(duì)照組。麻醉初期血糖變化不明顯，保活24 h后升至3.83 mmol/L，增幅達(dá)67.2%，但仍大大低于對(duì)照組(239%)的增幅。?；钸^(guò)程中尿素、肌酐都隨?；顣r(shí)間的增加而上升，麻醉24 h后，尿素增加了32.2%，肌酐上升了177.4%，但二者的增幅均低于對(duì)照組的增幅。

表5 鳊魚麻醉運(yùn)輸后血清生化指標(biāo)的變化

注：同行平均值間上標(biāo)字母不同者差異顯著(P<0.05).

3 討 論

3.1 不同質(zhì)量濃度MS-222對(duì)鳊魚麻醉、復(fù)蘇過(guò)程的行為特征及呼吸頻率的影響

MS-222質(zhì)量濃度低于20 mg/L時(shí)，鳊魚不能進(jìn)入麻醉期；MS-222質(zhì)量濃度大于100 mg/L時(shí)，魚體麻醉后復(fù)蘇率降低。主要原因可能是MS-222進(jìn)入魚體后主要聚集在其脾臟、肝臟中，質(zhì)量濃度過(guò)高，大劑量的麻醉劑會(huì)麻痹呼吸和舒縮中樞，導(dǎo)致魚體死亡[15]。隨著MS-222質(zhì)量濃度的升高，呼吸頻率下降速率逐漸加快，這一研究與MS-222麻醉鱖魚(Sinipercachuatsi)[15]、金魚(Carassiusauratus)[16]的結(jié)果一致。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在MS-222質(zhì)量濃度60～80 mg/L時(shí)，魚體產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng)較??；而在MS-222質(zhì)量濃度為100～120 mg/L時(shí)，魚體在短時(shí)間產(chǎn)生了較大的應(yīng)激反應(yīng)。綜合考慮，MS-222麻醉鳊魚的有效質(zhì)量濃度應(yīng)選擇60～80 mg/L，這與MS-222麻醉褐牙鲆(Paralichthysolivaceus)[17](有效麻醉質(zhì)量濃度60 mg/L)的結(jié)果相似，與麻醉鱖魚[15](有效麻醉質(zhì)量濃度200～220 mg/L)和加州鱸魚(Micropterussalmoides)[18](有效麻醉質(zhì)量濃度10～20 mg/L)的結(jié)果相差較大。表明不同魚種之間MS-222麻醉效果存在一定差異。

3.2 MS-222質(zhì)量濃度、水溫和魚水比對(duì)鳊魚存活率的影響

試驗(yàn)?；?4 h后，MS-222質(zhì)量濃度為60 mg/L時(shí)鳊魚的存活率高于其他質(zhì)量濃度。這可能由于低質(zhì)量濃度的MS-222對(duì)鳊魚的麻醉較淺，達(dá)不到深度麻醉；在高質(zhì)量濃度下，鳊魚進(jìn)入深度麻醉時(shí)間過(guò)快，超過(guò)魚體的耐受值，對(duì)魚體產(chǎn)生一定毒害作用，導(dǎo)致魚體死亡[16]。

溫度是影響魚類生理狀況的重要因素之一，魚類為變溫動(dòng)物，其生理狀況受環(huán)境溫度的影響較大，有相應(yīng)的生存溫度帶和最佳生存溫度，當(dāng)超出生存溫度范圍時(shí)，機(jī)體會(huì)出現(xiàn)一系列的不良反應(yīng)，導(dǎo)致機(jī)體免疫力低下甚至死亡[19]。20 ℃時(shí)麻醉組和對(duì)照組鳊魚?；?4 h后均全部死亡，這由于溫度過(guò)高魚體的新陳代謝速率較高，氧氣消耗量大[20]，致使水中溶解氧水平過(guò)低，魚體缺氧而死亡；15 ℃麻醉組和對(duì)照組鳊魚?；?4 h存活率較低，這可能由于麻醉?xiàng)l件下能降低魚體新陳代謝，減少了氧氣消耗，減緩魚體死亡；7 ℃時(shí)?；?4 h麻醉組和對(duì)照組存活率較好，可能由于在較低溫度下，魚體新陳代謝較低，同時(shí)能夠滿足魚體氧氣的消耗，說(shuō)明該溫度下鳊魚皮膚呼吸和鰓呼吸結(jié)合效率最好；2 ℃麻醉組和對(duì)照組?；? h鳊魚出現(xiàn)死亡，24 h均全部死亡，這可能由于在該臨界溫度下，魚體本身需要提供能量來(lái)應(yīng)對(duì)外界低溫，呼吸頻率下降，無(wú)法滿足魚體用氧而致其死亡，說(shuō)明鳊魚不適合臨界溫度?；睢母鳒囟榷慰疾?，在7 ℃條件下麻醉鳊魚的保活時(shí)間較長(zhǎng)、存活率較高。

在水產(chǎn)品保活運(yùn)輸中，降低魚水比是保活運(yùn)輸需要考慮的重點(diǎn)之一[21]，由試驗(yàn)結(jié)果可知，麻醉組對(duì)鳊魚?；钣兄e極影響，在各個(gè)時(shí)間階段的保活時(shí)間均高于對(duì)照組，所以綜合考慮選擇魚水比1∶3麻醉?xiàng)l件進(jìn)行?；钸\(yùn)輸，符合保活運(yùn)輸經(jīng)濟(jì)利益最大化。

3.3 保活過(guò)程中水體指標(biāo)的變化對(duì)鳊魚存活率的影響

氨氮是一種神經(jīng)毒性物質(zhì)，如果在水中的含量過(guò)高，魚體血漿中的氨排出量就會(huì)相應(yīng)減少，從而導(dǎo)致血漿中氨含量升高，引起毒性反應(yīng)[22]。高含量的氨氮會(huì)對(duì)魚體造成傷害，多數(shù)魚類的養(yǎng)殖氨氮水平應(yīng)低于2.79 mg/L[23]，其中對(duì)照組和麻醉組保活24 h分別比標(biāo)準(zhǔn)高出54.1%和9.3%。由此可知，氨氮含量的升高會(huì)影響鳊魚保活時(shí)間的延長(zhǎng)。另一方面，麻醉能降低魚體代謝產(chǎn)生氨氮，減緩水質(zhì)惡化，更利于鳊魚的存活。在試驗(yàn)過(guò)程中觀察到，?；铋_(kāi)始前，水清澈無(wú)味，而保活24 h后水微發(fā)黃，變得渾濁。

溶解氧對(duì)于魚類等水生生物的生存至關(guān)重要，多數(shù)魚類在溶解氧水平低于3～4 mg/L時(shí)就難于生存[24]，由試驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)，?；?2 h后麻醉組溶解氧水平是同一時(shí)間對(duì)照組溶解氧水平的1.9倍，在這一時(shí)間之后對(duì)照組鳊魚出現(xiàn)死亡，麻醉組鳊魚存活率為100%，這可能由于麻醉減少了鳊魚對(duì)溶解氧的消耗，延長(zhǎng)了保活時(shí)間。

綜上可知，氨氮含量的上升和溶解氧水平的下降是導(dǎo)致鳊魚死亡的重要原因。

在?；钸^(guò)程中pH變化為6.9～7.8，略有上升，與淡水魚水體pH 6.6～8.5基本一致[25]，所以水質(zhì)pH的變化對(duì)鳊魚影響不大。菌落總數(shù)是評(píng)價(jià)水質(zhì)污染程度的重要指標(biāo)[26]，在漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)中要求大腸桿菌(Escherichiacoli)密度低于5個(gè)/mL[25]。在?；钸^(guò)程中對(duì)照組和麻醉組?；?4 h菌落數(shù)量麻醉組略低，水質(zhì)中細(xì)菌總數(shù)增加，會(huì)引起耗氧量增加，也會(huì)導(dǎo)致水質(zhì)渾濁度增加，從而影響魚體?；顣r(shí)間。

3.4 麻醉?；顚?duì)鳊魚肌肉相關(guān)成分和血清生化指標(biāo)的影響

當(dāng)魚體處于饑餓狀態(tài)，血液中的葡萄糖不能滿足魚體的消耗，魚類利用肝糖原的能力差，主要分解肌糖原；乳酸與糖原兩者之間的變化存在密不可分的關(guān)系，在肌肉、血液和肝臟3種組織中乳酸、糖原和葡萄糖的含量水平有著相應(yīng)的關(guān)系[27]。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，麻醉組糖原下降速率和乳酸上升速率均小于對(duì)照組，原因可能是由于麻醉組鳊魚新陳代謝低于對(duì)照組，當(dāng)魚體處于饑餓狀態(tài)，血液中的葡萄糖不能滿足魚體的消耗，魚類會(huì)分解肌糖原，在缺氧條件下進(jìn)行無(wú)氧代謝，糖原分解產(chǎn)生大量乳酸[27]。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，?；?4 h，麻醉組魚體肌肉pH呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，低于對(duì)照組。這可能是由于鳊魚肌肉中糖原在無(wú)氧呼吸產(chǎn)生能量的同時(shí)生成了乳酸，乳酸在肌肉中不斷積累，引起肌肉pH的變化；麻醉組代謝較低，乳酸積累少，故pH降幅低于對(duì)照組的降幅[28]。

麻醉能夠緩解魚體在?；钸^(guò)程中的應(yīng)激反應(yīng)。其中，乳酸脫氫酶是糖代謝中催化丙酮酸轉(zhuǎn)化成乳酸的酶，無(wú)氧酵解、心肌梗死、肝臟疾病、肌肉損傷等均會(huì)導(dǎo)致乳酸脫氫酶的升高[29]，麻醉組鳊魚保活12 h和24 h之后，乳酸脫氫酶活性均顯著變化，可能是魚體無(wú)氧呼吸導(dǎo)致肝臟、心肌受損，乳酸脫氫酶活性上升，這也是魚體在保活過(guò)程中死亡的原因之一。此外，麻醉組乳酸脫氫酶的活性均低于對(duì)照組，說(shuō)明麻醉可以減少魚體肝臟和心肌的受損。谷草轉(zhuǎn)氨酶是肝臟中連接糖、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)代謝的重要酶，正常情況下血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性很低而且相對(duì)穩(wěn)定，當(dāng)肝臟、心肌受到損傷時(shí)血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性會(huì)升高[30-31]，在麻醉保活中，麻醉前后和保活12 h內(nèi)谷草轉(zhuǎn)氨酶活性變化不顯著，24 h時(shí)顯著變化，但變化趨勢(shì)明顯低于對(duì)照組，說(shuō)明保活過(guò)程中，魚體心肌、肝臟受到一定程度的影響，但麻醉能在一定程度上減少鳊魚心肌、肝臟受到的損傷。

血糖除受胰島素和腎上腺素的控制外，還受機(jī)體的各種因素調(diào)節(jié)。因此，機(jī)體血糖含量處于一種動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，很容易發(fā)生變化[32]。麻醉初期血糖變化不明顯，?；?4 h顯著變化，但變化趨勢(shì)均低于對(duì)照組。這與麻醉?xiàng)l件下減緩了糖原的分解有關(guān)。另外，在無(wú)氧條件下發(fā)生酵解產(chǎn)生乳酸，乳酸大部分會(huì)進(jìn)入血液，血液中乳酸量增加會(huì)對(duì)血紅蛋白運(yùn)輸氧的能力產(chǎn)生影響，造成血液氧結(jié)合量減少[33]，從而導(dǎo)致魚體供氧量減少，這可能是影響魚體存活的重要因素之一。

尿素、肌酐含量的變化能夠反映腎功能的代謝情況，尿素也是維持血液滲透壓的主要成分[34]，腎臟機(jī)能發(fā)生障礙，血尿素和肌酐的含量會(huì)升高[32]，保活過(guò)程中尿素、肌酐均隨保活時(shí)間的增加而上升，麻醉24 h后，尿素和肌酐顯著變化，但二者的增幅均低于對(duì)照組，說(shuō)明在整個(gè)?；钸^(guò)程中腎功能受到一定程度的損傷，這也是造成魚體出現(xiàn)死亡的原因之一。綜合以上指標(biāo)可見(jiàn)，麻醉組保活效果好于對(duì)照組，這與麻醉?；畹拇婊盥瘦^高是一致的。

4 結(jié) 論

試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，麻醉液質(zhì)量濃度為60～80 mg/L時(shí)，魚體達(dá)到麻醉第Ⅳ期時(shí)間均小于200 s，復(fù)蘇時(shí)間相對(duì)較短，復(fù)蘇率為100%。此時(shí)應(yīng)激反應(yīng)相對(duì)較小，為鳊魚保活有效麻醉質(zhì)量濃度。7 ℃水溫、魚水比1∶3時(shí)保活時(shí)間最長(zhǎng)，魚體存活率最高，水質(zhì)指標(biāo)結(jié)果表明，隨著?；顣r(shí)間的延長(zhǎng)，氨氮含量、微生物總量、pH均呈上升趨勢(shì)，而溶解氧水平則下降，這是導(dǎo)致鳊魚?；顣r(shí)間縮短和存活率下降的外部原因，麻醉組?；钚Ч黠@好于對(duì)照組，說(shuō)明麻醉能夠減緩鳊魚氨氮的代謝、減緩水質(zhì)的惡化、延長(zhǎng)鳊魚的?；睢ｔ~體指標(biāo)結(jié)果表明，隨著?；顣r(shí)間的增加，麻醉?；罱M肌肉中糖原、pH下降，乳酸含量上升。血清指標(biāo)中乳酸脫氫酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、血糖、尿素、肌酐均有顯著增加，從而影響到鳊魚的生理機(jī)能，但其變化幅度均小于對(duì)照組。由此可見(jiàn)，使用MS-222對(duì)鳊魚進(jìn)行麻醉保活能夠減緩鳊魚的應(yīng)激反應(yīng)，降低在保活過(guò)程中魚體受到的損傷，延長(zhǎng)?；顣r(shí)間，提高存活率。