曹越　曾烈華

【摘要】 目的：比較M5a和M5b患者實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果異同，對M5患者實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果進(jìn)行歸納總結(jié)，為該病的臨床診斷及分型提供依據(jù)。

方法：收集2015年2月-2017年8月韶關(guān)市第一人民醫(yī)院及粵北人民醫(yī)院初診M5患者68例，其中M5a 20例，M5b 48例，對以上患者進(jìn)行血常規(guī)檢測、免疫表型檢測及染色體核型分析。結(jié)果：M5a患者白細(xì)胞總數(shù)及單核細(xì)胞所占比例均明顯高于M5b患者（P<0.05），M5a和M5b患者RBC、HGB、HCT均有不同程度降低，但兩組患者之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;CD3、CD10、CD20、和CD41a在M5a患者和M5b患者中陽性率均較低，且兩組患者之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;M5b患者CD7、CD14、CD19、GlyA、CD15、CD13、CD34、HLA-DR陽性率均高于M5a患者，CD19、GlyA和CD13兩者間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），CD7、CD14、CD15、CD34和HLA-DR兩者間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;M5a患者CD33和CD117陽性率高于M5b患者（P<0.05）;M5a患者骨髓細(xì)胞染色體核型異常者所占比例明顯高于M5b患者（P<0.05），以非平衡核型異常最為明顯（P<0.01）。結(jié)論：M5a和M5b患者實(shí)驗(yàn)室檢查各具特征，對M5a和M5b患者實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果進(jìn)行歸納有助于M5的診斷及分型。

【關(guān)鍵詞】 M5a; M5b; 血常規(guī); 骨髓象; 免疫表型; 染色體核型

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.08.007 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1674-6805（2019）08-00-03

Comparative Analysis of Laboratory Results of M5a and M5b Patients/CAO Yue，ZENG Liehua.//Chinese and Foreign Medical Research，2019，17（8）：-18

【Abstract】 Objective：To compare the results of laboratory tests of M5a and M5b，to summarize the results of laboratory examination of M5 patients and provide basis for clinical diagnosis and classification of the disease.Method：A total of 68 first visit cases of M5 patients were collected，including 20 cases of M5a，48 cases of M5b，in First People's Hospital of Shaoguan from February 2015 to August 2017.Routine blood tests，bone marrow observation，immune phenotypic detection and chromosome karyotype analysis were all analysed for above patients.Result：The morphological features of M5a and M5b were not significant.Total number of white blood cells and mononuclear cells in M5a patients were significantly higher than M5b patients（P<0.05）.RBC，HGB，HCT were reduced to some extent in all patients with M5a and M5b，but there were no statistically significant difference between two groups of patients（P>0.05）.The positive rate of CD3，CD10，CD20，and CD41a in M5a patients and M5b patients were both low，and there were no statistically significant difference between the two groups（P>0.05）.The positive rate of CD7，CD14，CD19，GlyA，CD15，CD13，CD34，HLA-DR in M5b patients were higher than that in patients with M5a.CD19，GlyA and CD13 between M5a and M5b were no statistically significant difference（P>0.05）.CD7，CD14，CD15，CD34 and HLA-DR between M5a and M5b were statistically significant difference（P<0.05）.The positive rate of CD33 and CD117 in M5a patients was higher than that of M5b patients（P<0.05）.The proportion of abnormal chromosomal karyotypes in M5a patients was significantly higher than that of M5b patients（P<0.05），and the non-equilibrium karyotype abnormality was most obvious（P<0.01）.Conclusion：M5a and M5b patients have the characteristics of laboratory examination，and the results of laboratory examination of M5a and M5b patients can be summarized to help the diagnosis and classification of M5.

【Key words】 M5a; M5b; Routine blood test; Myelogram; Immune phenotype; Karyotype

First-authors address：Medical College of Shaoguan University，Shaoguan 512026，China

白血病是一類造血干細(xì)胞惡性克隆性疾病，按白血病細(xì)胞分化阻滯階段可分為急性白血病和慢性白血病，其中急性白血病按病變細(xì)胞系列分類可分為急性髓細(xì)胞白血病和急性淋巴細(xì)胞白血病，急性髓細(xì)胞白血病又可依據(jù)FAB分型標(biāo)準(zhǔn)將其分為M0～M7八個亞型，其中M5即為急性單核細(xì)胞白血病。據(jù)統(tǒng)計，在我國M5占急性髓細(xì)胞白血病的20%～30%，僅次于M2，位居第二位，并且該病易伴有明顯的髓外浸潤、高白血癥等，是一種預(yù)后較差的白血病。M5的實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目有很多，除血常規(guī)、骨髓象、細(xì)胞化學(xué)染色以外，還有免疫表型及細(xì)胞遺傳學(xué)等多項(xiàng)指標(biāo)。到目前為止，已經(jīng)有較多關(guān)于M5實(shí)驗(yàn)室檢查的相關(guān)報道，但是不夠全面，本研究通過對M5a和M5b患者實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果對比分析，以期讓臨床能夠更加全面的了解M5實(shí)驗(yàn)室檢查特征，為臨床M5的診斷及分型提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2015年2月-2017年8月韶關(guān)市第一人民醫(yī)院初診M5患者68例，其中M5a 20例，M5b 48例。M5a患者中，男11例，女9例，男∶女=1.2∶1;年齡30～69歲;M5b患者中，男26例，女22例，男∶女=1.2∶1，年齡7～69。診斷及分型依據(jù)：患者均進(jìn)行了骨髓象、血常規(guī)中及細(xì)胞化學(xué)染色檢查，并依據(jù)《血液病診斷及治療標(biāo)準(zhǔn)》進(jìn)行診斷和分型。

1.2 血常規(guī)檢測

于化療前，采用真空采血法采集患者清晨靜脈血標(biāo)本2 ml，EDTA-K2抗凝，采用Sysmex XN-2000全自動五分類血細(xì)胞分析儀及其配套試劑對標(biāo)本進(jìn)行檢測，所有標(biāo)本均在2 h以內(nèi)完成檢測，檢測前儀器要進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制并符合要求。

1.3 免疫分型檢測

于化療前，經(jīng)髂后上棘穿刺吸取患者骨髓液2 ml，肝素抗凝，于標(biāo)本采集后24 h以內(nèi)應(yīng)用BD公司流式細(xì)胞儀及其配套檢測試劑盒（間接免疫熒光法）檢測血細(xì)胞表面分化抗原（CD），結(jié)果以雙參數(shù)散點(diǎn)圖表示。髓系及CD7≥20%定為陽性，淋系除CD7外≥30%定為陽性，CD34≥10%定為陽性，HLA-DR≥10%定為陽性。所用的抗體種類有：造血干細(xì)胞CD34;髓系CD14、CD33、GlyA、CD15、CD13、CD117、HLA-DR、CD41a;T細(xì)胞CD3、CD7;B細(xì)胞系CD10、CD19、CD20。

1.4 染色體核型分析

于化療前，取患者骨髓標(biāo)本2 ml，肝素抗凝。采用24 h短期培養(yǎng)法制備染色體標(biāo)本，G顯帶后鏡檢，每個病例分析20個中期分裂相，異常染色體參照《人類細(xì)胞遺傳學(xué)國際命名體制（ISCN2009）》進(jìn)行描述。核型分組：正常核型;平衡核型（以平衡易位為主要異常的核型，DNA含量沒有發(fā)生改變）;非平衡核型（染色體部分片段的獲得或缺失，DNA含量發(fā)生改變，且不包含已確立的平衡易位）[1-2]。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 16.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 M5a和M5b患者血常規(guī)結(jié)果比較

M5a患者白細(xì)胞總數(shù)明顯高于M5b患者（P<0.05），M5a患者中白細(xì)胞大于50×109/L者占55%（11例），M5b患者中白細(xì)胞大于50×109/L者占31%（15例）。M5a患者單核細(xì)胞所占比例高于M5b患者（P<0.05），M5a和M5b患者中單核細(xì)胞在正常范圍內(nèi)的患者所占比例分別為45%（9例）和13%（6例）。M5a和M5b患者常伴有淋巴細(xì)胞百分比的增高，所占比例分別為45%（9例）和52%（25例），差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。M5a和M5b患者RBC、HGB、HCT均有不同程度降低，但兩組患者之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。具體檢測結(jié)果見表1。

2.2 M5a和M5b患者免疫表型結(jié)果分析

免疫表型檢測結(jié)果顯示，CD3、CD10、CD20、和CD41a在M5a患者和M5b患者中陽性率均較低，且兩組患者之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;M5b患者CD7、CD14、CD19、GlyA、CD15、CD13、CD34、HLA-DR陽性率均高于M5a患者，CD19、GlyA和CD13兩者間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），CD7、CD14、CD15、CD34和HLA-DR兩者間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;M5a患者CD33和CD117陽性率均高于M5b患者，且兩者間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。具體檢測結(jié)果見表2。

2.3 染色體核型分析檢測結(jié)果

20例M5a患者中有19例患者進(jìn)行了核型分析，其中10例患者核型異常。48例M5b患者中有19例患者進(jìn)行了核型分析，其中4例患者存在核型異常。M5a患者骨髓細(xì)胞染色體核型異常者所占比例明顯高于M5b患者（P<0.05），以非平衡核型異常最為明顯（P<0.01）。具體染色體核型檢測結(jié)果見表3。

3 討論

白血病是一個具有高度異質(zhì)性的疾病群，F(xiàn)AB協(xié)作組將其分為了八個亞型，其中M5，也即單核細(xì)胞白血病，又被分為M5a和M5b兩個亞型，急性單核細(xì)胞白血病準(zhǔn)確分型是順利診治該病和判斷預(yù)后的關(guān)鍵[3]。目前有關(guān)M5實(shí)驗(yàn)室檢查的報道都有所側(cè)重，不能較為全面的體現(xiàn)該病的實(shí)驗(yàn)室檢查特征。本研究對M5a和M5b兩種亞型多項(xiàng)檢查項(xiàng)目進(jìn)行檢測和對比分析，使臨床對M5 的實(shí)驗(yàn)室檢查特征有更為深入的認(rèn)識，為臨床該病的診斷和分型提供理論依據(jù)。

M5a和M5b患者血常規(guī)檢查結(jié)果、免疫表型檢測結(jié)果、染色體核型分析檢測結(jié)果均存在一定差異。血常規(guī)檢測結(jié)果顯示，M5a患者白細(xì)胞總數(shù)及白細(xì)胞大于50×109/L患者所占比例均明顯高于M5b患者（P<0.05），因此，白細(xì)胞總數(shù)對于M5的診斷和分型有一定的提示作用。M5a患者單核細(xì)胞所占比例高于M5b患者（P<0.05），M5a和M5b患者中單核細(xì)胞在正常范圍內(nèi)的患者所占比例分別為45%和13%，可見以外周血單核細(xì)胞的數(shù)量和比例來判斷有無M5及進(jìn)行M5分型容易產(chǎn)生漏診和分型錯誤，可靠的診斷一定要結(jié)合患者的臨床表現(xiàn)及其他實(shí)驗(yàn)室檢查。M5患者經(jīng)常伴有淋巴細(xì)胞百分比的增高和中性粒細(xì)胞比例減低，此現(xiàn)象產(chǎn)生原因可能是因?yàn)閱魏思?xì)胞的惡性增生抑制骨髓粒細(xì)胞增殖導(dǎo)致淋巴細(xì)胞相對增高，臨床上要注意將此現(xiàn)象與病毒性感染導(dǎo)致的淋巴細(xì)胞比例增高相區(qū)別，如果某患者血常規(guī)檢測結(jié)果淋巴細(xì)胞比例增高的同時單核細(xì)胞比例也有所增高，臨床上最好同時進(jìn)行外周血涂片形態(tài)觀察。M5a和M5b患者RBC、HGB、HCT均有不同程度降低，但兩組患者之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），此研究結(jié)果說明貧血對M5患者早期診斷確有提示作用[4]，但對于M5的分型意義不大。

免疫表型檢測結(jié)果顯示，CD3、CD10、CD20、和CD41a在M5患者中表達(dá)都比較低，對于M5的診斷及亞型的鑒別意義不大。M5b患者的CD7、CD14、CD19、GlyA、CD15、CD13、CD34陽性率均高于M5a患者，但只有CD7、CD14、CD15、CD34和HLA-DR兩者間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），有助于M5亞型的鑒別。已有研究顯示，CD14在診斷急性髓細(xì)胞白血病方面特異性較高，M0、M1、M2、M3患者CD14均為陰性，CD14主要表達(dá)于M4、M5患者，并且M5患者陽性率高于M4患者[5]。結(jié)合本研究結(jié)果，如果CD14為陽性，該患者為M4或M5b的可能性很大。CD117是一種由c-Kit原癌基因編碼的跨膜酪氨酸激酶受體，其配體是干細(xì)胞因子（SCF），SCF在早期造血調(diào)節(jié)中起重要作用。近些年，CD117檢測主要用于急性白血病的診斷和分型[6-8]。本研究結(jié)果顯示M5a和M5b患者CD117陽性率均比較高，且M5a患者CD117陽性率明顯高于M5b患者（P<0.05），說明CD117有助于M5的診斷和亞型區(qū)分[9]。另有研究顯示，CD117/CD34的共表達(dá)可用于排除ALL，有助于AML臨床診斷和鑒別診斷[10]，本研究結(jié)果顯示M5b患者中CD117/CD34共表達(dá)占到45%，而M5a患者僅有15%存在CD117/CD34共表達(dá)現(xiàn)象，因此CD117/CD34的共表達(dá)除具有已有研究結(jié)果顯示的臨床價值以外還可用于M5亞型鑒別[10-11]。

染色體核型分析檢測結(jié)果顯示，M5a患者正常核型、平衡核型和非平衡核型所占比例分別為47%、5%、47%，M5b患者正常核型、平衡核型和非平衡核型所占比例分別為79%、16%、5%。M5b患者正常核型所占比例明顯高于M5a患者（P<0.05），非平衡核型所占比例明顯低于M5a患者（P<0.01）。國外報道急性髓細(xì)胞白血病平衡核型檢出率為20%～25%，非平衡核型檢出率為35%～40%[1]，本研究顯示M5a患者平衡核型檢出率低于以上報到，而非平衡核型檢出率稍高于以上報道，M5b患者兩者檢出率均低于以上報道。20世紀(jì)80年代以來，國際上逐步提出的結(jié)合形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)及分子生物學(xué)的MICM分型及最新的WHO分型中都體現(xiàn)了細(xì)胞遺傳學(xué)在急性白血病診斷中的重要價值[12]。很多研究證實(shí)細(xì)胞遺傳學(xué)不僅對急性髓細(xì)胞白血病的診斷有重要意義，而且還與預(yù)后有密切的關(guān)系，可以作為評估預(yù)后檢測病情的重要指標(biāo)[13]，因此染色體核型分析對于M5患者的診斷、分型、治療及預(yù)后評估均有很重要的臨床實(shí)用價值。

綜上，M5a患者白細(xì)胞總數(shù)及單核細(xì)胞所占比例高于M5b患者（P<0.05）;M5b患者CD7、CD14、CD15、CD34和HLA-DR陽性率高于M5a患者（P<0.05）;M5a患者CD33和CD117陽性率高于M5b患者（P<0.05）;M5b患者中CD117/CD34共表達(dá)現(xiàn)象明顯高于M5a（P<0.05）;M5b患者正常核型所占比例高于M5a患者（P<0.05），非平衡核型所占比例明顯低于M5a患者（P<0.01）。M5a和M5b患者骨髓幼稚單核細(xì)胞形態(tài)差別不大，但血常規(guī)檢測結(jié)果、免疫表型檢測結(jié)果、染色體核型分析均對M5患者分型起到一定的提示作用。

參考文獻(xiàn)

[1] Bacher U，Kem W，Schnittger S，et al.Population-based agespecific incidences of cytogenetic subgroups of acute myeloid leukemia[J].Haematologica，2005，90：1502-1510.

[2]蘇龍，高素君，李薇，等.640例急性髓系白血病患者染色體核型與年齡相關(guān)性研究[J].中華血液學(xué)雜志，2013，34（2）：133-137.

[3]林元峰，鄭源海，周艷貞，等.免疫分型在單核細(xì)胞相關(guān)性急性髓細(xì)胞白血?。∕4/M5）鑒別診斷中的應(yīng)用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（19）：2520.

[4]郭斌，謝寧，劉文，等，急性髓細(xì)胞白血病免疫分型及骨髓、血常規(guī)綜合研究[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016，37（19）：2710-2712.

[5]林偉尚，林婷.CD64與CD14在急性單核細(xì)胞相關(guān)的髓系白血病免疫分型鑒別診斷中的意義[J].遼寧醫(yī)學(xué)雜志，2016，30（1）：13-14.

[6] Uckan D，Hicsinmez G，Yetgin S，et al.CD34/CD117 co-expression in childhood acute leukemia[J].Leuk Res，2000，24（3）：201-206.

[7] Muroi K，Ameniya Y，Miura Y.Specificity of CD117 expression in the diagnosis of acute myeloid leukemia[J].Leukemia，1996，10（7）：1048-1051.

[8] Tsao A S，Kantarjian H，Thomas D，et al.C-kit receptor expression in acute leukemias-association with patient and disease characteristics and with outcome[J].Leuk Res，2004，28（4）：373-378.

[9]李慶，翟志敏，徐靜瑋，等.CD117在急性白血病中的表達(dá)及其臨床意義[J].白血病·淋巴瘤，2006，15（3）：176-178.

[10]陳紅濤，許萍，張紅雨.CD117和CD34在急性白血病中的臨床意義[J].臨床血液學(xué)雜志，2013，26（7）：485-487.

[11]謝建興，譚禾英，彭敏，等.急性白血病患者CD117與CD34的表達(dá)及臨床意義[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2012，50（25）：58-59.

[12]李建勇，薛永權(quán)，阮長耿，等.98例成人急性白血病形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)分型診斷[J].中華腫瘤雜志，1996，16：746-751.

[13]嚴(yán)敏，李建勇，吳雨潔，等.急性髓細(xì)胞白血病62例細(xì)胞遺傳學(xué)特征及其診斷預(yù)后價值[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2004，24（2）：153-155.