張永利 王燁軍 蘇有健 羅毅 孫宇龍 廖珺 謝明之 桂利權(quán) 吳衛(wèi)國

摘 ?要 ?為了研究茶樹胚根倒接嫁接方法的優(yōu)劣，篩選茶樹胚根倒接方法的適宜根砧、接穗品種，通過田間試驗(yàn)，設(shè)置胚根順接法與倒接法2種嫁接方法，祁門櫧葉種、黃山大葉種、松蘿種3種根砧，紅旗1號與漕溪1號2種接穗，在不同時期取樣觀察嫁接苗愈合、成活及生長情況。結(jié)果表明：茶樹胚根嫁接后40 d愈合率為93.93%，平均成活率為99.26%;80 d后嫁接口已完全愈合，平均成活率為90.50%;145 d后平均成活率為76.1%，平均株高為20.22 cm，葉片數(shù)為5.89，平均根粗為3.73 cm;倒接法早期（40 d）愈合稍慢，但后期（145?d）生長加速，甚至超過順接法;漕溪1號接穗為半木質(zhì)化新梢，葉面積大，成活率高（80.92%），前期（40?d）以根系發(fā)育為主，80?d以后地上、地下生長速度均大于紅旗1號（為木質(zhì)化留養(yǎng)枝）;不同品種茶樹根砧的嫁接效果無顯著性差異，嫁接后5個月，黃山大葉種的地上部分表現(xiàn)最好，祁門櫧葉種的主根長及主、側(cè)根鮮重等地下部分表現(xiàn)最好;整體來看，祁門櫧葉種根砧倒接漕溪1號接穗處理為最優(yōu)選擇。因此，茶樹胚根倒接方法技術(shù)可行，嫁接時選擇大葉種茶樹的未木質(zhì)化或半木質(zhì)化新梢作為接穗，配合親和性強(qiáng)的根系粗壯的根砧，更有利于嫁接苗的成活及后期的生長發(fā)育。

關(guān)鍵詞 ?茶樹;胚根倒接;砧穗品種;愈合;成活率;生長情況

中圖分類號 ?S339;S571.1 ????文獻(xiàn)標(biāo)識碼 ?A

Abstract ?A field experiment was conducted to study the effects of different radicle-stocks and scions on the healing percentage， survival percentage and growth of grafting tea plants. The healing rate of the grafted seedlings was 93.93% 40 days after grafting， and the average survival rate was 99.26%. The grafting site completely healed 80 days after grafting， and the average survival rate was 90.50%. 145 days after grafting， the average survival rate was 76.1%， the average plant height was 20.22 cm， the number of leaves was 5.89， and the average root diameter was 3.73 cm. In the early stage （40 d）， tea plants were healed later under the reverse radicle-grafting method， but the growth of tree plants accelerated during the later stage （145 d）， even more than that under the?radicle-grafting method. Compared with ‘Hongqi 1 scion， the plants grafted on ‘Caoxi 1 scion which had larger leaf area， had higher survival percentage （80.92%） and better?underground growth situation during the early stage， and faster growth rate during the later stage. There was no significant difference of grafting effect among different varieties of stocks. Five months after grafting， the ‘Huangshan daye stock was the best for above-ground growth， and the ‘Qimen zhuye stock was the best for underground growth， including longer taproot length， heavier main and lateral root fresh weigh. On the whole， the reverse grafting of the ‘Qimen zhuye root-stock to ‘Caoxi 1 scion was?the optimum?choice. The technique of reverse radicle-grafting is feasible for tea plant. A large-leaf tea scion from the non-lignification or semi-lignification new shoot， grafting on a strong radicle which has?a good affinity， is more advantageous to the grafting survival and growth.

Keywords ?Camellia sinensis; reverse radicle-grafting; rootstock and scion varieties; healing; survival percentage; growth situation

DOI ?10.3969/j.issn.1000-2561.2019.06.005

茶樹品種是茶產(chǎn)業(yè)的基礎(chǔ)，優(yōu)良的茶樹品種是獲得優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、高效的重要保證，在茶葉生產(chǎn)中起著基礎(chǔ)性和先導(dǎo)性作用，茶樹良種的推廣依賴于育苗技術(shù)。茶樹種子繁殖方法簡單，但存在后代遺傳性復(fù)雜、易產(chǎn)生變異、良種性狀不易保持的缺陷。短穗扦插是目前茶樹無性繁育的主要方法，該技術(shù)不僅能保持茶樹品種原有的優(yōu)良特征、特性，而且繁殖系數(shù)高[1]，用扦插苗建成的茶園，茶樹蓬面整齊一致，便于機(jī)械化操作，并能提高茶葉品質(zhì)，但短穗扦插的扦插成活率、出圃率及茶苗質(zhì)量受扦插基質(zhì)、扦插時間[1]、扦插技術(shù)、苗圃管理[2]等諸多因素的影響，不易控制，且在圃時間長、管理繁瑣[3]，短穗扦插苗生根慢，無主根系，抗逆性差，對土肥條件要求較高。我國現(xiàn)有茶園面積290多萬hm2，大多分布在山地丘陵地帶，茶園土層較薄，土壤相對貧瘠，且易水土流失，而傳統(tǒng)的扦插苗須根系分布淺，水肥吸收能力弱，茶園容易早衰，因此，亟需一種新的茶樹育苗技術(shù)，對老茶園進(jìn)行改種換植，建設(shè)無性系良種標(biāo)準(zhǔn)園。

在一些果樹、苗木的繁育領(lǐng)域，有關(guān)于利用胚根嫁接或者芽砧嫁接的零星報道，如蛋黃果胚根倒置嫁接繁殖新法[4]，板栗[5]、油茶[6]等芽苗砧嫁接育苗技術(shù)等。而大部分茶樹品種為灌木型，芽砧嫁接繁育則存在嫁接后除萌工作量大，苗種純度難以保證等問題。針對茶樹育苗領(lǐng)域多年來存在的技術(shù)問題，提出茶樹胚根嫁接技術(shù)，即以茶樹實(shí)生茶苗胚根為砧木，以無性系良種穗條為接穗進(jìn)行嫁接，傳統(tǒng)的順接嫁接方式在嫁接時受根粗限制[7]，操作困難，本研究將采用胚根倒接法，即將根砧插入接穗，通過研究茶樹胚根倒接法與順接法的嫁接傷口愈合速度、嫁接成活率、嫁接苗地上部和地下部生長情況，明確茶樹胚根倒接嫁接法的實(shí)用性和嫁接效果，通過研究不同根砧、接穗品種組合的嫁接效果，分析茶樹胚根倒接嫁接方法的可行性，以期探索出適用于茶樹良種規(guī)?；a(chǎn)的嫁接繁殖新技術(shù)，并篩選出適宜的根砧和接穗品種，為茶樹育苗提供一種操作簡便、成活率高、茶苗長勢好、抗逆性強(qiáng)的新技術(shù)。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

試驗(yàn)于2014—2015年在黃山綠源農(nóng)林開發(fā)有限公司基地進(jìn)行。參試砧木品種為經(jīng)過沙藏催芽處理的實(shí)生苗。在2014年10—11月份采收成熟飽滿的茶果，于蔭涼、通風(fēng)、干燥處攤放至80%的果實(shí)開裂后，用11～13 mm篩孔的竹篩去果皮并除雜，12月在沙藏催芽前用1000～2000倍高錳酸鉀水溶液進(jìn)行種子消毒，在向陽、地勢平坦或緩坡、排水良好的地塊搭建沙床進(jìn)行沙藏催芽，待2015年5月中下旬，種子主根長度達(dá)到10～15cm、胚芽長1.5～2.0 cm時取出，淘洗干凈，保濕待用。供試接穗品種為紅旗1號（來自祁門箬坑鄉(xiāng)母穗園，為木質(zhì)化新梢）、漕溪1號（來自黃山綠源農(nóng)林開發(fā)有限公司母穗園，為半木質(zhì)化新梢），保濕待用。

1.2 ?方法

1.2.1 ?試驗(yàn)設(shè)計 ?試驗(yàn)設(shè)置5個處理（表1）：T1，祁門櫧葉種根砧-根部順接法-紅旗1號接穗（祁-順-紅）;T2，祁門櫧葉種根砧-根部倒接法-紅旗1號接穗（祁-倒-紅）;T3，祁門櫧葉種根砧-根部倒接法-漕溪1號接穗（祁-倒-漕）;T4，黃山大葉種根砧-根部倒接法-紅旗1號接穗（黃-倒-紅）;T5，松蘿種根砧-根部倒接法-紅旗1號接穗（松-倒-紅）。按照行距7～10?cm，株距5～6?cm的密度，每畦隨機(jī)假植5個處理，每個處理140株，小區(qū)面

1.2.2 ?嫁接 ?根部正接法：取整株實(shí)生茶苗，在主根上端子葉以下1～2 cm處切斷，保留下半部分作根砧。再將根砧縱劈成兩半，切口深度為1.0～ 1.2?cm，根砧長度控制在12 cm以下。將穗條剪成3 cm為一穗，保留一芽一葉，在芽的下部1.5～2.0 cm處將穗削成楔字形，斜面長1.0～1.2?cm。把削好的接穗插入根砧切口，使根砧和接穗的形成層對齊并緊密貼合，并用長約3 cm、寬約0.5 cm的鋁箔膠帶在嫁接處纏繞固定。

根部倒接法：如根部正接法準(zhǔn)備根砧和接穗，將主根上端削成楔字形，斜面長1.0～1.2?cm，將接穗下端剪平，在截面中心縱切一刀，切縫要長于根砧楔面長度。將實(shí)木苗根砧輕輕插入接穗，纏繞固定。

1.2.3 ?假植 ?地塊布置：選擇避風(fēng)陰涼、排水良好、疏松肥沃的地塊。5月中下旬前進(jìn)行整地做畦，畦面寬1.2 m，溝寬25 cm，苗床上鋪一層厚4～5 cm的黃心土，上方搭設(shè)高約1.5 m的遮陽棚，覆蓋遮陽率約75%的遮陽網(wǎng)。

假植方法：按照常規(guī)扦插密度用竹筷在苗床上插10～15 cm深的小孔，然后將嫁接苗輕輕的垂直插至孔穴底部，防止傷到根系，最后培土使根頸以上1.0～1.5?cm露在土層外，使根系與土壤密接。

假植后管理：假植后澆定根水，噴施多菌靈。在苗床上每隔50～60?cm用鋼筋架一拱，拱高40?cm，然后覆膜并壓緊實(shí)。適時澆水以保持苗床土壤濕度約為田間持水量的60%。在8月上旬揭膜，10月揭網(wǎng)。

1.2.4 ?觀測方法 ?在嫁接后40、80、145 d調(diào)查嫁接成活率，接穗青綠者成活，接穗發(fā)黑干枯則失敗。同時觀察嫁接苗的傷口愈合情況，以砧穗結(jié)合部位瘤狀愈傷組織的有無為評判標(biāo)準(zhǔn)。然后取樣調(diào)查生長情況，每個處理隨機(jī)采集10株，洗去泥土并擦干，調(diào)查茶苗的株高、新梢長、葉片數(shù)、根粗、主根長，以及地上部鮮重、根系鮮重、主根鮮重、側(cè)根鮮重。

1.3 ?數(shù)據(jù)分析

采用Microsoft Excel 2010及SPSS 19.0統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，并且采用Duncan法進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。

2 ?結(jié)果與分析

2.1 ?不同根部嫁接方法的茶樹嫁接效果

相同砧穗條件下，根部順接嫁接法和倒接嫁接法的嫁接效果見表2。T1處理根部順接法愈合組織形成較早，嫁接后40 d，倒接和順接2種嫁接苗的愈合率分別達(dá)到86.67%和96.67%（P>0.05），成活率分別為97.02%和100%;2種嫁接方式均有少數(shù)嫁接苗長出新生芽葉和少量側(cè)根，且生長指標(biāo)差異均不顯著。嫁接后80 d，倒接和順接的嫁接苗愈合率均達(dá)到100%，成活率稍有降低，其中前者低于后者;2種方式的嫁接苗株高、葉片、新生芽、根系均有不同程度的增加，其中順接法的增加幅度高于倒接法，但除順接法的側(cè)根鮮重顯著高于倒接法外，其他指標(biāo)差異均不顯著。嫁接后145 d，倒接和順接2種嫁接苗的成活率分別降至72.50%和85.71%（P>0.05）;倒接法處理的嫁接苗地上部和地下部生長均加速，與順接法的差異減小，甚至超過順接法處理，2種嫁接方式的株高均達(dá)到20 cm左右，新梢長達(dá)12～13 cm，新生葉約6片，側(cè)根鮮重達(dá)0.5～0.6 g/株?？梢?，2種嫁接方式的愈合率和成活率雖然有所差別，但均未達(dá)顯著水平，順接法較倒接法愈合早，成活率高，前期生長快，倒接法愈合速度稍慢，前期根系生長較弱，后期地上部和地下部生長均加速，與順接法差異減小，甚至超過順接法處理。

2.2 ?不同品種接穗的茶樹根部嫁接效果

相同根砧和嫁接方法條件下，不同品種接穗處理的嫁接效果見表3。嫁接后40?d，漕溪1號接穗處理的嫁接愈合率和成活率均達(dá)到100%，高于紅旗1號接穗處理;漕溪1號接穗處理的嫁接苗地上部幾乎沒有生長，其中株高和新梢長顯著低于紅旗1號接穗處理，但是地下部生長狀況明顯好于紅旗1號接穗處理，其中根粗、根系鮮重、主根鮮重均顯著高于紅旗1號接穗處理。嫁接后80 d，漕溪1號接穗處理的嫁接成活率達(dá)96.57%，高于紅旗1號接穗;漕溪1號接穗處理的嫁接苗地上部生長速度加快，株高、新梢長等地上部生長指標(biāo)，以及地上鮮重（P<0.01）、根粗（P<0.05）、根系鮮重、主根鮮重、側(cè)根鮮重等地下部生長指標(biāo)均高于紅旗1號接穗處理。嫁接后145 d，漕溪1號接穗的成活率為80.92%，顯著高于紅旗1號接穗成活率（66.67%）;漕溪1號接穗的地上部和地下部生長指標(biāo)除葉片數(shù)和主根長外，均高于紅旗1號，但差異均未達(dá)顯著水平?？梢姡钕?號接穗葉面積比較大，前期地上部生長較弱，新梢生長慢，葉片數(shù)較少，以根系發(fā)育為主，而前期的根系發(fā)育為后期植株生長提供了充足的養(yǎng)分供應(yīng)，后期地上部和根系生長速度大于紅旗1號，地上部和地下部生長指標(biāo)幾乎全部優(yōu)于紅旗1號。

2.3 ?不同品種根砧的茶樹根部嫁接效果

相同接穗和嫁接方法條件下，不同品種根砧處理的嫁接效果見表4。嫁接后40?d，不同品種根砧的茶樹嫁接苗的成活率在97%以上，愈合率在86.67%～93.33%，不同品種間差異不顯著;不同品種根砧的茶樹嫁接苗的生長量均較小，僅根粗、根系鮮重、主根鮮重等地下部生長指標(biāo)因根砧品種不同表現(xiàn)出差異，其中黃山大葉種和松蘿種處理大于祁門櫧葉種處理。嫁接后80 d，不同品種根砧的嫁接苗的成活率下降到76.20%～ 90.35%，不同品種間差異不顯著;祁門櫧葉種的地上和地下生長速度較快，生長情況整體表現(xiàn)較好，黃山大葉種的地下部生長速度較低，生長情況表現(xiàn)較差，松蘿種的地上部生長速度較低，生長情況表現(xiàn)較差，但不同根砧品種的嫁接苗的各項(xiàng)生長指標(biāo)均無顯著差異。后期各根砧品種嫁接苗的成活率下降速度較快，嫁接后145 d祁門櫧葉種的成活率降至66.67%（主要與蟲害有關(guān)），其他2個品種的成活率在73%左右;3個茶樹品種地上部和地下部生長速度差別不大，其中祁門櫧葉種根砧處理的地下部生長速度較快，黃山大葉種的地下部生長速度較慢，地上部生長速度較快，松蘿種的株高、葉片數(shù)的增長速度較慢，而不同根砧品種下嫁接苗的各項(xiàng)生長指標(biāo)差異不顯著，其中地上部以黃山大葉種表現(xiàn)最好，主根長、根重（主、側(cè)根）方面祁門櫧葉種表現(xiàn)最好。由此可見，祁門櫧葉種、黃山大葉種、松蘿種3種根砧與紅旗1號接穗的嫁接效果無顯著差異，嫁接后3個月內(nèi)，祁門櫧葉種生長速度最快，總體表現(xiàn)最好，松蘿種地上部表現(xiàn)較差，黃山大葉種地下部表現(xiàn)較差;嫁接后5個月，黃山大葉種的地上部分表現(xiàn)最好，祁門櫧葉種的主根長、主、側(cè)根鮮重等地下部分表現(xiàn)最好。

2.4 ?胚根嫁接茶苗生長指標(biāo)的相關(guān)性分析

對試驗(yàn)期間嫁接茶苗地上部與地下部生長指標(biāo)的觀測值進(jìn)行相關(guān)性分析（表5），結(jié)果顯示，茶苗根粗、根系鮮重、主根鮮重、側(cè)根鮮重與株高、葉片數(shù)、新生芽長、地上部鮮重均呈極顯著正相關(guān)（P<0.01），說明嫁接茶苗地上部與地下部的生長具有相互促進(jìn)作用。

3 ?討論

茶樹短穗扦插是目前茶樹良種繁殖的主要方式，吳淑平[1]和曾浩等[8]研究了不同條件下的茶樹短穗扦插成活率，分別為19.7%～96.2%（均值65.74%）和51.4%～97.0%（均值79.3%）。而本研究采用茶樹實(shí)生苗胚根與木質(zhì)化或半木質(zhì)化新梢剪成的短穗進(jìn)行嫁接，5個月后不同嫁接方式、砧穗品種的嫁接苗成活率在66.67%～85.71%之間，平均成活率為76.10%，說明不同條件下茶樹胚根嫁接的成活率比較穩(wěn)定，該育苗方法具有普遍適用性，與扦插育苗相比成活率也較為理想。

研究表明植物嫁接成活過程實(shí)質(zhì)就是砧木與接穗愈合的過程，砧穗愈傷組織溝通越早，嫁接成活率越高[9]。陳啟文等[10]研究發(fā)現(xiàn)皖茶91、舒茶早、石佛翠3個茶樹品種扦插60 d后的愈合率分別為80.6%、46.2%和13.3%，而本研究中茶樹胚根嫁接后40 d愈合率就已達(dá)85%以上，愈合速度很快?？赡苁且?yàn)橛啄鄣呐吒纳砟挲g較小，細(xì)胞生命旺盛，傷口容易愈合;而且胚根中含有豐富的赤霉素，具有促進(jìn)器官縱向生長的作用，利于嫁接后的生長[11]。

前人關(guān)于茶樹嫁接育苗的相關(guān)文獻(xiàn)鮮有報道，在油茶胚軸嫁接和芽砧嫁接方面的研究較多，而兩者均為山茶屬植物，親緣關(guān)系較近，對茶樹胚根嫁接的研究具有一定借鑒意義。有研究發(fā)現(xiàn)油茶芽砧嫁接中接穗留葉數(shù)可改變嫁接苗的愈合速率，接穗保留1片葉子進(jìn)行嫁接時愈合速度、成活率和嫁接苗長勢均表現(xiàn)最好[12]，本研究的接穗采用一芽一葉，并保留完整葉片，嫁接苗的愈合和生長情況良好。本研究中不同砧、穗組合的嫁接苗的愈合速度、成活率、地上部和地下部的生長指標(biāo)有不同程度的差別，其中不同接穗間的差別最大，這與前人對油茶的研究結(jié)果相似[13-14]。這種現(xiàn)象主要與砧、穗間的親和性有關(guān)[15]，嫁接親和性是決定嫁接成活的主要因素[16]，因此，茶樹胚根嫁接選擇砧穗品種時，不僅要關(guān)注茶樹品種的生長勢、抗逆性和遺傳力，還要著重考慮2者的親和性。

另外，不同接穗品種嫁接苗的愈合與生長差異可能與接穗枝條的幼嫩以及品種間葉片面積差異有關(guān)。徐春永等[17]的研究表明，接穗的木質(zhì)化程度對油茶嫁接苗成活率影響存在極顯著差異，成活率為剛木質(zhì)化>半木質(zhì)化>全木質(zhì)化。本研究中紅旗1號接穗多為褐色的木質(zhì)化枝條，而漕溪1號接穗多為半木質(zhì)化的新梢，在嫁接5個月后，紅旗1號嫁接苗的成活率顯著低于漕溪1號，生長情況也遜于后者，也說明嫁接苗成活率和生長情況與嫁接材料木質(zhì)化程度有關(guān)，這是因?yàn)閯傞_始木質(zhì)化枝條分生組織更為活躍，細(xì)胞分生能力強(qiáng)，容易形成愈傷組織，嫁接苗成活率高。因此，在嫁接中接穗應(yīng)選擇相對較嫩的剛木質(zhì)化或半木質(zhì)化新梢，以縮短嫁接愈合時間，提高成活率，促進(jìn)嫁接苗生長[6]。

茶樹胚根嫁接苗的根粗、根重與株高、葉片數(shù)、新生芽長、地上部鮮重均呈極顯著正相關(guān)，表明嫁接茶苗地上部分與地下部分是一個相互制約、相互促進(jìn)的整體[18]，漕溪1號品種的接穗葉片較大，光合作用較強(qiáng)，葉片蒸騰拉力大，能促進(jìn)砧穗之間營養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸，從而提高嫁接成活率[19]，光合產(chǎn)物的供應(yīng)促進(jìn)了根系的生長，而大量的吸收根又有助于形成良好的樹冠結(jié)構(gòu)[20]。因此，嫁接時選擇葉面積大的接穗和根系粗壯的根砧有利于嫁接苗的成活及后期的生長發(fā)育。

綜上所述，茶樹胚根嫁接方法在嫁接后80?d已完全愈合，嫁接后145 d平均成活率為76.1%，平均株高為20.22 cm，平均根粗為3.73 cm，當(dāng)年即可出圃，該育苗方法操作方便、育苗期短。胚根倒接法較順接法后期嫁接苗生長加速，短期內(nèi)（5個月）不同品種根砧間的嫁接效果差異不顯著，長期效果有待進(jìn)一步研究。嫁接時選擇大葉種茶樹良種的剛木質(zhì)化或半木質(zhì)化新梢作為接穗，配合親和性好的根系粗壯的根砧，更有利于嫁接苗的成活及后期的生長發(fā)育。

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